BAB I

PENDAHULULAN

1.1 Latar Belakang

Membran plasma sangat penting bagi kehidupan sel, tidak hanya sebagai batas menjaga
sitosolik lingkungan berbeda dari lingkungan ekstraseluler, tetapi juga sebagai platform untuk
perakitan protein, yang mengubah rangsangan ekstraseluler ke intraseluler sinyal. Hambatan
lipid kulit mencegah hilangnya air dari tubuh kita, lipid dalam fungsi selubung mielin sebagai
isolator serat saraf, dan lipid surfaktan paru di permukaan udara-air antarmuka penurunan
alveolar ketegangan. Ini lipid yang tepat diangkut dalam tubuh kita dan di dalam sel, dan
deposisi yang abnormal mereka menyebabkan kematian sel dan berbagai penyakit (Tabel 1).
Beberapa ATP-binding protein Sebuah kaset subfamili (ABCA) protein yang terlibat dalam
transportasi lipid antara organ dan antara kompartemen intraseluler (Tabel 1). Selanjutnya,
studi terbaru menunjukkan bahwa ABCA1 bergerak lipid tidak hanya antara membran yang
berbeda tetapi juga dalam membran yang sama untuk mengatur dan mereorganisasi
submicrometre (meso-skala) membran domain seperti membentuk lipid. Dalam review ini,
fungsi dan regulasi ABCA1 diringkas. ABCA1 tidak hanya memainkan peran utama
dalam biogenesis HDL dan kolesterol terbalik di proses transportasi tetapi juga telah
muncul sebagai target potensial untuk terapi yang dirancang untuk menghambat
perkembangan vaskular aterosklerotik penyakit (Gilat et al, 2001). Oleh karena itu, ada
alasan ilmiah yang kuat untuk pemahaman yang jelas tentang mekanisme dan jalur molekuler
yang mendasari apoA-ku proses lipid, khususnya dasar mekanistik lipid-bebas apoA-
ku interaksi dengan ABCA1.
 BAB II
DASAR TEORI

2.1 Kolesterol homeostasis dan ABCA1

Kolesterol adalah komponen kunci dari membran sel dan diperlukan untuk proliferasi
sel, namun, kelebihan akumulasi kolesterol merupakan racun bagi sel-sel dan deposisi
kelebihan di jaringan perifer menyebabkan aterosklerosis. Kelebihan kolesterol dalam
jaringan perifer adalah terbalik diangkut sebagai high-density lipoprotein (HDL) ke hati.
Karena kolesterol tidak catabolized pada jaringan perifer, pembentukan HDL adalah satu-
satunya jalan dengan mana kelebihan kolesterol dihapus dari perifer sel. Hubungan terbalik
antara plasma HDL tingkat dan risiko penyakit arteri koroner ditunjukkan (Dam et al, 2001),
walaupun secara genetik rendah HDL per se tidak dapat memprediksi peningkatan risiko.
Pada setidaknya 70 mutasi telah diidentifikasi dalam ABCA1 yang gen, menyebabkan
penyakit Tangier dan hypoalphalipoproteinaemia keluarga, di mana pasien memiliki dekat
tidak adanya atau penurunan HDL beredar ( Aram et Al, 2006 ). Lebih dari 15 mutasi
diperiksa menunjukkan tinggi korelasi antara fosfolipid, preferentially fosfatidilkolin (PC)
dan efluks kolesterol, menunjukkan bahwa ABCA1 mempengaruhi penghabisan dari kedua
PC dan bebas kolesterol. Memang, ABCA1, dinyatakan dalam kultur sel, menengahi sekresi
kedua jenis lipid lipid bebas ketika apolipoprotein AI (apoA-I), suatu lipid ekstraseluler
akseptor dalam plasma, yang ditambahkan ke medium (Tanaka et Al, 2003).

2.2 Akronim
ABCA1 ATP-binding protein kaset A1 apoA-aku, apolipoprotein AI, CK2 (kasein
kinase 2), ECD (domain ekstraselular), HDL (high density lipoprotein), JAK2 (Janus kinase
2), LXR (hati X reseptor), LXRE ( hati elemen X respon), MBCD (metil-b-siklodekstrin),
NBD (nukleotida mengikat domain), PC (fosfatidilkolin), PKA (protein kinase A), PKC,
(protein kinase C), PS (phosphatidylserine) RXR (retinoid) X (reseptor) SM (sphingomyelin)
SREBP-2 (peraturan sterol elemen protein mengikat 2).
Tabel 1. Kemungkinan substrat, lokalisasi dan penyakit terkait protein subfamili ABCA. PE,
hosphatidylethanolamine; PG, phosphatidylglycerol.
Kemungkinan Subselular Jaringan lokalisasi Penyakit terkait
substrat lokalisasi

