• Sterilisasi
Sterilisasi adalah penghancuran total semua
mikroba, termasuk bentuk yang lebih tangguh
seperti spora bakteri, bakteri, virus yang tidak
berkembang (non-lipid), dan jamur. Ini dapat
dicapai dengan menggunakan bahan kimia, uap
gas, atau bahan kimia steril (Tabel 3-1).
Steam jenuh dalam tekanan adalah metode
sterilisasi yang banyak digunakan, tidak mahal,
tidak beracun, dan andal. Tiga parameter sangat
penting: waktu pemaparan terhadap uap, suhu, dan
jumlah uap air. Siklus sterilisasi yang paling umum
digunakan adalah penggunaan uap jenuh yang
dipanaskan pada 121 ° C selama 15 menit.
Mempertahankan suhu yang tepat sangat penting
karena penurunan 1,7 ° C meningkatkan waktu
pemaparan yang dibutuhkan sebesar 48%. Jika
tidak ada kelembaban, maka suhunya harus
mencapai 160 ° C. Sterilisasi panas kering
membutuhkan waktu pemaparan yang lama dan
merusak banyak instrumen, sehingga saat ini tidak
direkomendasikan.
Gas etilen oksida digunakan untuk mensterilkan
benda yang sensitif terhadap suhu atau tekanan.
Perawatan umumnya selama 4 jam, dan barang-
barang yang disterilkan harus diangin-anginkan
selama 12 jam tambahan untuk menghilangkan gas
beracun sebelum barang digunakan. Meskipun
etilen oksida sangat efisien, peraturan ketat
membatasi penggunaannya, karena mudah terbakar,
mudah meledak, dan bersifat karsinogenik bagi
hewan laboratorium. Untuk alasan ini, sterilisasi
etilen oksida dihindari jika ada alternatif yang
dapat diterima.
Uap hidrogen peroksida adalah pensteril yang
efektif karena sifat pengoksidasi gasnya. Sterilisasi
ini digunakan untuk sterilisasi instrumen. Variasi
adalah sterilisasi gas plasma, di mana hidrogen
peroksida diuapkan, dan kemudian radikal bebas
reaktif diproduksi dengan energi frekuensi-mikro
atau frekuensi-radio. Karena ini adalah metode
sterilisasi efisien yang tidak menghasilkan produk
sampingan beracun, sterilisasi gas plasma telah
menggantikan banyak aplikasi untuk etilen oksida.
Namun, itu tidak dapat digunakan dengan bahan
yang menyerap hidrogen peroksida atau bereaksi
dengannya.
Dua bahan kimia steril juga telah digunakan: asam
perasetat dan glutaraldehida. Asam perasetat, zat
pengoksidasi, memiliki aktivitas yang sangat baik,
dan produk akhir (mis., Asam asetat dan oksigen)
tidak beracun. Sebaliknya, keamanan menjadi
perhatian
• Disinfeksi
Mikroba juga dihancurkan oleh prosedur
desinfeksi, meskipun organisme yang lebih tangguh
dapat bertahan hidup. Sayangnya, istilah desinfeksi
dan sterilisasi dengan santai dipertukarkan dan
dapat menimbulkan kebingungan. Ini terjadi karena
proses disinfeksi telah dikategorikan sebagai
tingkat tinggi, tingkat menengah, dan tingkat
rendah. Disinfeksi tingkat tinggi umumnya dapat
mendekati sterilisasi dalam efektivitas, sedangkan
bentuk spora dapat bertahan hidup disinfeksi
tingkat menengah, dan banyak mikroba dapat tetap
hidup ketika terkena desinfeksi tingkat rendah.
Bahkan klasifikasi desinfektan (Tabel 3-2)
berdasarkan tingkat aktivitasnya menyesatkan.
Efektivitas prosedur ini dipengaruhi oleh sifat item
yang akan didesinfeksi, jumlah dan ketahanan
organisme yang terkontaminasi, jumlah bahan
organik yang ada (yang dapat menonaktifkan
disinfektan), jenis dan konsentrasi disinfektan, dan
durasi dan suhu paparan. Disinfektan tingkat tinggi
digunakan untuk item yang terlibat dengan
prosedur invasif yang tidak dapat menahan
prosedur sterilisasi (mis., Jenis endoskopi dan
instrumen bedah tertentu dengan plastik atau
komponen lain yang tidak dapat diautoklaf).
Disinfeksi ini dan barang-barang lainnya paling
efektif jika membersihkan permukaan untuk
menghilangkan bahan organik sebelum perawatan.
