Jurnal Ilmiah Kimia Organik

Univeristas Hasanuddin
ISOLASI, IDENTIFIKASI, DAN UJI BIOAKTIVITAS METABOLIT SEKUNDER
EKSTRAK n-HEKSANA SPONS Petrosia alfiani DARI KEPULAUAN
BARRANG LOMPO

Muh. Syarif Aqa’id 1), Hanapi Usman2), Hasna Nasir2)

1)
ProgramSarjana Universitas Hasanuddin
2)
Jurusan Kimia Universitas Hasanuddin

ABSTRACT

Sponge is one of the highly prospective marine biota as a source of compounds of natural product that has
pharmacological activity. Isolation and identification of secondary metabolites from n-heksana extract of sponge Petrosia
alfiani from Spermonde Island, South Sulawesi had been done. Isolation techniques were using maceration, partition,
column chromatography vacuum, and gravity column chromatography. Pure compound was obtained as a needle crystals
with a melting point 131-132 °C followed by identification using UV-Vis, FTIR, 1H-NMR, and 13C-NMR. Based on
analysis spectrophotometric, the isolat compound was β-sitosterol. Result of bioactivity test indicate that the compound was
able to inhibit the growth of bacterial S. aureus, E. coli, and the fungus C. albicans. Toxicity tests were using larval shrimp
Artemia salina Leach showed the values of LC50 was 5,69 mg/mL.

Keywords: Sponges Petrossian alfiani, β-sitosterol, Bioactivity

PENDAHULUAN telah ditemukan dan dilaporkan dari genus Petrosia adalah

Berbagai senyawa kimia yang dihasilkan oleh
organisme secara teratur dan bermakna bagi kelangsungan
hidup organisme dimuka bumi ini. Keanekaragaman
molekul organik bahan alam sesungguhnya menyimpan
sejuta misteri yang harus dapat diungkap melalui
penelitian dan kajian yang mendalam. Meskipun upaya
untuk mencari, mengembangkan, dan memanfaatkan
senyawa kimia organik bahan alam telah menjadi tradisi
ilmiah yang cukup panjang, dan telah dirintis sejak abad
ke 17, namun hingga saat ini hasil penelitian di bidang
kimia organik bahan alam masih minim jika dibandingkan
dengan kebutuhan dan tantangannya (Usman, 2005).
Secara geografis, Indonesia memiliki wilayah
perairan yang luas sehingga tentunya mengandung
kekayaan molekul organik bahan alam laut yang
seharusnya dapat dijadikan sebagai objek penelitian dan
pengembangan, mengingat banyaknya manfaat yang dapat
diambil dari senyawa-senyawa metabolit sekunder yang
terkandung di dalamnya terutama senyawa yang memiliki
bioaktivitas tinggi. Salah satu invertebrata laut yang
potensial sebagai penghasil senyawa bioaktif adalah spons.
Telah diketahui beberapa sifat bioaktivitas senyawa yang
terdapat dalam spons, antara lain sifat sitotoksik, antifungi,
penghambat pembelahan sel, antitumor, antivirus,
antiinflamasi, antimikroba dan aktivitas penghambat
enzim “enzyme inhibitor” (Lee dkk., 2001).
Di perairan Sulawesi Selatan, empat spesies
spons telah dilaporkan, yaitu: Halichondria sp.,
Callyspongia sp., Callyspongia pseudoreticulatta, dan
Auletta sp., yang masing-masing memiliki ekstrak
senyawa bioaktif bersifat bakterisida (Ahmad dkk., 1995).
Belakangan ini telah ditemukan spesies baru yaitu
Petrosia alfiani di temukan oleh Voogd dan Van Soest
(2002) yang tersebar di kawasan perairan Kepulauan
Spermonde, Sulawesi Selatan. Beberapa hasil penelitian
senyawa bioaktif dari genus Petrosia telah dilaporkan
mengandung asam kortikatat sebagai antijamur dari spons
Petrosia cortikata (Soediro, 1999), sedangkan data dari
Van Soest dan Braekman (1999) menemukan beberapa
senyawa bioaktif dari famili petrosidae diantaranya
polihidroksilat asetilin, siklik 3-alkilpiperidin, dan
siklopropenasterol. Selain itu beberapa senyawa aktif yang
alkaloid manzamine-A bersifat sitotoksik (El sayed dkk.,
2001). Pada Petrosia sp. ditemukan senyawa poliasetilen,
dideoxypetrosynol A yang menunjukkan aktivitas
antitumor pada sel melanoma kulit manusia (Cho dkk.,
2004). Aktivitas antibakteri juga ditemukan pada hasil
isolasi dari spons laut Petrosia contignata, yaitu,
Taraxeron dan D-homoandrostan (Sutedja dkk., 2005).
