PJN 

ISSN 1680-5194 

JURNAL PENGARUH GIZI 

ANSlnet 
308 Kota Lasani, Sargodha Road, Faisalabad - Pakistan Mob: +92 300 3008585, Fax: +92 41 8815544 
E-mail: editorpjn@gmail.com 
 
AKSES OPEN Pakistan Jurnal Nutrisi 
ISSN 1680 -5194 DOI: 10.3923 / pjn.2017.384.392 

Artikel Penelitian Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat 

Pribumi dengan Urutan 16S rRNA dari Dangke, Keju Tradisional 
dari Enrekang, Sulawesi Selatan 
Setiawan Putra Syah, Cece Sumantri, Irma Isnafia Arief dan Epi Taufik 
Departemen Produksi dan Teknologi Hewan, Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor, Jl. Agatis, Kampus IPB Dramaga, 
16680 Bogor, Indonesia 

Abstrak 
#  BDLHSPVOEBOE0CKFDUJWF Dangke adalah keju tradisional dari Sulawesi Selatan yang telah dikerjakan oleh orang-orang 
dari  kabupaten  Enrekang  sepanjang  sejarah. Mikrobiota keju ini terdiri dari beragam spesies bakteri. The maKority yang dimiliki 
oleh  Lactic  Acid  Bacteria  (LAB)  genera.  LAB  pribumi  dangke  dapat  menjadi  sumber  potensial  kultur  starter  dan  probiotik. 
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengisolasi  LAB  dari  dangke  dan  mengidentifikasi  mereka  dengan  16S  rRNA 
seRuencing.  .FUIPEPMPHZ  Dangke  dari  Enrekang,  Sulawesi  Selatan  dikumpulkan.  LAB  diidentifikasi  dengan  morfologi 
(pewarnaan  Gram  dan bentuk sel), fisiologi (pertumbuhan dan Wiability pada 6,5 ​NaCl dan suhu 15, 37 dan 45EC), biokimia (uji 
catalasenegatiWe danCO 
2 
produksi)  dan  surWiWal 
pada  pH  rendah  (2,  3  ,  4  dan  7.2)  dan  dalam garam empedu (0.3). 3FTVMUT Hasil menunjukkan bahwa 30 isolat diidentifikasi 
sebagai  LAB  dengan  GrampositiWe,  catalasenegatiWe  dan  karakteristik  batang.  Sepuluh  isolat  LAB  dari  dangke  memiliki 
toleransi  tertinggi  terhadap  pH  rendah  dan  garam  empedu.  Isolat  yang  tahan  terhadap  pH  rendah  dan  garam  empedu  adalah 
A123K,  A113L,  A323L,  B111K,  B212K,  B221L,  B312K,  B323K,  C113L  dan  C222L.  Gen  16S  rRNA  dapat  diperkuat dengan 
Polymerase  Chain  Reaction  (PCR)  dari  5  isolat  (A323L,  B111K, B323K, C113L dan C222L) untuk mendapatkan satu pita pada 
gel  agarose  1.  $  PODMVTJPO  Identifikasi  oleh  gen  16S  rRNA  seRuencing  menunjukkan  semua  isolat  diidentifikasi  sebagai 
Lactobacillus fermentum dengan kemiripan indeY dari approYimately 99100. 
Kata kunci: Dangke, isolasi, identifikasi, bakteri asam laktat, 16S rRNA 
ReceiWed: 31 Januari 2017 Diterima: 31 Maret 2017 Diterbitkan: 15 April 2017 
Rujukan: Setiawan Putra Syah, Cece Sumantri, Irma Isnafia Arief dan Epi Taufik, 2017. Isolasi dan identifikasi bakteri asam 
laktat asli dengan seRuencing 16S rRNA dari dangke, keju tradisional dari Enrekang, Sulawesi Selatan. Pak. J. Nutr., 16: 384392. 
Penulis yang sesuai: Epi Taufik, Departemen Produksi dan Teknologi Hewan, Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor, Jl. 
Agatis, Kampus IPB Dramaga, 16680 Bogor, Indonesia 
Hak Cipta: ˜ 2017 Setiawan Putra Syah et al. Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan lisensi 
atribusi kreatiWe commons, yang memungkinkan penggunaan tidak terbatas, distribusi dan reproduksi dalam media apa saja, 
ProWided penulis asli dan sumber dikreditkan. 
Minat Bersaing: Para penulis haKami menyatakan bahwa tidak ada eYist minat bersaing. 
Kekosongan Data: Semua data releWant berada di dalam kertas dan file informasi pendukungnya. 
 
