Aktivitas Antibakteri Madu dan Propolis
Terhadap Isolat Bakteri yang Resisten Antibiotik
Suatu Kajian Antimikroba Alternatif
Peneliti
DG. Diah Dharma Santhi
Bagian Patologi Klinik
Fakultas Kedokteran Universitas Udayana
diahdharmasanthi@yahoo.co.id
DAP. Rasmika Dewi
Bagian Patologi Klinik
Fakultas Kedokteran Universitas Udayana
Ni Made Adi Tarini
Bagian Mikrobiologi Klinik
RSUP. Sanglah/ Fakultas Kedokteran
Universitas Udayana
Ringkasan Eksekutif
Resistensi bakteri terhadap antibiotika berkembang
jauh lebih cepat daripada penelitian dan penemuan
antibiotika baru. Selama dua puluh abad, dilaporkan
bahwa madu mempunyai potensi antimikroba
sedangkan propolis dilaporkan memiliki efek
antibakteri dan anti jamur alami. Tujuan penelitian
ini adalah untuk engetahu karakteristik fisik serta
aktivitas antibakteri dari madu dan propolis
Indonesia terhadap isoat bakteri MRSA, ESBL
producing Escherichia coli, Staphylococcus aureus
ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922.
Uji aktivitas antibakteri madu dan propolis dilakukan
menggunakan metode disc diffusion (tes Kirby dan
Bauer) dari sampel madu dan propolis dengan
melakukan beberapa serial pengenceran: 20 μl/100
μl, 40 μl/100 μl, 60 μl/ 100 μl dan 80 μl /100 μl dan
dilanjutkan dengan menghitung jumlah koloni
kuman dari bahan uji yang mempunyai zone hambat.
Karakteristik madu dan propolis yang berasal dari
Indonesia dilihat dari keasaman (pH), berkisar dari
3.2 sampai 4.5 secara teoritis dapat mencegah
tumbuhnya bakteri. Berat jenis bahan madu ternak,
madu hutan, dan propolis berturut – turut 1,4109;
1,2759; dan 1,0475. Pada pengujian kadar air madu
ternak, madu hutan, dan propolis berturut – turut
10,20 ± 3,01; 11,07 ± 1,05; dan 1,31 ± 0,21. Aktivitas
antibakteri dimiliki oleh madu ternak hanya
terhadap isolat bakteri S. aureus ATCC25923 pada
konsentrasi 100 (Net) sedangkan pada isolat bakteri
lainnya resisten. Aktivitas antibakteri dimiliki oleh
propolis Indonesia terhadap isolat bakteri MRSA dan
S. aureus ATCC25923 pada semua konsentrasi.
Sedangkan pada isolat bakteri E. coli Producing ESBL,
dan E. coli ATCC25922 propolis dikatakan R
(resisten).
Kata kunci: aktivitas antibakteri, madu, propolis
 HKI dan Publikasi

Diah Dharma Santhi, DGD, Rasmika Dewi, DAP, Adi

Tarini, Ni Made. Aktivitas Antibakteri Madu dan
Propolis Isolat Bakteri yang Resisten Antibiotik
Suatu Kajian Antimikroba Alternatif. Indonesian
Journal of Clinical Pathology.
(Akan diterbitkan)

Latar Belakang Hasil dan Manfaat

Masalah resistensi antibiotik ini merupakan
masalah global, sehingga pada peringatan
Hari Kesehatan Internasional tahun 2011,
WHO menetapkan tema
“Antimicrobacterial Resistance and its
Global Spread”. Saat ini sedang digalakkan
kampanye dan sosialisasi pengobatan
secara rasional yang meliputi tepat obat,
tepat dosis, lama penggunaan yang tepat
serta biaya yang tepat (WHO a, 2011).
