Soal Soal HPLC Kelompok 21 TK s1c 2015
Soal Soal HPLC Kelompok 21 TK s1c 2015
. PLHAN /"GANA
1. Salah satu jenis kromatografi dimana fase gerak berupa cairan dan menggunakan pompa tekanan
tinggi/high pressure untuk peningkatan efisiensi pemisahan disebut....
a. HPLC
. HLPC
. Kromatografi gas
d. Kromatografi kertas
. Kromatografi lapis tipis
2. Dibaah
Dibaah ini !ang merupakan
merupakan instrumen"inst
instrumen"instrumerumenn HPLC#
HPLC# kecuali..
kecuali....
..
a. Kolom
b. $eser%oir
c. Pompa
d. &njektor
. $#ala
'. Dibaah
Dibaah ini
ini !ang
!ang merupak
merupakan an jenis"jenis
jenis"jenis HPLC adalah....
adalah....
a. Krom
Kromat atog
ogra
rafi
fi (dso
(dsorb rbsi
si
b. Kromatografi penukar ion
c. Krom
Kromat atog
ogra
rafi
fi pasan
pasanga gann ion
d. Krom
Kromat atog
ogra
rafi
fi afin
afinita
itass
. Sma $a&
). Karakt
Karakteri
eristik
stik dete
detekto
ktorr !ang benar
benar adal
adalah.
ah....
...
a. Dapat memasukkan
memasukkan sampel sampel ke dalam
dalam kolom dalam bentukbentuk sesempit
sesempit mungkin
mungkin
b. *udah digunakan
. 4i'$al
4i'$al #a$' diha4il+
diha4il+a$ a$ &a$di$
&a$di$' ' l&4 d$'a$
d$'a$ +!$4$
+!$4$&a4
&a4ii 4!l ada
ada +i4a&a$
+i4a&a$ #a$' la4
la4
(+i4a&a$ di$ami4 li$i&).
d. Kebe
Keberurula
lang
nganan tin
tingg
ggii
e. Dapat
Dapat beke
bekerja
rja alaup
alaupun un ada
ada teka
tekanan
nan balik
balik
+. Prinsip pemisahan
pemisahan KCK, didasarkandidasarkan pada perbedaan
perbedaan....
....
a. -arna at
. P!la&ia4
c. Kelarutan
d. au at
e. Kekentalan
0. Dibaah
Dibaah ini urutan
urutan skala
skala polaritas
polaritas !ang benar adalah....
adalah....
a. '!l!$'a$
'!l!$'a$ fl!&!a
fl!&!a&!$&!$ '!l!$'a$
'!l!$'a$ hid&!+a&
hid&!+a&!$!$ 4$#aa
4$#aa &hal!'$a
&hal!'$a4i 4i '!l!$'a$ &
&
'!l!$'a$ 4& '!l!$'a$ +!$ '!l!$'a$ al+!h!l '!l!$'a$ a4am
b. golongan fluorocarbon 1 golongan hidrocarbon 1 sen!aa terhalogenasi 1 golongan ester 1
golongan eter 1 golongan keton 1 golongan alkohol 1 golongan asam.
c. golong
golonganan hidrocar
hidrocarbon bon 1 golong
golonganan fluoroca
fluorocarbo
rbon
n 1 sen!aa
sen!aa terhalog
terhalogena
enasi
si 1 golon
golongan
gan ester
ester 1
golongan eter 1 golongan keton 1 golongan alkohol 1 golongan asam.
d. golong
golonganan fluoroca
fluorocarborbon n 1 golong
golongan an hidrocabo
hidrocabon1n1 sen!aa
sen!aa terhal
terhaloge
ogenas
nasii 1 golon
golongan
gan ester 1
golongan keton1 golongan alkohol 1 golongan asam.
e. golong
golonganan fluoroc
fluorocarbarbonon 1 golong
golonganan hidrokar
hidrokarbon
bon 1 sen!aa
sen!aa terhalo
terhalogen
genasi
asi 1 golong
golongan
an eter 1
golongan keton 1 golongan alkohol 1 golongan asam1 golongan ester.
. Keunggulan
Keunggulan KCK,KCK, dibanding
dibandingkan kan dengan
dengan kromatogr
kromatografi
afi lainn!a
lainn!a adalah kecuali.
kecuali....