Pak. J. Nutr., 16 (5): 384392, 2017 
* / 530% 6 $ 5 * 0 / 
Dangke telah diproduksi oleh orang-orang Enrekang sejak 1905. Dangke terbuat dari susu sapi atau kerbau. Ini diproses oleh 
pasteurisasi  dan  dikoagulasi  dengan  enzim  papain  untuk  memisahkan  dadih  dan  whey.  Dadih  ini  kemudian  ditempatkan  dalam 
cetakan  khusus  yang  terbuat  dari  tempurung  kelapa  dan  ditekan  sampai  whey  dipisahkan1.  Dangke  mengandung  Wariety  of 
microbiota  yang  luas,  khususnya  genera  Lactic  Acid  Bacteria  (LAB).  LAB  umumnya  digunakan  untuk  kultur  starter  yang 
menghasilkan  asam  laktat  sebagai  produk  utama  dan  metabolit lain, seperti senyawa aroma, yang berkontribusi pada flaWor dan 
teye produk. MoreoWer, LAB dapat meningkatkan kelarutan karbohidrat dan manisnya produk akhir23. 
LAB  juga bisa dibuat menjadi probiotik untuk makanan fungsional. Probiotik adalah mikroorganisme liWing yang, jika oleh 
manusia  atau  hewan  dalam  jumlah  yang  cukup  akan  memberi  manfaat  kesehatan  bagi  tuan  rumah  dengan  meningkatkan 
keseimbangan  mikrobiota  usus4.  Banyak  laporan  yang  mengamati  potensi  LAB  sebagai  probiotik  untuk  manusia.  LAB  dapat 
menghasilkan  senyawa antimikroba57, mengurangi kolesterol serum leWels8,9, pra-intoleransi Laktosa, eYert antihipertensi efek 
10,  menstabilkan  mikroflora11  usus,  efek  antioYidant  intestinal,  meningkatkan  respon  imun  sistemik12  dan  eYhibit  antikanker 
dan  antitumor  actiWity13.  Probiotik  dapat  diterapkan  pada  produk  makanan  seperti  sosis  fermentasi14,  produk  susu12,15,16, 
susu kedelai17 dan whey18 terfermentasi. 
Isolasi  Bakteri  Asam  Laktat  (LAB)  asli  dari  produk  susu  dan  susu  telah  dilaporkan  secara  bebas,  termasuk  LAB dari susu 
sapi  mentah1921,  susu  kerbau22,  susu  kambing2325,  susu unta2628, susu kuda Sumbawa29, ASI 30,31 dan keju tradisional dan 
produk  susu8 , 3236. Di Indonesia, Sunaryanto dan Marwoto37 melaporkan bahwa isolasi LAB dari produk susu tradisional yang 
disebut  lDadihz.  HoweWer,  studi  tentang  sifat  LAB  yang  diisolasi  dari  dangke  haKami  belum  pernah  dilaporkan.  Tujuan  dari 
penelitian  ini  adalah  untuk  mengisolasi  LAB  dari  dangke  dan  mengidentifikasi  mereka  dengan  16S  rRNA  seRuencing. 
Sepengetahuan kami, ini adalah laporan pertama tentang identifikasi LAB dari dangke. 
. "5 & 3 *" - 4 "/% .& 5) 0% 4 
4BNQMJOH  Sebanyak  9  sampel  dangke  dikumpulkan  dari  berbagai  daerah  industri  rumah  dangke  di  kabupaten  Enrekang, 
Sulawesi  Selatan.  Sampel  langsung  dikumpulkan  dengan  teknik  aseptik  dan  kemudian  diangkut  ke  laboratorium  dalam  boY 
pendingin (4EC) untuk meminimalkan kontaminasi. Sampel dianalisis untuk menentukan kandungan LAB di atas arriWal. 
"#  JTPMBUJPO  Dua  puluh  miligram  sampel  miligram  dangke  dihomogenisasi  dengan  225  mL  0,85  (b  /  W)  )  larutan  NaCl 
fisiologis  steril (10G1). Pengenceran serial dibuat untuk setiap sampel dan 1 mL pengenceran yang tepat (10G4, 10G5 dan 10G6) 
tersebar  di  piring  MRS  agar  (Merck  KGaA,  Darmstadt,  Jerman)  dan  kemudian  diinkubasi  pada  37EC  selama  48  jam.  Setelah 
inkubasi,  koloni  dengan  morfologi  yang  berbeda  (seperti  warna,  bentuk  dan  ukuran)  dipilih  secara  acak,  dimurnikan  dengan 
melapisi  mereka  pada  agar  MRS  dan  kemudian  diinkubasi  pada  30EC  selama  48  jam.  Koloni  terus-menerus  melesat  untuk 
mendapatkan koloni murni38. 
$  IBSBDUFSJ  [BUJPO  PG  UIF  -  "#  JTPMBUFT  Semua  isolat  dicirikan  sesuai  dengan  morfologi  mereka  dengan  pewarnaan 
Gram  dan  pembentukan  sel8,  fisiologi  mereka  dengan  pertumbuhan  dan  Wiability  pada  6,5  ​NaCl dan suhu 15, 37 dan 45EC38, 
biokimia mereka dengan uji catalasenegatiWe dan CO 
2  produksi39  dan  surWiWal  mereka  pada  pH  rendah  (2,  3,  4 
dan 7.2) 29 dan dalam 0,3 (b / W) garam empedu 25,40. 
"OBMZTJTPGUIF4S3 /" HFOFTFRVFODFT% / "FYUSBDUJPO DNA genomik total dari masing-masing isolat eyukur dari 5 
mL kultur dari masing-masing koloni murni yang ditanam dalam MRS broth (Merck KGaA, Darmstadt, Jerman) oWernight at 
37EC. DNA itu menarik seperti yang dijelaskan oleh Sambrook dan Russell41 dengan beberapa modifikasi. Biakan disentrifugasi 
pada 10.000wg selama 1 menit pada 37EC dan supernatan dibuang. Kemudian, 200 ŸL larutan I (25 mM TrisHCl buffer, pH 8,0, 
10 mM EDTA dan 50 mM glukosa) ditambahkan ke sel, yang diresuspended oleh pipetting dan diinkubasi selama 5 menit pada 
suhu kamar. NeYt, 400 ŸL larutan II (1,2 N NaOH dan 1 SDS) ditambahkan dan solusinya adalah miYed dengan lembut dan 
diinkubasi pada es selama 5 menit. SubseRuently, 300 ŸL larutan III (60 mL 5 M kalium asetat, 11,5 mL asam asetat dan 28,5 
mL dH 
2 
O)  ditambahkan,  WorteY  miYed  dan  kemudian  diinkubasi  pada  es 
selama  5  menit.  Sepuluh  mikroliter  kloroform  ditambahkan  ke  miYtures,  WorteY  miYed  dan  disentrifugasi  pada  10.000wg 
selama  10  menit  pada  4EC.  Supernatan  dipindahkan ke tabung baru (1,5 mL) dan 1 ŸL dari 1 mg mLG1 RNase A ditambahkan, 
miYed  lembut  dan  diinkubasi  pada  suhu  kamar  selama  15  menit.  Kemudian,  500  ŸL  2propanol  ditambahkan,  miYed  dengan 
lembut  dan  disentrifugasi  pada  10.000wg  selama  10  menit  pada  4EC.  Supernatan  kemudian  dibuang  dan  500  ŸL  etanol  (70) 
ditambahkan,  miYed  dengan  lembut  dan  disentrifugasi  selama  1  menit.  Kemudian,  supernatan  dibuang  untuk  mengumpulkan 
DNA  yang  dimurnikan,  yang  kemudian  dikeringkan.  DNA  yang  telah  dimurnikan telah diremajakan dengan 100 ŸL penyangga 
Tris EDTA (TE) untuk aplikasi lebih lanjut. 
385 
 
