139 292 1 PB PDF
139 292 1 PB PDF
1
ISSN: 1693-5683
Abstract: Infectious diseases have been the leading cause of morbidity and mortality because of the
widespread antibacterial resistance due to existing drugs. Thus, the discovery and development of new
antimicrobial agents, especially from natural resources is important to promote the human health. This
research aimed to examine the antibacterial activity of som jawa (Talinum paniculatum (Jacq.) Gaertn.)
standardized extract thus their application into cream. Extraction was done by remaceration method, then
followed by phytochemical investigation to obtain the active ingredients inside extract. The result of this
research showed that both som jawa standardized extract and their formula cream had antibacterial
activity towards Staphylococcus aureus. This formula cream was potential as alternative herbal medicine
for skin infection caused by Staphylococcus aureus.
daun som jawa telah dilakukan oleh Suharsanti dan Determinasi Tanaman
Sulistiyanto (2012) yang menunjukkan bahwa Sampel yang digunakan adalah daun som
ekstrak telah memenuhi seluruh persyaratan jawa (Tallinum panicalatum (Jacq.) Gaertn) yang
parameter standardisasi. diperoleh dari Lembaga Ilmu Pengetahuan
Penggunaan ekstrak terstandardisasi akan Indonesia (LIPI), Bogor. Teknik sampling yang
lebih optimal dengan memformulasikannya dalam digunakan adalah sampling secara acak (random
bentuk sediaan, salah satunya sediaan krim. Sediaan sampling).
krim merupakan salah satu sediaan farmasi yang
digunakan secara topikal untuk pengobatan Ekstraksi
berbagai penyakit kulit. Krim lebih banyak Metode ekstraksi yang digunakan yaitu
digunakan karena praktis, lebih mudah digunakan, remaserasi dengan cara merendam 100 g serbuk
menimbulkan rasa dingin, mudah dicuci, tidak simplisia daun som jawa dengan 300 mL etanol
berlemak, dapat digunakan untuk daerah yang 70%. Penyarian dilakukan 3 x 24 jam dengan
tertutup rambut, memberikan rasa nyaman (tidak penggantian cairan penyari setiap 1 x 24 jam.
iritasi), mudah dibersihkan dari kulit, Setelah 3 hari atau proses ekstraksi berakhir,
memungkinkan kontak dengan tempat aplikasi lebih maserat dikumpulkan dan dipekatkan dengan
lama, dan tidak lengket seperti salep atau sediaan rotary evaporator dan waterbath sampai diperoleh
farmasi lainnya (Sulaiman et al., 2008). ekstrak kental. Ekstrak kental diuji bebas etanol
Berdasarkan uraian diatas, dilakukan uji yang dilakukan dengan menambahkan asam
aktivitas ekstrak terstandardisasi daun som jawa sulfanilat, HCl, dan larutan NaNO2 ke dalam
kemudian diformulasikan dalam sediaan krim. sejumlah kecil ekstrak albedo buah durian.
Harapannya adalah dapat ditemukan obat herbal Campuran tersebut ditambah larutan NaOH
alternatif untuk pengobatan infeksi bakteri kemudian dipanaskan. Jika ekstrak masih
Staphylococcus aureus. mengandung etanol akan terbentuk warna merah
frambos. Cara lain adalah dengan menambahkan
METODE PENELITIAN asam asetat dan H2SO4 ke dalam ekstrak kental,
Alat dan Bahan kemudian dipanaskan. Jika ekstrak masih
Alat yang digunakan yakni ayakan no. mesh mengandung etanol akan terbentuk bau pisang
60, blender, beaker glass, timbangan digital, cawan (Schoorl, 1998)
porselin, rotary evaporator, bejana kromatografi,
pipa kapiler, plat silika GF 254, kertas penjenuh, Skrining Fitokimia
oven, alat penyemprot penampak bercak, lampu UV Skrining fitokimia dilakukan terhadap beberapa
254 nm, pipet tetes, indikator pH, lumpang alu, golongan senyawa, diantaranya:
cawan petri, kawat ose, yellow tip (100 µL),
micropipette, jangka sorong, autoklaf, oven, Flavonoid
inkubator, LAF, cylinder cup, bunsen, tabung Ekstrak kental 0,5 g dilarutkan dalam etanol
reaksi, statif dan klem. kemudian dimasukkan dalam tabung reaksi.