Munculnya kuman-kuman patogen
yang kebal terhadap satu
(antimicrobacterial resistance) atau
beberapa jenis antibiotika tertentu
(multiple drug resistance) sangat
menyulitkan proses pengobatan (Utami,
2012). Beberapa bakteri diketahui resisten
terhadap antibiotik beta-laktam,
diantaranya adalah Methicillin resistant
Staphylococcus aureus (MRSA) dan
penghasil Extended Spectum Beta-
lactamase (ESBL) seperti Escherichia coli,
Klebsiella pneumonia, dan Acinetobacter
baumanii. Beberapa studi menyatakan
bahwa selain ditemukan secara alami pada
bakteri Gram Positif dan Gram Negatif, gen
penyandi enzim beta-laktamase juga
ditemukan pada plasmid dan transposon
sehingga dapat ditransfer antarspesies
bakteri. Hal ini menyebabkan resistensi
antibiotik beta-laktam dapat menyebar
dengan cepat. (Anonim a, 2012).
Indonesia sebagai Negara tropis mempunyai
potensi besar sebagai penghasil madu baik
yang diternakkan (dari spesies Apis mellifera)
maupun yang alami terdapat di hutan tropis
(dari spesies Apis dorsata). Akan tetapi
kondisi geografis kemungkinan berpengaruh
terhadap kualitas dan aktivitas antibakeri
madu. Sehingga studi aktivitas antibakteri
madu dari berbagai tempat perlu dipelajari
secara mendalam. Demikian juga halnya
dengan madu yang dihasilkan dari Indonesia
perlu diteliti lebih lanjut sehingga dapat
dikembangkan menjadi alternative
antimikroba baru dalam upaya mengatasi
masalah resistensi antibiotika.
Resistensi kuman terhadap antibiotik
berkembang jauh lebih cepat daripada
penelitian dan penemuan antibiotik baru.
Adanya paradigma “back to nature” juga
memberikan inspirasi terhadap penelitian
atimikroba alternative. Madu dan Propolis
merupakan salah satu bahan yang potensial
dikembangkan sebagai antimikroba baru.
Selama dua puluh abad, dilaporkan bahwa
madu mempunyai potensi antimikroba dan
sampai saat ini berbagai penelitian terus
dilakukan (Rahman S, dkk, 2011). Propolis
merupakan zat yang dihasilkan oleh lebah
dan dari pucuk daun-daun muda dan
dicampur dengan enzim tertentu dari dalam
tubuh lebah yang digunakan untuk
melindungi semua yang ada didalam sarang
 Resistensi kuman terhadap
antibiotik berkembang jauh lebih cepat
daripada penelitian dan penemuan
antibiotik baru. Adanya paradigma “back to
nature” juga memberikan inspirasi terhadap
penelitian atimikroba alternative. Madu dan
Propolis merupakan salah satu bahan yang
potensial dikembangkan sebagai
antimikroba baru. Madu merupakan
pemanis yang banyak digunakan di seluruh
dunia dan telah digunakan dari zaman kuno
untuk mempercepat penyembuhan luka.
Selama dua puluh abad, dilaporkan bahwa
madu mempunyai potensi antimikroba dan
sampai saat ini berbagai penelitian terus
dilakukan (Rahman S, dkk, 2011). Propolis
merupakan zat yang dihasilkan oleh lebah
dan dari pucuk daun-daun muda dan
dicampur dengan enzim tertentu dari dalam
tubuh lebah yang digunakan untuk
melindungi semua yang ada didalam sarang
dari serangan kuman maupun serangga.
Propolis dilaporkan memiliki efek
antibakteri dan anti jamur alami (Anonim g,
2012).
Sebuah penelitian yang dilakukan di
Bangladesh menunjukkan bahwa madu
mempunyai aktivitas antibakteri terhadap
bakteri Gram Positif (Staphylococcus
aureus) maupun bakteri Gram Negatif
(Escherchia coli, Pseudomonas aeruginosa,
dan Shigella spp) (Rahman S, dkk, 2011).
Penelitian lain yang dilakukan di Mesir
menunjukkan bahwa madu yang digunakan
dalam penelitian ini mempunyai efektivitas
antibakteri yang lebih tinggi pada
Escherichia coli dibandingkan dengan
Salmonella typhi (Badawy, dkk, 2004).