ABCA1 PS [81] PC Cell surface, Macrophages, liver, Tangier’s disease,

(similarity and intracellular small intestine,brain atherosclerosis
with cholesterol vesicles [5,106–108] [5–7,13]
ABCA1) [54] [11,31]

ABCA2 Oxysterols Endosome Brain [111,112] Alzheimer’s

(59.2%) [105] [110] Disease [113–115]
Neonatal fatal
ABCA3 SM, Intracellular Lung alveolar type II surfactant deficiency
(57.3%) gangliosides vesicles, cells [121,123] and chronic interstitial
[109] lamellar bodies lung disease [124,125]
[121–123]
Intracellular
ABCA4 PC, PG, PE disc Photoreceptor cells Stargardt muscular
(66.7%) [116–120] membrane (rod cells, cone cells)dystrophy, age-related
[129] [129–131] macular degeneration
Lysosome, late [132–135]
ABCA5 All-trans- endosome Brain, lung, heart and Dilated
(50.3%) retinal, [136] thyroid gland [136] cardiomyopathy [136]
N- Unknown
retinylidene-
PE [126–128] Unknown
ABCA6 Unknown Unknown Unknown
(48.6%) Plasma
ABCA7 Unknown membrane Spleen, lung, adrenal, Unknown
(69.3%) and brain, liver, kidney
PC, SM, intracellular (proximal tubule),
cholesterol membranes peritoneal
[77,79,137] [77,79,137,138 macrophages [79,137]
] Unknown
Unknown
Oestradiol-b- Unknown
ABCA8 Macrophages [140]
(46.1%) glucuronide,
taurocholate,
LTC4, p-
aminohippuric
acid,
ochratoxin-A
[139] Unknown
ABCA9 Unknown Macrophages [141]
Unknown Unknown
(48.2%)
ABCA10 Unknown Keratinocyte [143]
Lamellar Harlequin ichthyosis
(49.5%) [144]
ABCA12 Glucosylcera bodies [143] Brain [145]
mide [142] Schizophrenia, bipolar
(56.3%) disorder, depression
Unknown
Unknown [145]
ABCA13
(51.1%)
Gambar. 1. Putative struktur sekunder ABCA1 manusia. Lima sistein residu (C75, C309,
C1463, C1465 dan C1477) terlibat dalam dua ikatan disulfida intramolekular antara ECD1
dan ECD2 ditunjukkan. Urutan PEST, yang 1-5-8-14, yang diduga kalmodulin situs
pengikatan, motif PDZ mengikat dan PKA dan CK2 situs fosforilasi ditunjukkan.
(Tidakskala.) K. Nagao et al. Fungsi dan regulasi ABCA1 Jurnal FEBS 278 (2011) 3190-
3203 ª 2011 Kompilasi Jurnal FEBS Penulis ª 2011 3191

2.3 Transkripsi regulasi ABCA1

ABCA1-dimediasi efluks kolesterol sangat diatur pada tingkat transkripsi. Pada sel
perifer, seperti makrofag dan fibroblast, ABCA1 ekspresi gen ditingkatkan oleh kolesterol
memuat (Lawn,1999). tanggapan ini diperantarai oleh reseptor LXRa nuklir dan
LXRb, yang ligan sterol metabolit seperti 22-(R)-hydroxycholesterol, 24-(S)-
hydroxycholesterol, 27-hydroxycholesterol dan 24-(S),25-epoxycholesterol (Lehmann,1997).
LXRb adalah ubiquitously diungkapkan, sedangkan LXRa terbatas pada hati, jaringan
adiposa, kelenjar adrenal, usus, paru-paru, ginjal dan sel-sel myeloid asal. Manusia LXRa
ekspresi sangat diatur dan dapat autoregulated dengan sendirinya, sedangkan LXRb manusia
secara stabil menyatakan bahkan dalam adanya kelebihan kolesterol. Dalam negara basal,
LXRb dan reseptor retinoid X (RXR) heterodimer terikat ke elemen respon hati X
(LXREs) dalam promotor gen target (Binchoff, 2010) (Gambar 2). Ketika kolesterol
terakumulasi dalam sel, konsentrasi intraseluler kenaikan oxysterols; selanjutnya, LXRb,
diaktifkan melalui pengikatan oxysterols, merangsang transkripsi ABCA1 dan juga LXRa.
Menariknya, kolesterol makan tikus atau tikus telah gagal menunjukkan peningkatan yang
signifikan dalam hati ABCA1 ekspresi mRNA (Engelking, 2011). Sebuah wilayah promotor,
yang merespon protein regulator mengikat sterol elemen 2 (SREBP-2), telah diidentifikasi
dalam intron pertama ABCA1 gen dan dilaporkan terlibat dalam peraturan
dari ABCA1 ekspresi dalam hati (Tamehero, 2007). Baru-baru ini, Mir-33, sebuah
microRNA intronic terletak dalam gen pengkodean SREBP-2, regulator transkripsi kolesterol
sintesis, ditemukan untuk memodulasi ekspresi dari ABCA1 pada tingkat pasca-transkripsi
(Rayner, 2010). Sebuah jaringan yang rumit peraturan telah berkembang untuk memodulasi
kolesterol sintesis dan penghabisan untuk mempertahankan kolesterol homeostasis.