Bahan yang digunakan yaitu ekstrak daun Serbuk Mg dan HCl pekat ditambahkan ke dalam
som jawa, etanol teknis 70%, etil asetat teknis, n- tabung reaksi. Hasil tersebut ditambah amil
heksana teknis, air, bakteri Staphylococcus aureus, alkohol, dikocok dengan kuat dan dibiarkan
media MSA (Manittol Salt Agar) merk oxoid, hingga memisah. Bila terdapat flavonoid maka
media NA (Nutrient Agar) merk oxoid, media NB akan terbentuk warna merah atau coklat pada
(Nutrient Broth) merk oxoid, larutan ½ Mc Farland, lapisan amil alkohol (Depkes RI, 1995).
ampisilin (Phapros), silika Gel GF254, kloroform pa,
methanol pa, anisaldehida – H2SO4, n-butanol pa, Saponin
asam asetat glasial pa, toluen pa, etil asetat pa , Ekstrak kental 0,5 g dicampur dengan 10 mL
asam stearat, gliserin, Na tetraborat, trietanolamin, air panas kemudian didinginkan dan dikocok
propilenglikol dan tween 80. hingga muncul buih. Larutan didiamkan selama 2
menit, kemudian diteteskan HCl 2 N. Bila terdapat Sistem KLT untuk uji flavonoid adalah sebagai
senyawa saponin dalam ekstrak maka akan berikut:
terbentuk buih mantap selama 10 menit (Depkes RI, Volume cuplikan : 5µL
1995). Fase diam : silika gel GF 254 dengan
jarak pengembangan 8 cm
Tanin Fase gerak : n-butanol: asam asetat : air
Ekstrak kental 1 (satu) g dicampur dengan 10 (4 : 1 : 5)
mL aquadest panas dan dipanaskan kurang lebih 1 Ditotolkan cuplikan ke fase diam yang telah diberi
jam. Larutan kemudian didinginkan dan disaring batas elusi, masukkan ke dalam chamber berisi
dengan kertas saring. Filtrat yang diperoleh dibagi eluen yang telah dijenuhkan. Elusi dihentikan saat
menjadi dua bagian. Filtrat pertama ditambahkan 5 mencapai batas elusi. Diamati noda dibawah sinar
mL larutan FeCl3 1%, jika terbentuk warna biru tua UV 254 nm dan 366 nm (Narwade et al., 2012).
atau hijau kehitaman maka hal itu menunjukkan
adanya senyawa golongan tanin. Filtrat yang kedua Uji aktivitas antibakteri
ditambahkan 15 mL pereaksi Stiasny (formaldehid Media NA (Nutrient Agar) dimasukkan dalam
30% : HCl pekat = 2:1), lalu dipanaskan di atas cawan petri steril sebanyak 10 mL, dan dibiarkan
penangas air sambil digoyang-goyangkan. Jika memadat. Setelah media memadat, lapisan dasar
terbentuk endapan warna merah muda menunjukkan tersebut diberi cylinder cup kemudian dimasukkan
adanya tanin katekuat. Endapan disaring, filtrat media NA sebanyak 10 mL yang sudah diberi
dijenuhkan dengan serbuk natrium asetat, suspensi bakteri Staphylococcus aureus (5 µL
ditambahkan beberapa tetes larutan FeCl3 1%, jika bakteri / 20 mL media) dibiarkan hingga memadat,
terbentuk warna biru tinta maka menunjukkan setelah itu cylinder cup dicabut dari media. Pada
adanya tanin galat (Depkes RI, 1995). masing-masing cylinder cup diberi ekstrak dengan
konsentrasi 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, kontrol
Alkaloid positif (ampisilin 1%), dan kontrol negatif
Ekstrak kental sebanyak 0,5 g dicampur (DMSO) dengan replikasi empat kali. Cawan petri
dengan 1 mL HCl 2 N dan 9 mL aquadest panas. tersebut kemudian diinkubasi pada suhu 37oC
Larutan dipanaskan selama 2 menit, kemudian selama 24 jam. Adanya diameter zona hambat
didinginkan dan disaring lalu filtratnya dibagi dua. disekeliling sumuran menunjukkan adanya
Filtrat pertama diteteskan pada kertas saring aktivitas antibakteri dan dilakukan pengukuran
kemudian disemprot dengan pereaksi Dragendorf, dengan jangka sorong.