...
a. Simultan
b. Sampel sedikit
c. Cepat
d. Saml a$#a+
e. ,eliti
3. Dibaah ini !ang merupakan pers!aratan fase gerak HPLC adalah kecuali....
a. 4at cair harus bertindak sebagai pelarut !ang baik untuk cuplikan !ang akan dianalisis.
b. 4at cair harus murni sekali untuk menghindarkan masukn!a kotoran !ang dapat mengganggu
interpretasi kromatografi.
c. 4at air harus jernih sekali untuk menghindarkan pen!umbatan pada kolom.
d. 4at cair harus mudah diperoleh# murah# tidak mudah terbakar# dan tidak beracun.
. a ai& #a$' di'$a+a$ ha&4 +$al.
5. HPLC dengan kombinasi antara fase diam polar dan fase gerak non"polar disebut dengan HPLC
fase....
a. Diam
b. Lurus
. N!&mal
d. ergerak
e. ,erbalik
67. Pompa !ang digunakan sebagai instrumen HPLC adalah....
a. Pompa reciprocating
b. Pompa displacemen
c. Pompa pneumatic
d. a dan b benar
. 4ma $a&
66. (pa keunggulan utama dari HPLC....
a. $esolusi rendah
b. Lambat
. S$4ii9ia4 d+!& i$''i
d. Kolom !ang tidak dapat digunakan lagi
e. ,idak Lues
62. Komponen dasar HPLC# kecuali....
a. 8luen
b. Pompa
c. &njektor
d. !$!+&!ma!&
e. detektor
6'. (da ) jenis detektor pada HPLC# kecuali....
a. d+!& i$f&a&d
b. detektor fluoresensi
c. detektor ultra%iolet
d. detektor indeks refraksi
e. detektor diode arra!
6). *etode detektor HPLC !ang umum dipakai 9 mudah untuk menjelaskan !aitu....
a. Penggunaan detektor fluoresensi
. $''$aa$ d+!& 4&aa$ l&a-9i!l (U;)
c. penggunaan detektor indeks refraksi
d. penggunaan detektordiode arra!
e. ( dan C benar
6+. Sampel !ang dapat dianalisis dengan HPLC adalah kecuali....
a. (sam amino
. A4am $+la
c. Hidrokarbon aromatik
d. Protein
e. (sam organik
60. :ang termasuk Ciri"ciri detektor !ang baik dibaah ini adalah....
a. memiliki sensitifitas !ang rendah
b. gangguan ;noise< !ang rendah#
c. a+ &4!$ $d+ 4hi$''a &'a$$' +aa$ ali&
d. stabilitas dan keterulangan tinggi
e. aktu respon !ang panjang
6. Sampel !ang dapat dianalisa dengan HPLC kecuali....
a. (nion anorganik
b. Hidrokarbon aromatik
c. L!'am
d. Sirup jagung
e. (nion organik
63. 2 fasa !ang terdapat pada penggunaan HPLC adalah=
a. >asa berdiri dan >asa duduk
b. Fa4a '&a+ da$ Fa4a diam
c. >asa mobile dan >asa gerak
d. >asa diam dan >asa duduk
e. >asa mobile dan fasa diam
65. erikut ini urutan alat dalam proses kerja HPLC adalah=
a. S!l9$ &4&9!i& < Pm < Saml $=i!$ < HPLC < !& <P&!44i$'
U$i a$d i4la#
. Sol%ent reser%oir ? Sample &njection ? Pump ? HPLC tube ? Detector ?Processing
@nit and Displa!
. Sol%ent reser%oir ? Sample &njection ? HPLC tube ? Pump ? Detector ?Processing
@nit and Displa!
d. Sol%ent reser%oir ? Detector ? Pump ? HPLC tube ? Sample &njection ?Processing
@nit and Displa!
. Sol%ent reser%oir ? Detector ? Pump ? Sample &njection? HPLC tube ?Processing @nit
and Displa!