Gambar. 2. LXR ABCA1 mengatur tidak hanya di tingkat transkripsional tetapi juga di
tingkat pasca-translasi dengan mengikat langsung. Selain welldefined nya peran dalam
transkripsi, LXRb langsung mengikat daerah C-terminal ABCA1 untuk menengahi pasca-
ranslasi regulasinya. (A) Dalam adanya akumulasi kolesterol, LXRb / RXR heterodimer
mengikat ke daerah C-terminal ABCA1. Kompleks ABCA1-LXRb / RXR stabil melokalisasi
ke membran plasma, tetapi tidak aktif dalam pembentukan HDL (30147). (B) Bila kelebihan
kolesterol terakumulasi, oxysterols mengikatuntuk LXRb mengarah ke pemisahan dari
ABCA1. Karena ternyata lebih cepat ABCA1 dengan paruh 1-2 jam, dan karena transkripsi,
splicing, terjemahan dan pematangan ABCA1, di lebih dari 2000 residu asam amino,
membutuhkan waktu beberapa jam setelah aktivasi transkripsi, sel tidak dapat mengatasi
akumulasi kolesterol akut selama beberapa jam. Peraturan ini pasca-translasi memungkinkan
ABCA1 untuk menyebabkan langsung awal tanggapan terhadap akumulasi kolesterol akut.
LXRb memiliki setidaknya dua peran yang berbeda dalam homeostasis kolesterol
mengendalikan
2.4 Pasca-translasi peraturan ABCA1 kegiatan

ABCA1-dimediasi efluks kolesterol juga sangat diatur pada tingkat pasca-translasi.

karena kolesterol merupakan komponen penting dari sel, penghapusan berlebihan kolesterol
dapat mengakibatkan kematian sel. Akibatnya, kemampuan untuk cepat menurunkan ABCA1
untuk mencegah penghapusan berlebihan juga penting. Memang, ABCA1 protein ternyata
lebih cepat, dengan paruh 1-2 jam (Wang et Al, 2002). Beberapa protein, termasuk a1-
syntrophin, b1-syntrophin, kalmodulin dan apoA-aku telah dilaporkan untuk berinteraksi
dengan ABCA1dan mengurangi tingkat ABCA1 degradasi protein. Degradasi ABCA1 diatur
dan dilakukan melalui beberapa jalur: (a) sel-permukaan ABCA1 adalah endocytosed dan
didaur ulang kembali ke membran plasma atau dikirim ke lisosom melalui awal dan akhir
endosomes untuk degradasi, (b) degradasi protease calpain ABCA1 pada membran plasma
dan intraseluler, terutama ketika apoA-aku tidak mengikat ABCA1 (R. Lu et AL, 2008).
ABCA1 adalah juga terdegradasi melalui jalur ubiquitin-proteasome. COP9 signalosome
kompleks, yang memainkan peran penting dalam degradasi berbagai protein seperti IjBa,
rekan dengan ABCA1 dan mengontrol ubiquitinylation dan deubiquitinylation dari ABCA1
(Y. Azuma et Al, 2009).