sisanya dimasukkan dalam tabung reaksi dan
ditambahkan pereaksi Dragendorf. Sampel positif Pembuatan krim
terdapat alkaloid bila terbentuk warna merah atau Formulasi basis krim terdiri atas asam stearat,
jingga (Majumdar, 2005). gliserin, trietanolamin (TEA), dan aquadest.
R/ Asam stearat 142
Kuinon Glycerin 100
Ekstrak kental 0,5 g dicampur dengan 10 mL Triaethanolamin 10
air didihkan 15 menit, saring, filtrat yang diperoleh Aquadest 750
ditambahkan NaOH 1N. Terbentuknya warna merah Pembuatan basis krim dilakukan dengan
menunjukkan adanya senyawa golongan kuinon. menimbang asam stearat dan gliserin untuk
Sampel positif mengandung kuinon bila terbentuk dilelehkan diatas penangas air. TEA dan aquadest
warna merah (Majumdar, 2005). dicampur, kemudian dimasukkan dalam lelehan
campuran pertama. Dilakukan pengadukan untuk
Kromatografi Lapis Tipis-Densitometri mendapatkan basis krim yang homogen. Ekstrak
Ekstrak dilarutkan dengan etanol 96% dibuat daun som jawa ditambahkan sedikit demi sedikit
konsentrasi 20% atau 20 mg /mL. sambil diaduk hingga terbentuk sediaan krim yang
siap diuji aktivitas antibakteri Staphylococcus
aureus. Pengujian aktivitas krim menggunakan kromatogram senyawa flavonoid ditampilkan pada
metode yang sama dengan pengujian aktivitas Gambar 2.
ekstrak terstandardisasi daun som jawa. Uji aktivitas antibakteri ekstrak
terstandardisasi daun som jawa dilakukan untuk
Analisa Data memastikan bahwa kandungan senyawa aktif
Data hasil uji aktivitas antibakteri dianalisis dalam ekstrak memiliki kemampuan menghambat
menggunakan ANOVA satu jalan yang pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus serta
membandingkan aktivitas antar konsentrasi ekstrak menentukan konsentrasi ekstrak dalam sediaan
serta aktivitas ekstrak setelah diformulasikan dalam krim. Hasil uji aktivitas antibakteri antar
sediaan krim. konsentrasi ditunjukkan pada Gambar 3 dan grafik
diameter zona hambat ekstrak ditampilkan pada
HASIL DAN PEMBAHASAN Gambar 4.
Ekstraksi daun som jawa menghasilkan
rendemen 17,12% dan ekstrak sudah bebas etanol
dengan tidak terbentuk warna merah maupun bau
pisang (Schoorl, 1998), seperti ditunjukkan pada
Gambar 1.
Skrining fitokimia menunjukkan bahwa
ekstrak mengandung senyawa flavonoid, saponin,
tanin, alkaloid, dan kuinon (Tabel 1). Pola
spektrum serapan senyawa flavonoid menegaskan
hasil uji kandungan senyawa aktif dimana ekstrak
mengandung flavonoid dengan nilai Rf sebesar 0,69
pada panjang gelombang 345 nm. Hasil pola Gambar 1. Ekstrak daun som jawa
100.0 100.0
[ AU ] [ AU ]
80.0 80.0
70.0 70.0
60.0 60.0
50.0 50.0
40.0 40.0
30.0 30.0
20.0 20.0
10.0 10.0
0.0 0.0
200.0 250.0 300.0 350.0 400.0 450.0 500.0 550.0 600.0 [ nm ] 700.0
T Rf Substance Max. @
1 0.69 Rf AutoGenerated1 345 nm
B D E
A C
Gambar 3. Hasil uji aktivitas antibakteri. Keterangan: A: ekstrak terstandardisasi konsentrasi 30%; B: ekstrak
terstandardisasi konsentrasi 40%; C: ekstrak terstandardisasi konsentrasi 50%, D: ekstrak terstandardisasi
konsentrasi 60%; E: ekstrak terstandardisasi konsentrasi 70%; K+: ampisilin 1%; K-: DMSO
Berdasarkan Gambar 4 dapat diamati bahwa 70% dengan diameter zona hambat terbesar
konsentrasi ekstrak 70% memiliki diameter zona sebagai konsentrasi optimal untuk diformulasikan
hambat terbesar karena kandungan senyawa aktif dalam sediaan krim.