Pak. J. Nutr., 16 (5): 384392, 2017 
4S3  /  "HFOFTFRVFODJOH  DNA  genom  digunakan  sebagai  template  untuk amplifikasi PCR dari segmen gen 16S rRNA. Dua 
primer  uniWersal  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  sama  dengan  dijelaskan  dalam  laporan  sebelum  37,  yaitu  9  F 
(5GAGTTTGATCCTGGCTCAG3)  dan  1541  R  (5  AGGAGGTGATCCAGCC3)  .Pengampuhan  PCR  dilakukan  untuk 
mendapatkan  satu  band  yang  mewakili  produk  gen  16S  rRNA  yang  diperkuat  .Produk  PCR  adalah  eYamined  oleh  1 
elektroforesis agarose, difoto menggunakan Transilluminator UV dan dicetak pada film Polaroid38. 
%  BUB  BOBMZTJT  BOE  TQFDJFT  JEFOUJGJDBUJPO  The  nukleotida  seRuences  gen  16S  rRNA  dari  semua  isolat  LAB 
dianalisis  dan  diidentifikasi  menggunakan  perpustakaan  data  GenBank  dan  program  BLAST  di  situs  NCBI  http:  //  www. 
ncbi.nlm.nih.goW  /  18.  Beberapa  keberpihakan  seRuence  dianalisis  menggunakan  perangkat  lunak  BioEdit  untuk  membangun 
pohon  filogenetik  dan  untuk  membandingkan  kemiripan  antara  seRuences  dengan  metode  neighborKoining  menggunakan 
MEGA 7 softwa re42. 
3 & 46-54 
*  TPMBUJPOBOE  *  EFOUJGJDBUJPOPG  -  "#  Tiga  puluh  isolat  murni  diperoleh dari dangke dan diidentifikasi sebagai LAB 
berdasarkan  morfologi,  fisiologi  dan  uji  biokimia.  Semua  isolat  tumbuh  pada  MRS  agar  dalam  kondisi  aerobik  dan 
GrampositiWe  dan  negatiKami  untuk  aktivitas  katalase,  menunjukkan  bahwa  isolat-isolat  tersebut  termasuk  ke  dalam  genus 
Lactobacilli. Profil morfologi, fisiologis dan biokimia dari LAB yang terisolasi ditunjukkan pada Tabel 1. 
$  IBSBDUFSJ  [BUJPO  PG  UIF  JTPMBUFT  Karakteristik  morfologi  isolat  LAB  diidentifikasi  dengan  pewarnaan  Gram,  yang 
menunjukkan  bahwa  semua  isolat  adalah  bakteri  GrampositiWe  Analisis  bentuk  LAB  menunjukkan  bahwa  28  isolat  eYhibited 
bentuk  batang  dan  2  isolat  ditampilkan  bentuk  oWal  (Tabel  1)  .Pengujian  karakteristik  biokimia  menunjukkan  bahwa  semua 
isolat  adalah  catalasenegatiKami  dan  70 dari LAB dapat menghasilkan gas dari glukosa, menunjukkan bahwa 70 dari isolat LAB 
adalah heterofermentatiKami Lactobacilli dan 
Tabel 1: Morp profil hologio, fisiologis dan biokimia dari LAB 
Growth (EC) Isolate codes Bentuk Gram stain Katalase 10 37 45 Pertumbuhan dalam 6.5 NaCl Gas dari glukosa A112K Rod 
A113L Rod A123K Rod A123L Rod A212K Rod A212L Rod A312K Rod A321K OWal A321L Rod A323L Rod B111K Rod 
B122K Rod B212K Rod B211K Rod B221K Rod B221L Rod B322L Rod B312K Rod B321K Rod B323K Rod C111K Rod 
C112K OWal C113L Rod C121L Rod C123K Rod C211K Rod C213K Rod C221L Rod C222L Rod C312L Rod LAB: bakteri 
asam Laktat, A: AnggeraKa, B: Enrekang, C: Cendana,: pertumbuhan lemah,: pertumbuhan Medium,: pertumbuhan yang kuat,: 
Tidak ada pertumbuhan 
386 
 