Penelitian yang dilakukan di Iran, dengan
membandingkan 15 sampel madu,
menunjukkan bahwa madu dengan
konsentrasi tinggi mempunyai aktivitas
antibakteri terhadap Pseudomonas
aeruginosa (Taghizadehi, dkk, 2011).
Penelitian lain tentang madu di Belanda
dari serangan kuman maupun serangga.
Propolis dilaporkan memiliki efek antibakteri
dan anti jamur alami (Anonim g, 2012).
Indonesia sebagai Negara tropis
mempunyai potensi besar sebagai penghasil
madu baik yang diternakkan (dari spesies
Apis mellifera, Trigona sp) maupun yang
alami terdapat di hutan tropis (dari spesies
Apis dorsata). Akan tetapi kondisi geografis
kemungkinan berpengaruh terhadap kualitas
dan aktivitas antibakeri madu. Pada
penelitian ini dipergunakan madu yang
diperoleh dari tanaman kapuk dengan spesies
lebah Apis mellifera, sedangkan bahan madu
hutan diperoleh dari hutan di pedalaman
Riau, yaitu dari spesies Apis dorsata. Untuk
bahan uji propolis yang dipergunakan
diperoleh dari spesies lebah Trigona sp.
Ketiga bahan uji ini merupakan produk
dagang yang mudah ditemukan di pasaran
Indonesia.
Uji fisika kimia madu dan propolis
bertujuan untuk mengetahui karakteristik
madu dan propolis yang berasal dari
Indonesia Selain itu data uji fisika kimia ini
penting untuk tujuan penyimpanan serta
pemasaran madu dan propolis yang berasal
dari Indonesia. Dari uji fisika kimia madu
diketahui pH bahan uji madu ternak sebesr
3,45, pH bahan uji madu hutan sebesar 3,85.
Sedangkan pH dari bahan uji propolis sebesar
4,44. Secara teoritis dikatakan bahwa
aktivitas antibakteri madu diperoleh karena
keasamannya, berkisar dari 3.2 sampai 4.5
dimana pada tingkat keasaman tersebut
dapat mencegah tumbuhnya bakteri. Berat
jenis bahan uji madu ternak diperoleh
1,4109, berat jenis madu hutan diperoleh
1,2759 sedangkan berat jenis propolis
sebesar 1,0475. Berat jenis madu berbeda –
beda pada setiap daerah penghasil, misalnya
madu yang berasal dari Italia mempunyai
berat jenis berkisar 1,39 – 1, 44 g/ ml, madu
dari jepang 1,310 – 1,410, sedangkan madu
dari Skotlandia dan Inggris memiliki berat
dengan menggunakan berbagai isolate
bakteri yaitu : Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis, Enterococcus
faecium, Escherichia coli, Pseudomonas
aeruginosa, Enterobacter cloacae, Klebsiella
oxytoca, menunjukkan bahwa sediaan
madu yang diteliti (Revamil®) mempunyai
potensi sebagai antimikroba topikal
(Kwakman, dkk, 2008).
Metode
Penelitian ini merupakan penelitian
eksperimen laboratorium untuk
mengetahui aktivitas antibakteri madu hasil
budidaya (madu multiflora dan monoflora)
dibandingkan dengan madu hutan yang
terdapat di Indonesia, diujicobakan
terhadap bakteri yang telah resisten
terhadap antibiotik.
Isolat bakteri yang dipergunakan
adalah MRSA, E.coli producing ESBL,
Staphylococcus aureus ATCC25923 dan
Escherichia coli ATCC25922 yang diperoleh
dari Laboratorium Mikrobiologi Klinik RSUP
Sanglah Denpasar.