yang lebih banyak dibandingkan konsentrasi Aktivitas antibakteri dari ekstrak berasal dari
lainnya sehingga meningkatkan kemampuan dalam kandungan senyawa fitokimia. Flavonoid bekerja
menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus dengan cara membentuk senyawa kompleks
aureus. Diameter zona hambat dari seluruh dengan protein ekstraseluler yang mengganggu
konsentrasi berada pada rentang 1-2 cm atau 10-20 integritas membran sel bakteri (Kumar et al.,
mm yang termasuk dalam kategori kuat (Davis et 2013). Alkaloid berfungsi sebagai antibakteri
al., 1971). Analisis dengan ANOVA satu jalan dengan cara mengganggu penyusun peptidoglikan
menunjukkan bahwa antar konsentrasi ekstrak pada sel bakteri, sehingga lapisan dinding sel tidak
berbeda signifikan sehingga digunakan konsentrasi terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian
sel tersebut (Cushnie et al., 2014). Saponin mengkerutkan dinding sel atau membran sel
mempunyai sifat seperti sabun yang merupakan sehingga mengganggu permeabilitas sel bakteri.
senyawa aktif permukaan yang kuat, sehingga dapat Terganggunya permeabilitas sel mengakibatkan sel
menurunkan tegangan permukaan. Diabsorbsinya tidak dapat melakukan aktivitas hidup sehingga
saponin pada permukaan sel akan mengakibatkan pertumbuhannya terhambat atau bahkan mati.
kerusakan membran sel dengan naiknya Selain itu tanin juga memiliki daya antibakteri
permeabilitas membran atau kebocoran sel sehingga dengan cara mempresipitasi protein, karena
menyebabkan kematian sel karena hilangnya bahan- mempunyai efek yang sama dengan fenolik
bahan esensial sel (Netala et al., 2014). Aktivitas (Courtney et al., 2015).
antibakteri tanin berdasarkan kemampuannya
Ekstrak yang diformulasikan dalam sediaan krim Depkes RI, 1995. Materia Medika Indonesia Jilid
juga memiliki aktivitas antibakteri, meskipun terjadi VI, Jakarta: Departemen Kesehatan Republik
penurunan diameter zona hambat jika dibandingkan Indonesia.
dengan uji aktivitas antibakteri dari ekstrak Djide dan Sartini, 2008. Dasar-Dasar
(Gambar 5). Hal ini disebabkan fakta bahwa Mikrobiologi Farmasi. Makasar: Lephas.
pelepasan senyawa aktif dari sediaan dipengaruhi Foster, T.J., Geoghegan, J.A., Ganesh, V.K.,
oleh beberapa faktor yaitu afinitas senyawa terlepas Höök, M., 2014. Adhesion, invasion and
dari basis, kelarutan zat aktif, dan viskositas sediaan evasion: the many functions of the surface
itu sendiri (Barry, 1983). Meskipun demikian, proteins of Staphylococcus aureus. Nature
sediaan krim yang mengandung ekstrak Reviews Microbiology, 12 (1), 49-62.
terstandardisasi daun som jawa mampu Hertiani, T., Palupi, I.S., Sanliferianti, dan
menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus Nurwindasari, H.D., 2003. Uji potensi
aureus dan lebih acceptable digunakan untuk antimikroba terhadap S. aureus, E. coli,
pengobatan infeksi kulit. Shigella dysentriae, dan Candida albicans
dari beberapa tanaman obat tradisional untuk
KESIMPULAN penyakit infeksi. Pharmacon, 4 (2). UMS,
Ekstrak terstandardisasi daun som jawa Surakarta.
mengandung senyawa flavonoid. tanin, saponin, Kumar, S., Pandey, A.K., 2013. Chemistry and
alkaloid, dan kuinon. Senyawa aktif tersebut biological activities of flavonoids: an
memiliki efek sinergis dalam menghambat overview. The Scientific World Journal, 29.