100 
pH 2 pH 3 pH 4 pH 7,2 
90 
ba 
 
80 
ba 
 
a 
 
70)% 
(setarlavivru S 
60 
50 
40 
30 
20 
10 
0 
A123K A113L A323L B111K B212K B221L B322K B323K C113L C222L Isolat LAB 
Gambar 1: Tingkat SurWiWal dari isolat LAB pada pH yang berbeda Walues 
LAB: Bakteri asam laktat 
30 adalah homofermentatiKami Lactobacilli. Bakteri asam laktat dapat diolah menjadi homofermentatiKami dan bakteri 
heterofermentatiKami berdasarkan kemampuan mereka untuk memfermentasi glukosa. The heterofermentatiWe LAB dapat 
menghasilkan gas sebagai produk akhir fermentasi. 
Uji karakteristik fisiologis menunjukkan bahwa semua isolat dapat tumbuh dengan baik pada 6,5 ​NaCl, 36,67 dari isolat 
menunjukkan pertumbuhan yang lemah, 56,67 menunjukkan pertumbuhan sedang dan 6,67 menunjukkan pertumbuhan yang 
kuat. Berdasarkan uji suhu, semua isolat dapat tumbuh dengan baik pada suhu tinggi (45EC), eYcept untuk isolat C211K dan 
C222L, ​yang​ menunjukkan pertumbuhan yang l​emah. Selanjutnya, 26 dari 30 (86,67) isolat bisa tumbuh pada suhu rendah 
(10EC). Salah satu faktor yang mempengaruhi pertumbuhan bakteri adalah suhu. Bakteri dapat dikategorikan sebagai 
psychrophilic, mesophilic dan thermophilic, sesuai dengan rentang pertumbuhan suhu mereka. Beberapa spesies LAB dapat 
tumbuh dengan baik pada suhu tinggi43. Lactobacilli dan kelompok cocci termofilik dapat tumbuh pada 45EC, tetapi tidak dapat 
tumbuh pada 10EC atau dalam 6.5 NaCl (b / W). Kelompok mesofilik dapat tumbuh pada 10EC, tetapi tidak dapat tumbuh pada 
45EC atau 6,5 NaCl (b / W). HoweWer, kelompok Enterococci dapat tumbuh pada 45 dan 10EC dan di 6,5 NaCl44. 
Isolat  BAL  ditumbuhkan  dalam  media  pH  asam  (2,  3  dan  4)  dan  media  pH  normal  (7.2)  untuk  memancarkan  Wi-Fi  LAB 
dalam  kondisi  asam.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  Wiability  of  LAB  pada  pH  asam berbeda nyata (p0.05) pada pH 2, 4 
dan  7.2,  tetapi  tidak  berbeda  nyata  (p0.05)  pada  pH  3.  SurWiWal  dari  isolat  LAB  pada  pH  2,  3  ,  4  dan  7.2  ditunjukkan  pada 
Gambar. 1. Sebanyak 10 isolat LAB bisa surWiWe dalam 
kondisi pH asam, tetapi kemampuan surWiWal mereka berbeda dan hanya 3 isolat (A113L, A323L dan B323K) memiliki tingkat 
surWiWal yang baik (70) pada pH 2. Tingkat surWiWal semua isolat LAB pada pH 4 lebih baik daripada pH 3 dan 2, yang di 
atas 70, dengan kisaran 81.4791.12. Tingkat surwisal dari isolat A323L (88,63) pada pH 2 lebih baik daripada beberapa isolat 
pada pH 3, 4 dan 7,2. Semua isolat mampu bertahan pada pH 2 dan 3 dan menunjukkan surWiWal lebih baik pada pH 4 (68), 
beberapa dari mereka menunjukkan tingkat surWiWal mendekati 100 (isolat A323L dengan tingkat surWiWal 97,2) pada pH 7,2. 
HoweWer, isolat B322K menunjukkan 0 tingkat surWiWal pada pH 2. Uji resistensi garam empedu dari isolat LAB dilakukan 
untuk menentukan kemampuan isolat LAB untuk menahan garam empedu yang biasanya diproduksi di usus dan surWiK dan 
koloni usus pada saat masuk38 . Dalam penelitian ini, semua isolat LAB dapat bertahan dengan baik dalam larutan garam 
empedu 0,3 (Gbr. 2). Tingkat surWiWal menunjukkan bahwa semua isolat LAB sangat resisten terhadap garam empedu (50). 
Hasil penelitian menunjukkan bahwa di antara semua isolat, isolat A232L eYhibited tingkat surWiWal tertinggi dalam 0,3 garam 
empedu (83,11), sedangkan isolat C222L eYhibited tingkat surWiWal terendah 57,28. 
4S3  /  "HFOFTFRVFODFTBOEQIZMPHFOFUJDBOBMZTJT  Bentuk  terisolasi  LAB  dangke  akan  lebih  akurat  diidentifikasi 
untuk  spesies  leWel  oleh  gen  16S  rRNA  seRuencing. Dalam penelitian ini, gen 16S rRNA seRuences berhasil diamplifikasi dari 
5  isolat  oleh  Polymerase  Chain  Reaction  (PCR).  Hasilnya  menunjukkan  bahwa  seRuences  gen  16S  rRNA  (membentang  terus 
menerus approYimately 1.500 bp) adalah 
387 
a 
a 
a 
a 
a 
a 
Pak J. Nutr, 16 (5):.. 384.392, 2017 
sebuah 
cba 
a 
a 
a 
a 
a 
c 
iklan 
ba 
sebuah 
aba 
a 
b 
d 
ba 
 
ba 
 
a 
a 
b 
bdc 
 
ba 
 
a 
 
 
100 
90 
80 
70)% (setarlavivru S 
60 
50 
40 
30 
20 
10 
0 
LAB isolat 
Gambar 2:. tingkat SurWiWal LAB isolat dalam 0,3 empedu larutan garam 
LAB : Bakteri asam laktat 
M abcde M 
1500 bp 
Gambar 3: 16S rRNA diamplifikasi oleh PCR dan dipisahkan oleh 1 gel agarosa elektroforesis 
M: Penanda λEcoT141, a: B323K, b: B111K, c: A323L, d: C222L, e: C113L 
berhasil  diperkuat  dengan  primer  uniWersal  9  F dan 1541 R (Gambar 3). MoreoWer, konstruksi pohon filogenetik menunjukkan 
bahwa  5  isolat  dimasukkan  dalam  kelompok  fermentum  Lactobacillus,  yang  pohon  utamanya  terdiri  dari  empat  kelompok 
(Gambar. 4). 
Dua  strain,  B323K  dan  C113L  isolat  diklasifikasikan  dalam  cluster  dengan  L.  fermentum  strain  FMAC283  (diisolasi  dari 
caciocaWallo  palermitanotype  keju  tradisional,  Italia),  L.  fermentum  strain  KF7  (diisolasi  dari  susu  segar,  Pakistan),  L. 
fermentum  strain  W5  (diisolasi  dari  Wara,  keju  lunak  Afrika)  dan  L.  fermentum  strain  LFW2  (diisolasi  dari  ASI,  Taiwan),  di 
mana mereka memiliki nilai kesamaan 100 berdasarkan pada proyeksi NCBI BLAST. The 
A323L  isolat  termasuk  dalam  cluster  dengan  L.  fermentum  regangan  3872  (diisolasi  dari  ASI  dari  seorang  wanita  yang  sehat, 
Rusia)  dan  L.  fermentum  ketegangan  NM985  (diisolasi  dari  produk  susu, Mongolia), didasarkan pada NCBI BLAST proYimity 
dari  99,1.  Isolat  B111K  termasuk  dalam  kelompok  dengan  L.  fermentum  strain  PD2  dan  CPO  7.002  yang diisolasi dari produk 
susu  tradisional  dari  India  (Dosa  adonan)  dan  MeYico  (Jarocho  keju  segar),  dengan  hormat.  Mereka  memiliki  100  proYimity 
berdasarkan  NCBI  BLAST.  Dalam  cluster  terakhir,  isolat  C222L  termasuk  dalam  cluster  dengan  koleksi  budaya  L.  fermentum 
IMAU: 80800 dari Cina dan memiliki hubungan tertutup 99,7 menurut NCBI BLAST. 
388 
Pak. . J. Nutr, 16 (5): 384.392 2017 
ab ab 
ab 
b ab ab bbb 
A123K A113L A323L B111K B212K B221L B312K B323K C113L C222L 
 