Beberapa protein kinase termasuk protein kinase A (PKA), protein kinase C (PKC),
Janus kinase 2 (JAK2) dan kasein kinase (CK2) yang terlibat dalam peraturan
dari ABCA1 aktivitas dan stabilitas dengan apoA-I. Interaksi dari apoA-I dengan ABCA1
meningkatkan selular konten cAMP dan ABCA1 fosforilasi (Haidar B, 2004). Ini fosforilasi
penting untuk ABCA1 kegiatan, seperti apoA-aku-yang tergantung fosfolipid penghabisan
berkurang secara signifikan oleh mutasi fosforilasi PKA situs, Ser-2054, dari ABCA1. ApoA-
aku juga mengaktifkan PKCa dan fosforilasi ABCA1. Ini reaksi mengarah pada perlindungan
ABCA1 dari perusahaan degradasi oleh calpain. Di sisi lain, fosforilasi dari tahun 1286 dan
tahun 1305 dalam urutan PEST (kaya prolin, serin glutamat, asam dan treonin) (Gambar 1)
dalam domain sitoplasmik dari ABCA1 mempromosikan calpain degradasi dan dibalikkan
oleh apoA-I. Asam lemak tak jenuh mengguncang ABCA1 olehfosforilasi melalui jalur
PKCd. Fosforilasi dari Thr-1242, Thr-Ser-1243 dan 1255 oleh CK2 menurunkan aktivitas
ABCA1 flippase, apoA-I mengikat dan lipid penghabisan. Kalmodulin berinteraksi dengan
ABCA1 di dekat atau posisi yang tumpang tindih CK2 fosforilasi situs dan interaksi ini
mengatur calpain-dimediasi ABCA1 degradasi. Interaksi dari apoA-I dengan ABCA1 untuk
menit hanya merangsang autofosforilasi dari JAK2, yang pada gilirannya mengaktifkan
ABCA1 tergantung lipid penghabisan (Rosbeek S, 2004). Menariknya, aktivasi apoA-aku-
dimediasi JAK2 juga mengaktifkan STAT3, yang independen dari lipid
penghabisan kegiatan ABCA1. Jalur apoA-I / ABCA1 dalam makrofag diusulkan berfungsi
sebagai antiinflamasi melalui aktivasi reseptor / JAK2 STAT3. Siklosporin A dan FK506
dilaporkan untuk menghapuskan ABCA1 tergantung efluks lipid dengan menghambat
jalur Ca2 dependent kalsineurin / JAK2. Cdc42, anggota keluarga GTPase Rho, adalah
dilaporkan untuk berinteraksi dengan ABCA1 dan interaksi meningkatkan apoA-aku-
imediasi efluks kolesterol. Palmitoylation dari ABCA1 juga terlibat dalam perdagangan
manusia dan fungsi ABCA1 (Noffer JR, 2006). Kami telah melaporkan bahwa kompleks
LXRb / RXR mengikat ABCA1 ketika konsentrasi intraseluler dari oxysterols rendah, dan
ABCA1-LXRb / RXR kompleks didistribusikan pada membran plasma tetapi inert dalam hal
penghabisan kolesterol (Gambar 2). ketika kolesterol terakumulasi dan konsentrasi
intraseluler meningkat oxysterols, oxysterols mengikat LXRb dan yang LXRb / RXR
kompleks berdisosiasi dari ABCA1. Setelah bebas dari LXRb / RXR, ABCA1 aktif dalam
pembentukan HDL dan menurunkan kolesterol lokal konsentrasi segera. Setelah mengikat
untuk oxysterols, LXRb / RXR mengaktifkan transkripsi ABCA1 dan lainnya gen.
Akibatnya, LXRb dapat menyebabkan posttranslational respon, serta transkripsi respon,
untuk mempertahankan homeostasis kolesterol. Ini mekanisme baru adalah respon awal
segera dengan peningkatan yang cepat mengatasi kolesterol intraseluler, seperti ketika
mengkonsumsi makrofag sel apoptosis.

2.5 Efek mutasi Tangier pada ABCA1

Dari pasien dengan penyakit Tangier dan hypoalphalipiproteinaemia keluarga, lebih

dari 70 mutasi telah diidentifikasi dalam gen ABCA1. sebagian besar mutasi berada dalam
domain ekstraseluler (ECDs) (apoAI putatif mengikat situs) dan domain mengikat nukleotida
(NBDs) (mengemudi-force-situs memasok) dari ABCA1 (Gambar 1). Mutasi dapat
dikategorikan menjadi tiga kelompok (Tabel 2). Yang pertama adalah pematangan cacat
mutan dan mayoritas mutasi milik kelompok ini. Wild type ABCA1, dimodifikasi dengan
oligosakarida kompleks, terutama terlokalisasi pada membran plasma dan kadang-kadang
dalam kompartemen intraselular namun, mutan cacat pematangan ABCA1, dimodifikasi
dengan tinggi oligosakarida jenis mannose, telah gangguan perdagangan dan lokal tidak tepat
ke retikulum endoplasma (V. Rigot et Al, 2002). Karena apoA-aku berinteraksi dengan
ABCA1 pada permukaan sel, mutan yang tidak mencapai membran plasma tidak dapat
menengahi apoA-aku-tergantung efluks lipid. Para Kelompok kedua adalah apoA-aku cacat
mengikat mutan. Kelompok ini diwakili oleh mutan C1477R dari kedua ECD (Tabel 2).
Meskipun C1477R mutan dinyatakan dalam membran plasma seperti wild type ABCA1,
apoA-aku mengikat dihapuskan (Vaughan AM, 2009). Para Kelompok ketiga adalah lipid
translokasi cacat mutan, diwakili oleh mutasi W590S dalam ECD pertama ABCA1 (Tabel 2).
Distribusi subselular

Table 2. Effects of mutations on the functions of ABCA1.