Senyawa antibakteri epidoksi sterol dari spons laut
Petrosia nigrans juga telah diisolasi dan dikarakterisasi
dengan nama 5,8-epidioksi-24-etilkolest-6-en-3-ol
(Handayani dkk., 2008).
n-Heksana merupakan pelarut yang bersifat non-
polar. Oleh karena itu n-heksana diharapkan dapat
menarik senyawa-senyawa yang bersifat non-polar pada
spons Petrosia yang belum pernah diteliti sebelumnya.
Berdasarkan informasi yang ada, menunjukkan
bahwa metabolit sekunder yang terkandung dalam spons
Petrosia sangat banyak dan umumnya memiliki
bioaktivitas yang kuat. Oleh sebab itu diperlukan
penelitian yang lebih konperehensif.
Spons Petrosia alfiani adalah spesies yang baru
ditemukan dan endemik di kepulauan Barrang Lompo,
diduga spons Petrosia alfiani mengandung banyak
metabolit sekunder yang berguna dan memungkinkan
ditemukannya metabolit sekunder yang baru.
METODE PENELITIAN
a. Bahan Penelitian
Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian ini
adalah serbuk spons P. alfiani, pelarut yang berkualitas
teknis yang telah didestilasi seperti metanol (CH3OH),
kloroform (CHCl3), etil asetat (EtOAc), dan n-heksana
(C6H14). Pelarut metanol (CH3OH) dan n-heksana
(C6H14) yang berkualitas (p.a) digunakan pada proses
rekristalisasi. Adsorben kolom kromatografi seperti
silika gel 60 GF254 (Merck), G 60 (230-400 Mesh), 60
PF254 (Merck), kieselgel 60 F254 0,25 mm (Merck), plat
KLT, dan FeCl3 5 % sebagai penampak noda. Dimetil
sulfoksida (DMSO), Natrium hipoklorit, bakteri E. coli,
Staphylcocus aureus, jamur Candida albicans, serta
pereaksi Liberman-Burchard.

b. Prosedur Penelitian
1. Penyiapan dan Pengolahan Sampel
Sampel yang telah diambil dari laut kemudian
dipotong-potong lalu dikeringkan selama kurang lebih 1
minggu 2 hari. Sampel yang telah kering kemudian
dipotong-potong menjadi potongan kecil agar nantinya
mudah untuk dihaluskan menggunakan blender. Setelah
halus, sampel kembali dikeringkan selama 3 hari dan berat
kering sampel ditimbang. Berat sampel kering yang
diperoleh sebanyak 969,32 gram.
2. Ekstraksi
Serbuk spons dimaserasi dengan metanol selama 1
x 24 jam pada suhu kamar. Maserasi diulangi dengan
volume metanol yang sama 4 kali. Hasil maserasi
kemudian ditampung untuk diuapkan menggunakan
rotary evaporator. Hasil maserasi kemudian ditampung
untuk diuapkan menggunakan rotary evaporator.
Ekstrak metanol hasil penguapan dipartisi dengan
n-heksana dan selanjutnya diuapkan lagi dengan
menggunakan evaporator. Jumlah ekstrak n-heksana
yang diperoleh dalam proses ekstraksi ini sebanyak
7,4768 g.
Ekstrak metanol diekstraksi cair-cair dengan
pelarut n-heksana kemudian dianalisis dengan KLT untuk
mencari eluen yang dapat memisahkan komponen
senyawa dengan baik.
3. Isolasi
Tahapan isolasi ini dimulai dengan melakukan
kromatografi kolom gravitasi (KKG). Ekstrak yang sudah
kering sebanyak 10 g kemudian diimprek dengan
menggunakan silika gel tipe 7730. Setelah itu barulah
dilakukan KKG untuk memisahkan senyawa menjadi
beberapa fraksi-fraksi. Fraksi 21-30 disebut isolat 1 yang
berpendar pada sinar short wave dan fraksi 31-59 yang
tidak berpendar pada sinar UV short wave.
