Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.

(Orchidaceae) adalah ramuan obat tradisional Tiongkok yang

berharga dan telah digunakan untuk mengobati berbagai penyakit. Namun, ada penjual yang tidak
etis yang memalsukan A. roxburghii liar dengan yang dibiakkan dan dibudidayakan. Oleh karena itu,
ada kebutuhan mendesak untuk metode otentikasi yang efektif untuk membedakan antara berbagai
jenis A. roxburghii ini. Dalam penelitian ini, pendekatan identifikasi tiga langkah spektroskopi
inframerah termasuk spektroskopi inframerah transformasi Fourier (FT-IR), spektrum inframerah
turunan kedua (SD-IR) dan spektrum inframerah korelasi dua dimensi (2D-IR) digunakan untuk
mengembangkan dan metode cepat untuk membedakan antara rencana A. roxburghii liar, budidaya
dan jaringan

Dalam beberapa tahun terakhir, ada banyak laporan tentang penerapan spektroskopi Fourier
Transform Infrared (FT-IR) dalam penelitian pengobatan Tiongkok tradisional (TCM) dari berbagai
aspek. Untuk sistem TCM yang kompleks, FT-IR telah menunjukkan keunggulan dibandingkan
metode analisis tradisional lainnya, karena tidak hanya menyajikan fitur holistik TCM tetapi juga
karakter sidik jari makro sampel . Dalam penelitian ini, identifikasi tri-langkah digunakan untuk
membedakan antara A. roxburghii liar, jaringan dan dibudidayakan. Data yang diperoleh kemudian
dianalisis dengan menggunakan teknik pengenalan pola Soft Independent Modeling of Class Analogy
(SIMCA) untuk menguji dan memverifikasi hasil eksperimen. Model SIMCA divalidasi dengan
membandingkan 70 herbal standar dengan model.

Sebelum percobaan, bubuk KBr pertama-tama dikeringkan dalam oven pada suhu 120 ° C selama 30
menit untuk menghilangkan H2O yang terserap. Setiap sampel kering secara terpisah bubuk dalam
blender, disaring menggunakan saringan 200 mesh, dan kemudian dicampur dengan bubuk KBr.
Campuran ditumbuk lagi, dan kemudian ditekan ke tablet sebelum analisis spektroskopi inframerah.
Spektra di daerah inframerah pertengahan dari 4000 hingga 400 cm − 1 direkam pada resolusi 4 cm
− 1 dengan interval 1 cm − 1 dan tablet KBr murni dicatat sebagai spektrum latar belakang. Setiap
sampel diukur pada 16 pemindaian, untuk mengurangi rasio signal-to-noise (SNR) dan untuk
meningkatkan kualitas spektral. Gangguan air dan karbon dioksida dihilangkan secara online saat
memindai. Untuk mendapatkan spektrum IR berkorelasi 2D, pelet sampel ditempatkan ke dalam
dudukan sampel yang dilengkapi dengan jaket pemanas. Sampel disc dipanaskan dan spektrum
dikumpulkan dari 50 ° C hingga 120 ° C pada interval 10 ° C.

Diferensiasi Liar, Dibudidayakan dan Dibiakkan Jaringan A. roxburghii oleh Tri-step FT-IR Tri-step FT-
IR sidik jari makro dapat dikenal sebagai spektrum akumulatif keseluruhan dari semua spektrum dari
masing-masing komponen. Dengan demikian, dapat memberikan gambaran kimia holistik A.
roxburghii liar, dibudidayakan dan jaringan. Spektra IR mewakili profil kimianya dan juga
menunjukkan variasi dalam komposisi kimianya [7]. Selain itu, identifikasi tristep FT-IR juga dapat
secara bertahap meningkatkan resolusi dan memperkuat fitur sidik jari sampel

Kesimpulan

Meskipun berbagai jenis A. roxburghii mengandung konstituen kimia yang serupa, mereka dapat
dibedakan dengan sukses dengan multi-step IR Macro Fingerprint analysis dan teknik chemometric.
Sangat penting untuk membedakan jenis tanaman yang berbeda karena harga dari jenis yang
berbeda bervariasi dan juga untuk mencegah penjual yang tidak etis memalsukan A. roxburghii liar
dengan yang dibudidayakan dan dibudidayakan oleh jaringan. Menurut karakter sidik jari, yang
meliputi, posisi puncak, intensitas puncak dan bentuk puncak, perbedaan komposisi dari tiga jenis A.
roxburghii dapat diidentifikasi, dibedakan dan divalidasi oleh spektrum FT-IR, SD-IR dan 2D-IR
selangkah demi selangkah. A. roxburghii yang dibudidayakan dengan bulan pertumbuhan yang
berbeda juga dapat dibedakan dengan menggunakan metode identifikasi sidik jari inframerah tiga
langkah juga.

result

Spektra FT-IR dari berbagai usia A. roxburghii liar dan budidaya ditunjukkan pada Gambar 5. Dengan
inspeksi visual, dapat diamati bahwa seiring bertambahnya usia C-JXL, spektrum menunjukkan lebih
banyak kemiripan dengan spektrum W -JXL. Dengan kata lain, profil kimia C-JXL menjadi lebih mirip
dengan W-JXL karena bulan-bulan budidaya meningkat, terutama di kisaran 1000-400 cm-1. Di
wilayah ini, perubahan yang paling jelas adalah munculnya puncak karakteristik sekitar 535 dan 469
cm-1. Ditemukan bahwa kedua puncak muncul sejak bulan keenam dibudidayakan dan puncak ini
adalah puncak karakteristik WJXL karena mereka datang dalam intensitas yang sangat kuat dalam
spektrum.

Diskusi

Pra-perawatan spektrum FT-IR adalah prosedur standar sebelum menganalisis analisis kemometrik
spektrain. Spektrum dinormalisasi dengan standar normal variate (SNV). SNV bekerja dengan
menghitung deviasi standar semua titik data dalam spektrum FT-IR yang diberikan dan kemudian
seluruh FT-IR dinormalisasi dengan nilai ini, sehingga memberikan FT-IR deviasi standar
unit.sedangkan SNV berfungsi untuk menghapus variasi kemiringan dan juga efek hamburan [15].

Setelah menganalisis spektrum FT-IR konvensional A. roxburghii, dapat diamati bahwa pita serapan
utama dari W-JXL, C-JXL dan TC-JXL serupa seperti memiliki puncak terkuat sekitar 3370 cm-1 dari
getaran peregangan gugus OH, puncaknya sekitar 2920 cm-1 dari peregangan asimetris gugus CH2,
puncak sekitar 1750 cm-1 dari peregangan C = O ester, 1630 cm-1 dari pembungkusan cincin
aromatik, puncak sekitar 1410 cm-1 dari keberadaan cincin aromatik dan pita yang tumpang tindih
pada kisaran 1200-1000 cm-1 yang terutama disebabkan oleh getaran peregangan CO, yang
semuanya merupakan penyerapan khas dalam polisakarida dan pati