Effects of mutations Position of mutations

ApoA-
PM I HDL
Clas localizatio bindin formatio
s n g n ECD1 TMD1 NBD1 ECD2 TMD2 NBD2
R587Wa, DL693b, N935Sb N1800Hb, R2081W
I Defect Defect Defect b c S1506Lb d b
Q597Ra– A1046D
c b
M1091T
b
C1477Rb,
II Normal Defect Defect c
Norma
III Normal l Defect A255Tb T929I C1660Rf
        W590Sa–e B    

W590S tidak dapat dibedakan dari yang tipe liar ABCA1. Selanjutnya, mutasi W590S tidak
mempengaruhi apoA-ku mengikat, namun, W590S mutasi mengurangi phosphatidylserine
(PS) menjatuhkan kegiatan ABCA1, terdeteksi dengan alat tes Annexin V mengikat, dan
sodium taurocholate tergantung kolesterol terganggu dan fosfolipid penghabisan oleh
ABCA1 (Nagao et al, 2009). Ini Hasil ini menunjukkan bahwa mutasi W590S mempengaruhi
lipid translokasi kegiatan ABCA1 dan bahwa kedua kegiatan ABCA1 (apoA-I mengikat dan
lipid translokasi) dapat dipisahkan (Gambar 3A). Selain itu, W590S mutasi terbelakang
pemisahan apoA-I dari ABCA1. Lipid translokasi oleh ABCA1 adalah seharusnya
memfasilitasi disosiasi apoA-I dari ABCA1. ApoA-aku dilaporkan mengalami konformasi
transisi dalam respon terhadap lipid, dan lipidated apoA-aku tidak berinteraksi dengan
ABCA1 (Davidson DS et al, 2007). Para konformasi transisi dari apoA-ku yang disebabkan
oleh lipid memuat selama mengikat ABCA1 dapat memfasilitasi disosiasi apoA-I dari
ABCA1 (Gambar 3A).
Gambar. 3. Membran meso-domain organisasi dan reorganisasi oleh ABCA1. (A) Dua
diusulkan mekanisme untuk pembentukan HDL. (i) Membran fosfolipid dan kolesterol yang
translokasi oleh ABCA1 dan (ii) yang dimuat ke apoA-aku langsung terikat pada ECDs dari
ABCA1 untuk menghasilkan partikel HDL yang baru lahir (Nagao, 2010). (iii) Membran
fosfolipid translokasi melalui ABCA1 menginduksi lentur dari membran bilayer untuk
membuat situs kelengkungan tinggi, yang apoA-ku mengikat membran fosfolipid dan
solubilizes dan kolesterol untuk membuat partikel HDL yang baru lahir. (B) Peraturan sinyal
sel oleh ABCA1. (i) membran fosfolipid dan kolesterol ABCA1 translocates dan (iv)
perubahan membran meso-damain organisasi, seperti rakit lipid, yang mengarah ke ditekan
dimediasi reseptor sinyal peristiwa (L. Y van-Carvet et Al, 2010).

2.6 Subselular lokalisasi dan fungsi ABCA1

ABCA1 melokalisasi terutama ke membran plasma tapi kadang-kadang juga

melokalisasi dalam kompartemen intraselular. Dua mekanisme yang berbeda telah diusulkan
untuk ABCA1-dimediasi pembentukan HDL. Salah satunya adalah bahwa ABCA1
menengahi pembentukan kompleks apoA-I dengan fosfolipid dan kolesterol pada permukaan
sel (sel-permukaan model), dan yang lainnya adalah bahwa apoA-aku mengikat untuk
ABCA1 pada permukaan sel dan ABCA1 / apoA-I kompleks yang kemudian diinternalisasi.
ApoA-I/lipid kompleks terbentuk (mungkin melalui aktivitas ABCA1) pada akhir endosomes
dan kembali disekresikan oleh eksositosis (retroendocytosis model). Takahashi dan Smith
pertama menunjukkan bahwa, setelah internalisasi, apoA-I didaur ulang kembali ke
permukaan sel akan kembali dilepaskan. Para ABCA1 diinternalisasikan dan apoA-aku
dilaporkan co-melokalisasi dalam akhir endosomes, dan ABCA1 cepat huttled antara
kompartemen intraseluler dan membran plasma (Neufeld EB et al, 2004). Perangkap ABCA1
pada membran plasma siklosporin perlakuan A dengan mengurangi apoA-aku dimediasi
kolesterol penghabisan (Le Goff W et al, 2004). Penghapusan PEST urutan blok endositosis
dan menurun apoA-aku-dimediasi penghabisan kolesterol setelah loading kolam endosome /
lisosom akhir kolesterol oleh asetat low-density lipoprotein pengobatan (Ceng W et al, 2009).
Ini hasil bersama-sama mendukung gagasan bahwa baru lahir lipoprotein partikel terbentuk
dalam kompartemen intraseluler dan kemudian dikeluarkan dari sel. Ada juga banyak laporan
bahwa ABCA1-dimediasi kolesterol penghabisan untuk apoA-aku terutama terjadi pada sel
permukaan dan bahwa jalur retroendocytosis tidak memberikan kontribusi signifikan
terhadap pembentukan HDL (Faulner LE et al, 2008).

