I.1.

1 Kegiatan antioksidan in vitro dari EPS

I.1.2 Radikal bebas DPPH mengais assay
Secara umum, radikal yang berlebihan dalam sel dapat menyebabkan peradangan,
nekrosis dan fibrosis memperburuk proses patologis. Mengurangi tingkat radikal oleh
pemulung telah terbukti efektif untuk penyakit yang terkait radikal bebas. Aktivitas
antioksidan in vitro dari tiga EPS ini dievaluasi dengan penilaian aktivitas pemulungan
radikal bebas (Elg.5).
DPPH adalah radikal stabil yang memiliki radikal bebas nitrogen dan bisa
dihancurkan oleh pemulung. Tiga EPS menunjukkan kemampuan yang jelas untuk
mengais DPPH. EPS-CP, EPS-SS dan EPS-CS menunjukkan pemulungan yang jelas
kegiatan pada DPPH, dan nilai IC 30 adalah 2,14, 0,83 dan 1,38 mg / ml, masing-
masing. Mengacu pada EPS-CP (55,2%) dan EPS-SS (68,2%), kegiatan pemulungan
maksimum imumingkatkan pada konsentrasi 2,0 mg / ml. Di sisi lain, aktivitas
mengendalikan EPS-CS menunjukkan konsentrasi dengan EPS di antara rentang yang
disponsori, dan mencapai maksimum 3,0 mg / ml. (71,4%).
selain itu, ketiga EPS tersebut menunjukkan aktivitas pembersihan DPPH yang
lebih baik lebih dari itu EPS dari Pseudomonas fl uorescens (sekitar 30.0% pada 1,0 mg
/ mL) [ 35 1, SEPS dari (18,92% pada 1,0 mg / ml.) [ 36 1, EPS dari Lactobacillus
plantarum C88 (52,2% pada 4,0 mg / mL) dan EPS dari Lactobacillus gasseri (30%
pada 4,0 mg / mL) Khususnya EPS-CP, Aktivitas pemulung DPPH pada konsentrasi 2 ,
0 mg / ml adalah 55,2%, mirip dengan 53,0% dari bagian polisaklon interselular yang
dimurnikan PCPP charide dari C. pyrenoidosa pada komposisi yang sama .
I.1.3 Rilis laktat dehidrogenase (LDH)
Efek sitotoksik yang disebabkan oleh ekstrak dalam penelitian ini ditentukan
dengan mengukur LDH pada berbagai konsentrasi (15, 30, 60 dan 120 ug / mL)
(Gambar 1). Ekstrak cyanobacterial menunjukkan sitotoksisitas rendah pada semua
konsentdapepida Garis sel HeLa dan A549 (- 10 - 20% sitotoksisitas). Telah ditemukan
bahwa rendah konsentrasi, efek sitotoksik dari ekstrak pada garis sel MCF7 sangat
rendah dan meningkat seiring dengan konsentrasi (- 5 40 % sitotoksisitas). Seperti
pada MCF7 dan sel Hep3B baris, toksisitas rendah pada konsentrasi rendah. Ekstrak
ditemukan lebih beracun garis sel lain (HT29, C6, FL). C. minutus dan A. oryzae
memiliki efek sitotoksik yang rendah pada sel Vero garis, tetapi sitotoksisitas mereka
tinggi di lainnya ekstrak. Dibandingkan dengan 5FU standar yang sitotoksisitas
diketahui 5 15%, ekstraknya ditemukan memiliki efek sitostatik pada Hela, Sel A549,
MCF7 dan Hep3B. Karena mereka toksisitas rendah dan efek antiproliferatif yang tinggi
ekstrak diperiksa dalam penelitian ini adalah cocok untuk pengembangan obat dan
mereka pantas investigasi farmakologis lebih lanjut.
I.1.4 Korelasi morfologis dengan sitotoksik aktivitas
Perubahan morfologi yang disebabkan oleh tinggi aktivitas antikanker ekstrak G.
carotinosum pada sel C6 dan sitotoksisitas rendah pada sel HeLa dengan kontras fase
terbalik miskroskop.
II.2.1 Analisis spektral konstituen MA
Analisis data spektra serapan untuk beberapa kategori yang diuji menunjukkan
adanya ok mengalir kelompok fenolik dan flavonoid. Absorbansi spektrum untuk
konstituen MA dicatat dalam air (bebas sel media) untuk semua ekstrak untuk
memberikan wawasan pertama dari ponents yang terkandung dalam sampel. Mayoritas
konstituen MA dari semua kategori di atas ditampilkan puncak absorbansi tinggi pada
panjang gelombang antara 220-300 nm, 400-500 nm dan puncak lainnya antara 650-
750 nm. Konstituen MA mantan variasi intensitas absorpsi hibrid yang mencerminkan
karakter mereka- komponen kimia istic. Hanya MA-09, -15, dan -17 dari Cat- egory I,
MA-2, -8, -10, -16, -18, dan -20 dari Kategori II, dan MA-25 hingga MA-31 dari Kategori
III memiliki variabel absorbansi in- tensitas di semua wilayah di atas memuncak pada
sekitar 670 nm. Itu Analisis spektra Kategori III menunjukkan beberapa fitur karakteristik
senyawa tetrapyrroles, khususnya klorin, tempat Soret band muncul sekitar 400 nm dan
band Q antara 630-800 nm.
II.2.2 Aetivitas Antimikroba
Sebanyak 411 ekstrak cyanobacterial disaring untuk mempelajari efek senyawa
intraseluler pada pertumbuhan penghambatan patogen 49 dan 35% bakteri Gram-
negatif dan Gram-positif. masing-masing. Lima strain (Phormidium autumnale
UTEX1580, Myxosarcina sp. CENA240, Gloeotrichia sp. CENA288, Cyanobium sp.
CENA142 dan Cyanobacterium sp. CENA169) mampu menghambat pertumbuhan lebih
dari enam bakteri patogen. persentase ekstrak yang disajikan penghambatan
pertumbuhan untuk setiap bakteri patogen yang diuji bakteri.
II.2.3 Aktivitas Antitumor
Sel tumor diobati dengan ekstrak cyanobacterial pada rentang konsentrasi 0,8
hingga 100 ug ml ', selama 48 jam. Delapan belas dari 59 ekstrak sianobakteri yang
disaring (metanol, DCM dan etanol) menunjukkan aktivitas antikanker yang moderat
atau kuat . Ekstrak ini diperoleh dari strain yang termasuk dalam 11 genera dan lima
pesanan. Sebagian besar ekstrak tidak menunjukkan aktivitas apa pun dalam skrining
dan menyajikan aktivitas penghambatan yang sangat rendah pada limfosit darah
perifer.
II.2.4 Spektrometri Massa
Spektrum MS dari molekul terprotonasi untuk ekstrak sianobakteri
mengkonfirmasi produksi beberapa protease inhibitor, mikrokista dan
cylindrospermopsin.
Dengan menggunakan mode prekursor ion, dimungkinkan untuk memantau
keberadaan molekul-molekul ini. Electrospray ion positif MS / MS spektrum diterapkan
untuk fragmentasi ion untuk mengidentifikasi metabolit cyanobacterial. Ion karakteristik
pada m / z 86. 100 dan 140 diamati, yang berhubungan dengan leusin immonium,
fragmen argal dan asam amino 2-carboxy-6-hydroxyoctahydroindole (Choi), masing-
masing, dan ditemukan dalam molekul aeruginosin Ion yang diamati pada m / z 250 dan
284 mewakili non-atau monoklorinasi juga diidentifikasi.