PROSEDUR PEMERIKSAAN ENTAMOEBA HISTOLYTICA

DENGAN METODE SEDIMENTASI

Oleh

NAMA KELOMPOK :

1. Ni Kadek Ayu Sintya Dewi (P07134019053)

2. Kade Ayuningtias (P07134019058)
3. Ni Putu Miranti Dewi (P07134019068)
4. Ni Putu Wulan Danaswari (P07134019072)
5. Ni Made Thalia Kusuma Berliana S (P07134019074)
6. Ni Komang Yuni Suartini (P07134019075)
7. Ni Kadek Indah Purnama Sari (P07134019077)
8. Ni Komang Kristina Yanti (P07134019088)
9. Ni Made Ayu Satya Antari (P07134019090)
10. Dewa Ayu Mirah Deswika R (P07134019092)
11. Ni Komang Lia Sari (P07134019093)
12. Ni Komang Ayu Satya Dewi (P07134019099)
13. Ni Made Dwinsty Sangryani (P07134019103)

KEMENTRIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN DENPASAR

PRODI DIII JURUSAN TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIS

TAHUN 2021
 TEKNIK KONSENTRASI — FORMALIN-ETHYL ACETATE

A. Rasional Klinis
Prosedur konsentrat tinja dengan metode sedimentasi meningkatkan
kemungkinan ditemukannya parasit dan sel telurnya ketika jumlah yang sedikit pada
spesimen tinja. Ini adalah teknik rutin dan sering digunakan bersama dengan metode
pengangkatan yang sangat berguna dalam mendeteksi sel telur parasit, tetapi metode
etil asetat adalah paling umum digunakan untuk memusatkan telur dan kista. Sampel
terkonsentrasi tunggal dari pasien yang terinfeksi terkadang cukup untuk mendeteksi
cacing (cacing). Seringkali perlu menggunakan beberapa spesimen untuk mendeteksi
organisme protozoa karena kesulitan dalam tahap penemuan yang agak mudah
diidentifikasi (Gambar 12-6).

Peringatan Keamanan:
Kewaspadaan standar harus diterapkan saat menangani sampel tinja dan jaringan lain
serta cairan tubuh yang diperiksa untuk parasit. Bahaya biologis dan bahaya kimia
mungkin ada. Spesimen masih berpotensi menularkan setelah penambahan fikatif,
karena telur cacing dan kista protozoa tahan terhadap PVA.

Metode konsentrasi diperlukan di sebagian besar pemeriksaan karena jumlah

organisme yang ada mungkin sedikit. Beberapa kit yang telah dikemas tersedia untuk
menyiapkan sampel tinja dalam proses kedua dari pemeriksaan lengkap spesimen
tinja. Namun, kit yang disiapkan secara komersial ini lebih mahal daripada
menggunakan reagen dan pasokan curah. Kit ini paling sering digunakan untuk
 kenyamanan, kemudahan pembersihan permukaan lingkungan, dan substitusi untuk
beberapa campuran formalin-eter yang mudah menguap. Dimungkinkan untuk
menggunakan spesimen feses yang segar dan yang diawetkan saat melakukan
prosedur pemekatan.
Karena proses konsentrasi meningkatkan kemungkinan menemukan parasit,
ini adalah langkah kedua setelah pemasangan basah awal yang akan dilakukan dalam
analisis lengkap sampel tinja, dan merupakan persiapan untuk melakukan teknik
sedimentasi atau pengapungan. Prosedur konsentrasi berfungsi untuk meningkatkan
kepadatan parasit dari spesimen menjadi sejumlah kecil cairan dari mana sebagian
besar kotoran juga dikeluarkan, sehingga dapat melihat dengan jelas isi tabung
konsentrasi. Perlu dicatat bahwa trofozoit protozoa dihancurkan selama proses ini,
tetapi kista protozoa dan larva serta telur cacing sering ditemukan saat menggunakan
teknik ini.
Seringkali perlu untuk menggunakan prosedur sedimentasi dan flotasi untuk
melakukan teknik konsentrasi yang dirancang untuk meningkatkan jumlah organisme
atau sel telur yang mungkin ada. Kedua metode tersebut pada dasarnya mencapai
tujuan yang sama tetapi yang satu mungkin lebih berguna daripada yang lain
tergantung pada spesies parasit atau parasit yang ada. Kedua metode ini didasarkan
pada perbedaan antara berat jenis, yang paling tepat digambarkan sebagai kepadatan
larutan berdasarkan bahan terlarut, untuk mengkonsolidasikan organisme atau sel telur
ke area yang lebih kecil. Pada prosedur sedimentasi, organisme dan sel telur
dipadatkan ke dalam dasar tabung sentrifus berbentuk kerucut. Metode flotasi
berfungsi untuk menangguhkan organisme dan sel telur di bagian atas larutan dengan
kepadatan tinggi. Metode sedimentasi cenderung memberikan keanekaragaman
organisme yang lebih besar dan berbagai tahapannya serta telurnya dan memusatkan
feses dalam jumlah besar ke dalam sekitar 2 gram sedimen. Metode flotasi terutama
menguntungkan untuk memusatkan sel telur, tetapi tahapan dan bentuk lain juga dapat
ditemukan dengan metode ini.

