PERBANDINGAN KADAR TOTAL FENOLAT PADA TIGA

JENIS MADU TERNAK (Apis mellifera) OLAHAN SERTA

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DENGAN METODE
DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil)

SKRIPSI SARJANA FARMASI

Oleh :

FITRIA UTAMI
150101055

SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI BHAKTI PERTIWI

PALEMBANG
2019

i
ii
 KATA PENGANTAR

Dengan mengucapkan puji dan syukur kehadirat Allah SWT, atas berkat rahmat dan
karunia-nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul :
“PERBANDINGAN KADAR TOTAL FENOLAT PADA TIGA JENIS MADU
TERNAK (Apis mellifera) OLAHAN SERTA UJI AKTIVITAS
ANTIOKSIDAN DENGAN METODE DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil)”.
Skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana Farmasi

di Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Bhakti Pertiwi Palembang. Penulis menyadari

bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh sempurna, hal ini karena keterbatasan

kemampuan dalam pengetahuan penulis, maka dengan segala kerendahan hati

penulis menerima saran dan kritik yang membangun untuk penyempurnaan skripsi.

Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis menyampaikan ucapan terimakasih

yang sebesar-besarnya kepada semua pihak yang telah membantu penulis dalam

menyelesaikan skripsi ini yaitu yang terhormat:

1. Ketua Yayasan Notari Bhakti Pertiwi Palembang Drs.H. Noprizon,M. Kes, Apt.

2. Ketua Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Bhakti Pertiwi Palembang Erjon, M. KeS,

Apt.

3. Ibu Ade Arinia Rasyad, M.Kes, Apt selaku Ketua Program Studi S1 Sekolah

Tinggi Ilmu Farmasi Bhakti Pertiwi Palembang yang telah banyak memberikan

masukan, nasehat dan dorongan dalam penulisan skripsi ini

4. Ibu Lidia, M.Si., Apt, selaku pembimbing akademik yang telah banyak

memberikan dukungan dalam penulisan skripsi ini.

iii
5. Ibu Mauizatul Hasanah. S.T., MT, selaku pembimbing 1 yang banyak memberi

masukan dan bimbingan selama penelitian dan dalam penulisan skripsi ini.

6. Ibu Lidia, M.Si., Apt, selaku pembimbing 2 yang telah banyak memberi masukan

dan bimbingan selama penelitian dan dalam penulisan skripsi ini.

7. Staf Dosen dan Karyawan Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Bhakti Pertiwi

Palembang yang telah banyak memberikan masukkan, nasehat dan dorongan

untuk terselesainya penulisan skripsi ini.

8. Teman-teman angkatan 2015 dan semua pihak yang telah membantu dalam

terselesainya penulisan skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini jauh dari sempurna. Untuk itu

penulis mengharapkan saran dan kritik agar skripsi ini menjadi semakin baik.

Semoga skripsi ini dapat meberikan smanfaat bagi kita semua,. Amin.

Palembang, juli 2019

Penulis

iv
 ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian mengenai perbandingan kadar total fenolat pada

tiga jenis madu ternak (Apis mellifera) olahan serta uji aktivitas antioksidan dengan
metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil). Larutan baku standar asam galat yang
dideteksi menggunakan alat Spektrofotometri UV-vis dengan panjang gelombang
maksimum 730 nm dan pelarut aquadest sebagai blanko, diperoleh persamaan regresi
y = 0,0158x + 0,0797 dengan nilai koefisien korelasi (r) = 0,994. Nilai kadar total
fenolat yang diperoleh dari sampel madu ternak A 1919,52 mg GAE/kg, madu
ternak B 1070,97 mg GAE/kg, dan madu ternak C 1750 mg GAE/kg. Hasil
pengukuran panjang gelombang maksimum DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) yaitu
522 nm, diperoleh nilai IC50 dari asam galat 2,2589 ppm dengan intensitas sangat
aktif, sampel madu ternak A 3459,148 ppm, madu ternak B 10653,333 ppm, dan
madu ternak C 4402,211 ppm. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa
kadar total senyawa fenolat pada madu ternak A, madu ternak B dan madu ternak C
memiliki hubungan dengan masing-masing aktivitas antioksidannya dimana semakin
tinggi kadar total fenolat maka semakin rendah nilai IC50.

Kata Kunci : Madu ternak, Fenolat, Antioksidan, DPPH, Spektrofotometri Uv-vis.

v
 ABSTRACT

Had conducted a study of the amount of total phenolics in three types of

livestock honey (Apis mellifera) processed and the antioxidant activity test using the
DPPH (2,2-diphenyl-1-pikrilhidrazil) method. Standard solution of gallic acid which
was detected using UV-Vis spectrophotometry with a maximum wavelength of 730
nm and aquadest solvent as blank, obtained a regression equation y = 0.0158x +
0.0797 with a correlation coefficient (r) = 0.994. Total phenolic content values
obtained from livestock honey sample A 1919.52 mg GAE / kg, livestock honey B
1070.97 mg GAE / kg, and livestock honey C 1750 mg GAE / kg using a UV-vis
spectrophotometer. The results of the measurement of the maximum wavelength of
DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) are 522 nm, IC50 values obtained from gallic
acid 2,2589 ppm with very active intensity, livestock honey samples A 3459,148
ppm, livestock honey B 10653, 333 ppm, and livestock honey C 4402,211 ppm.
Based on the results of this study it can be concluded that the total amount of
phenolics in livestock honey A, livestock honey B and honey honey C had a
colaretion with each antioxidant activity where the higher the total phenolics the
lower the IC50 value.