27. :ang dimaksud dengan eluen pada HPLC adalah=
a. >ase Stasioner
b. Fa4 !il
c. (bsorban
d. Panjang gelombang
e. ku%et
26. Sifat umum fase gerak pada HPLC adalah# kecuali =
a. *urni
b. /&a&$a
c. Sesuai dengan detector
d. Aiskositas rendah
e. >aktor penentu keberhasilan pemisahan
22. Pern!ataan berikut !ang benar mengenai HPLC adalah....
a. HPLC daa dia+ai $+ 4a'ia$ 4a& 4$#aa &!! m!l+l i$''i. Slai$
i HPLC
b. HPLC biasan!a tidak dapat dilakukan pada suhu kamar
c. Dalam HPLC# untuk beberapa sen!aa# aktu retensi akan sangat ber%ariasi dan tidak
bergantung pada komposisi !ang tepat dari pelarut dan temperatur pada kolom
d. HPLC merupakan jenis kromatografi gas
e. 4at"at dengan kepolaran berbeda# !aitu antara sedikit polar sampai polar tidak dapat
dipisahkan dengan HPLC.
2'. erikut ini urutan dari bagian"bagian HPLC....
a. $eser%oir B pump B column B injector B detector B recorder
b. "4&9!i& > m > i$=!& > !lm$ >d!& > &!&d&
c. $eser%oir B pump B column B detector " injector B recorder
d. $eser%oir B column B pump B injector B detector B recorder
e. $eser%oir"column"injector"pump"recorder"detector
2). Penggunaan tekanan tinggi untuk mengirim fasa mobil ke dalam kolom merupakan ciri"ciri....
a. C
b. HPLC
c. ((S
d. spektrostroskopi @A"A&S
e. inframerah
2+. erikut ini pern!ataan untuk injector pada HPLC# kecuali....
a. &njector digunakan untuk memasukkan sampel.
b. Pada alat HPLC biasan!a dilengkapi dengan pen!ampel otomatis (automatic sampler).
c. &njektor dapat bekerja tekanan balik
d. Pen!ampel otomatis dapat diprogram untuk mereaksikan atau menginjeksikan sampel.
e. $=+!& ida+ daa +&=a ada +a$a$ ali+
20. eberapa sifat fase gerak !ang digunakan pada HPLC adalah# kecuali....
a. *urni# tidak terdapat kontaminan
b. ,idak bereaksi dengan adah ;packing<
c. mili+i 9i4i+!4ia4 #a$' i$''i
d. Lues
e. Sesuai dengan detector
2. Dasar pemisahan LLC dari HPLC adalah....
a. (bsorbsi
b. (dsorbsi
. Pa&i4i
d. pertukaran ion filtrasi gel
e. (bsorban
23. Dasar pemisahan LSC dari HPLC adalah....
a. (bsorbsi
b. (bsorbansi
c. Partisi
d. &+a&a$ i!$ fil&a4i 'l
e. kepolaran
25. erdasarkan kekuatan / kepolaran fasa gerakn!a HPLC dibagi menjadi
a. >ase gerak dan fase diam
b. >ase mobil dan fase stasioner
. Fa4 $!&mal da$ fa4 &ali+
d. >ase terbalik dan fase stasioner
e. >ase diam dan fasa stasioner
'7. (da tiga tipe dasar injektor !ang dapat digunakan#kecuali....
a. S#&i$'
b. Loop %al%e
c. Septum
d. Stop B flo
e. Semua benar
@ntul men!elesaikan soal nomor '6 dan '2 lihat gambar di baah iniE
'6. (pa nama bagian dari HPLC no 6 dan ) !ang di
tunjukkan oleh gambar
a. Detektor dan injektor
b. &njektor dan recorder
. "4&9!i& da$ d+!&
d. &njektor dan pump
e. Pump dan column
'2. (pa nama bagian dari HPLC no 2 dan + !ang di tunjukkan oleh gambar
a. Detektor dan injektor
b. $eser%oir dan detektor
c. $eser%oir dan pum
d. $=+!& da$ m
e. Pump dan column
''. @ntuk beberapa sen!aa# aktu retensi akan sangat ber%ariasi dan bergantung pada# kecuali....
a. ,ekanan !ang digunakan
b. ,emperatur pada kolom
. ,la&a$
d. Komposisi !ang tepat pada pelarut
e. a dan b salah
'). agian HPLC !ang berfungsi untuk merekam data adalah....