Fraksi dimurnikan dengan cara rekristalisasi maka
diperoleh isolat 1 murni dengan titik leleh 131-132 °C. Hal
ini dapat dikatakan murni karena jarak titik lelehnya tidak
lebih dari 2 derajat dan berbentuk kristal jarum putih
seperti yang terlihat pada Lampiran 6. Selanjutnya
pengukuran dilakukan menggunakan instrument GC-MS,
FT IR, 1H NMR, dan 13C NMR serta dilanjutkan dengan
pengujian anti sitotoksik, anti jamur, dan anti bakteri.
4. Uji Bioaktivitas Antibakteri (Metode difusi)
Ekstrak uji yang diserap dengan kertas saring
dimasukkan ke dalam silinder atau dimasukkan ke dalam
lubang, dikontakkan dengan media yang telah diinokulasi.
Kemudian setelah diinkubasi, diameter daerah bening
disekitar reservoir diukur. Diameter daerah bening ini
merupakan daerah inhibisi dari ekstrak sampel terhadap
mikroba uji. Untuk menurunkan limit deteksi, sistem
dibiarkan pada suhu rendah selama beberapa jam sebelum
diinokulasi, yaitu untuk memberikan kesempatan kepada
antibiotik untuk berdifusi sebelum mikroba tumbuh.
5. Uji Bioaktivitas Antijamur (Metode difusi)
Ekstrak uji yang diserap dengan kertas saring dimasukkan
ke dalam silinder atau dimasukkan ke dalam lubang,
dikontakkan dengan media yang telah diinokulasi.
Jurnal Ilmiah Kimia Organik
Univeristas Hasanuddin
Kemudian setelah diinkubasi, diameter daerah bening
disekitar reservoir diukur. Diameter daerah bening ini
merupakan daerah inhibisi dari ekstrak sampel terhadap
mikroba uji. Untuk menurunkan limit deteksi, sistem
dibiarkan pada suhu rendah selama beberapa jam sebelum
diinokulasi, yaitu untuk memberikan kesempatan kepada
antibiotik untuk berdifusi sebelum mikroba tumbuh.
6. Uji Toksisitas
Uji bioaktivitas yang dilakukan adalah Brine
Shrimp Lethality Test (BSLT) yang dilakukan terhadap A.
salina, prosedur uji aktivitasnya sebagai berikut:
Pengambilan sekitar 10-17 ekor Artemia salina berumur
48 jam ke dalam 100 mL air laut sintetik dilakukan secara
acak, dimasukan dalam flakton-flakton yang telah diisi
dengan sampel masing-masing 100 µL yang telah
dilakukan pengenceran sebagai berikut: sebanyak 200 µL
sampel 1000 µg/mL dari fraksi kloroform bioaktif yang
diatur konsentrasinya dengan DMSO. Selanjutnya
pengenceran dilakukan dalam mikroplate dengan
konsentrasi yang divariasi (5, 50, 500) µg/mL dan volume
sampel tiap lubang 100 µL secara triplo. Kemudian
diikubasi selama 24 jam pada suhu kamar dan selanjutnya
jumlah larva yang mati dan yang hidup dihitung dengan
bantuan kaca pembesar serta ditentukan nilai LC50
(µg/mL) dengan program Bliss Method (Meyer, dkk.,
1982).
HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Spektrofotometer Fourier Transform Infra Red
Meski spektrum IR spesifik untuk setiap molekul
yang berbeda adalah spektrum IR lebih digunakan untuk
mengidentifikasi keberadaan gugus fungsi yang memiliki
pita spesifik yang menonjol, seperti: C=O, O-H, N-H, C-
O, C=C, C≡N, dan NO2. Data pada Tabel 4 merupakan
hasil pengukuran FTIR dari sampel yang telah
dimurnikan yang dibandingkan dengan spektrum FTIR
senyawa β-sitosterol yang telah ditemukan oleh Rahman
(2014).
Tabel 1. Hasil analisis perbandingan spectrum FTIR
antara senyawa produk dengan senyawa β-
sitosterol (Rahman, 2014)

2. Spektrofotometer Proton dan Karbon Nuclear
Magnetic Resonance (1H-NMR) dan (13C-NMR)
Tabel 2. Hasil Pengukuran spektrum 1H-NMR dan 13
C-
NMR pada sampel
3. Gas Chromatography-Mass Spectrometri (GC-MS)
Hasil identifikasi isolat 1 berdasarkan spektrum MS
(Lampiran 5) menunjukkan Mr isolat isolat 1 = 414 dan
hasil fragmentasi tahap 1 m/z 386, tahap 2 m/z 353, dan
tahap 4 m/z 301 hal tersebut memperkuat bahwa isolat 1
adalah β-sitosterol.
