ISOLASI MIKROORGANISME PADA TANAH SAWI (Brassica juncea) DENGAN

MENGGUNAKAN METODE POTATO DEXTROSE AGAR (PDA) DAN MEDIA

STANDAR

MICROORGANISM ISOLATION ON SAWI (Brassica juncea) SOIL USING THE

POTATO DEXTROSE METHOD (PDA) AND STANDARD MEDIA
Silva Rizky Putra
201910200311084
E-mail : silvarizkyputra2gmail.com
Jurusan Agroteknologi, Fakultas Pertanian – Peternakan, Universitas Muhammadiyah Malang
(University of Muhammadiyah Malang), Jl. Raya Tlogomas No. 246, Malang, Jawa Timur, Indonesia

TUJUAN gram, lalu memasukkan tanah rhizosfer sawi 1

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk
mengisolasi mikroorganisme dari campurannya
sehingga didapat kultur murni pada tanah TPA
limbah sayur.
BAHAN DAN METODE
2.1 Tempat dan Waktu
Praktikum ini dilaksanakan di
Laboratorium Agroteknologi 1, pada hari
Jum’at, 13 November 2020 pada pukul 13.00-
14.40 WIB.
2.2 Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam praktikum ini
adalah pipet tetes, pipet ukur, tabung reaksi,
cawan petri, spirtus, erlenmeyer, timbangan
analitik, plastik wrap, alat tulis, alat
dukumentasi dan alat tulis.
Bahan yang digunakan dalam praktikum ini
adalah PDA , tanah rhizosfer sawi (Brassica
chinensis var. Parachinensis), garam fisiologi,
dan kertas label.
2.3 Metode Kerja
Menyiapkan alat dan bahan, selanjutnya
menimbang tanah rhizosfer sawi sebanyak 1
gram ke dalam tabung reaksi dan tambahkan
garam fisiologis 9 ml untuk melakukan teknik
pengenceran, kemudian menghomogenkan
tabung reaksi pertama, setelah itu mengambil 1
ml larutan dari tabung reaksi pertama,
kemudian pindahkan pada tabung kedua lalu
menambahkan 9 ml garam fisiologis dan
menghomogenkan, berikutnya mengambil 1 ml
larutan dari tabung reaksi kedua, kemudian
pindah pada tabung reaksi ketiga lalu
menambahkan 9 ml garam fisiologis dan
menghomogenkan, seperti perlakuan tadi
mengambil 1 ml larutan dari tabung reaksi
ketiga, kemudian pindah pada tabung reaksi
keempat lalu menambahkan 9 ml garam
fisiologis dan menghomogenkan, setelah itu
mengambil cawan petri dan menuangkan media
PDA yang telah disterilkan, lalu menuang
larutan pada tabung reaksi keempat kedalam
media PDA dan menutup cawan petri dengan
plastik wrap, berikutnya menghomogenkan
cawan petri dengan di putar pola angka 8 dan
terakhir mendiamkan selama 1x 24 jam untuk
hasil pengamatan.

HASIL DAN PEMBAHASAN

a. Hasil
Tabel 1. Hasil pengamatan dari isolasi mikroorganisme pada rhizosfer tanah sawi
(Brassica chinensis var. Parachinensis)

Sampel/
Pengamatan Dokumentasi Pengamatan Koloni
Tanah
Jumlah Warna Bentuk Tepi Permukaan