Contoh disinfektan tingkat tinggi termasuk
pengobatan dengan panas lembab dan penggunaan
cairan seperti glutaraldehida, hidrogen peroksida,
asam perasetat, dan senyawa klorin. Disinfektan
tingkat menengah (mis., Alkohol, senyawa
iodophor, senyawa fenolik) digunakan untuk
membersihkan permukaan atau instrumen di mana
kontaminasi dengan spora bakteri dan organisme
yang sangat tangguh lainnya tidak mungkin terjadi.
Ini telah disebut sebagai instrumen semikritikal dan
perangkat dan termasuk endoskopi fiberoptik
fleksibel, laringoskopi, specula vagina, sirkuit
pernapasan anestesi, dan item lainnya. Disinfektan
tingkat rendah (mis., Senyawa amonium kuaterner)
digunakan untuk merawat instrumen dan perangkat
nonkritis, seperti manset tekanan darah, elektroda
elektrokardiogram, dan stetoskop. Meskipun
barang-barang ini bersentuhan dengan pasien,
mereka tidak menembus melalui permukaan
mukosa atau ke dalam jaringan steril.
Tingkat desinfektan yang digunakan untuk
permukaan lingkungan ditentukan oleh risiko
relatif yang ditimbulkan oleh permukaan ini
sebagai reservoir bagi organisme patogen. Sebagai
contoh, tingkat desinfektan yang lebih tinggi harus
digunakan untuk membersihkan permukaan
instrumen yang terkontaminasi dengan darah
daripada yang digunakan untuk membersihkan
permukaan yang “kotor,” seperti lantai, wastafel,
dan coun-tertop. Pengecualian untuk aturan ini
adalah jika permukaan tertentu telah terlibat dalam
infeksi nosokomial, seperti kamar mandi yang
terkontaminasi Clostridium difficile (bakteri
pembentuk spora pembentuk bakteri) atau bak cuci
yang terkontaminasi dengan Pseudomonas
aeruginosa. Dalam kasus ini, desinfektan dengan
aktivitas yang sesuai terhadap patogen yang terlibat
harus dipilih.

• Antisepsis
Agen antiseptik (Tabel 3-3) digunakan untuk
mengurangi jumlah mikroba pada permukaan kulit.
Senyawa ini dipilih untuk keamanan dan
kemanjurannya. Ringkasan sifat-sifat kuman
mereka disajikan pada Tabel 3-4. Alkohol memiliki
aktivitas yang sangat baik terhadap semua
kelompok organisme kecuali spora dan tidak
beracun, meskipun mereka cenderung
mengeringkan permukaan kulit karena mereka
menghilangkan lemak. Mereka juga tidak memiliki
aktivitas residual dan tidak aktif oleh bahan
organik. Dengan demikian permukaan kulit harus
dibersihkan sebelum alkohol diterapkan. Iodofor
juga merupakan agen antiseptik kulit yang sangat
baik, memiliki serangkaian aktivitas yang mirip
dengan alkohol. Mereka sedikit lebih beracun bagi
kulit daripada alkohol, memiliki aktivitas residu
yang terbatas, dan tidak aktif oleh bahan organik.
Iodofor dan sediaan yodium sering digunakan
dengan alkohol untuk mensterilkan permukaan
kulit. Chlorhexidine memiliki aktivitas anti-
mikroba yang luas, meskipun membunuh
organisme pada tingkat yang jauh lebih lambat
daripada alkohol. Aktivitasnya tetap ada, meskipun
bahan organik dan tingkat pH tinggi menurunkan
efektivitasnya. Aktivitas parachlorometaxylenol
(PCMX) terbatas terutama untuk bakteri gram
positif. Karena tidak beracun dan memiliki
aktivitas residu, telah digunakan dalam produk-
produk pencuci tangan. Triclosan aktif melawan
bakteri tetapi tidak melawan banyak organisme
lain. Ini adalah agen antiseptik umum dalam sabun
deodoran dan beberapa produk pasta gigi.
Mechanisms of Action
The following section briefly reviews the
mechanisms by which the most common sterilants,
disinfectants, and anti- septics work.
Panas lembab
Upaya untuk mensterilkan barang menggunakan air
mendidih tidak efisien karena hanya suhu yang
relatif rendah (100 ° C) dapat dipertahankan.
Memang, pembentukan spora oleh bakteri secara
umum ditunjukkan dengan merebus larutan
organisme dan kemudian mensubkultur larutan
tersebut. Organisme vegetatif yang mendidih
membunuh mereka, tetapi spora tetap hidup.