4. Uji Toksisitas
Hasil uji bioaktivitas (toksisitas) menggunakan
larva udang Artemia salina leach ditunjukkan pada Tabel
3. Pengujian diawali dengan mengairasi telur udang
selama 2 × 24 jam.
Tabel 3. Hasil uji toksisitas dengan Artemia salina Leach
Berdasarkan data pada Tabel 3, diketahui bahwa
senyawa isolat berpotensi sebagai anti sitotoksik
disebabkan pada konsentrasi 5 ppm telah terjadi kematian
larva udang dan peningkatan hingga 500 ppm masih
mengalami peningkatan terhadap kematian larva. Tabel 3
menunjukkan rata-rata larva udang yang mati selama 1 x
24 jam, dari data tersebut kemudian dihitung persentase
kematiannya dengan menggunakan rumus:
Jurnal Ilmiah Kimia Organik
Univeristas Hasanuddin
Dengan menggunakan rumus di atas didapatkan
persentase masing-masing konsentrasi berturut-turut
sebesar 0%; 46,7%; 20%. Menentukan log dosis tiap-tiap
kelompok kemudian dibuat grafik dengan persamaan
garis lurus hubungan antara nilai probit vs log
konsentrasi, y = bx + a. Dimana y: angka probit dan x:
log konsentrasi, kemudian ditarik garis dari harga probit
5 (= 50% kematian) menuju sumbu X, didapatkan log
konsentrasi. Log konsentrasi diantilogkan untuk
mendapatkan harga LC50 atau LC50 dapat juga dihitung
dari persamaan garis lurus tersebut dengan memasukkan
nilai 5 (probit dari 50 % kematian hewan coba) sebagai y
sehingga dihasilkan x sebagai nilai log konsentrasi. LC50
dihitung dan diperoleh dari antilog nilai x tersebut.
Berdasarkan pada pernyataan Meyer (1982) bahwa
senyawa dikatakan toksik apabila mortalitas terhadap
Artemia salina Leach yang ditimbulkan memiliki nilai
LC50 < 1000 μg/mL dan sangat toksik apabila ≤ 30
μg/mL. Berdasarkan perhitungan diketahui LC50 sebesar
5,6872 µg/mL (ppm) dan dapat dikategorikan sangat
toksik.
5. Anti Bakteri dan Anti Jamur
Pengujian anti bakteri dilakukan terhadap bakteri
uji berupa E. coli dan S. aureus, sedangkan pengujian
terhadap anti jamur dilakukan terhadap C. albicans.
Campuran bakteri dan sampel dimasukkan ke
dalam inkubator suhu 37 oC selama 1 x 24 jam, lalu
kemudian diukur daya hambat sampel tehadap bakteri.
Pengukuran menggunakan jangka sorong dengan cara
mengukur kedua diameter hambatan dan ditentukan rata-
ratanya.
Berdasarkan Tabel 5 menunjukkan bahwa sampel
pada konsentrasi 100 ppm, 25 ppm, dan 10 ppm mampu
menghambat pertumbuhan bakteri E. coli namun tidak
sebesar diameter zona hambat kontrol positifnya (21,6
mm), dan konsentrasi 50 ppm tidak mampu
menghambat pertumbuhan bakteri E. coli.
Diameter zona hambat sampel pada bakteri S.
aureus adalah 7,3 mm (100 ppm); 9,7 mm (50 ppm); 7,5
mm (25 ppm);7,2 mm (10 ppm); 6,4 mm (kontrol
negatif). Dengan demikian senyawa tersebut mampu
menghambat pertumbuhan bakteri S. aureus walaupun
tidak sebaik kontrol positifnya yaitu sebesar 10,2 mm.
Pada jamur C. albicans dapat disimpulkan bahwa
pada konsentrasi 100 ppm, 50 ppm, 25 ppm, dan 10 ppm
mampu menghambat pertumbuhan jamur C. albicans
namun tidak sebesar diameter zona hambat kontrol
positifnya (26 mm).