a. &njektor
b. Column
c. Detektor
d. $eser%oir
. "+!&d&
'+. Pada analisis HPLC# Fpuncak"puncak kromatogramG menunjukkan....
a. ugus fungsi
b. S$#aa
c. Konsentrasi
d. $umus sen!aa
e. Kelarutan
'0. ika pemisahan meliputi suatu partisi sederhana antara fase diam cair dan fase gerak cair juga#
maka proses ini disebut =
a. +&!ma!'&afi a&i4i
b. kromatografi cair
c. kromatografi flotasi
d. Kromatografi ionic
e. Kromatografi adsorbsi
'. Hasil percobaan pada analisis HPLC akan dicetak dalam bentuk kromatogram !ang terlihat oleh
komputer pada instrument....
a. Pompa
b. &njeksi
c. Kolom
d. Detector
e. "!&d&
'3. @ntuk melaksanakan pemisahan secara kromatografi kolom ada ' cara# !aitu =
a. Destilasi# ekstraksi dan presipitasi
b. (nalisi frontal# penukar ion# dan presipitasi
. A$ali4i f&!$al? a$ali4i4 l4i da$ &'4&a$
d. ,eknik ring o%en# one melting dan penukar ion
e. Dialisis# flotasi dan presipitasi
'5. Dalam HPLC# fasa gerak selain berfungsi membaa komponen"komponen campuran menuju
detector# juga....
a. fasa gerak dapat berinteraksi dengan gas pembaa
b. fasa gerak dapat berinteraksi dengan fasa diam
c. fasa gerak dapat berinteraksi dengan fasa terbalik
d. fa4a '&a+ daa &i$&a+4i d$'a$ 4!l-4!l
e. fasa gerak dapat berinteraksi dengan eluen
)7. $esolusi !ang tinggi# aktu analisis pendek dan kepekaan di daerah ppm merupakan cirri"cii dari...
a. Kromatografi cair"padat
b. Kromatografi gas"cair
c. Kromatografi cair
d. ,&!ma!'&afi 'a4
e. Kromatografi padat
)6. @ntuk memperoleh analisis kromatografi !ang sempurna diperlukan pemilihan kondisi. Hal ini
dilakukan agar =
a. Luas peak semakin besar
b. umlah peak semakin ban!ak
c. @a+ &$4i$#a id+ &lal 4a&
d. -aktu tetesnsin!a besar
e. Luas peak semakin kecil
)2. erdasarkan kekuatan / kepolaran fasa gerakn!a HPLC dibagi menjadi....
a. fa4 $!&mal da$ fa4 &ali+
b. fase diam dan fase terbalik
c. fase normal dan fase gerak
d. fase polar dan fase non"polar
e. fase diam dan fase polar
)'. erikut merupakan at !ang dapat dianalisis menggunakan HPLC# kecuali=
a. Protein
b. Lma+
c. Karbohidrat
d. Aitamin
)). Pada kromatografi# Diffusi 8dd! timbul karena adan!a =
a. P&daa$ ali&a$ fa4a '&a+ dalam +!l!m
. Perbedaan aliran fasa gerak dalam detector
. Perbedaan aliran fasa diam dalam kolom
d. Perbedaan aliran fasa diam dalam detector
. Perbedaan aliran fasa gerak dalam injektor
)+. Keunggulan dari analisis High Pressure LiIuid Chrom ;HPLC< adalah# kecualiJ
a. $esolusi tinggi
b. Cepat
c. idal $+ a &&a m!l+l &$dah da$ &i!$i+
d. teliti
e. sensiti%itas detector tinggi
)0. erapa tekanan !g didukung pada alat HPLC J
a. 6777 atm
b. ) atm
c. 67 atm
d. %00 am
e. 7#) atm
). *anakah pelarut !g lebih polar untuk fase mobile pada alat HPLC....
a. a4am a4a
. aseton
. heksana
d. benene
. min!ak
)3. Komponen dasar peralatan HPLC terdiri dari# kecuali....
a. eluen/ fase mobil
b. detector
c. rekorder
d. injektor
e. flam
)5. (lat HPLC sangat berguna untuk industri....
a. &ndustri min!ak bumi
b. i$d4&i fa&ma4i da$ 4i4ida
c. industr! makanan
d. industr! tekstile
e. industri karet
+7. Dibaah ini adalah keunggulan utama analisis HPLC# kecuali....