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus, baik Majumdar, M., 2005. Evaluation of Tectona
dalam bentuk ekstrak maupun setelah grandis leaves for wound healing activity.
diformulasikan dalam sediaan krim. Sediaan Thesis, Departement of Pharmacology,
farmasi ini dapat menjadi obat herbal alternatif Krupadhini College of Pharmacy, Bangalore.
untuk mengatasi infeksi kulit akibat bakteri Miller, L.G., Eells, S.J., Taylor, A.R., David,
Staphylococcus aureus. M.Z., Ortiz, N., Zychowski, D., Kumar, N.,
Cruz, D., Boyle-Vavra, S., dan Daum, R.S.,
DAFTAR PUSTAKA 2012. Staphylococcus aureus colonization
Barry, B.W., 1983. Dermatological Formulation among household contacts of patients with
Percutaneous Absorpsion. Volume 18. New skin infections: risk factors, strain
York: Marcel Dekker, Inc, 49-67. discordance, and complex ecology. Clinical
Courtney, R., Sirdaarta, J., Matthews, B., Cock, Infectious Diseases, 54 (11), 1523-1558.
I.E., 2015. Tannin components and inhibitory Narwade, V.T., Waghmare, A.A., dan Vaidya,
activity of Kakadu plum leaf extracts against A.L., 2012. Detection of minor flavonoids
microbial triggers of autoimmune from Tragia plukenetii A. R. Smith.
inflammatory diseases. Pharmacognosy International Multidisciplinary Research
Journal, 7 (1), 18-31. Journal, 2 (3), 51-52.
Cushnie, T.T., Cushnie, B., Lamb, A.J., 2014. Netala, V.R., Ghosh, S.B., Bobbu, P., Anitha, D.,
Alkaloids: an overview of their antibacterial, dan Tartte, V., 2014. Triterpenoid saponins:
antibiotic-enhancing and antivirulence a review on biosynthesis, applications and
activities. International Journal of mechanism of their action. International
Antimicrobial Agents, 44 (5), 377-386. Journal of Pharmacy and Pharmaceutical
Davis, W.W. dan Stout, T.R., 1971. Disc plate Sciences, 7 (1).
method of microbiological antibiotic assay. Pine, A.T., Alam, G., dan Attamim, F., 2011.
Applied Microbiology, 22 (4), 659-665. Standardisasi mutu ekstrak daun gedi
(Abelmoschus manihot (L.) Medik) dan uji Kemopreventif Pada Terapi Kanker”,
efek antioksidan dengan metode DPPH. Fakultas Farmasi Universitas Wahid
Tesis, Pascasarjana Fakultas Farmasi Hasyim, Semarang.
Universitas Hasanuddin Makasar. Sulaiman, T.N., 2008. Teknologi dan Formulasi
Schoorl, 1988. Materi Pelengkap Kemurnian Cara Sediaan Semi Padat. Yogyakarta: UGM
Pemisahan Obat. Yogyakarta: Gajah Mada Press
University Press. Xie, Y., Yang, W., Tang, F., Chen, X., Ren, L.,
Subroto A, dan Saputro H., 2008. Gempur Penyakit 2015. Antibacterial Activities of
dengan Sarang Semut, Jakarta: Penebar Flavonoids: structure-activity relationship
Swadaya and mechanism. Current Medicinal
Suharsanti, R., Sulistiyanto, F.X., 2012. Chemistry, 22 (1), 132-181.
Standarisasi ekstrak daun som jawa (Talinum Zhang, L.J., Guerrero-Juarez, C.F., Hata, T.,
paniculatum (Jacq) Gaertn) untuk menjamin Bapat, S.P., Ramos, R., Plikus, M.V., Gallo,
mutu penggunaan sebagai obat herbal. In: R.L., 2015. Dermal adipocytes protect against
Prosiding Seminar Nasional “Perkembangan invasive Staphylococcus aureus skin
Terbaru Pemanfaatan Herbal Sebagai Agen infection. Science, 347 (6217), 67-71.