Bahan-bahan yang digunakan dalam
uji aktivitas antibakteri ini adalah madu
ternak, madu hutan dan propolis yang
diperoleh dari peternak Indonesia dan
produknya dapat diperoeh di pasaran
Indonesia. Bahan uji dibuat dengan
mengencerkan madu dan propolis masing-
masing pada pengenceran yang berbeda, 20
μl/100 μl, 40 μl/100 μl, 60 μl/ 100 ml dan 80
jenis 1,4153. Kadar air di dalam madu
merupakan karakteristik fisik yang penting
karena mempengaruhi sifat fisika kimia
lainnya dalam madu, seperti densitas, berat
jenis, index refractive, dan viskositas madu.
Kadar air di dalam madu juga mempengaruhi
peran penting madu sebagai pengawet. Bila
kadar airnya mencapai 22 persen, madu
kemungkinan mengalami fermentasi.
Sehingga sebagai pengawet, madu dengan
kadar air yang tinggi memerlukan penurunan
kadar air, misalnya dengan pengeringan atau
penambahan bahan lain yang memiliki kadar
air lebih rendah (Attri, 2011). Pada pengujian
kadar air madu ternak dengan metode
gravimetri diperoleh kadar air 10,20 ± 3,01,
kadar air madu hutan sebesar 11,07 ± 1,05.
Sedangkan kadar air propolis diperoleh 1,31 ±
0,21.
Uji aktivitas antibakteri madu dengan
metode disc diffusion (tes Kirby dan Bauer)
diperoleh hasil berupa diameter zona hambat
(mm) yang dihasilkan sekitar cakram yang
diukur sebagai indeks aktivitas antibakteri
dari bahan uji. Ukuran zona hambatan lebih
mewakili ukuran kuantitatif dari aktivitas
antibakteri dari bahan uji. Dengan metode ini
akan diperoleh data seri pengenceran terkecil
yang masih mampu memberikan zone
hambat. Uji aktivitas antibakteri madu hutan
dan propolis terhadap isolat bakteri MRSA
dan S. Aureus ATCC25923, dipergunakan
Vancomycin sebagai kontrol positif dan
aquadest sebagai kontrol negatif. Sedangkan
pada uji aktivitas antibakteri madu hutan dan
propolis terhadap isolat bakteri E. coli
Producing ESBL dan E. coli ATCC25922,
dipergunakan Meropenem sebagai kontrol
positif dan aquadest sebagai kontrol negatif.
Pada penelitian ini, zone hambat
hanya dimiliki oleh bahan uji madu ternak
konsentrasi 100 (Net) pada isolat bakteri S.
aureus ATCC25923 dan propolis pada semua
konsentrasi pada isolat bakteri uji MRSA dan
S. aureus ATCC25923.
μl /100 μl. Selain itu, madu murni juga
digunakan sebagai bahan uji. Semua
pengenceran dilakukan dengan aqua
bidestilata dan deionisasi yang steril.
Sebelum dilakukan uji aktivitas
antibakteri, dilakukan uji sifat fisiko-kimia
madu dan propolis yang meliputi: keasaman
(pH), diukur dengan menggunakan alat pH-
meter, berat jenis diukur dengan
menggunakan alat BJ-meter, kadar air
diukur dengan metode gravimetri.
Penentuan aktivitas antibakteri
madu uji dilakukan dalam 2 tahap:
Metode disc diffusion (tes Kirby dan Bauer):
Dibuat serial pengenceran madu dan
propolis seperti disebutkan di atas. Strain
bakteri disiapkan dengan kekeruhan secara
visual dibandingkan dengan standar
McFarland 0,5. Disiapkan Muller Hinton
Agar dan sudah diinokulasi selama semalam
sebelum digunakan. Dalam metode difusi,
digunakan disc blank berdiameter 6 mm.
Materi uji (20 μl dari setiap pengenceran
madu murni dan propolis) diserapkan ke
dalam disc blank, dikeringkan pada suhu
kamar dan hati-hati ditempatkan ke dalam
cawan petri yang telah diinokulasi dengan
bakteri uji. Masukkan ke dalam pendingin
suhu 40C, selama 2 – 6 jam, kemudian
diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24
jam. Pada pengukuran zone hambat dengan
isolat bakteri MRSA dan S.Au, dipergunakan
Vancomycin sebagai kontrol positif,
sedangkan pada pengukuran zone hambat
dengan isolat bakteri E.coli producing ESBL
dan E. coli, dipergunakan Meropenem
sebagai kontrol positif. Aquadest
dipergunakan sebagai kontrol negatif.