a. $esolusi tinggi
b. Cepat
c. ,eliti
d. Lama
e. Lues
+6. fase stationer ;diam< pada HPLC berupa...
a. cair
b. padat
c. gas
d. gas dan cair
. ai& da$ ada
+2. Komponen peralatan HPLC berupa....
a. pompa# injector# dan kolom
b. eluen# kolom# dan detector
c. recorder dan kolom
d. l$? !ma? i$=!&? +!l!m? d!&? da$ &!&d&
. !ala# ku%et# monokromator# detector# recorder
+'. Dibaah ini adalah jenis"jenis detector pada HPLC# kecuali....
a. detector ultra%iolet
. d!& a4!&4i
c. detector fluoresensi
d. detector indeks refraksi
e. detector diode arra!
+). -aktu !ang dibutuhkan oleh sen!aa untuk bergerak melalui kolom menuju detector# disebut....
a. a+ &$4i
b. aktu absorpsi
c. aktu injeksi
d. aktu adsorpsi
e. aktu resensi
++. :ang termasuk bagian kromatografi adalah...
a. GC da$ HPLC
b. &$ dan HPLC
c. HPLS
d. @A A&S
e. &nframerah
+0. Pemakaian HPLC pada kromatografi eksklusi dilakukan dengan kolom panjang# tujuan utama
kerjan!a# !aitu....
a. Pemisahan gas bertitik didih rendah seperti oksigen# karbon monoksida dan karbon dioksida.
b. Sen!aa organik !ang mudah menguap seperti hidrokarbon dan ester.
c. *enentukan konsentrasi at !ang dianalisa
d. P$$a$ &a m!l+l !lim& da$ ma4alah-ma4alah i!+imia.
e. (nalisis min!ak mentah dan min!ak atsiri dalam buah.
+. Komponen dasar peralatan HPLC terdiri dari# kecuali....
a. "4&9!i&
b. *onokromator
c. Detector
d. $ekorder
e. &njektor
+3. >ungsi dari Gradien Controller/Solvent Reservoir pada HPLC adalah....
a. @ntuk elusi gradien
b. @ntuk mendeteksi komponen !ang keluar dari kolom
c. U$+ m$am$' fa4a '&a+ #a$' a+a$ diali&+a$ +dalam +!l!m d$'a$ a$a$
!ma
d. @ntuk merekam data dan juga dilengkapi dengan pengolah data (data station) !ang
dihubungkan dengan computer
e. @ntuk menampilkan hasil analisa
+5. Pern!ataan berikut !ang benar mengenai HPLC adalahJ
a. aa dia+ai $+ 4a'ia$ 4a& 4$#aa &!! m!l+l i$''i. Slai$ i HPLC
daa dia+ai $+ 4$#aa a$!&'a$i+
b. HPLC biasan!a tidak dapat dilakukan pada suhu kamar
c. Dalam HPLC# untuk beberapa sen!aa# aktu retensi akan sangat ber%ariasi dan tidak
bergantung pada komposisi !ang tepat dari pelarut dan temperatur pada kolom
d. 4at"at dengan kepolaran berbeda# !aitu antara sedikit polar sampai polar tidak dapat
dipisahkan dengan HPLC
e. *emiliki fasa mobile dan stationer
07. Penggunaan tekanan tinggi untuk mengirim fasa mobil kedalam kolom merupakan ciri"ciri....
a. C
. HPLC
c. ((S
d. Spektroskopi &$
e. Spektroskopi @A
06. Data dibaah ini
• $esolusi tinggi
• Cepat
• Sensiti%itas detektor tinggi
• Kolom !ang dapat digunakan kembali
• &deal untuk at berberat molekul tinggi dan berionik
Data diatas merupakan keuntungan dari....
a. &$
b. ((S
c. C
d. HPLC
e. Spektrofotometer
02. Dibaah ini enis"jenis detektor pada HPLC# kecuali....
a. Detektor @ltra%iolet ;@AD<
b. Detektor >luoresensi ;>D<
c. Detektor indeks refraksi ;$&D<
d. Detektor Diode (rra! ;D(D<
. +!& df&a+4i
0'. Dibaah ini !ang merupakan Komponen dasar peralatan HPLC#kecuali....