Sebaliknya, uap di bawah tekanan dalam autoklaf
adalah bentuk sterilisasi yang sangat efektif;
Semakin tinggi suhu menyebabkan denaturasi
protein mikroba. Tingkat pembunuhan organisme
selama proses autoklaf berlangsung cepat tetapi
dipengaruhi oleh suhu dan lamanya autoklaf,
ukuran autoklaf, laju aliran uap, densitas dan
ukuran beban, dan penempatan beban dalam
ruangan . Harus diperhatikan untuk tidak membuat
kantong udara, yang menghambat penetrasi uap ke
dalam beban. Secara umum, sebagian besar
autoclave dioperasikan pada 121 ° C hingga 132 °
C selama 15 menit atau lebih. Termasuk persiapan
komersial Bacillus stearothermophilus, spora dapat
membantu memantau efektivitas sterilisasi. Sebuah
ampul spora ini ditempatkan di tengah beban,
dihilangkan pada akhir proses autoklaf, dan
diinkubasi pada suhu 37 ° C. Jika proses sterilisasi
berhasil, spora terbunuh dan organisme gagal
tumbuh.
Etilena Oksida
Etilen oksida adalah gas yang tidak berwarna (larut
dalam air dan pelarut organik umum) yang
digunakan untuk mensterilkan benda yang peka
terhadap panas. Proses sterilisasi relatif lambat dan
dipengaruhi oleh konsentrasi gas, kelembaban
relatif dan kadar air dari item yang akan disterilkan,
waktu pemaparan, dan suhu. Waktu pemaparan
dikurangi 50% untuk setiap penggandaan
konsentrasi etilena oksida. Demikian juga, aktivitas
etilen oksida sekitar dua kali lipat dengan setiap
kenaikan suhu 10 ° C. Sterilisasi dengan etilena
oksida optimal dalam kelembaban relatif sekitar
30%, dengan penurunan aktivitas pada kelembaban
tinggi atau rendah. Ini khususnya bermasalah jika
terkontaminasi organisme dikeringkan di
permukaan atau diliofilisasi. Etilen oksida
memberikan aktivitas sporisidanya melalui alkilasi
kelompok hidroksil terminal, karboksil, amino, dan
sulfhidril. Proses ini menghambat kelompok reaktif
yang diperlukan untuk banyak proses metabolisme
esensial. Contoh gas alkilasi kuat lainnya yang
digunakan sebagai sterilisasi adalah formaldehida
dan β-propiolakton. Karena etilen oksida dapat
merusak jaringan yang layak, gas harus dibuang
sebelum benda tersebut dapat digunakan. Periode
aerasi ini umumnya 16 jam atau lebih. Efektivitas
sterilisasi dipantau dengan uji spora Bacilus
subtilis.
Aldehida
Seperti halnya etilen oksida, aldehida memberikan
efeknya melalui alkilasi. Dua aldehid yang paling
terkenal adalah formaldehyde dan glutaraldehyde,
yang keduanya dapat digunakan sebagai pensteril
atau disinfektan tingkat tinggi. Gas formaldehyde
dapat dipecahkan dalam air, menciptakan larutan
yang disebut formalin. Formalin dengan
konsentrasi rendah bersifat bakteriostatik (mis.,
Mereka menghambat tetapi tidak membunuh
organisme), sedangkan konsentrasi yang lebih
tinggi (mis., 20%) dapat membunuh semua
organisme. Menggabungkan formaldehid dengan
alkohol dapat meningkatkan aktivitas mikrobisida
ini. Paparan kulit atau selaput lendir terhadap
formaldehida bisa menjadi racun, dan uap bisa
bersifat karsinogenik. Untuk alasan ini,
formaldehida sekarang jarang digunakan dalam
pengaturan perawatan kesehatan. Glutaraldehyde
kurang beracun untuk jaringan yang hidup, tetapi
masih dapat menyebabkan luka bakar pada kulit
atau selaput lendir. Glutaraldehid lebih aktif pada
tingkat pH basa ("diaktifkan" oleh natrium
hidroksida) tetapi kurang stabil. Glutaraldehyde
juga diinaktivasi oleh bahan organik, sehingga
barang yang harus dirawat terlebih dahulu harus
dibersihkan.
Agen pengoksidasi
Contoh oksidan termasuk ozon, asam perasetat, dan
hidrogen peroksida, dengan yang terakhir paling
sering digunakan. Hidrogen peroksida secara
efektif membunuh sebagian besar bakteri pada
konsentrasi 3% hingga 6% dan membunuh semua
organisme, termasuk spora, pada konsentrasi yang
lebih tinggi (10% hingga 25%). Bentuk oksidan
aktif bukan hidrogen peroksida melainkan radikal
hidroksil bebas yang dibentuk oleh dekomposisi
hidrogen peroksida. Hidrogen peroksida digunakan
untuk mendisinfeksi implan plastik, lensa kontak,
dan prostesis bedah.