Pak. J. Nutr., 16 (5): 384392, 2017 
A323L mengisolasi 
0,5 0,4 0,3 0,1 0,1 
Lactobacillus fermentum strain 3872 (CP011536.1) 
Lactobacillus fermentum regangan NM98-5 (HM218414.1) 
C222L mengisolasi 
Lactobacillus fermentum budaya-koleksi IMAU: 80800 (HM058965.1) 
Lactobacillus fermentum strain PD2 (KR612224.1) 
Lactobacillus fermentum strain CPO 7.002 (KP313676.1) 
B111K isolat 
B323K isolat 
Lactobacillus fermentum strain FMAC283 (KF060259.1) 
Lactobacillus fermentum strain KF7 (KR816163.1) 
C113L mengisolasi 
Lactobacillus fermentum strain W5 (JN091087.1) 
Lactobacillus fermentum strain LFW2 (KF746167.1) 
0,0 
Gambar. 4: Pohon filogenetik berdasarkan analisis gen 16S rRNA seRuences dan isolat internasional terdekat yang menunjukkan 
penempatan filogenetik dari strain representatiWe terisolasi dari dangke 
% * 4 $ 644 * 0 / 
LAB  secara  alami  hadir  sebagai  mikroflora  asli  dan  biasanya  dianggap sebagai organisme pembusukan dalam susu mentah 
dan  produk  susu19,45.  Mereka  didistribusikan  secara  luas  dalam  susu  mentah  dan  produk  susu  dengan  potensi  sebagai 
probiotik8,21,46.  Jumlah  Wiab  LAB  di  antara  semua  sampel  dangke  dalam  penelitian  ini  berkisar  dari  4,034.45  log  CFU gG1. 
Dalam  penelitian  serupa,  Liu  et  al.42  melaporkan  bahwa  jumlah  LAB  dari  Tarag  (produk  susu  tradisional  Mongolia)  berkisar 
antara  4,028.88  log  CFU  mLG1.  Lebih  banyak  lagi,  jumlah  serupa  dilaporkan  dalam  produk  LAB  komersial47  dan  jenis  susu 
lainnya, seperti camel28 dan susu kambing23. HoweWer, itu lebih rendah dari jumlah Wiab LAB dari dadih (keju tradisional dari 
Sumatera,  Indonesia)  37.  Penting  untuk  dicatat  bahwa  mikroorganisme  LAB  harus  dapat  ditingkatkan,  aktif  dan  berlimpah, 
dengan  konsentrasi  paling  tidak  6  log  CFU  g  mLG1  dalam  produk  selama  umur  simpan  yang  ditentukan  hingga  eYert  efek 
positif4. 
Lactobacilli  adalah  LAB  yang paling sering digunakan dalam produk hewani yang difermentasi sebagai promotor kesehatan 
dan  digunakan  sebagai  probiotik  dalam  makanan,  susu  berbudaya  dan  sediaan  farmasi buram48. Bakteri probiotik didefinisikan 
sebagai  mikroorganisme  liwe dengan manfaat kesehatan bagi inangnya dengan cara menginvasi mikrobiota usus ketika diberikan 
dalam jumlah adeRuata4. Banyak laporan yang mengamati 
kegunaan  LAB  sebagai  probiotik  untuk  kesehatan  manusia8,28,4952.  Kondisi  dasar  untuk  penggunaan  strain  LAB  sebagai 
probiotik  minimal  mencakup  hal-hal  berikut:  (1)  Mereka  harus  Secara  Umum  Diakui Sebagai Aman (GRAS), (2) Mereka harus 
toleran  terhadap  asam dan garam empedu dan (3) Mereka harus tindakan antagonis melawan bakteri patogen (FAO dan WHO) 4, 
seperti  yang  menghasilkan  zat  antimikroba  yang  dikenal  sebagai  bacteriocin,  yang  digunakan  sebagai  pengantar  makanan 
alamiWatiWe67.  Dalam  penelitian  ini,  diisolasi  strain  LAB  dari  dangke,  keju  tradisional  dari  Enrekang,  Sulawesi  Selatan, 
mengidentifikasi  mereka  sebagai  L.  fermentum  melalui  kombinasi  uji fenotipik dan genotipik dan diwestigated tingkat surwinya 
pada larutan garam asam dan empedu. 
Genus  Lactobacillus  telah  diidentifikasi  sebagai  spesies  maKor  dalam  produk  susu  dan  susu.  Dalam  penelitian  ini,  juga 
ditemukan  bahwa  semua  isolat  yang  diperoleh  di  bawah  kondisi  termal  kami  adalah  anggota  genus Lactobacilli. SubseRuently, 
fiWe  LAB  isolat  dari  dangke  lebih akurat diidentifikasi untuk spesies leWel oleh gen 16S rRNA seRuencing. Menurut seGuence 
nukleotida,  semua  isolat  diidentifikasi  sebagai  L.  fermentum  (Gambar  4).  Lactobacillus fermentum juga telah diisolasi dari susu 
kuda  di  Sumbawa  oleh  16S  rRNA  identifikasi  dengan  panjang  seRuence  approyimately  440  bp29.  Itu  juga  diisolasi  dari  keju 
tradisional 33,53,54, produk susu tradisional 55,56 dan ASI57,58. 
389 
 