a. pompa
b. injector
c. Kolom
d. Detector
. &
0). erikut merupakan hal"hal !ang mempengaruhi aktu retensi# kecuali...
a. ,emperatur pada kolom
b. ,ekanan !ang digunakan
c. Komposisi !ang tepat dari pelarut
d. Kondisi dari fase diam
. Pa$=a$' 'l!ma$'
0+. erikut merupakan sifat umum fase gerak pada HPLC
i. *urni# tidak terdapat kontaminan
ii. Sesuai dengan injector
iii. ereaksi dengan adah ;packing<
i%. *elarutkan sampel
%. Aiskositas tinggi
%i. *emudahkan sample reco%er!
:ang termasuk kedalam sifat umum dari fase gerak pada HPLC adalah...
a. i# ii# dan iii
b. i# ii# dan i%
. i? i9? da$ 9i
d. ii# i%# dan %i
e. ii# iii# dan %
00. (lat !ang digunakan untuk memisahkan sampel dari komponen"komponenn!a pada HPLC
disebut...
a. C!l!m$
b. Detector
c. $ecorder
d. &njector
e. $eser%oir
0. Pada proses kromatografi berdasarkan perbedaan distribusi sen!aa pen!usun campuran dengan
fasa# !aitu fasa=.
a. Diam
b. 4ai!$& da$ '&a+
c. gas
d. gas dan padat
e. terbalik
03. Pemisahan sampel terjadi di dalam=.
a. Detektor
b. tempat injeksi
c. +!l!m
d. resolusi
e. recorder
05. HPLC termasuk kromatografi=.
a. as
b. Padat
c. as"cair
d. Cai&
e. Larutan
7. Luas peak men!atakan...
a. ,!$4$&a4i
. Aolume
. *assa
d. Panjang
. Luas
. SSA
1. Bla4+a$ aa #a$' dima+4d d$'a$ HPLC
HPLC atau KCK, merupakan teknik pemisahan !ang diterima secara luas untuk analisis dan
pemurnian sen!aa tertentu dalam suatu sampel pada sejumlah bidang# antara lain J farmasi
lingkungan bioteknologi polimer dan industri" industri makanan. Penggunaan HPLC ; High
Performance LiIuid Chromatograph!<# dalam bidang kefarmasian !aitu HPLC *ethod for the
(nal!sis of Paracetamol# Cafeine and Dip!rone ;*etode HPLC @ntuk (nalisis Parasetamol#
Kafein dan (ntalgin<. HPLC merupakan satu teknik kromatografi cair B cair !ang dapat
digunakan baik untuk keperluan pemisahan maupun analisis kuantitatif. (nalisis kuantitatif
dengan teknik HPLC didasarkan kepada pengukuran luas atau area puncak analit dalam
kromatogram# dibandingkan dengan luas atau area larutan standar.
2. Bla4+a$ &i$4i +&=a HPLCD
Prinsip kerja dari HPLC adalah suatu tekhnik !ang mana solut atau at terlarut terpisah
perbedaan kecepatan elusi# dikarenakan solut"solut ini meleati suatu kolom kromatografi.
Pemisahan solut"solut ini diatur oleh distribusi solut dalam fase gerak dan fase diam.
3. S+a$ +'$aa$ mm da&i HPLCD
Kegunaan umum HPLC adalah untuk J pemisahan sejumlah sen!aa organik# anorganik#
maupun sen!aa biologis analisis ketidakmurnian ;impurities< analisis sen!aa"sen!aa
tidak menguap ;non"%olatil< penentuan molekul"molekul netral# ionik# maupun itt er ion
isolasi dan pemurnian sen!aa pemisahan sen!aa"sen!aa !ang strukturn!a hampir sama
pemisahan sen!aa"sen!aa dalam jumlah sekelumit ;trace element<# dalam jumlah ban!ak
dan dalam skala proses industri. HPLC merupakan metode !ang tidak dekstruktif dan dapat
digunakan baik untuk analisis kualitatif maupun kuantitatif.
