A.

Definis kromatografi lawan arus tetes

Kromatografi arus balik (CCC, juga kromatografi counter-current) adalah bentuk

kromatografi cair-cair yang menggunakan fase diam cair yang diadakan di tempat oleh gaya
sentrifugal dan digunakan untuk memisahkan, mengidentifikasi, dan mengkuantifikasi komponen
kimia sebuah campuran. Dalam arti luasnya, kromatografi arus balik meliputi kumpulan teknik
kromatografi cair terkait yang menggunakan dua fase cairan yang tidak dapat dicairkan tanpa
dukungan yang kuat. Kedua fase cair bersentuhan satu sama lain karena setidaknya satu fasa
dipompa melalui kolom, tabung hampa atau serangkaian bilik yang terhubung dengan saluran,
yang berisi kedua fasa. Hasil pencampuran dinamis dan tindakan pengendapan memungkinkan
komponen dipisahkan oleh masing-masing kelarutan dalam dua fase. Berbagai macam sistem
pelarut dua fase yang terdiri dari setidaknya dua cairan tak tercampur dapat digunakan untuk
memberikan selektivitas yang tepat untuk pemisahan yang diinginkan. Beberapa jenis
kromatografi berlawanan arah, seperti aliran ganda CCC, menampilkan proses arus balik yang
sebenarnya di mana dua fase yang tidak dapat dilewati mengalir satu sama lain dan keluar pada
ujung yang berlawanan dari kolom. Lebih sering, bagaimanapun, satu cairan bertindak sebagai
fase diam dan dipertahankan dalam kolom ketika fase gerak dipompa melewatinya. Fasa diam cair
diadakan di tempat oleh gravitasi atau dengan gaya sentrifugal. Contoh metode gravitasi disebut
droplet counter current chromatography (DCCC). Ada dua mode di mana fase diam dipertahankan
oleh gaya sentrifugal: hidrostatik dan hidrodinamik. Dalam metode hidrostatik, kolom diputar
sekitar sumbu pusat. Instrumen hidrostatik dipasarkan dengan nama kromatografi partisi
sentrifugal (CPC). Instrumen hidrodinamik sering dipasarkan sebagai instrumen kromatografi
tandingan kecepatan tinggi atau kinerja tinggi (HSCCC dan HPCCC) yang mengandalkan
kekuatan sekrup Archimedes dalam kumparan heliks untuk mempertahankan fase stasioner dalam
kolom.

Komponen sistem CCC mirip dengan konfigurasi kromatografi cair, seperti kromatografi cair
kinerja tinggi. Satu atau lebih pompa mengirimkan fase ke kolom yang merupakan instrumen CCC
itu sendiri. Sampel dimasukkan ke dalam kolom melalui loop sampel yang diisi dengan jarum
suntik otomatis atau manual. Aliran keluar dipantau dengan berbagai detektor seperti spektroskopi
ultraviolet-terlihat atau spektrometri massa. Pengoperasian pompa, instrumen CCC, injeksi
sampel, dan deteksi dapat dikontrol secara manual atau dengan mikroprosesor.
Pendahulunya teori dan praktek kromatografi modern berlawanan arah adalah distribusi arus
berlawanan (CCD). Teori CCD digambarkan pada tahun 1930 oleh Randall dan Longtin. Archer
Martin dan Richard Laurence Millington Synge mengembangkan metodologi lebih lanjut selama
tahun 1940-an. Akhirnya, Lyman C. Craig memperkenalkan alat distribusi berlawanan Craig pada
tahun 1944 yang membuat CCD praktis untuk pekerjaan laboratorium. CCD digunakan untuk
memisahkan berbagai senyawa bermanfaat selama beberapa dekade.
Kromatografi cair bebas dukungan. Kromatografi kolom standar terdiri dari fase diam padat dan
fase gerak cair, sedangkan kromatografi gas (GC) menggunakan fase diam padat atau cair pada
pendukung yang kuat dan fase gerak berbentuk gas. Sebaliknya, dalam kromatografi cair-cair, fase
bergerak dan diam adalah cair. Kontrasnya, namun tidak sekeras yang pertama kali muncul. Pada
kromatografi fase-terbalik, misalnya, fase diam dapat dianggap sebagai cairan yang
diimobilisasikan oleh ikatan kimia ke pendukung mikro-berpori silika padat. Pada kromatografi
berlawanan, gaya sentrifugal atau gravitasi melumpuhkan lapisan cairan stasioner. Dengan
menghilangkan dukungan solid, adsorpsi permanen dari analit ke kolom dihindari, dan pemulihan
analit yang tinggi dapat dicapai. Instrumen kromatografi berlawanan dengan mudah beralih antara
kromatografi fase normal dan kromatografi fase terbalik hanya dengan mengubah fase bergerak
dan diam. Dengan kromatografi kolom, potensi pemisahan dibatasi oleh media fase stasioner yang
tersedia secara komersial dan karakteristik khususnya. Hampir semua pasangan solusi tak
tercampur dapat digunakan dalam kromatografi arus balik asalkan fase diam dapat dipertahankan
dengan sukses. Biaya pelarut juga umumnya lebih rendah daripada kromatografi cair kinerja tinggi
(HPLC). Dibandingkan dengan kromatografi kolom, aliran dan total penggunaan pelarut dapat
paling sering dalam pemisahan kromatografi saat ini dapat dikurangi setengahnya dan bahkan
hingga sepersepuluh. biaya pembelian dan pembuangan media fase stasioner dihilangkan.
Keuntungan lain dari kromatografi arus balik adalah bahwa percobaan yang dilakukan di
laboratorium dapat diskalakan ke volume industri.
B. Tahap pemisahan dalam kromatgrafi lawan arus tetes