Keywords: Livestock Honey, antioxidant, Phenolics, DPPH, Uv-vis

Spectrophotometry.

vi
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL........................................................................................ i
LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................. ii
KATA PENGANTAR ..................................................................................... iii
ABSTRAK ...................................................................................................... iv
ABSTRACK .................................................................................................... v
DAFTAR ISI .................................................................................................... vi
DAFT AR TABEL ........................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... ix
DAFTAR LAMPIRANAN ............................................................................. x

BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang ......................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ................................................................... 4
1.3 Tujuan Penelitian ..................................................................... 4
1.4 Manfaat Penelitian ................................................................... 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Klasifikasi Lebah ..................................................................... 6
2.2 Madu ........................................................................................ 7
2.3 Kandungan Kimia Madu........................................................... 8
2.4 Manfaat Madu .......................................................................... 8
2.5 Senyawa Fenolat ...................................................................... 9
2.6 Radikal Bebas dan Antioksidan................................................ 10
2.6.1 Radikal Bebas ............................................................... 10
2.6.2 Antioksidan................................................................... 12
2.7 Metode Pengujian Aktivitas Antioksidan ................................ 13
2.8 Spektrofotometer UV-VIS ....................................................... 16

BAB III METODE PENELITIAN

vii
 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian .................................................. 18
3.2 Alat dan Bahan ........................................................................ 18
3.2.1 Alat ............................................................................. 18
3.2.2 Bahan ......................................................................... 18
3.3 Prosedur Penelitian .................................................................. 19
3.3.1 Pengambilan Sampel Penelitian ................................. 19
3.3.2 Identifikasi Fenolat pada Sampel Madu .................... 19
3.4 Penentuan Kadar Total Fenolat ............................................... 19
3.4.1 Pembuatan Larutan Induk Asam Galat ...................... 19
3.4.2 Pembuatan Kurva Standar Asam Galat ..................... 20
3.4.3 Penetapan Kadar Total Fenolat .................................. 20
3.4.4 Perhitungan Kadar Total Fenolat .............................. 20
3.5 Pemeriksaan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH .... 21
3.5.1 Preparasi Sampel Madu ............................................. 21
3.5.2 Pembuatan Larutan DPPH ........................................ 21
3.5.3 Pengukuran Serapan Larutan DPPH ......................... 21
3.5.4 Pengukuran Aktivitas Antioksidan Larutan Induk
Asam Galat ................................................................ 21
3.5.5 Pengukuran Aktivitas Antioksidan Sampel Madu .... 22
3.6 Perhitungan Persen Inhibisi Radikal Bebas dan Pengujian IC50. 22
3.6.1 Perhitungan Persen Inhibisi Radikal Bebas ............... 22
3.6.2 Pengujian IC50 ............................................................ 23
3.7 Analisa Data ............................................................................ 23
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian ............................................................................ 24
4.2 Pembahasan .................................................................................. 25
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan. .................................................................................. 29
5.2 Saran ............................................................................................. 29
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 30
LAMPIRAN ..................................................................................................... 34

viii
 DAFTAR TABEL

Tabel Halaman
2.1 Tingkat kekuatan antioksidan ................................................................. 16
4.1 Hasil identikasi fenolat pada sampel madu ............................................. 24
4.2 Data absorbansi dan kadar total fenolat .................................................. 24
4.3 Hasil persen inhibisi larutan induk asam galat ........................................ 25
4.4 Hasil persen inhibisi sampel madu .......................................................... 25
4.5 Nilai IC50 pada sampel madu dan asam galat ........................................ 25

ix
 DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman
2.1 Struktur DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil) ..................................... 13
2.2 Reaksi Radikal Bebas DPPH dengan Senyawa Antioksidan .................. 15

x
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman
1 Gambar sampel........................................................................................... 34
2 Skema Penelitian ........................................................................................ 35
3 Skema Indentifikasi Fenolat pada Sampel Madu ....................................... 36
4 Hasil Identifikasi Fenolat pada Sampel Madu ........................................... 37
5 Skema Kerja Penentuan Kadar Total Fenolat ............................................ 38
6 Data Absorbansi Asam Galat ..................................................................... 39
7 Persamaan Regresi Linier Asam Galat ...................................................... 40
8 Perhitungan Kadar Total Fenolat dari Tiga Jenis Madu Ternak Olahan ... 41
9 Tabel Hasil Perhitungan Kadar Total Fenolat dari Tiga Jenis Madu Ternak
Olahan ........................................................................................................ 43
10 Skema Kerja Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH ...................... 44
11 Perhitungan Larutan Asam Galat Total Fenolat......................................... 45
12 Perhitungan Larutan DPPH ........................................................................ 47
13 Perhitungan Larutan Smapel dan Asam Galat Antioksidan ....................... 48
14 Panjang Gelombang Maksimum DPPH ..................................................... 52
15 Tabel Hasil Perhitungan Persen Inhibisi Dari Tiga Jenis Madu Ternak
Olahan dan Asam Galat ............................................................................. 53
16 Perhitungan Persen Inhibisi Sampel Uji dan Asam Galat .......................... 54
17 Persamaan Regresi Linier Dari Tiga Jenis Madu Olahan dan Asam Galat 60
18 Perhitungan Nilai IC50 Sampel Uji dan Asam Galat .................................. 62
19 Sertifikat analisis metanol .......................................................................... 63
20 Sertifikat baku asam galat .......................................................................... 64
21 Sertifikat DPPH.......................................................................................... 65

xi