%. S+a$ i$4&m$ da&i HPLCD
(1) -adah fase gerak ;$eser%oir<
(2) Pompa
(3) ,empat &njeksi
(%) Kolom
(5) Detector
5. /alah a'a$ 44$a$ ala HPLCD
20. S+a$ da$ =la4+a$ =$i4 HPLC &da4a&+a$ +!la&a$ fa4 diam da$ fa4
'&a+D
a< HPLC fase normalJ HPLC dengan kombinasi antara fase diam polar dan fase gerak non"
polar. >ase diam !ang digunakan seperti silica# alumina# atau trietilenaglikol !ang dilapiskan
pada partikel silica. Sedangkan fase gerak !ang digunakan adalah heksana atau i"propileter.
b< HPLC fase terbalikJ HPLC dengan kombinasi antara fase diam non"polar dan fase gerak
polar. >ase gerak !ang digunakan seperti air# methanol# atau asetinitril.
21. Aa-aa 4a=a 4#a&a !ma #a$' i4a di'$a+a$ 4a'ai i$4&m$ HPLC
Pompa !ang digunakan harus inert terhadap fase gerak. ahan !ang umum dipakai untuk
pompa adalah gelas# baja tahan karat# ,eflon# dan batu nilam. Pompa !ang digunakan
sebaikn!a mampu memberikan tekanan sampai +777 psi dan mampu mengalirkan fase gerak
dengan kecepatan alir ' mL/menit. @ntuk tujuan preparatif# pompa !ang digunakan harus
mampu mengalirkan fase gerak dengan kecepatan 27 mL/ menit.
22. Aa f$'4i !ma dalam i$4&m$ HPLC
,ujuan penggunaan pompa atau sistem penghantaran fase gerak adalah untuk menjamin
proses penghantaran fase gerak berlangsung secara tepat# reprodusibel# konstan# dan bebas
dari gangguan.
23. Bla4+a$ 3 ah =$i4 !ma #a$' di'$a+a$ 4a'ai i$4&m$ HPLCD
a< Pompa reciprocating
Pompa ini terdiri dari ruangan kecil tempat pelarut !ang dipompa dengan cara gerakan piston
mundur"maju !ang dijalankan oleh motor. Piston berupa gelas dan berkontak langsung
dengan pelarut. Ketika piston mundur maka bola gelas baah terangkat dan pelarut masuk#
sebalikn!a ketika piston maju maka bola baah menutup saluran pelarut dan pelarut !ang
telah berada di ruang pompa didorong masuk ke dalam kolom.
b< Pompa displacemen
Pompa ini men!erupai s!ringe ;alat suntik< terdiri dari tabung !ang dilengkapi pendorong
!ang digerakkan oleh motor. Pompa ini juga menghasilkan aliran !ang cenderung tidak
bergantung pada tekanan balik kolom dan %iskositas pelarut.
c< Pompa pneumatic
Dalam pompa ini pelarut didorong oleh gas bertekanan tinggi. Pompa jenis ini murah dan
bebas pulsa. (kan tetapi mempun!a keterbatasan kapasitas dan tekanan !ang dihasilkan
;12777 psi< serta kecepatan alir bergantung pada %iskositas pelarut dan takanan balik kolom.
2%. alam i$4&m$ HPLC &daa ma i$=+4i? =la4+a$ 3 i da4a& i$=+!&
#a$' daa di'$a+a$D
a< Stop">loJ (liran dihentikan# injeksi dilakukan pada kinerja atmosfir# sistem tertutup# dan
aliran dilanjutkan lagi. ,eknik ini bisa digunakan karena difusi di dalam cairan kecil clan
resolusi tidak dipengaruhi
b< SeptumJ Septum !ang digunakan pada HPLC sama dengan !ang digunakan pada
Kromtografi as. &njektor ini dapat digunakan pada kinerja sampai 07"7 atmosfir. ,etapi
septum ini tidak tahan dengan semua pelarut"pelarut Kromatografi Cair. Partikel kecil dari
septum !ang terko!ak ;akibat jarum injektor< dapat men!ebabkan pen!umbatan.
c< Loop Aal%eJ ,ipe injektor ini umumn!a digunakan untuk menginjeksi %olume lebih besar
dari 67 T dan dilakukan dengan cara automatis ;dengan menggunakan adaptor !ang sesuai#
%olume !ang lebih kecil dapat diinjeksifan secara manual<. Pada posisi LQ(D# sampel diisi
kedalam loop pada kinerja atmosfir# bila A(LA8 difungsikan# maka sampel akan masuk ke
dalam kolom.