Pak. J. Nutr., 16 (5): 384392, 2017 
Uji  ketahanan  terhadap  kondisi  asam  pada  pH  rendah  diterima  sebagai  salah  satu  sifat  yang  diinginkan  digunakan  untuk 
memilih  strain  probiotik  potensial  LAB38. Kandidat probiotik LAB seharusnya tidak hanya toleran terhadap kondisi asam (asam 
dari  kondisi  lambung)  tetapi  juga  resisten  terhadap  garam  empedu  usus46.  Asam  asam  dari  cairan  lambung  berkisar  dari  pH 
1,54,529  dan  garam-garam  empedu  di  usus  berkisar  0,150.659,  tergantung  pada  konsumsi makanan. Dalam penelitian ini, isolat 
LAB  diuji  pada  pH  2,  3  dan  4  (untuk  mensimulasikan  kondisi  lambung)  dan  7,2  (untuk  mensimulasikan  kondisi  usus).  LAB 
diisolasi  dari  dangke  haKemampuan  yang  berbeda  dari  kondisi  asam  surWiWing.  Isolat  SiY  memiliki  tingkat  surWiWal  yang 
baik  (lebih  dari  50)  pada  isolat  pH  2  dan  4  memiliki  tingkat  surWiWal  kurang  dari  50.  Semua  isolat  LAB  memiliki  tingkat 
surWiWal  lebih  dari  60  pada  pH  3,  4  dan  7.2.  Tingkat  surwisal  dari  isolat  LAB  kemudian  ditentukan  setelah  eYposure  ke  0,3 
larutan  garam  empedu  selama  3  jam  dan  tingkat  surWiWal  dari  semua isolat lebih dari 50. Hasil ini menunjukkan bahwa semua 
LAB  yang  diisolasi  dari  dangke  dapat  terjaring  dengan  baik di kedua lambung. dan kondisi usus. Dalam penelitian serupa, Arief 
et  al.  Melaporkan  bahwa  tingkat  surWiWal  dari  isolat  LAB  pada  pH  2,5  lebih  besar  dari  pada  pH  2,  yang  lebih  dari  40. 
MoreoWer, Shi et al.29 melaporkan bahwa lebih dari 50 L. fermentum dan Strain L. rhamnosus pada pH 2. 
$ 0 / $ - 64 * 0 / 
Sebanyak 30 isolat LAB berhasil diisolasi dari dangke, keju tradisional Enrekang dan 5 isolat berhasil diidentifikasi oleh gen 
16S  rRNA  seRuencing.  Analisis  dari  gen  16S  rRNA  seRuences  menunjukkan  bahwa  semua  isolat  LAB  diidentifikasi  sebagai 
Lactobacillus  fermentum.  Isolat  LAB  menunjukkan  kemampuan  yang berbeda untuk mengatasi kondisi lambung. Hanya 6 isolat 
LAB  yang  dapat  bertahan dengan baik pada pH 2 (tingkat surWiWal lebih dari 50) dan populasi meningkat pada pH 3, 4 dan 7,2. 
Semua  isolat  LAB  dapat  bertahan  dengan  baik  (tingkat  surWiWal  lebih  dari  50)  dalam  larutan  garam  empedu  0,3.  Temuan  ini 
menunjukkan  kemungkinan  bahwa  isolat LAB dari dangke dapat digunakan sebagai probiotik. Namun demikian, penelitian lebih 
lanjut diperlukan untuk mengidentifikasi karakteristik probiotik lainnya dari isolat LAB. 
4 * (/ * '* $ "/ $ & 45" 5 &. & / 5 
Studi  ini  membedakan  LAB  yang  secara  khusus  diisolasi  dari  dangke  dan  mengidentifikasi  mereka  dengan  16S  rRNA 
seRuencing.  LAB ha yang teridentifikasi Kami telah diuji dan proWed untuk haKami beberapa karakteristik probiotik yang dapat 
digunakan sebagai starter probiotik 
untuk  produk  makanan  fungsional  .Penelitian  ini  akan  membantu  peneliti  untuk  mengungkap  manfaat  LAB  asli  dari  dangke 
sehingga banyak peneliti tidak dapat menggunakan eYplore. 
"$, / 08 - &% (. & / 5 
Studi  ini  adalah  didukung  secara  finansial  oleh  Direktorat  Jenderal  Pendidikan  Tinggi,  Kementerian  Pendidikan  Nasional 
Indonesia  (DIKTI)  melalui  Program  Penelitian  Ilmu  Pengetahuan  dan  Teknologi  2015  (064  /  SP2H  /  PL  /  Dit.Libtabmas  / 
5/2015).  Kami  juga  mengucapkan  terima  kasih  kepada  Prof.  Dr.  Kazuhito  FuKiyama,  Pusat  Internasional  untuk  Bioteknologi, 
Osaka UniWersity, Jepang atas dukungannya dalam melakukan gen 16S rRNA seRuencing. 
3 & '& 3 & / $ & 4 
1. Marzuki, AA, 1977. Penelitian yang dibuat dengan kualitas dangke, 
Departemen Perindustrian, Makassar. LegaroWa, V. dan L. Kourimska, 2010. Sensory Ruality eWal dari wheybased 
beWerages. MlKekarstWo, 60: 280287. 3. Pescuma, M., EM Hebert, F. Mozzi, dan GF de Valdez, 2010. Wheybased beWerage 
yang difermentasi secara fungsional menggunakan bakteri asam laktat. Int. J. Food Microbiol., 141: 7381. 4. FAO dan WHO., 
2007. Kelompok kerja WHO dalam menyusun pedoman untuk e-evaluasi probiotik dalam makanan. Panduan untuk e-Evaluasi 
probiotik dalam makanan: Laporan Koint FAO / WHO. FAO dan WHO, London, Ontario, Kanada. 5. Adegbehingbe, KT dan M. 
Bello, 2014. Aktivitas antibakteri whey fermentasi pada beberapa bakteri Enteropathogenic terpilih. Int. J. Curr. Mikrobiol. 
Applied Sci., 3: 152161. 6. Arief, II, C. Budiman, BSL Jenie, E. Andreas dan A. Yuneni, 2015. Plantaricin IIA1A5 dari 
Lactobacillus plantarum IIA1A5 menampilkan aktivitas bakterisida melawan Staphylococcus aureus. Mikroba bermanfaat, 6: 
603613. 7. Kia, KW, II Arief, C. Sumantri dan C. Budiman, 2016. Plantaricin IIA1A5 dari Lactobacillus plantarum IIA1A5 
menghambat bakteri patogen pada bakso sapi yang disimpan pada suhu kamar. Saya. J. Food Technol., 11: 3743. 8. Iranmanesh, 
M., H. Ezzatpanah dan N. MoKgani, 2014. Aktivitas antibakteri dan asimilasi kolesterol dari bakteri asam laktat yang diisolasi 
dari produk susu tradisional Iran. LWTFood Sci. Technol., 58: 355359. 9. Singh, TP, RK Malik, SG Katkamwar dan G. Kaur, 
2015. Efek hipokolesterolemik Lactobacillus reuteri LR6 pada tikus yang diberi diet highcholesterol. Int. J. Food Sci. Nutr., 66: 
7175. 10. Pihlanto, A., T. Virtanen dan H. Korhonen, 2010. Angiotensin I ConWerting Enzyme (ACE) inhibitory actiWity and 
antihypertensiWe efek dari susu fermentasi. Int. Dairy J., 20: 310. 
390 
 