Diameter zona hambat yang dihasilkan
sekitar cakram diukur sebagai indeks
aktivitas antibakteri dari bahan uji. Ukuran
zona hambatan lebih mewakili ukuran
kuantitatif dari aktivitas antibakteri dari
bahan uji. Replikasi dilakukan sebanyak 5
kali dan zona hambat diukur dua kali untuk
Madu ternak konsentrasi 100 (Net) pada
isolat bakteri S. aureus ATCC25923 memiliki
zone hambat sebesar 8,4 ± 1,67. Sedangkan
pada isolat bakteri MRSA, E. coli Producing
ESBL, dan E. coli ATCC25922 madu ternak
dikatakan R (resisten) atau tidak mempunyai
zone hambat pada semua konsentrasi. Dapat
disimpulkan bahwa bahan uji madu ternak
mampu menghambat pertumbuhan isolat
bakteri S. aureus ATCC25923 pada
konsentrasi 100 (Net).
Aktivitas antibakteri ditunjukkan oleh
propolis Indonesia terhadap isolat bakteri
MRSA dan S. Aureus ATCC25923 pada
pemeriksaan aktivitas antibakteri
menggunakan metode disc diffusion (tes
Kirby dan Bauer). Adapun zone hambat yang
dihasilkan oleh propolis terhadap isolat
bakteri MRSA dengan konsentrasi 20 µl, 40
µl, 60 µl, 80 µl, dan 100 (Net) berturut – turut
6,8 ± 0,45 mm; 7 ± 0 mm; 7,8 ± 0,84 mm, 8,2
± 0,84 mm; dan 9,8 ± 1,30 mm. Diameter
zone hambat yang dihasilkan oleh kontrol
positif Vancomycin adalah 20,2 ± 0,84 mm.
Diameter zone hambat yang dihasilkan oleh
propolis terhadap isolat bakteri S. aureus
ATCC25923 dengan konsentrasi 20 µl, 40 µl,
60 µl, 80 µl dan 100 (Net) berturut – turut 7 ±
0 mm; 7,4 ± 0,55 mm; 8,0 ± 1,22 mm; 8,6 ±
0,89 mm; dan 11,8 ± 1,64 mm. Diameter zone
hambat yang dihasilkan oleh kontrol positif
Vancomycin adalah 20,8 ± 1,48 mm.
Analisis statistik yang digunakan untuk
mengetahui apakah terdapat perbedaan
aktivitas antibakteri propolis yang diukur dari
diameter zone hambat terhadap isolat
bakteri uji MRSA dan S. Aureus ATCC25923
adalah Mann Whitney. Syarat untuk berlaku
atau tidaknya asumsi Uji Mann Whitney
adalah data yang diperoleh terdistribusi tidak
normal dan tidak homogen. Sebelumnya
dilakukan uji normalitas dengan metode
Saphiro – Wilk, diperoleh nilai p < 0,05,
menunjukan data terdistribusi tidak normal,
sehingga dilanjutkan pada uji Mann Whitney.
setiap pengenceran madu. Dengan metode
ini akan diperoleh data seri pengenceran
terkecil yang masih mampu memberikan
zone hambat (Mandal, 2011; Tumin, dkk,
2005).
Penentuan Jumlah koloni bakteri :
Dibuat serial pengenceran madu dan
propolis seperti disebutkan diatas.
Digunakan Tryptic Soy Broth (TSB) yang
sudah diinkubasi semalam. Sebanyak 1 ml
sampel madu maupun propolis pada
berbagai konsentrasi pengenceran
ditambahkan ke dalam 9 ml media TSB,
homogenkan, tambahkan 1 ml isolate
bakteri, homogenkan, kemudian dinkubasi
pada 350 - 37 ° C selama 18 - 24 jam.