25. S+a$ 4#a&a-4#a&a i$=+!& #a$' ai+ $+ di'$a+a$ 4a'ai i$4&m$
HPLCD
S!arat" s!arat injektor !ang baik J
a< Dapat memasukkan sampel ke dalam kolom dalam bentuk sesempit mungkin
b< *udah digunakan
c< Keberulangan tinggi
d< Dapat bekerja alaupun ada tekanan balik
26. S+a$ $'l!m!+a$ d+!& 4a'ai i$4&m$ HPLCD
Detektor pada HPLC dikelompokkan menjadi 2 golongan !aituJ detektor uni%ersal ;!ang
mampu mendeteksi at secara umum# tidak bersifat spesifik# dan tidak bersifat selektif<
seperti detektor indeks bias dan detektor spektrometri massa dan golongan detektor !ang
spesifik !ang han!a akan mendeteksi analit secara spesifik dan selektif# seperti detektor @A"
Ais# detektor fluoresensi# dan elektrokimia.
27. S+a$ +a&a+&i4i+ idal da&i d+!&D
a. mempun!ai respon terhadap solut !ang cepat dan reprodusibel
b. mempun!ai sensitifitas !ang tinggi# !akni mampu mendeteksi solut pada kadar !ang
sangat kecil
c. stabil dalam pengopersiann!a
d. mempun!ai sel %olume !ang kecil sehingga mampu meminimalkan pelebaran pita
e. signal !ang dihasilkan berbanding lurus dengan konsentrasi solut pada kisaran !ang luas
;kisaran dinamis linier<
f. tidak peka terhadap perubahan suhu dan kecepatan alir fase gerak.
28. Bla4+a$ &i$4i +&=a HPLC dalam m$'a$ali4a 4a&a +aliiaifD
Pada proses kualitatif cara !ang paling umum untuk mengidentifikasi adalah dengan melihat
$etention time ;$,<. Peak !ang mempun!ai $, !ang sama dengan standard umumn!a adalah
sebagai peak milik analat. Selain melihat $, hal lain !ang perlu dilihat adalah spektrum 'D
dari signal kromatogram. 4at !ang sama akan mempun!ai spektrum 'D !ang juga sama.
Sehingga jika spektrum 'D antara dua at berbeda# maka kedua at tersebut juga dipastikan
adalah at !ang berlainan# meskipun me miliki $, !ang sama.
2E. Bla4+a$ &i$4i +&=a HPLC dalam m$'a$ali4a 4a&a +a$iaifD
*elalui analisa kuantitatif dapat diketahui kadar komponen !ang dianalisis di dalam sampel.
:ang berperan dalam proses separasi pada s!stem HPLC adalah kolom. (da kolom !ang
digunakan untuk beberapa jenis analisa# misaln!a kolom C63 !ang dapat digunakan untuk
analisa carotenoid# protein# lo%astatin# dan sebagain!a. amun ada juga kolom !ang khusus
dibuat untuk tujuan analisa tertentu# seperti kolom 4orbaM carboh!drat ;(gilent< !ang khusus
digunakan untuk analisa karbohidrat ;mono"# di"# pol!sakarida<. Keberhasilan proses separasi
sangat dipengaruhi oleh pemilihan jenis kolom dan juga fasa mobil.
30. S+a$ 'a$''a$-'a$''a$ #a$' &=adi ada a$ali4a HPLCD
angguan !ang terjadi dibedakan menjadi dua !aitu J gangguan sistem garis dasar dan
gangguan bentuk puncak. angguan sistem garis dasar ;baseline< !ang mungkin timbul antara
lain J noise ;derau<# drift ;mela!ang<# spiking ;berpaku<# ander ;men!impang< dan shift
;bergeser<. Sedangkan gangguan bentuk puncak ;peak shape< !ang mungkin timbul !aitu
JPuncak lebih kecil dari !ang diharapkan# ,ailing ;puncak<# >ronting ;puncak mengandung<#
Puncak berubah bentuk ;cigar top# round top# flat top<# Puncak membelah ;split<# Puncak
negatif.