Mayoritas diinternalisasi apoA-I langsung diangkut ke endosomes terlambat dan

lisosom untuk degradasi, dan memblokir endositosis tidak penurunan apoA-aku-tergantung
efluks kolesterol. Meskipun apoA-I secara khusus diambil oleh makrofag, hanya sebagian
kecil dari apoA-I re-disekresikan dari sel-sel ini. Selanjutnya, mayoritaskembali-disekresikan
apoA-I terdegradasi dalam medium, menunjukkan bahwa massa retroendocytosed apoA-aku
tidak cukup untuk menjelaskan pembentukan HDL, namun, studi ini dilakukan dengan
menggunakan makrofag dan sel lain tanpa loading kolesterol. Seperti yang ditunjukkan oleh
(Oram, 2008), mekanisme dari Pembentukan HDL mungkin berbeda apakah kelebihan
kolesterol telah terakumulasi dalam sel atau tidak. ABCA1 dan apoA-aku endocytosed
melalui clathrinand Rab5-dimediasi jalur cepat kembali dan didaur ulang ke permukaan sel,
setidaknya sebagian melalui Rab4-dimediasirute; sekitar 30% dari ABCA1 endocytosed
didaur ulang kembali ke permukaan sel. Ketika clathrinmediated endositosis dihambat,
tingkat ABCA1 pada permukaan sel dan meningkatkan apoA-aku internalisasi diblokir.
Dengan kondisi tersebut, apoA-I-dimediasi kolesterol penghabisan dari sel yang telah
terakumulasi lipoprotein yang diturunkan kolesterol menurun, sedangkan penghabisan dari
sel tanpa kelebihan kolesterol meningkat (Azuma Y et al, 2009).

Hasil ini menunjukkan bahwa retroendocytosis yang jalur ABCA1 / apoA-I

memberikan kontribusi untuk pembentukan HDL ketika kelebihan yang diturunkan
lipoprotein kolesterol telah terakumulasi dalam sel. Studi ini juga dalam perjanjian
dengan studi sebelumnya yang menghalangi retroendocytosis dari ABCA1 tidak
mempengaruhi efluks kolesterol dari sel-sel di tidak adanya kelebihan kolesterol. ABCA1
mungkin mengikuti jalur daur ulang yang sama konstitutif sebagai reseptor LDL (Hueser JE
et al, 1989).
2.7. Lipid akseptor untuk ABCA1

Kolesterol dan fosfolipid sangat hidrofobik, lipid akseptor yang melarutkan mereka
dalam air solusi yang diperlukan untuk sekresi lipid. Bawah kondisi fisiologis, apoA-I dan
apoE, mengandung amphipathic heliks, berfungsi sebagai akseptor dari lipid disekresikan ke
dalam serum dengan ABCA1. Meskipun lainnya amphipathic-heliks-peptida yang
mengandung protein (misalnya apoA-II, apoC-aku, C-II, C-III, PLTP dan amiloid serum A)
juga berfungsi sebagai akseptor lipid untuk ABCA1- kolesterol tergantung penghabisan,
kontribusi fisiologis mereka tetap harus diklarifikasi (Remeley AT et al, 2001). Sintetis
amphipathic heliks peptida (37pA) juga mempromosikan kolesterol dan fosfolipid
penghabisan dari ABCA1-mengekspresikan sel. Selain itu, peptida 37pA disintesis dengan
asam amino d adalah sebagai efektif seperti yang dengan asam amino l. Dari hasil tersebut,
amphipathic heliks dianggap motif struktural utama untuk peptida-dimediasi efluks lipid dari
ABCA1. Kami melaporkan bahwa taurocholate natrium juga dapat berfungsi sebagai
akseptor untuk kolesterol dan fosfolipid translokasi oleh ABCA1, karena itu, seperti deterjen
properti dari heliks amphipathic mungkin penting sebagai akseptor lipid. Hal ini diusulkan
bahwa apoA-aku langsung mengikat ABCA1 dalam proses pembentukan HDL, ditunjukkan
oleh beberapa kelompok melalui percobaan silang (Vedhachalam et al, 2007). Karena 3-A
crosslinker dapat crossling apoA-I dengan ABCA1, pasangan asam amino reaktif ABCA1
dan apoA-aku berada dalam jarak 3 £ A ˚. (Hozojiet Al et al, 2009) menemukan bahwa dua
ikatan disulfida intramolekular terbentuk antara ECD1 dan ECD2 dari ABCA1, dan kedua
ikatan disulfida yang diperlukan untuk apoA-aku mengikat dan pembentukan HDL (Gambar
1). Hal ini melaporkan bahwa apoA-aku tidak silang dengan ATPase-kekurangan bentuk
mutan dari ABCA1. Selanjutnya, neon-berlabel apoA-aku tidak mengikat ATPase sel
mengekspresikan mutan yang kekurangan. Ini Hasil penelitian menunjukkan bahwa ECD
besar ABCA1 adalah langsung mengikat situs untuk apoA-I dan nya ATP-dependent
perubahan konformasi diperlukan untuk apoA-aku mengikat. Tapi, juga diusulkan bahwa
apoA-aku berinteraksi dengan khusus domain pada membran plasma terpisah dari ABCA1
dan solubilizes lipid membran.