Setelah diinkubasi, diamati adanya
kekeruhan. Adanya kekeruhan menandakan
bahwa pada konsentrasi pengenceran
tersebut madu uji tidak mampu
menghambat pertumbuhan bakteri.
Selanjutnya untuk setiap serial yang masih
menunjukkan adanya kekeruhan, lakukan
pengenceran sampai pengenceran 10-5.
Ambil 1 ml sampel yang keruh dan 1 ml
isolat bahan uji tuang ke dalam petri dish
tambahkan media Mueller Hinton (MH)
suhu 40 – 500C, ± 6 – 8ml. Inkubasi 350 - 37
° C selama 18 - 24 jam dan dihitung jumlah
koloni yang tumbuh.
Data yang terkumpul, dianalisis
menggunakan SPSS 15, yaitu uji normalitas
variabel perlakuan dengan metode Shapiro-
Wilk, uji homogenitas varians antar
perlakuan dengan uji Levene, dan uji
komparasi varians perlakuan menggunakan
Analysis of Variance (ANOVA).
Pada uji Mann Whitney, diperoleh nilai p =
0,292. Hal ini menunjuukkan tidak terdapat
perbedaan aktivitas propolis terhadap isolat
bakteri uji MRSA dan S. Aureus ATCC25923.
Untuk mengetahui perbedaan aktivitas
antiakteri propolis pada masing – masing
konsentrasi pengenceran terhadap isolat
bakteri uji MRSA dan S. Aureus ATCC25923
(konsentrasi efektif), dilakukan analisis
statistik menggunakan uji Kruskal Wallis yang
dilanjutkan dengan Post Hoc dengan LSD.
Syarat untuk berlaku atau tidaknya asumsi Uji
Kruskal Wallis adalah data yang diperoleh
terdistribusi tidak normal dan tidak
homogen. Sebelumnya dilakukan uji
normalitas dengan metode Saphiro – Wilk,
diperoleh nilai p yang bervariasi, menunjukan
data terdistribusi tidak normal, sehingga
dilanjutkan menggunakan uji nonparametrik
Kruskal Wallis. Pada uji Kruskal Wallis
diperoleh nilai p untuk isolat bakteri MRSA <
0,05, menunjukkan bahwa perbedaan
konsentrasi pengenceran memberikan
pengaruh terhadap aktivitas antibakteri
(diameter zone hambat). Oleh karena itu,
data pengamatan pada waktu tersebut dapat
dianalisis lebih lanjut dengan uji LSD.
Berdasarkan uji LSD, konsentrasi
pengenceran propolis 20 l sama dengan
konsentrasi 40l dan 60l, tetapi berbeda
bermakna dengan konsentrasi 80l dan 100
(Net). Sedangkan konsentrasi 60l sama
dengan konsentrasi 80l, tetapi berbeda
bermakna dengan konsentrasi 100 (Net).
Semakin besar konsentrasi, maka aktivitas
antibakteri yang dimiliki oleh propolis
terhadap isolat MRSA akan semakin
meningkat.
Analisis statistik pada isolat bakteri S. Aureus
ATCC25923 dengan uji Kruskal Wallis
diperoleh nilai p< 0,05, menunjukkan bahwa
perbedaan konsentrasi pengenceran
memberikan pengaruh terhadap aktivitas
antibakteri (diameter zone hambat). Oleh
karena itu, data pengamatan pada waktu
tersebut dapat dianalisis lebih lanjut dengan
uji LSD. Berdasarkan uji LSD, konsentrasi
pengenceran propolis 20 l sama dengan
konsentrasi 40l dan 60l, tetapi berbeda
bermakna dengan konsentrasi 80l dan 100
(Net). Sedangkan konsentrasi 40l sama
dengan konsentrasi 60l dan 80l, tetapi
berbeda bermakna dengan konsentrasi 100
(Net). Semakin besar konsentrasi, maka
aktivitas antibakteri yang dimiliki oleh
propolis terhadap isolat MRSA akan semakin
meningkat.