Pak. J. Nutr., 16 (5): 384392, 2017 
11. Ren, D., C. Li, Y. 2in, R. Yin dan S. Du et al., 2014. Dalam Witro eValuasi potensi probiotik dan fungsional strain 
Lactobacillus yang diisolasi dari makanan yang difermentasi dan usus manusia. Anaerobe, 30: 110. 12. Sharma, R., R. Kapila, M. 
Kapasiya, V. Saliganti, G. Dass dan S. Kapila, 2014. Suplementasi makanan susu yang difermentasi dengan probiotik 
Lactobacillus fermentum meningkatkan respon imun sistemik dan antioYidant kapasitas dalam penuaan tikus. Nutr. Res., 34: 
968981. 13. Haghshenas, B., Y. Nami, N. Abdullah, D. Radiah, R. Rosli dan AY Khosroushahi, 2015. Dampak antikanker dari 
bakteri asam asetat probiotik yang berpotensi diisolasi dari mikrobiota susu tradisional. LWTFood Sci. Technol., 60: 690697. 14. 
Afiyah, DN, II Arief dan C. Budiman, 2015. Karakterisasi proteolitik dari sosis fermentasi daging sapi potong yang diinokulasi 
oleh probiotik Indonesia: Lactobacillus plantarum IIA2C12 dan Lactobacillus acidophilus IIA2B4. AdW. J. Food Sci. Technol., 
8: 2735. 15. Tillisch, K., J. Labus, L. Kilpatrick,;. Jiang dan J. Stains et al., 2013. Konsumsi produk susu fermentasi dengan 
probiotik memodulasi tindakan otak. Gastroenterologi, 144: 13941401. 16. Usmiati, S., W. Broto dan H. Setiyanto, 2014. 
Karakteristik dadih susu sapi yang menggunakan starter bakteri probiotik. JITV, 16: 141153. 17. Lee, BH, YH Lo dan TM Pan, 
2013. Kegiatan antiobesitas produk susu kedelai fermentasi Lactobacillus. J. Funct. Makanan, 5: 905913. 18.; hao,; .W., DD 
Pan,;. Wu, YY Sun, YX Guo, dan X.2. ; eng, 2014. KEGIATAN PRIAKSINSIA TERHADAP PERIODE difermentasi oleh 
Lactobacillus casei yang diisolasi dari koumiss. J. Dairy Sci., 97: 40624071. 19. Rodriguez, E., B. Gonzalez, P. Gaya, M. Nunez 
dan M. Medina, 2000. DiWersity dari bakteriosin yang dihasilkan oleh bakteri asam laktat diisolasi dari susu mentah. Int. Dairy 
J., 10: 715. 20. Wouters, JTM, EHE Ayad, J. Hugenholtz dan G. Smith, 2002. Mikroba dari susu mentah untuk produk susu 
fermentasi. Int. Dairy J., 12: 91109. 21. Ali, AA, 2011. Isolasi dan identifikasi bakteri asam laktat dari susu sapi mentah di negara 
Khartoum, Sudan. Int. J. Dairy Sci., 6: 6671. 22. RizRiati, H., C. Sumantri, RR Noor, E. Damayanthi dan EI Rianti, 2015. Isolasi 
dan identifikasi bakteri asam laktat asli dari susu kerbau Sumatera Utara. Indonesia J. Anim. Dokter hewan. Sci., 20: 8794. 23. 
Badis, A., D. Guetarni, B. MoussaBoudKema, DE Henni dan M. Kihal, 2004. Identifikasi dan sifat teknologi bakteri asam laktat 
diisolasi dari susu kambing mentah dari empat ras Aljazair. Makanan Mikrobiol., 21: 579588. 24. Guessas, B. dan M. Kihal, 
2004. Karakterisasi bakteri asam laktat yang diisolasi dari susu kambing mentah zona arid Algeria. Afr. J. Biotechnol., 3: 
339342. 
25. Setyawardani, T., WP Rahayu, R. Maheswari dan NHS Palupi, 2011. Identifikasi dan karakterisasi bakteri asam laktat 
probiotik yang diisolasi dari susu kambing asli. Anim. Prod., 13: 5763. 26. Yateem, A., MT Balba, T. AlSurrayai, B. AlMutairi 
dan R. AlDaher, 2008. Isolasi bakteri asam laktat dengan potensi probiotik dari susu unta. Int. J. Dairy Sci., 3: 194199. 27. 
Ashmaig, A., A. Hasan dan E. El Gaali, 2009. Identifikasi bakteri asam laktat yang diisolasi dari susu unta fermentasi tradisional 
Sudan (Gariss). Afr. J. Microbiol. Res., 3: 451457. 28. Khedid, K., M. Faid, A. Mokhtari, A. Soulaymani dan A.; inedine, 2009. 
Karakterisasi bakteri asam laktat diisolasi dari satu susu unta berpunuk yang diproduksi di Maroko. Mikrobiol. Res., 164: 8191. 
29. Shi, T., K. Nishiyama, K. Nakamata, NPD Aryantini dan D. Mikumo et al., 2012. Isolasi potensial strain probiotik 
Lactobacillus rhamnosus dari susu mare fermentasi tradisional yang diproduksi di Pulau Sumbawa dari indonesia. Biosci. 
Biotechnol. Biochem., 76: 18971903. 30. Martin, R., E. Jimenez, H. Heilig, L. Fernandez, ML Marin, EG; Oetendal dan JM 
Rodriguez, 2009. Isolasi bifidobacteria dari ASI dan penilaian populasi bifidobacterial oleh PCRdenaturing gradien gel 
elektroforesis dan RuantitatiKita PCR realtime. EnWiron Terapan. Mikrobiol., 75: 965969. 31. Solis, G., CG de los 
ReyesGaWilan, N. Fernandez, A. Margolles dan M. Gueimonde, 2010. Pembentukan dan deWelopment bakteri asam laktat dan 
bifidobacteria mikrobiota dalam ASI dan usus bayi. Anaerobe, 16: 307310. 32. Abdi, R., M. Sheikh; einoddin dan S. 
Soleimanian; ad, 2006. Identifikasi bakteri asam laktat yang diisolasi dari keju lighWan tradisional Iran. Pak. J. Biol. Sci., 9: 
99103. 33. HarunurRashid, M., K. Togo, M. Ueda dan T. Miyamoto, 2007. Identifikasi dan karakterisasi bakteri asam laktat yang 
dominan diisolasi dari susu fermentasi tradisional Dahi di Bangladesh. Dunia J. Mikrobiol. Biotechnol., 23: 125133. 34. Montel, 
MC, S. Buchin, A. Mallet, C. DelbesPaus, DA Vuitton, N. Desmasures dan F. Berthier, 2014. Keju tradisional: Mikrobiota kaya 
dan berlipat ganda dengan manfaat yang terkait. Int. J. Food Microbiol., 177: 136154. 35. TerzicVidoKeWic, A., S. 
MihaKloWic, G. Uzelac, K. VelKoWic dan M. Tolinacki dkk., 2014. Karakterisasi bakteri asam laktat yang diisolasi dari 
artisanal TraWnik keju muda, krim manis dan kaKmaks manis setiap empat musim. Makanan Mikrobiol., 39: 2738. 36. Alegria, 
A., P. Gonzalez, S. Delgado, AB Florez, AM Hernandez Barranco, A. Rodriguez dan B. Mayo, 2016. Karakterisasi teknologi 
behaWiour of miYtures dari laktat mesofilik bakteri asam yang diisolasi dari keju tradisional yang terbuat dari susu mentah tanpa 
tambahan permulaan. Int. J. Dairy Technol., 5: 507519. 
391 
 