2.8. Transportasi substrat

Substrat diangkut langsung oleh ABCA1 masih kontroversial (Tabel 1). Beberapa
model telah diusulkan untuk mekanisme ABCA1-dimediasi HDL formasi: (a) model proses
dua langkah di mana ABCA1 pertama menengahi PC penghabisan untuk apoA-aku, dan ini
apoA-I-PC kompleks menerima kolesterol dalam ABCA1 secara independen, (b) model
proses bersamaan dalam yang PC dan efluks kolesterol oleh ABCA1 untuk apoA-I
yang digabungkan satu sama lain, dan (c) model ketiga di mana ABCA1 menghasilkan
sebuah situs apoA-aku spesifik mengikat pada membran plasma dengan translokasi
berikutnya PC dan kolesterol untuk apoA-aku. Ketika diusulkan, model dua langkah tampak
paling masuk akal, karena PC photoactive bisa silang (K. Nagao et Al, 2010). Fungsi dan
regulasi ABCA1 mengikat langsung kolesterol photoactive untuk ABCA1 tidak bisa
dideteksi.

2.9 Membran meso-domain organisasi dan reorganisasi

Pada membran plasma, berbagai skala meso (10 -100 nm) domain, seperti penyusun
lipid, yang seharusnya untuk menjadi dinamis terorganisasi dan reorganisasi terlibat dalam
berbagai fungsi seluler, seperti sinyal transduksi. ABCA1 terlibat dalam membran
mesodomain reorganisasi, sebagai hasil ekspresi ABCA1 redistribusi yang signifikan dalam
kolesterol dan sphingomyelin (SM) dari Triton X-100-tahan membran domain. Caveolin juga
mendistribusikan kembali dari tanda baca caveolae-seperti struktur ke daerah umum
membran plasma. Makrofag dari ABCA1- tikus kekurangan dipamerkan penyusun lipid
meningkat pada sel permukaan dan ABCA1 sel dibuat lebih sensitif terhadap
metil-b-siklodekstrin (MBCD) pengobatan dan dihasilkan kolesterol oksidase yang dapat
diakses membran domain (Vaughan dan Oram et al, 2003). Yang penting, membran meso-
domain reorganisasi oleh ABCA1 adalah independen dari apoA-aku.

Hal ini dimungkinkan bahwa translokasi aktif lipid melalui ABCA1, flop fosfolipid
dan kolesterol dari batin untuk leaflet luar, menyebabkan destabilisasi membran. Sejak
ABCA1 tidak terkait dengan Triton X-100-tahan domain membran, domain yang stabil
melalui translokasi lipid dengan ABCA1 berlokasi di luar domain. Hal ini melaporkan bahwa
ABCA1 terkait dengan Luburol WX-tahan membran dalam cholesterolloaded monosit-
makrofag berasal, bahwa ABCA1 dan flotillin-1 adalah co-lokal dalam deterjen tahan
membran dan dapat menjadi co-diendapkan, dan bahwa ekspresi caveolin-1 meningkatkan
apoAI-kolesterol penghabisan tergantung dalam sel hati. ABCA1 dapat melokalisasi luar
Triton X-100-tahan membran domain. Tapi ABCA1 ini belum pulih dari baik Triton X-100-
atau WX-tahan membran Luburol dalam fibroblas. Tidak jelas bagaimana translokasi lipid
oleh ABCA1 non-penyusun daerah mereorganisasi lainnya domain membran plasma. Kami
menganalisis efek dari tingkat SM selular fungsi ABCA1 menggunakan sel CHO-K1 mutan
line, LY-A, yang memiliki mutasi missense di CERT mentransfer protein ceramide, dan
melaporkan bahwa penurunan konten SM di membran plasma merangsang apoA-aku-
tergantung kolesterol penghabisan oleh ABCA1 (K. Nagoa et Al, 2007).