KESIMPULAN
Senyawa metabolit sekunder hasil ekstrak n-
heksana dari spons P. alfiani diperoleh senyawa β-
sitosterol sebanyak 39 mg berbentuk kristal jarum
berwarna putih dengan titik leleh 131-132 °C. Hasil uji
bioaktifitas senyawa isolat dari kandungan ekstrak n-
heksana dari spons P. alfiani diperoleh aktif terhadap
terhadap larva udang Artemia salina Leach dengan nilai
LC50 sebesar 5,6872 µg/mL (ppm), dan juga aktif
terhadap bakteri E. Coli, bakteri S. aereus dan terhadap
jamur C. albicans.

DAFTAR PUSTAKA
Ahmad, T., E., Suryati, and Muliani, 1995, Spons
bioactive screening for bactericide in shrimp
culture, IFRJ, 1 (1), 1-10.
Amir, I., 1991, Fauna Spons (Porifera) dari Terumbu
Karang Genteng Besar Pulau-Pulau Seribu,
Oseanologi di Indonesia, (24), 41 – 54.
Amir, I., dan Budiyanto, 1996, Mengenal Spons Laut
(Demospongiae) Secara Umum, Oseana, 21
(2),15 – 31.
Aoki, S., Naka, Y., Itoh, T., Furukawa, T., Rachmat, R.,
Akiyama, S., and Kobayashi, M., 2002,
Lembehsterols A and B, Novel Sulfated Sterols
Inhibiting Thymidine Phosphorylase, from the
Marine Spons Petrosia strongylata, Chem.
Pharm. Bull., 50 (6) 827—830.
Ashour, M. A. A., 2006, Structure Elucidation of
Bioactive Marine Natural Products Using Modern
Methods of Spectroscopy, Universitas Gadjah
Mada, Yogyakarta.
Bergquist, P. R., 1978, Spons, Hutchinson, London.
Braekman, J. C., and Daloze, D., 1986, Chemical
defence in sponss, Pure & Appl. Chem., 58 (3),
357-364.
Cimino, G., de Giulio, A., de Rosa, S., di Marzo, V.,
1989, Tetrahedron Lett, 30, 3563–3566.
Cimino, G., de Giulio, A., de Rosa, S., di Marzo, V.,
1990, J. Nat. Prod, 53, 345-353.
Cho, H. J., S. Ja Bae, N. D. Kim, J. H. Jung and Y.H.
Cho., 2004, Induction of Apoptosis by
Dideoxypetrosynol A, A Polyasetylene from Spons
Petrosia sp., in Human Skin Melanoma
Cells, International Journal of Molecular
Medicine, 23 (8) 1091-1096.
El Sayed, K. L., Kelly, M., Kara, U. K., Ang, K. H.,
Katsuyama, I., Dunbar, D.C., Khan, A. A.,
and Hamann, M.T., 2001, New Manzamine
Alkaloids with Potent Activity against Infectious
Disease, J. Am. Chem. Soc., 123, 1804-1808.
Fusetani, N., Shiragaki, T., Matsunaga, S., Hashimoto,
K., 1987, Tetrahedron Lett 28, 4313–4314.
Garson, M.J., 1994, The Biosynthesis of Secondary
Metabolits: Why is Important. In: Sponss in
Timeand Space, pp: 428-429, edited by R.W.M.
van Soest, Th. M.G. Van Kempen and
J.CBraekman (eds.)., Proceeding 4th International
Porifera Conggress, Amsterdam/Netherland.
Guo, Y., Gavagnin, M., Trivellone, E., Cimino, G, 1994,
Tetrahedron, 50, 13261– 13268.
Jurnal Ilmiah Kimia Organik
Univeristas Hasanuddin
Handayani, D., Sayuti, N., dan Dachriyanus, 2008,
Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Antibakteri
Epidioksi Sterol dari Spons Laut Petrosia
Nigrans, Asal Sumatra Barat, Prosiding Seminar
Nasional Sains Dan Teknologi-II
2008 Universitas Lampung, 17-18 November
2008.
Harrison, F. W., and De Vos, L., 1991, Porifera, Di
dalam: Harrison FW, Westfall
JA(ed.). Microscopic Anatomy of
Invertebrates.Volume 2. Placozoa,
Porifera, Cnidaria, and Ctenophora.Wiley-
Liss. A John Wiley & Sons, Inc., Publication.
New York, Chicester, Brisbane, Toronto,
Singapore, 28 –89.
