ABSTRACT
The aim of this research was to determine the content of flavonoid and antibacterial activity of ethanol
extract of sintrong leaf (Crassocephalum crepidiodes) on Bacillus cereus. This research used a Completely
Randomized Design (CRD) with treatment concentrations extract which were 20%, 40%, 60%, 80%, and
100% with three replications and resulting in 15 experimental units. Data were presented with tables and
pictures and analyzed in descriptive statistic. Ethanol extract of sintrong leaf contained flavonoid compounds
of 1,75% and was able to inhibit the growth of Bacillus cereus at a concentration of 20% with an average
12,3 mm and strong inhibition categories, also has a bacteriostatic character with percentage range death of
Bacillus cereus 80,9% - 93,7%.
202
Simanungkalit, dkk Kandungan Flavonoid dan Aktivitas Antibakteri…
pada Candida albicans, Aspergillus flavus, dan Pelaksanaan penelitian ini dilakukan pada bulan
Aspergillus niger. Hasil penelitian Lestari et al., Juli 2019 sampai dengan September 2019.
(2015) menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun
Bahan dan alat
sintrong pada konsentrasi 10% dapat menghambat
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini
pertumbuhan S. aureus dan E. coli dengan
adalah daun sintrong yang diperoleh dari Desa
diameter zona hambat sebesar 3,16 mm dan 2,77
Kintamani, bakteri Bacillus cereus yang diperoleh
mm. Selain itu, menurut penelitian Anggraeni,
dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
(2017) ekstrak etanol daun sintrong dapat
Kedokteran, Universitas Udayana, etanol 96%,
menghambat pertumbuhan Staphylococcus
aquades, LB (Lactose Broth), NA (Nutrient Agar),
epidermidis dan Pseudomonas aerugenusae
alkohol 95%, NaNO2, AlCl3, NaOH, dan
dengan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)
methanol.
5120 μg/mL, dan 2560 μg/mL.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini
Bacillus cereus adalah bakteri Gram positif
adalah blender, evaporator, water bath,
yang menghasilkan enterotoksin. Bakteri ini
spektrofotometer UV Vis, autoklaf, batang
memproduksi dua jenis toksin, yaitu toksin emetic
bengkok, timbangan analitik, mikropipet, freezer,
dan diare. Toksin ini dapat menyebabkan gejala
inkubator (Memmert), tip, laminar flow cabinet
keracunan pangan yang berbeda. B. cereus
(Kojair), bunsen, magnetic stirrer, tabung
biasanya terdapat di dalam susu, daging, rempah-
durham, kertas label, vortex, korek api,
rempah, dan sereal. Bahan pangan yang
mikroskop, cawan petri (Pyrex), jarum ose,
mengandung pati merupakan sumber optimal
tabung reaksi (Pyrex), rak tabung reaksi, gelas
untuk pertumbuhan B.cereus.
beker (Pyrex), erlenmeyer (Pyrex), gelas ukur
Berdasarkan data di atas, maka penelitian
(Pyrex), jangka sorong, tabung effendorf, tissue,
ini dilakukan untuk mengetahui kandungan
plastik HDPE, kertas saring, dan aluminium foil
senyawa flavonoid yang dimiliki ekstrak etanol
(Klin Park).
daun sintrong (Crassocephalum crepidiodes) dan
aktivitas antibakterinya terhadap Bacillus cereus
Rancangan Penelitian
dengan metode difusi sumur dan metode kontak.
Perlakuan pada penelitian yaitu konsentrasi
ekstrak daun sintrong, terdiri dari 5 taraf yaitu
METODE PENELITIAN
konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%.
Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini diulangi sebanyak 3 kali sehingga
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium
didapat 15 unit percobaan. Data hasil penelitian
Analisis Pangan, Kampus Sudirman dan UPT
disajikan dalam bentuk tabel dan gambar dan
Laboratorium Biosains dan Bioteknologi
dianalisis secara deskriptif.
Universitas Udayana, Kampus Bukit Jimbaran.
205
Jurnal Itepa, 9 (2) Juni 2020, 202-210 ISSN : 2527-8010 (Online)
206
Simanungkalit, dkk Kandungan Flavonoid dan Aktivitas Antibakteri…
tabung durham lalu diisi ±20 µL ekstrak etanol etanol daun kelor sebesar 7,19% yang memiliki
daun sintrong sesuai dengan perlakuan. diameter penghambatan 7,5 mm–9,9 mm
Selanjutnya, diinkubasi pada suhu 37oC lalu zona (Kenconojati dan Rukmana, 2019). Penelitian
penghambatan diukur dengan jangka sorong Parubak., (2013) juga membuktikan bahwa kadar
sebanyak empat kali di tempat yang berbeda dan flavonoid yang diperoleh pada ekstrak daun
hasilnya dirata-ratakan kemudian dikurangi Akway (Drimys beccariana Gibbs) sebesar 0,36%
dengan diameter sumur (mm). dan memiliki diameter penghambatan sebesar 6,9
mm – 7,3 mm.