Rhizosfer
Tanah Putih
Sawi 12 Ireegular Serrate Flat
keruh
b. Pembahasan
Menurut Nendissa (2013) Isolasi bakteri
adalah sebuah proses yang dilakukan untuk
mendapatkan biakan murni, yaitu koloni bakteri
yang tumbuh terpisah dan bentuk koloninya
seragam. Isolasi bakteri adalah proses
memisahkan bakteri dari habitatnya di alam dan
menumbuhkannya dalam sebagai biakan murni
dalam medium baru.
Berdasarkan data yang didapat dari
pengamatan praktikum, didapatkan hasil isolasi
kurang lebih 12 bercak koloni yang diduga
sebagai bakteri berwarna bening, agak keruh.
Tetapi pengamatan tersebut gagal dan tidak ada
bakteri yang tumbuh pada PDA tersebut.
Beberapa penyebab PDA tersebut tidak
ditumbuhi bakteri ataupun jamur karena
kemungkinan media tanah rhizosfer sawi
tersebut tidak memenuhi semua unsur hara yang
diperlukan untuk pertumbuhan dan
perkembangan bakteri, ataupun tekanan
osmosis, tegangan permukaan dan pH yang
sesuai dengan kebutuhan bakteri. Menurut BSN
(2013) mikroba tumbuh baik pada pH sekitar
netral dan pH 4,6 – 7,0 merupakan kondisi
optimum untuk pertumbuhan bakteri pada suatu
media PDA dan kemungkinan terbesar bakteri
tidak tumbuh pada PDA tersebut adalah pH nya
tidak mencakup ataupun ada kesalahan waktu
praktikan menghomogenkan larutan tanah
rhizosfer sawi ke dalam PDA. Tiap tanaman
mengeluarkan eksudat akar dengan komposisi
yang berbeda-beda sehingga berperan juga
sebagai penyeleksi mikroba dan meningkatkan
perkembangan mikroba tertentu dan
menghambat perkembangan mikroba lainnya
(Hartana, 2014).
Media Potato Dextrose Agar (PDA)
merupakan media yang umum digunakan untuk
menganalisis jenis dan jumlah kapang pada
produk makanan. Masalah yang sering dihadapi
dengan penggunaan media ini adalah seringnya
terjadi kegagalan dalam pengamatan morfologi
dan penghitungan jumlah koloni kapang atau
bakteri akibat tumbuhnya koloni yang
menyebar sehingga menghambat atau menutupi
koloni yang lain. Dalam hasil table diatas
terlhiat bahwa terdapat 12 bercak putih seperti
kontaminasi bakteri, tetapi bercak tersebut
merupakan tanda bahwa media tidak terdapat
kontam sama sekali setelah diisolasi selama 2
sampai 3 hari (Henson, 2011). Mikroorganisme
dapat ditumbuhkan dalam keadaan cair atau
padat dalam keadaan cair mikroorganisme
menunjukan ciri pertumbuhan tersendiri
pertumbuhan adalah pertambahan teratur semua
komponen suatu organisme dengan demikian
pertambahan ukuran yang diakibatkan oleh
bertambahnya air atau karena deposit lipid
bukan merupakan pertumbuhan sejati (Abdel-
Hamid,2010).
DAFTAR PUSTAKA
Abdel-Hamid, M.S., A. F. Elbaz., A. A. Ragab.,
H. A. Hamza., dan K. A. El Halafawy.
2010. Identification and Characterization
of Azotobacter chroococcum Isolated
from some Egyptian Soils. Journal of
Argricultural Chemistry and
Biotechnology. Vol. 1 No. 2 Hal. 93-104.
BSN. 2013. SNI 2332.7.2009. Cara Uji
Mikrobiologi – Bag 7: Perhitungan
Kapang dan Khamir pada Produk
Perikanan. Badan Standardisasi Nasional,
Jakarta
Henson, O.E. 2011. Dichloran as an inhibitor
of mold spreading in fungal plating
media : Effects on colony diameter and
enumeration. Appl. Environ. Microbiol.
42(4): 656–660.
Hartana, S. N. 2014. Keanekaragaman
Cendawan yang diisolasi Lokasi
Perkandangan Ayam. Institut Pertanian
Bogor. Bogor, Jawa Barat
Nendissa, J.S. 2013. Pengaruh Penambahan
Pediococcus acidilactici F11 Sebagai
Kultur Starter terhadap Kualitas Ikan
Asin (inasua) Bae (Lutjanus
malabaricus). Ekosains. Vol. 2 No.1 Hal.
39-46