Halogen
Halogen, seperti senyawa yang mengandung iodin
atau klorin, digunakan secara luas sebagai
disinfektan. Senyawa yodium adalah halogen
paling efektif yang tersedia untuk disinfeksi.
Yodium adalah elemen yang sangat reaktif yang
mengendapkan protein dan mengoksidasi enzim
esensial. Ini adalah mikrobisida terhadap hampir
semua organisme, termasuk bakteri pembentuk
spora dan mikobakteri. Baik konsentrasi maupun
pH larutan iodin tidak mempengaruhi aktivitas
mikrobisida, meskipun efisiensi larutan iodin
meningkat dalam larutan asam karena lebih banyak
yodium bebas dibebaskan. Yodium bertindak lebih
cepat daripada senyawa halogen lain atau senyawa
amonium kuaterner. Namun, aktivitas yodium
dapat dikurangi dengan adanya beberapa senyawa
organik dan anorganik, termasuk serum, tinja,
cairan asites, dahak, urin, natrium tiosulfat, dan
amonia. Elemental iodine dapat dilarutkan dalam
potassium iodide atau alkohol dalam air, atau dapat
dikomplekskan dengan zat pembawa. Senyawa
terakhir disebut sebagai iodophor (iodo, "iodine";
phor, "carrier"). Povidone iodine (iodine
complexed dengan polyvinylpyrrol- idone)
digunakan paling umum dan relatif stabil dan tidak
beracun untuk jaringan dan permukaan logam,
tetapi harganya lebih mahal dibandingkan dengan
solusi yodium lainnya.
Senyawa klorin juga digunakan secara luas
sebagai disinfektan. Larutan klorin dalam air
bersifat bakterisida cepat, meskipun mekanisme
kerjanya tidak ditentukan. Tiga bentuk klorin dapat
ada dalam air: unsur klor (Cl2), yang merupakan
zat pengoksidasi yang sangat kuat; asam hipoklorat
(HOCl); dan ion hipoklorit (OCl2). Klorin juga
bergabung dengan amonia dan senyawa nitrogen
lainnya untuk membentuk kloramin, atau senyawa
N-kloro. Klorin dapat memberikan efeknya dengan
oksidasi ireversibel dari kelompok sulfhidril (SH)
enzim esensial. Hipoklorit diyakini berinteraksi
dengan komponen sitoplasma untuk membentuk
senyawa N-kloro toksik, yang mengganggu
metabolisme seluler. Kemanjuran klor berbanding
terbalik dengan pH, dengan aktivitas yang lebih
besar diamati pada tingkat pH asam. Ini konsisten
dengan aktivitas yang lebih besar terkait dengan
aktivitas yang setara, lebih dari 1 aktivitas yang
ditunjukkan kurang dari fenol, dan kurang dari 1
aktivitas yang ditunjukkan lebih besar dari fenol.
Tes ini terbatas karena fenol tidak sporisida pada
suhu kamar (tetapi sporisida pada suhu mendekati
100 ° C), dan memiliki aktivitas buruk terhadap
virus yang tidak mengandung lipid. Hal ini dapat
dimengerti karena fenol diyakini bertindak dengan
mengganggu membran yang mengandung lipid,
yang mengakibatkan kebocoran konten seluler.
Senyawa fenolik aktif terhadap mikobakteri yang
biasanya tahan karena dinding sel organisme ini
memiliki konsentrasi lipid yang sangat tinggi.
Paparan fenolat terhadap senyawa alkali secara
signifikan mengurangi aktivitasnya, sedangkan
halogenasi fenolik meningkatkan aktivitasnya.
Pengenalan kelompok alifatik atau aromatik ke
dalam inti fenol halogen juga meningkatkan
aktivitasnya. Bisphenol adalah dua senyawa fenol
yang saling terkait. Aktivitas senyawa-senyawa ini
juga dapat diperkuat dengan halogenasi. Salah satu
contoh bisphenol yang dihalogenasi adalah
heksaklorofen, suatu antiseptik dengan aktivitas
melawan bakteri gram positif.asam hipoklorus
daripada dengan konsentrasi ion hipoklorit.