Proses pemisahan CCC dapat dianggap sebagai terjadi dalam tiga tahap: pencampuran,
pengendapan, dan pemisahan dari dua fase (meskipun sering terjadi terus menerus). Pencampuran
yang kuat dari fase sangat penting untuk memaksimalkan area antarmuka antara mereka dan
meningkatkan transfer massa. Analit akan mendistribusikan antara fase sesuai dengan koefisien
partisi yang juga disebut koefisien distribusi, distribusi konstan, atau rasio partisi dan diwakili oleh
P, K, D, Kc, atau KD. Koefisien partisi untuk analit dalam sistem pelarut biphasic tertentu tidak
tergantung pada volume instrumen, laju aliran, rasio volume retensi fasa stasioner dan g-force yang
diperlukan untuk melumpuhkan fase stasioner. Tingkat retensi fase stasioner adalah parameter
yang sangat penting.

c. Factor factor yang mempengaruhi kromatografi lawan arus tetes

Faktor-faktor umum yang mempengaruhi retensi fase stasioner adalah laju aliran,
komposisi pelarut dari sistem pelarut biphasic, dan g-force. Retensi fase stasioner
direpresentasikan oleh rasio retensi volume fase stasioner (Sf) yang merupakan volume
fase stasioner dibagi dengan total volume instrumen. Waktu penyelesaian adalah properti
dari sistem pelarut dan matriks sampel, keduanya sangat mempengaruhi fase retensi
stasioner.
Untuk sebagian besar proses kimiawan, istilah "berlawanan" menyiratkan dua cairan yang
tak dapat bergerak yang bergerak dalam arah yang berlawanan, seperti yang biasanya
terjadi dalam unit-unit ekstraktor sentrifugal besar. Dengan pengecualian aliran ganda
(lihat di bawah) CCC, sebagian besar mode kromatografi operasi berlawanan memiliki fase
stasioner dan fase gerak. Bahkan dalam situasi ini, arus arus berlawanan terjadi dalam
kolom instrumen. Beberapa peneliti telah mengusulkan penggantian nama CCC & CPC
menjadi kromatografi cair-cair, tetapi yang lain merasa istilah "berlawanan" itu sendiri
adalah keliru. Tidak seperti kromatografi kolom dan kromatografi cair kinerja tinggi,
operator kromatografi arus balik dapat menyuntikkan volume besar relatif terhadap volume
kolom. Biasanya 5 hingga 10% volume kumparan dapat disuntikkan. Dalam beberapa
kasus, ini dapat ditingkatkan hingga setinggi 15 hingga 20% dari volume kumparan.
Biasanya, sebagian besar CCC komersial modern dan BPK dapat menyuntikkan 5 hingga
 40 g per liter kapasitas. Kisarannya sangat besar, bahkan untuk instrumen tertentu, apalagi
semua opsi instrumen, karena jenis target, matriks, dan pelarut biphasic yang tersedia
sangat bervariasi. Sekitar 10 g per liter akan menjadi nilai yang lebih khas, yang sebagian
besar aplikasi dapat digunakan sebagai nilai dasar.

Pemisahan countercurrent dimulai dengan memilih sistem pelarut biphasic yang tepat
untuk pemisahan yang diinginkan. Beragam campuran pelarut biphasic tersedia untuk
praktisi CCC termasuk kombinasi n-heksana (atau heptana), etil asetat, metanol dan air
dalam proporsi yang berbeda. Sistem pelarut dasar ini kadang-kadang disebut sebagai
sistem pelarut HEMWat. [Rujukan?] Pemilihan sistem pelarut dapat dipandu oleh teliti
literatur CCC. Teknik kromatografi lapis tipis yang familiar juga dapat digunakan untuk
menentukan sistem pelarut yang optimal. Organisasi sistem pelarut menjadi "keluarga"
telah sangat memudahkan pemilihan sistem pelarut juga. Sistem pelarut dapat diuji dengan
percobaan pembuatan satu-tabung. Koefisien partisi diukur dari percobaan partisi akan
menunjukkan perilaku elusi senyawa. Biasanya, diinginkan untuk memilih sistem pelarut
di mana senyawa target (s) memiliki koefisien partisi antara 0,25 dan 8. Secara historis,
diperkirakan bahwa tidak ada kromatografi komersial berlawanan yang dapat mengatasi
viskositas tinggi cairan ionik. Namun, instrumen modern yang dapat menampung 30
hingga 70+% cairan ionik (dan berpotensi 100% cairan ionik, jika kedua fase tersebut
adalah cairan ionik yang sesuai) telah tersedia. Cairan ionik dapat disesuaikan untuk
senyawa organik, akiral dan kiral, non-polar, bio-molekul, dan pemisahan anorganik,
karena cairan ionik dapat disesuaikan untuk memiliki solvabilitas dan spesifisitas yang luar
biasa.

D. keuntungan kromatografi lawan arus tetes

 Simple dan cepat
 Memiliki sensitivitas tinggi
 Memiliki kinerja tinggi
 Proses yang cepat dan menghemat waktu
 Memiliki kapasitas resolusi tinggi
 Akurat dan presisi
 Tehnik yang penting untuk validasi produk
Penting untuk analisis kualitatif dan kuantitatif

E. kerugian kromatogarfi lawan arus tetes

Pencampuran yang relatif buruk menyebabkan berkurangnya efisiensi pemisahan.