Aktivitas antibakteri madu disebabkan oleh
beberapa hal, diantaranya adanya keasaman
(PH) madu yang rendah, berkisar dari 3.2
sampai 4.5. Kondisi asam ini dapat mencegah
tumbuhnya bakteri. Aktivitas antibakteri
nonperoksida dalam madu disebabkan oleh
metilglioksal (MGO) dan komponen sinergi
yang tidak dikenali. Kebanyakan madu
mengandung MGO yang sangat rendah,
namun madu manuka mengandung MGO
yang sangat tinggi. Tingkat sinergi dalam
madu manuka dua kali lipat lebih dari
aktivitas antibakteri MGO. Dengan efek
osmotik yang dimiliki madu, menjadikan
madu menjadi media yang tidak bagus untuk
mikroorganisme berkembang biak. Aktivitas
antibakteri madu paling dipengaruhi oleh
kandungan Hidrogen Peroksida (H2O2) di
dalamnya. kandungan Hidrogen Peroksida
(H2O2) ditentukan oleh proses oksidasi
glukosa yang dsintesis oleh lebah dan enzim
catalase yang berasal dari bunga pollen.
Kebanyakan madu membetuk H2O2 ketika
diencerkan, disebabkan aktivasi enzim
glucosa oxidase yang mengoksidasi glukosa
menjadi asam glukonic dan H2O2 yang
berkaitan degan aktivitas antibakterinya.
Tetapi aktivitas peroxida di dalam madu
dapat dirusak dengan mudah dengan
pemanasan atau adanya catalase (Mandal
dan Mandal, 2011).
Penelitian mengenai aktivitas
antimikroba madu terhadap sejumlah bakteri
yang patogen pada manusia dilakukan oleh
Osho dan Bello tahun 2010 menggunakan
madu yang berasal dari peternakan madu di
Nigeria, menunjukkan memiliki aktivitas
antibakteri terhadap S. aureus, P. aeruginosa,
K. pneumonia, B. subtilis, dan E. coli. Penelitian
aktivitas antimikroba produk madu dan propolis
komersial di Nigeria oleh Agbagwa dan Okolo
tahun 2012, terhadap bakteri S. aureus, P.
aeruginosa, dan K. pneumonia, mengunakan
metode disc diffusion menunjukkan bahwa
propolis yang dipasarkan di Nigeria memiliki
aktivitas antibakteri yang lebih baik dibandingkan
madu yang dipasarkan di Nigeria. Hal ini sejalan
dengan penelitian yang kami lakukan. Penelitian
menggunakan madu Iraq menunjukan aktivitas
antibakteri madu Iraq terhadap S. aureus, P.
aeruginosa, dan E. coli. Madu seperti halnya
antibiotika memilki sensitivitas terhadap
organisme, sehingga dapat dijadikan alternatif
untuk melawan bakteri tertentu serta memiliki
aktivits antibakteri terhadap bakteri gram positif
maupun bakteri gram negatif (Naama, 2009).
Penelitian mengenai aktivitas madu terhadap
isolat bakteri yang resisten, salah satunya
dilakukan oleh Jenkin, dkk terhadap madu
Manuka. Hasil penelitian menunjukkan
bahwa pertumbuhan MRSA dihambat oleh
madu manuka 5%, 10% dan 20% (b/v). Hal ini
disebabkan aktivitas antibiotik nonperoksida
yang dimiliki oleh metilglioksal (MGO) dan
komponen sinergi yang tidak dikenali yang
terkandung dalam madu manuka.
Kebanyakan madu mengandung MGO yang
sangat rendah, namun madu manuka
mengandung MGO yang sangat tinggi.
Tingkat sinergi dalam madu manuka dua kali
lipat lebih dari aktivitas antibakteri MGO
(Jenkin, dkk, 2012).
Propolis atau lem lebah merupakan
suatu bahan resin yang dikumpulkan oleh
lebah madu dari berbagai macam jenis
tumbuhan. Aktivitas antibakteri propolis
yang sangat bervariasi ini lebih disebabkan
komposisi dari propolis yang digunakan.