B. Peralatan dan Perlengkapan

1. Sarung tangan pelindung dan gaun sekali pakai
2. Tabung centrifuge kaca berbentuk kerucut 15 mL
3. Tongkat aplikator untuk mengambil dan mencampur bahan garam dan feses
4. 10% formalin
 5. Saline untuk mencuci sampel
6. Metode untuk menyaring tinja seperti kain kasa bedah yang dibasahi yang
akan memungkinkan ovum dan parasit untuk melewatinya tetapi akan
mempertahankan kotoran yang besar (perawatan harus dilakukan pada sampel
mukoid, di mana ookista dan mikrosporidia mungkin terperangkap di dalam
mukus).
7. Centrifuge dengan penahan yang akan menampung tabung centrifuge besar
8. Spesimen feses segar dikumpulkan dalam wadah yang sesuai bebas dari
kontaminan termasuk urin
9. Etil asetat
10. Tongkat aplikator berujung kapas
11. Noda yodium
12. Slide mikroskop standar
13. Kacamata penutup 22-mm
14. Parafilm atau tutup karet berukuran sesuai dengan tabung sentrifugasi

C. Langkah Prosedural
1. Dapatkan standar 1 3 3-in. kaca objek mikroskop dan tempatkan satu tetes
garam normal pada salah satu ujung kaca objek dan setetes yodium
(pengenceran iodium Lugol 1: 5) di sisi lainnya.
2. Tambahkan ½ hingga 1 sendok teh spesies segar ke dalam wadah, seperti piring
kaca, dan gunakan tongkat aplikator untuk mencampur sampel tinja dengan 10
hingga 15 mL formalin 10%.
3. Saring campuran melalui dua lapis kotak kain kasa yang dibasahi ke dalam
tabung sentrifus kaca berukuran 15 mL. Penggunaan kain kasa yang lebih tebal
dapat menjebak ookista atau mikrosporidia.
Pencegahan Klinis:
Jika sampel sangat berlendir, sampel tidak boleh disaring tetapi harus disentrifugasi
selama 10 menit pada 1500 rpm dan kemudian ditempatkan pada slide dengan
setetes noda yodium dan kaca penutup.

4. Sentrifugasi suspensi dengan kecepatan 1500 rpm selama 10 menit, kemudian

tuangkan supernatan dengan hati-hati ke dalam wadah yang berisi disinfektan.
Jika sampel masih mengandung kotoran feses dalam jumlah besar, susun
 kembali sampel dalam 10 hingga 15 mL larutan garam atau formalin dan cairan
penurun panas. Prosedur ini dapat diulangi jika ada kotoran berlebih.
5. Tahan kembali sampel yang telah dibilas (langkah 4) dalam 7 hingga 8 mL
formalin dan 4- hingga 5-mL etil asetat (langkah ini tidak diperlukan jika hanya
sedikit kotoran yang ada setelah langkah sebelumnya).
6. Tutupi tabung dengan Parafi lm atau tutup karet dan kocok campuran dengan
kuat setidaknya selama 30 detik.
7. Lepaskan Parafi lm atau tutup dengan hati-hati untuk menghindari cipratan ke
wajah atau mata.
8. Nyalakan suspensi dengan kecepatan 1500 rpm selama 10 menit.
 DAFTAR PUSTAKA

Ridley John W. 2012. PARASITOLOGY FOR MEDICAL AND CLINICAL LABORATORY

PROFESSIONALS. Delmar, Cengage Learning. United States of America. Diakses
pada tanggal 11 Januari 2021 pada pukul 13.05 WITA.