Higa, T., Tanaka,J., Kitamura, A., Koyama, T.,
Takahashi, M., and Uchida, T., 1994,
Bioactive compounds from marine sponss, Pure
& Appl. Chern., 66 (10/11), 2227-2230.
Hosettman, K., 1991, Methods in Plant Biochemistry,
Academic Press, New York, 6.
Ireland, C. M., Molinski, T. F., Roll, D. M., Zabriskie, T.
M., McKee, T. C., Swersey, J. C., and
Foster, M. P., 1989, Natural Product Peptides
from Marine Organisms, Di dalam Scheuer PJ
(ed.), Bioorganic Marine Chemistry, Springer –
Verlag, 3, 1-27.
Isaacs, S., Kashman, Y., Loya, S., Hizi, A., Loya, Y.,
1993, Tetrahedron, 49, 10435–10438.
Kimura, J., Ishizuka E., Nakao Y. Yoshida W.Y,
Scheuer, P.J., and Borges, K. 1998. Isolation
of 1- methylherbipoline Salt of Halisulfate-1 and
of Suvanine as Serine Protease Inhibitors
from Marine Spons, Coscinoderma Mathewsi, J.
Nat Prod 61 (28), 248- 250.
Kobayashi, M., dan Rachmaniar R., 1999, Overview of
Marine Natural Product Chemistry, Makalah
disajikan dalam Seminar Bioteknologi Kelautan
Indonesia I, Lembaga Ilmu Pengetahuan
Indonesia Jakarta, Jakarta 14 Oktober.
Kunitz, M., and J.H. Northrop, 1936, Isolation from
Beef Pancreas of Crystalline trypsinogen
trypsin, a trypsin, and an Inhibitor- Trypsin
Compound, J.Gen. Physio, 19 (31), 991 – 1007.
Lee KY, Lee HJ, Lee HK., 2001, Microbial Symbiosis in
Marine Sponss, The Journal of Microbiology, 29
(4), 254-264.
Li, H., Matsunaga, S., Fusetani, N., 1994, J. Nat. Prod.,
57, 1464–1467.
Muliani, Suryati E., Tompo A., Parenrengi A., Rosmiati,
1998, Isolasi Bioaktif Bunga Karang Sebagai
Fungisida pada Benih Udang Windu Penaeus
monodon, Jurnal Penelitian Perikanan Indonesia,
4 (2) 19-24.

Muniarsih T., dan Rachmaniar R., 1999, Isolasi
Substansi Bioaktif Antimikroba dari Spons Asal
Pulau Pari Kepulauan Seribu. Makalah disajikan
dalam Seminar Bioteknologi Kelautan Indonesia
I, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia Jakarta,
Jakarta 14 Oktober.
Munro M. H. G., Luibrand R. T., and Blunt J. W., 1989,
The Search for Antivaral and Anticancer
Compounds from Marine Organisms. Di dalam
Scheuer PJ (ed.), Bioorganic Marine
Chemistry, Springer -Verlag, 1, 94-176.
Murti, Y. B., 2006, Isolation and structure elucidation of
bioactive secondary metabolites from sponss
collected at Ujungpandang and in the Bali Sea,
Indonesia, Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Nakagawa, N., Endo, M., Tanaka, N., and Pei, G. L.,
1984, Tetrahedron Letters, 3227—3230.
O’Keefe, B. R., Erim,T., Beutler, J.A., Cardellina, J.H.,
Gulakowski, R.W.J., Krepps, B. L.,
Mcmahon, J. B., Sowder, R. C., Johnson, D. G.,
Buckheit, R.W.J., Halliday, S., And Boyd,
M. R., 1998, Isolation and Characterization of
adociavirin, a Novel HIV- Inhibitory Protein from
the Spons Adocia sp FEBS Lett, 431 (44), 85– 90.
Parenrengi A., Suryati E., Dalfiah, dan Rosmiati, 1999,
Studi Toksisitas Ekstrak Spons Auletta sp.
Callyspongia sp., dan C. Pseudoreticulata
terhadap Nener Bandeng (Chanos chanos), Jurnal
Penelitian Perikanan Indonesia 5 (4).
Pronzato, R., Bavestrello, G., Cerrano, C., Magnino, G.,
Manconi, R., Pantelis, J., Sara, A., and Sidri M.,
1999, Spons Farming in the Mediterranian Sea
New Perspectives, Memoir of the Queensland
Museum, 44, 485 - 491.