Pengujian Aktivitas Antibakteri Dengan Pelarut yang digunakan pada penelitian ini
Metode Kontak adalah etanol 96%. Etanol merupakan salah satu
Dipipet 0,2 mL kultur B. cereus ke dalam pelarut yang bersifat polar. Menurut Moein and
tabung efendorff dan ditambahkan 0,2 mL ekstrak Mahmood, (2010) pelarut yang bersifat polar
etanol daun sintrong sesuai perlakuan, lalu mampu melarutkan fenol lebih baik, dimana
o
diinkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam. Setelah turunan fenol tertinggi adalah flavonoid.
waktu kontak tercapai, campuran diencerkan Flavonoid bekerja sebagai antibakteri dengan cara
-3
hingga 10 kemudian sebanyak 0,1 mL dari merusak membran sitoplasma bakteri. Membran
pengenceran 10 –10 -1 -3
ditanam pada media NA sitoplasma bakteri berfungsi sebagai pengatur
dengan metode sebar kemudian diinkubasi selama masuknya nutrisi atau bahan-bahan makanan
24 jam (Tanzilla et al., 2016 yang sudah untuk bakteri. Jika membrane sitoplasma rusak,
dimodifikasi). Pengujian dilakukan dengan metabolit penting dalam bakteri akan keluar dan
menghitung total mikroba yang tumbuh. nutrisi untuk menghasilkan energi tidak dapat
masuk sehingga terjadi ketidakmampuan sel
HASIL DAN PEMBAHASAN bakteri untuk tumbuh (Dzen, 2003).
Uji Kadar Flavonoid Ekstrak Etanol Daun
Sintrong Uji Konfirmasi Bacillus cereus
Pengujian kadar flavonoid ekstrak etanol Hasil uji konfirmasi menunjukkan bahwa B.
daun sintrong dilakukan secara kuantitatif. cereus memiliki bentuk koloni bulat, warna
Senyawa flavonoid adalah senyawa aktif yang koloni pink keunguan, memiliki bentuk sel basil
umumnya digunakan sebagai antibakteri, kadar panjang dan termasuk bakteri Gram positif. Hasil
flavonoid juga digunakan untuk mengetahui besar pengamatan terhadap B. cereus sesuai dengan
kecilnya diameter penghambatan pertumbuhan pernyataan Fatmasari (2015) yang menyatakan
bakteri. Hasil rata-rata kadar flavonoid total bahwa B. cereus memiliki bentuk koloni bulat
ekstrak etanol daun sintrong yaitu sebesar 1,75% terbentuk zona, dan berwarna pink keunguan.
(mg/100g). Kadar ini lebih kecil jika Pengamatan terhadap warna koloni B. cereus pada
dibandingkan dengan kadar flavonoid ekstrak media MYP dapat dilihat pada Gambar 1.
207
Jurnal Itepa, 9 (2) Juni 2020, 202-210 ISSN : 2527-8010 (Online)
208
Simanungkalit, dkk Kandungan Flavonoid dan Aktivitas Antibakteri…
Gambar 3. Zona hambat ekstrak etanol daun sintrong terhadap Bacillus cereus
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun kontak dengan konsentrasi ekstrak 100%, jumlah
Sintrong (Crassocephalum crepidiodes) B. cereus turun sebanyak 1,4 x 106 dengan
Terhadap Pertumbuhan Bacillus cereus kematian bakteri uji sebesar 93,7%. Pada kontak
dengan Metode Kontak dengan konsentrasi 80% jumlah B. cereus turun
Total B. cereus yang digunakan pada sebanyak 1,4 x 106 dengan kematian bakteri uji
penelitian ini adalah 1,47 x 106 CFU/mL dan sebesar 92,4%. Pada kontak dengan konsentrasi
setelah dikontakkan pada konsentrasi sesuai 60% jumlah B. cereus turun sebanyak 1,3 x 106
perlakuan, B. cereus yang tumbuh mengalami dengan kematian bakteri uji sebesar 90,5%. Pada
penurunan. Tabel 2 menunjukkan bahwa pada kontak dengan konsentrasi 40% jumlah B. cereus
207
Jurnal Itepa, 9 (2) Juni 2020, 202-210 ISSN : 2527-8010 (Online)
turun sebanyak 1,3 x 106 dengan kematian bakteri ditandai dengan berkurangnya jumlah koloni
uji sebesar 87,8% dan pada kontak dengan bakteri uji ketika konsentrasi ekstrak dinaikkan.
konsentrasi 20% jumlah B. cereus turun Menurut Baron et al., (1992) jika kematian
sebanyak 1,2 x 106 dengan kematian bakteri uji bakteri uji minimal 99,99%, maka pada
sebesar 80,9%. konsentrasi tersebut antibakteri dikatakan bersifat
Hal ini membuktikan bahwa semakin tinggi bakterisidal (membunuh bakteri). Sebaliknya, jika
konsentrasi ekstrak etanol daun sintrong yang kematian kurang dari 99,99%, maka antibakteri
ditambahkan, semakin tinggi pula kemampuan dikatakan bersifat bakteristatik (menghambat
penghambatannya terhadap pertumbuhan B. pertumbuhan bakteri). Berdasarkan persentase
cereus. Peningkatan konsentrasi ekstrak etanol kematian, ekstrak etanol daun sintrong memiliki
daun sintrong akan diikuti oleh peningkatan daya penghambatan kurang dari 99,99% yang
konsentrasi zat bioaktif, sehingga aktivitas berarti bersifat bakteristatik.