Jumlah kolesterol yang tersedia untuk dingin MBCD ekstraksi meningkat bila konten
SM berkurang. Namun, apoA-aku-tergantung kolesterol penghabisan tidak diamati tanpa
ABCA1 ekspresi bahkan ketika SM konten berkurang, menunjukkan bahwa kolesterol
tersedia untuk MBCD dingin tidak dapat dimuat ke apoAI spontan. Ketika ABCA1
diungkapkan, kolesterol tersedia untuk MBCD dingin meningkat 40%. Ini pengaruh ABCA1
adalah independen dari apoA-I. Ini Hasil penelitian menunjukkan bahwa membran ABCA1
translocates lipid dalam deterjen-larut dan membuat domain mengaktifkan kolesterol tersedia
untuk proyek- royek dingin MBCD. Efek dari pengurangan plasma membran Konten SM
pada fungsi ABCA1 cukup berbeda pada fungsi ABCG1, karena ABCG1-dimediasi efluks
kolesterol menurun ketika selular SM konten berkurang (O. Sano, et Al, 2007).

Hal ini konsisten dengan laporan sebelumnya bahwa lipid dimuat ke lipid-miskin
apoA-I dengan ABCA1 disediakan oleh Triton X-100-sensitif domain membran, sedangkan
lipid dimuat ke HDL, lipid akseptor untuk ABCG1, berasal dari Triton X-100-tahan membran
domain, dan bahwa mengobati fibroblast tikus dengan peningkatan Smase apoA-aku-atau
apo-E-bergantung kolesterol penghabisan (J. Ito et AL, 2000). Beberapa penelitian
menunjukkan bahwa ABCA1 menghasilkan khusus membran meso-domain.

Membran fosfolipid translokasi melalui ABCA1 menginduksi lentur dari bilayer

membran untuk membuat situs kelengkungan tinggi, seperti yang dibuat dalam 20-nm-
diameter unilamellar vesikel kecil, yang apoA-aku mengikat dan solubilisasi membran
fosfolipid dan kolesterol HDL yang baru lahir untuk menciptakan partikel (Gambar 3A).
Dengan konsep ini, tonjolan membran plasma dan apoA-I mengikat untuk menonjol domain
membran plasma telah diamati dalam sel mengekspresikan ABCA1. Seperti apoA-I mengikat
dapat ditingkatkan dengan molekul PS translokasi ke selebaran exofacial oleh ABCA1,
karena kehadiran PS meningkatkan kelengkungan vesikel. Namun, masih ada perbedaan jelas
dalam ketergantungan pada apoA-aku konsentrasi antara ABCA1-dimediasi penghabisan
lipid dan fosfolipid solubilisasi in vitro vesikel (C. Vedhachalam et Al, 2007). Telah dihitung
bahwa hanya sebagian membran domain. Tapi ABCA1 ini belum pulih dari baik Triton X-
100-atau WX-tahan membran Luburol dalam fibroblas. Tidak jelas bagaimana translokasi
lipid oleh ABCA1 non-rakit daerah mereorganisasi lainnya domain membran plasma. Kami
menganalisis efek dari tingkat SM selular fungsi ABCA1 menggunakan sel CHO-K1 mutan
line, LY-A, yang memiliki mutasi missense di CERT mentransfer protein ceramide, dan
melaporkan bahwa dari apoA-I terkait dengan permukaan sel mengikat langsung ke ABCA1.

Salah satu penjelasan yang masuk akal mungkin bahwa interaksi langsung dengan
penyebab ABCA1 perubahan konformasi dalam apoA-aku untuk membuatnya terbuka dan
menerima lipid. Activated apoA-aku mungkin berinteraksi dengan meso-domain khusus
dibuat oleh ABCA1. Baru-baru ini dilaporkan bahwa LXR sinyal pada pos pemeriksaan
metabolik memodulasi proliferasi sel T dan kekebalan (L. Yvan- Charvet et Al, 2010). T
aktivasi sel disertai dengan downregulation gen target LXR, ABCA1 dan ABCG1.
Kehilangan ekspresi LXR menganugerahkan proliferatif keuntungan untuk limfosit, sehingga
ditingkatkan homeostatik dan antigen-driven tanggapan. Sebaliknya, aktivasi ligan LXR
menghambat mitogendriven Sel T ekspansi. Kolesterol selular diperlukan untuk
meningkatkan sintesis membran selama proliferasi sel. Mekanisme tambahan juga mungkin
terlibat, seperti perubahan dalam membran meso-domain organisasi, misalnya penyusunan
lipid, yang menyebabkan receptormediated ditingkatkan sinyal peristiwa. Fungsional
kekurangan ABCA1 dan ABCG1 menyebabkan inflamasi ditingkatkan tanggapan dari
makrofag, terutama setelah pengobatan dengan lipopolisakarida atau pulsa seperti reseptor
ligan. ABCA1 dan ABCG1 dapat mempromosikan membran lipid redistribusi, yang
memodulasi penyusun-tergantung sel sinyal (Gambar 3B).