Rachmaniar, R., 1996, Penelitian Produk Alam Laut
Skreening Substansi Bioaktif, Laporan Penelitian
Tahun Anggaran 1995/1996, Lembaga Ilmu
Pengetahuan Indonesia, Puslitbang Oseanologi.
Rahman, A., 2014, Isolasi, Identifikasi dan Uji
Bioaktivitas Metabolit Sekunder Ekstrak
kloroform spons Petrosia alfiani dari Kepulauan
Barang Lompo, Jurusan Kimia Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Hasanuddin, Makassar.
Rasyid, A., 2009, Senyawa-senyawa Bioaktif dari Spons,
Oseana, 34 (2), 25-32.
Reinheimer, G., 1991, Aquatic Microbiology, 4 th Ed,
John Wiley and Sons, Chichester and New York.
Romihmohtarto, K., dan Juwana, S., 1999, Biologi
Laut,Ilmu Pengetahuan tentang Biota Laut,
Pusat Penelitian dan Pengembangan Oseanologi-
LIPI Jakarta, 115 – 128.
Jurnal Ilmiah Kimia Organik
Univeristas Hasanuddin
Ruppert, E. E., and Barnes, R. D., 1991, Invertebrates
Zoology, Sixth Edition, Saunders College
Publishing, Philadelphia, New York, Chicago,
San Fransisco, Montreal, Toronto, London,
Sidney, Tokyo, 68 – 91.
Sandoval, I. T., Davis, R. A., Bugni, T. S., Concepcion,
G. P., Harper, M. K., and Ireland, C. M.,
(tanpa tahun), Cytotoxic Isoquinoline Quinones
from Spons of the Genus Petrosia
Setyowati, E. P., Jenie, U. A., Sudarsono, Kardono, B.,
Rahmat, R., dan Meiyanto, E., 2007,
Isolation of Cytotoxic Substance From Kaliapsis
Spons, Majalah Farmasi Indonesia, 18 (4), 183-
189.
Soediro, I.S., 1999, Produk Alam Hayati Bahari dan
Prospek Pemanfaatannya di Bidang Kesehatan
dan Kosmetika, Makalah disajikan dalam
Seminar Bioteknologi Kelautan Indonesia I,
Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia Jakarta,
Jakarta 14 Oktober.
Soest, R. W. M., Van, and Braekman, J. C., 1999,
Chemosystematics of Porifera: A Review,
Memoir of the Queensland Museum, 44, 569 -
589.
Suparno, 2005, kajian bioaktif spons laut
(forifera:Demospongiae) suatu peluang alternatif
Pemanfaatan ekosistem karang Indonesia Dalam
bidang farmasi, Sekolah Pasca Sarjana, IPB-
Bogor.
Suriani, 2006, Isolasi, Karakterisasi, dan Uji Bioaktivitas
Metabolit Sekunder Spons Callyspongia sp.,
Tesis Tidak Diterbitkan, jurusan Kimia FMIPA
Universitas Hasanuddin, Makassar.
Suryati, E., Parenrengi, A., dan Rosmiati, 2000,
Penapisan Serta Analisis Kandungan Bioaktif
Spons Clathria sp. yang efektif
sebagaiAntibiofouling pada teritif (Balanus
amphitrit), Jurnal Penelitian
Perikanan Indonesia, 5 (3).
Sutedja, L., Udin, L. Z., dan Manupputy, A., 2005,
Antimicrobial Activity of the Spons Petrosia
contignata Thiele, Sistem Informasi Dokumen
Kegiatan Pusat Penelitian Kimia LIPI,
Bandung.
Usman, H., Hakim, E. H., Achmad, S.A., Syah, Y. M.,
Harlim, T., Jalaluddin, M. N. 2005. 2’,4’-
Dihidroksi-3’,5’,6’-Trimetoksi Calkon suatu
Senyawa Antitumor dari Kulit Batang Tumbuhan
Cryptocarya costata (Lauraceae). Jurnal
Matemaika dan Sains ITB. 10 (3): 97-100.
Voogd, N. J., De., and Van Soest, R. W. M., 2002,
Indonesian Sponss of the Genus Petrosia, Zool.
Med. Leidan 76.
Warren, L., 1982, Encyclopedia of Marine Invertebrates,
Di dalam: Walls JG (ed.), 15 – 28.
Jurnal Ilmiah Kimia Organik
Univeristas Hasanuddin
 Jurnal Ilmiah Biokimia
Univeristas Hasanuddin