antibakteri juga akan semakin tinggi. Hal ini
Tabel 2. Penghambatan Ekstrak Etanol Daun Sintrong Terhadap Bacillus cereus Dengan Metode Kontak
208
Pharmaceutical Research, 2013, 5(6):160- Kenconojati, H dan Nina, R.R. 2019. Daya
167 hambat ekstrak daun Kelor (Moringa
oleifera) terhadap Aeromonas hydrophila:
Anggraeni, N. 2017. Uji Aktivitas Antibakteri
studi awal untuk pengobatan aeromoniasis.
Pada Tumbuhan Tespong (Oenanthe
Universitas Airlangga. Journal of
Javanica Dc), Sintrong (Crassocephalum
Aquaculture Science April 2019 vol 4 (1):
Crepidioides), Dan Pohpohan (Pi Lea
12-20
Trinerviaw) Terhadap Bakteri
Staphylococcus Epidermidis & Kusdianti., Nilawati, T. S., Sheba, L. (2008).
Pseudomonas Aerugenosae. [Skripsi]. Tumbuhan Obat di Legok Jero Situ
Sekolah Tinggi Farmasi Bandung Program Lembang. Makalah seminar penggalang
Studi Strata I Farmasi. Bandung taksonomi tumbuhan. Bandung: Universitas
Pendidikan Indonesia.
Baron, E.J., L.R Peterson, dan S.M. Finegold.
1992. Diagnostic Microbiology. 9th Ed. Lestari, T., Nurmala., dan Nurmalasari. 2015.
Baile&Scott’s. St. Louis Penetapan Kadar Polifenol dan Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sintrong
Desmiaty,Y., J. Ratnawati., dan P. Andini. 2009.
(Crassocephalum crepidiodes (Benth.) S.
Penentuan Jumlah Flavonoid Total Ekstrak
moore). Jurnal Kesehatan Bakti Tunas
Etanol Daun Buah Merah (Pandanus
Husada. Volume 13 Nomor 1 Februari 2015
Conoideus Lamk) Secara Kalorimeter
Komplementer. Fakultas Farmasi. Moein S., and Mahmood RM. 2010. Relationship
Universitas Jendral Ahmad Yani. Cimahi. between antioxidant properties and
Jawa Barat. phenolics in Zhumeria majdae. Journal of
Medicinal Plants Research (7): 517-521
Djajadisastra, A.N. 2007. Penapisan
Komponen Antibakteri dan Uji Parubak, A.S. 2013. Senyawa Flavonoid Yang
Toksisitas dari Spons Perairan Taka Bersifat Antibakteri Dari Akway (Drimys
Bonerate Sulawesi Selatan. Skripsi. Bogor. becariana.Gibbs). Chem. Prog. Vol. 6,
Program Studi Teknologi Hasil Perikanan No.1
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan
Purwanti, M., Sudarwanto, M., Rahayu, W. P. &
Universitas Institut Pertanian Bogor
Sanjaya, A. W. 2008. Pertumbuhan Bacillus
Fatmasari, 2015. Uji Sensitivitas Antibiotik cereus dan Clostridium perfringens pada
Kloramfenikol, Siprofloksasin, Eritromisin Makanan Tambahan Pemulihan yang
dan Klindamisin Terhadap Bacillus cereus Dikonsumsi Balita Penderita Gizi Buruk.
Yang Diisolasi Dari Daging Sapi di Pasar Jurnal Forum Pascasarjana. Vol. 31 No. 4
Tradisional dan Pasar Modern Kota
Tanzilla, A. 2017. Kemampuan Daya Hambat
Makassar. Skripsi. Fakultas Kedokteran,
Ekstrak Daun Pegagan (Centella Asiatica
Universitas Hasanudin, Makassar
(L.) Urban) Terhadap Pertumbuhan
Gress, R.N. 2018. Kandungan Flavonoid dan Escherichia coli ATCC 8739. Skripsi.
Antosianin Ekstrak Kayu Secang Fakultas Teknologi Pertanian. Universitas
(Caesalpinia sappan L.) Serta Aktivitas Udayana.
Antibakteri Terhadap Vibrio cholera.
Xu, B.J. dan Chang, S.K.C. 2007. A comparative
Skripsi. Fakultas Teknologi Pertanian.
study on phenolic profiles and antioxidant
Universitas Udayana
activities of legumes affected by extraction
Gunawan. 2002. Ilmu Obat Alam (Farmakologi). solvent. Journal of Food Science 72: 59-66.
Penebar Swadaya. Jakarta: 99-100.
210