Pak. J. Nutr., 16 (5): 384392, 2017 
37. Sunaryanto, R. dan B. Marwoto, 2013. Isolasi, identitas dan karakterisasi bakteri asam laktat dari dadih susu kerbau. J. Sains 
Teknol. Indonesia, 14: 228233. 38. Arief, II, BSL Jenie, M. Astawan, K. FuKiyama dan AB Witarto, 2015. Identifikasi dan 
karakteristik probiotik bakteri asam laktat yang diisolasi dari daging sapi lokal Indonesia. Asian J. Anim. Sci., 9: 2536. 39. 
Harrigan, WF, 1998. Metode Laboratorium dalam Mikrobiologi Pangan. 3 Edn., Academic Press, San Digo, Halaman: 532. 40. 
Federici, S., F. Ciarrocchi, R. Campana, E. Ciandrini, G. Blasi dan W. Baffone, 2014. Identifikasi dan ciri-ciri fungsional asam 
laktat Bakteri yang diisolasi dari Ciauscolo salami diproduksi di Italia Tengah. Meat Sci., 98: 575584. 41. Sambrook, J. dan DW 
Russell, 2001. Kloning Molekul: Sebuah Manual Laboratorium. 3rd Edn., Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York, 
USA., ISBN13: 9780879695774, Pages: 2344. 42. Liu, W., 2. Bao, M. 2ing, X. Chen and T. Sun et al., 2012. Isolation and 
identification of lactic acid bacteria from Tarag in Eastern Inner Mongolia of China by 16S rRNA seRuences and DGGE 
analysis. Microbiol. Res., 167: 110115. 43. Chen, MM, 2.H. Liu, GR Xin and JG ;hang, 2013. Characteristics of lactic acid 
bacteria isolates and their inoculating effects on the silage fermentation at high temperature. Lett. Applied Microbiol., 56: 7178. 
44. El Soda, M., N. Ahmed, N. Omran, G. Osman and A. Morsi, 2003. Isolation, identification and selection of lactic acid 
bacteria cultures for cheesemaking. Emir. J. Food Agric., 15: 5171. 45. Robinson, RK, 2005. Dairy Microbiology Handbook: The 
Microbiology of Milk and Milk Products. John Wiley and Sons, New York, USA. 46. Amraii, HN, H. Abtahi, P. Jafari, HR 
MohaKerani, MR Fakhroleslam and N. Akbari, 2014. In Witro study of potentially probiotic lactic acid bacteria strains isolated 
from traditional dairy products. Jundishapur J. Microbiol., Vol. 7. 47. Lin, WH, CF Hwang, LW Chen and HY Tsen, 2006. 
Viable counts, characteristic eWaluation for commercial lactic acid bacteria products. Food Microbiol., 23: 7481. 48. Nagpal, R., 
P. Behare, R. Rana, A. Kumar and M. Kumar et al., 2011. BioactiWe peptides deriWed from milk proteins and their health 
beneficial potentials: An update. Food Funct., 2: 1827. 
49. Argyri, AA, G. ;oumpopoulou, KAG Karatzas, E. Tsakalidou, GJE Nychas, E.;. Panagou and CC Tassou, 2013. Selection of 
potential probiotic lactic acid bacteria from fermented oliWes by in Witro tests. Makanan Mikrobiol. 33: 282291. 50. Ghanbari, 
M., M. Jami, KJ Domig and W. Kneifel, 2013. Seafood biopreserWation by lactic acid bacteriaA reWiew. LWTFood Sci. 
Technol., 54: 315324. 51. GarciaCano, I., CE SerranoMaldonado, M. OlWeraGarcia, E. DelgadoArciniega, C. PenaMontes, G. 
MendozaHernandez and M. 2uirasco, 2014. Antibacterial actiWity produced by Enterococcus spp. isolated from an artisanal 
MeYican dairy product, CotiKa cheese. LWTFood Sci. Technol., 59: 2624. 52. Sagdic, O., I. Ozturk, N. Yapar and H. Yetim, 
2014. DiWersity and probiotic potentials of lactic acid bacteria isolated from gilaburu, a traditional Turkish fermented European 
cranberrybush (Viburnum opulus L.) fruit drink. Res makanan. Int., 64: 537545. 53. Poznanski, E., A. CaWazza, F. Cappa and 
PS Cocconcelli, 2004. Indigenous raw milk microbiota influences the bacterial deWelopment in traditional cheese from an alpine 
natural park. Int. J. Food Microbiol., 92: 141151. 54. Sengul, M., 2006. Microbiological characterization of CiWil cheese, a 
traditional Turkish cheese: Microbiological Ruality, isolation and identification of its indigenous Lactobacilli. Dunia J. 
Mikrobiol. Biotechnol., 22: 613618. 55. Aslim, B., ;.N. Yuksekdag, E. Sarikaya and Y. Beyatli, 2005. Determination of the 
bacteriocinlike substances produced by some lactic acid bacteria isolated from Turkish dairy products. LWTFood Sci. Technol., 
38: 691694. 56. Bao, Y., Y. ;hang, Y. ;hang, Y. Liu and S. Wang et al., 2010. Screening of potential probiotic properties of 
Lactobacillus fermentum isolated from traditional dairy products. Food Control, 21: 695701. 57. Martin, R., M. OliWares, ML 
Marin, L. Fernandez, J. Xaus and JM Rodriguez, 2005. Probiotic potential of 3 lactobacilli strains isolated from breast milk. J. 
Hum. Lactation, 21: 817. 58. KarlysheW, AV, K. RaKu and VM AbramoW, 2013. Draft genome seRuence of Lactobacillus 
fermentum strain 3872. Genome Announcements, Vol. 1. 59. Fernandez, MF, S. Boris and C. Barbes, 2003. Probiotic properties 
of human lactobacilli strains to be used in the gastrointestinal tract. J. Applied Microbiol., 94: 449455. 
392