Komposisi propolis sendiri sangat
dipengaruhi oleh jenis dan umur tumbuhan,
iklim, dan waktu di mana propolis tersebut
diperoleh. Salah satu kandungan senyawa
kimia yang penting pada propolis adalah
senyawa flavonoid. Flavonoid merupakan
salah satu senyawa fenol alami yang tersebar
luas pada tumbuhan, yang disintesis dalam
jumlah sedikit (0,5–1,5%) dan dapat
ditemukan pada hampir semua bagian
tumbuhan. Penelitian secara in vitro maupun
in vivo menunjukkan aktivitas biologis dan
farmakologis dari senyawa flavonoid sangat
beragam, salah satu diantaranya yakni
memiliki aktivitas antibakteri. Para peneliti
menyatakan pendapat yang berbeda-beda
sehubungan dengan mekanisme kerja dari
flavonoid dalam menghambat pertumbuhan
bakteri, antara lain bahwa flavonoid
menyebabkan terjadinya kerusakan
permeabilitas dinding sel bakteri, mikrosom,
dan lisosom sebagai hasil interaksi antara
flavonoid dengan DNA bakteri. Penelitian lain
menyebutkan bahwa flavonoid mampu
melepaskan energi tranduksi terhadap
membran sitoplasma bakteri selain itu juga
menghambat motilitas bakteri. Mekanisme
yang berbeda menyatakan bahwa gugus
hidroksil yang terdapat pada struktur
senyawa flavonoid menyebabkan perubahan
komponen organik dan transpor nutrisi yang
akhirnya akan mengakibatkan timbulnya efek
toksik terhadap bakteri. Penelitian mengenai
propolis Indonesia salah satunya dilakukan
oleh Sabir pada tahun 2005 mengenai
aktivitas flavonoid dalam propolis Trigona sp
yang berasal dari Kabupaten Bulukumba,
propinsi Sulawesi Selatan terhadap
pertumbuhan Streptococcus mutans yang
dapat menyebabkan karies pada gigi. Hasil
penelitian menunjukkan bahwa kandungan
flavonoid di dalam propolis mampu
menghambat pertumbuhan S. Mutans.
Perbedaan aktivitas antibakteri madu
dan propolis yang dihasilkan di Indonesia
dapat berbeda dengan madu dan propolis
yang dihasilkan di negara lain dapat
disebabkan oleh beberapa alasan. Salah satu
kemungkinan berkaitan dengan perbedaan
dalam sensitifitas masing-masing isolat
bakteri uji terhadap aktivitas antibakteri
madu dan propolis yang digunakan. Selain
itu, hasil perbedaan aktivitas antibakteri yang
diamati antara madu bisa juga mungkin
disebabkan oleh sumber-sumber bunga yang
berbeda yang digunakan oleh lebah dan
faktor-faktor geografis seperti suhu,
kelembaban di mana madu diproduksi
(Tumin, 2005) .
Melissa, dkk, 2004 melaporkan bahwa
proses pengenceran madu meningkatkan
hidrogen peroksida aktivitas antibakteri.
Adanya agen yang diduga tidak stabil dan/
atau agen antibakteri thermolabile juga bisa
dinonaktifkan selama prosedur eksperimental
dan dengan demikian dapat dianggap sebagai
kemungkinan perbedaan aktivitas antibakteri
madu dan propolis yang dihasilkan di
Indonesia dapat berbeda dengan madu dan
propolis yang dihasilkan di negara lain.
Penelitian ini tidak dapat memperjelas agen
yang mungkin terlibat dalam aktivitas
antibakteri madu dan propolis digunakan.
Diperlukan suatu studi lanjutan untuk
mengetahui kandungan agen hydrogen
peroksida (H2O2) dan komponen non
peroksida seperti metylglyoksal (MGO) yang
terdapat dalam madu dan propolis bahan uji.
Identifikasi dan karakterisasi prinsip aktif
dapat memberikan informasi berharga
tentang kualitas dan potensi terapi mungkin
ini madu dan propolis Indonesia.