Aktivitas senyawa klor juga meningkat dengan
konsentrasi (misalnya, peningkatan dua kali lipat
dalam konsentrasi menghasilkan penurunan 30%
dalam waktu yang diperlukan untuk membunuh)
dan suhu (misalnya, pengurangan 50% hingga 65%
dalam waktu membunuh dengan peningkatan 10 °
C dalam suhu). Bahan organik dan deterjen alkali
dapat mengurangi efektivitas senyawa klor.
Senyawa ini menunjukkan aktivitas kuman yang
baik, meskipun organisme pembentuk spora 10
hingga 1000 kali lipat lebih tahan terhadap klorin
daripada bakteri vegetatif.
Senyawa fenolik
Senyawa fenolik (germisida) jarang digunakan
sebagai desinfektan. Namun, mereka menarik
sejarah karena mereka digunakan sebagai standar
komparatif untuk menilai aktivitas senyawa kuman
lainnya. Rasio aktivitas germicidal oleh senyawa
uji dengan konsentrasi fenol yang ditentukan
menghasilkan koefisien fenol. Nilai 1 ditunjukkan
aktivitas yang setara, lebih dari 1 aktivitas yang
ditunjukkan kurang dari fenol, dan kurang dari 1
aktivitas yang ditunjukkan lebih besar dari fenol.
Tes ini terbatas karena fenol tidak sporisida pada
suhu kamar (tetapi sporisida pada suhu mendekati untuk tujuan ini. Alkohol juga digunakan untuk
100 ° C), dan memiliki aktivitas buruk terhadap mendisinfeksi barang-barang seperti termometer.
virus yang tidak mengandung lipid. Hal ini dapat
dimengerti karena fenol diyakini bertindak dengan
mengganggu membran yang mengandung lipid,
yang mengakibatkan kebocoran konten seluler.
Senyawa fenolik aktif terhadap mikobakteri yang
biasanya tahan karena dinding sel organisme ini
memiliki konsentrasi lipid yang sangat tinggi.
Paparan fenolat terhadap senyawa alkali secara
signifikan mengurangi aktivitasnya, sedangkan
halogenasi fenolik meningkatkan aktivitasnya.
Pengenalan kelompok alifatik atau aromatik ke
dalam inti fenol halogen juga meningkatkan
aktivitasnya. Bisphenol adalah dua senyawa fenol
yang saling terkait. Aktivitas senyawa-senyawa ini
juga dapat diperkuat dengan halogenasi. Salah satu
contoh bisphenol yang dihalogenasi adalah
heksaklorofen, suatu antiseptik dengan aktivitas
melawan bakteri gram positif.

Senyawa Amonium Kuarter

Senyawa amonium kuarter terdiri dari empat gugus
organik yang secara kovalen terkait dengan
nitrogen. Aktivitas kuman dari senyawa kationik
ini ditentukan oleh sifat dari gugus organik, dengan
aktivitas terbesar yang diamati dengan senyawa
yang memiliki gugus yang panjangnya 8 hingga 18
karbon. Contoh-contoh senyawa amonium
kuaterner termasuk benzalkonium klorida dan
cetylpyridinium klorida. Senyawa ini bertindak
dengan mendenaturasi membran sel untuk
melepaskan komponen intraseluler. Senyawa
amonium kuarter adalah bakteriostatik pada
konsentrasi rendah dan bakterisida pada
konsentrasi tinggi; namun, organisme seperti
Pseudomonas, Mycobacterium, dan jamur
Trichophyton resisten terhadap senyawa-senyawa
ini. Memang, beberapa strain Pseudomo nas dapat
tumbuh dalam larutan amonium kuaterner. Banyak
virus dan semua spora bakteri juga resisten.
Deterjen ion, bahan organik, dan pengenceran
menetralkan senyawa ammonium kuaterner.

Alkohol
Aktivitas kuman dari alkohol meningkat dengan
meningkatnya panjang rantai (maksimum lima
hingga delapan karbon). Dua alkohol yang paling
umum digunakan adalah etanol dan isopropanol.
Alkohol ini dengan cepat bersifat bakterisidal
terhadap bakteri vegetatif, mikobakteri, beberapa
jamur, dan virus yang mengandung lipid.
Sayangnya, alkohol tidak memiliki aktivitas
melawan spora bakteri dan memiliki aktivitas yang
buruk terhadap beberapa jamur dan virus yang
tidak mengandung lipid. Aktivitas lebih besar
dalam keberadaan air. Jadi, 70% alkohol lebih aktif
daripada 95% alkohol. Alkohol adalah desinfektan
umum untuk permukaan kulit dan, ketika diikuti
dengan perawatan dengan iodophor, sangat efektif