BAB III

METODE PRAKTIKUM

1. Alat dan Bahan

 Alat :

Gelas kimia Korek

Tabung reaksi Lakmus Merah dan Biru
Rak tabung reaksi Spatel
Pipet tetes Lampu spiritus
Erlenmayer Kaki tiga
Kassa kawat Batang pengaduk
Cawan porselen

 Bahan :
Aquadest Kloroform
Sampel No 345 Larutan NaOH 10%
Pereaksi Molisch Larutan CuSO4 0,2 %
H2SO4 Pekat Pereaksi Ninhidrin
Perekasi Benedict HNO3 Pekat
Larutan iodium Air brom
Alkohol Asam asetat anhidrid
Eter Larutan Pb-asetat 10 %
Larutan NaOH 6 N Larutan BiNO3
Larutan KI 5% Larutan CuS04 2%
Larutan NaOH 3 N Larutan FeCl3
Larutan NaHCO3 5 %

2. Waktu dan Tempat Pelaksanaan

 Praktikum ini dilaksanakan pada hari Senin, 25 November 2019 dan pada
hari Senin, 02 Desember 2019 yang bertempat di Laboraturium Biokimia Prodi
S1-Farmasi STIKes Bakti Tunas Husada Tasikmalaya.
3. Langkah Kerja
1. Uji Kualitatif Karbohidrat
 Uji Molisch

Masukkan 1 ml
larutan sampel ke Tambahkan 3 tetes
dalam tabung pereaksi molisch
reaksi.

Terjadinya warna ungu

Tambahkan 1 ml
pada bidang batas
H2SO4 Pekat melalui
antara kedua lapisan
dinding tabung yang
cairan menunjukan
dimiringkan
reaksi positif

 Uji Iodium

Masukkan 3 tetes
larutan sampel ke Tambahkan 2 tets
dalam cawan porselen larutan iodium

Jika positif polisakarida,

amilum akan berwarna biru, Amati warna
glikogen berwarna merah, spesifik yang terjadi
dan dekstrin berwarna
coklat

 Uji Benedict

Masukkan 2 ml Tambahkan 3 tetes

reagen Benedict larutan karbohidrat
 Biarkan dingin. Lalu
amati perubahan warna
dan perhatikan endapan
hijau, kuning, atau merah
menunjukkan reaksi
positif
Tempatkan tabung
dalam penangas air
mendidih selama 1
menit

2. Uji Kualitatif Protein

 Uji kelarutan protein

Masukkan alkohol dan Tambahkan 2 ml

kloroform ke dalam larutan sampel ke
tabung reaksi yang dalam masing-
berbeda masing tabung reaksi

Kocok dengan kuat,

lalu amati sifat
kelarutannya

 Uji Biuret

Masukkan 2 ml Tambahkan 1 ml
larutan sampel ke NaOH 10 % dan 3
dalam tabung reaksi tetes CuSO4 0,2%

Campur dengan baik,

amati perubahan warna
yang terjadi

 Uji Ninhidrin

Masukkan 2 ml larutan
Tambahkan 5 tetes pereaksi
sampel ke dalam tabung
ninhidrin
reaksi
 Panaskan dalam
Amati perubahan
penangas air mendidih
warna yang terjadi
selama 5 menit

 Uji Xantoprotein

Tambahkan 1 ml
Masukkan 2 ml larutan HNO3 pekat.
sampel Perhatikan endapan
putih yang terbentuk.

Dinginkan di bawah air

kran, lalu tambahkan
NaOH 10% setetes demi
setetes melalui dinding
tabung hingga terbentuk
lapisan.
Panaskan selama 1
menit dan amati
terbentuknya warna

Perhatikan perubahan
warna yang terjadi

3. Uji Kualitatif Lemak

 Uji kelarutan lemak

Siapkan 5 tabung rekasi. Isi Tambahkan pada tiap

setiap tabung dengan air, tabung 2 ml larutan
alkohol 96%, eter, sampel. Kocok sampai
kloroform, dan metanol. homogen.

Amati sifat kelarutannya.

 Uji Ketidakjenuhan Minyak

Tambahkan setetes demi
Masukkan 2 tetes larutan Tambahkan 2 ml
setetes air brom sambil
sampel ke dalam tabung kloroform
dikocok hingga warna air
reaksi
brom berubah
 Hitung jumlah tetesan
yang dibutuhkan

 Uji keasaman lemak

Teteskan sedikit Ujilah dengan kertas

larutan sampel pada lakmus biru dan merah
cawan porselen

Amati perubahan warna

yang terjadi.

4. Uji Kualitatif Vitamin

 Uji adanya Vitamin B1
a. Percobaan 1

Masukkan 10 tetes
Tambahkan 10 tetes
larutan sampel ke
larutan Pb-asetat 10%
dalam tabung
dan NaOH 6 N
reaksi

Panaskan, sehingga akan

muncul endapan warna Campur dengan baik,
coklat-hitam yang kemudian perhatikan warna
menandakan rekasi kuning yang terbentuk
positif

b. Percobaan 2

Masukkan 10 tetes
Tambahkan 10 tetes larutan
larutan sampel ke
BiNO3. Campur dengan
dalam tabung
baik.
reaksi

Munculnya endapan warna

merah menandakan reaksi Tambahkan 2 tetes larutan
positif KI 5 %
 Uji adanya vitamin B6
a. Percobaan 1

Masukkan 10 tetes
Tambahkan 2 tetes Larutan
larutan sampel ke
CuSO4 0,2 % dan 10 tetes
dalam tabung reaksi
Larutan NaOH 3 N

Bila terbentuk warna Campur dengan baik,

biru-ungu menandakan kemudian perhatikan warna
reaksi positif yang terbentuk

b. Percobaan 2

Masukkan 5 tetes
Tambahkan 2-3 tetes
larutan sampel ke
larutan FeCl3. Campur
dalam tabung
degan baik.
reaksi

Timbulnya warna jingga

sampai merah Amati perubahan warna
menandakan reaksi yang terjadi.
positif

 Uji adanya vitamin C

a. Percobaan 1

Masukkan 5 tetes
Tambahkan 15 tetes
larutan sampel ke
Pereaksi Benedict
dalam tabung reaksi

Perhatikan endapan yang Panaskan di atas api kecil

terbentuk. Warna hijau sampai mendidih selama 2
kekuningan ampai merah menit
bata menandakan sampel
positif vitamin C.
 b. Percobaan 2

Masukkan 10 tetes
Netralkan larutan dengan
larutan sampel ke
NaHCO3 5 % (pH = 8)
dalam tabung
reaksi

Timbulnya warna merah-

Tambahkan 2 tetes larutan
ungu menandakan
FeCl3
sampel positif vitamin C.