Preeklamsia (PE) adalah penyakit utama pada kehamilan yang ditandai dengan hipertensi

dan proteinuria, biasanya muncul selama trimester kedua atau ketiga kehamilan. Secara klasik,

PE didefinisikan oleh hipertensi (> 140/90 mmHg tekanan darah sistolik / diastolik) dan

proteinuria (> 300 mg / 24 jam). Dalam kasus yang parah, tubuh dapat mengembangkan

komorbiditas seperti perubahan hati (sindrom HELLP), edema, vaskular diseminata koagulasi

(DIC), dan eklamsia, terutama yang menargetkan otak (edema serebral). Untuk janin, komplikasi

utama yang terkait dengan preeklamsia termasuk hambatan pertumbuhan yang menyebabkan

berat badan lahir rendah, prematuritas, dan kematian janin.

Selama dekade terakhir, kemajuan substansial telah dicapai dalam memahami

patofisiologi dari PE. Ini berasal dari cacat implantasi plasenta ke dinding rahim ibu, gangguan

renovasi arteri uterina spiral oleh trofoblas ekstravillous (EVT) yang menyebabkan penurunan

perfusi plasenta. Akibatnya, aliran darah arteri yang berulang menghasilkan iskemia / reperfusi,

sehingga menciptakan lingkungan yang mendukung untuk mengembangkan stres oksidatif.

Kerusakan oksidatif di plasenta menyebabkan peradangan, apoptosis, dan pelepasan puing-puing

seluler ke dalam sirkulasi ibu, bersama dengan beberapa faktor anti-angiogenik, seperti tirosin

seperti fms yang larut kinase-1 (sFlt1) dan Endoglin terlarut (sEng), sitokin, dan oksidan. Faktor

turunan plasenta ini bekerja pada endotel vaskular ibu, menginduksi stres oksidatif dan

merangsang produksi dan sekresi sitokin pro-inflamasi, serta senyawa vasoaktif yang dapat

menyebabkan disfungsi endotel sistemik yang ditandai dengan peradangan dan penyempitan

pembuluh darah. Stres oksidatif tampaknya menjadi komponen sentral dari disfungsi plasenta

dan endotel yang merupakan etiologi Preeklamsia.

Stres oksidatif (OS) didefinisikan sebagai "ketidakseimbangan antara oksidan dan

antioksidan” yang menyebabkan gangguan pensinyalan dan kontrol redoks atau kerusakan
molekuler. Stres oksdatif melibatkan reaktif spesies oksigen (ROS), yang paling umum adalah

superoksida (O2•-), hidrogen peroksida (H2O2), dan radikal hidroksil (•HO). Proses paralel

dikenal sebagai stres nitrosatif (NS), yang didefinisikan sebagai ketidakseimbangan rasio

nitrosant dengan antioksidan. Stres nitrosatif pada prinsipnya melibatkan spesies nitrogen reaktif

(RNS) oksida nitrat (•NO) dan peroksinitrit (ONOO−). Dalam tubuh manusia produksi ROS dan

RNS merupakan fenomena fisiologis yang berperan penting dalam metabolisme dan aktivitas sel.

Stres oksidatif dan stress nitrosatif terjadi bila ada ketidakseimbangan antara pembentukan

oksidasi zat dan molekul antioksidan yang mendorong untuk terjadinya detoksifikasi. Karena

stres oksidatif dan stress nitrosatif sangat tinggi sifat reaktif, ROS dan RNS dapat menyebabkan

kerusakan struktural dan fisiologis pada DNA, RNA, protein, dan lipid, termasuk lipid yang

terikat membran sel. Kompartemen seluler atau jalur metabolisme yang berbeda dapat

menghasilkan ROS dan RNS. Mitokondria, retikulum endoplasma, dan membran inti

menghasilkan (O2• - ) anion disebabkan oleh oksidasi otomatis dari komponen rantai transpor

elektron (ETC). ROS juga diproduksi sebagai konsekuensi dari metabolisme asam arakidonat

oleh Cyclooxygenase 2 (COX-2), Lipoxygenases, Xanthine Oxydase (XO), dan Sitokrom P450.

Nicotin Amide Dinucléotide PHosphate oxidases (NOX) adalah sumber penting lain dari ROS.

NOX menghasilkan O2• - dengan mentransfer electron dari NADPH di dalam sel melintasi

membran dan mengurangi oksigen molekuler. Sintase NO dapat menghasilkan O2•- dan H2O2,

khususnya jika konsentrasi substratnya, L-arginin, atau kofaktornya, tetrahydrobiopterin (BH4)

dalam kadar rendah. Selain itu, ketika produksi ROS intraseluler meningkat (terutama O2•-),

•NO dapat bereaksi dengan ROS membentuk peroksinitrit (ONOO−), penyebab utama stres

nitrosatif.
 Stres oksidatif juga dapat terjadi akibat kurangnya antioksidan. Ada dua kategori

antioksidan: enzimatik dan non-enzimatik. Antioksidan enzimatik yang paling relevan adalah

superoksida dismutase (SOD), hemoksigenase (HO-1), katalase (CAT), glutathione peroksidase

(GPx), dan thioredoxin (TRX). SOD mengkatalisis reaksi redoks O2• - menjadi O2 dan H2O2.

H2O2 cepat dinetralkan oleh CAT, yang kemudian dipecah menjadi H2O dan O2. GPx, enzim

yang bergantung pada mikronutrien selenium (Se), yang memainkan peran penting dalam

mereduksi peroksida hidrogen dan lipid. Enzim ini menggunakan glutathione (GSH) sebagai

kofaktor untuk mereduksi H2O2, menghasilkan pembentukan glutathione teroksidasi (GSSG).

TRX adalah enzim oksidoreduktase yang memfasilitasi reduksi lainnya protein melalui

pembentukan jembatan disulfida antara residu sistein. GSH, vitamin C dan E, Nicotinamide

adenine dinucleotide (NADH), dan Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH)

adalah semua antioksidan non-enzimatik. GSH menetralkan ROS (terutama H2O2) dan

memainkannya berperan dalam menjaga vitamin C dan E dalam bentuk tereduksi. Di antara

fungsi lainnya, NADPH adalah terlibat dalam perlindungan terhadap ROS dengan

memungkinkan regenerasi GSH. Karena stress oksidatif dapat terjadi di kompartemen seluler

yang berbeda dan melalui mekanisme yang berbeda, kapasitas antioksidan memblokir baik ROS

atau RNS dan sangat bergantung pada produksi lokal (atau impor) dan sifat dari stres oksidatif.

Di antara berbagai efeknya pada fisiologi sel, OS mengarah pada regulasi faktor transkripsi

seperti AP-1, NRF2, FoxO, CREB, HSF1, HIF-1α, TP53, NF-κB, Notch, SP1, dan CREB-1. Ini,

hanya NRF2 dan FoxO yang mengontrol ekspresi beberapa gen yang menjadikan enzim yang

dibutuhkan untuk detoksifikasi molekul pengoksidasi.

Sistem Enzimatis dan Seluler Utama yang Terlibat dalam Generasi Radikal Bebas

Spesies radikal (ROS dan RNS) memainkan peran sentral dalam fisiologi sel sebagai

pembawa pesan kedua dari beberapa jalur pensinyalan. Selain itu, spesies radikal memainkan

peran utama dalam inisiasi plasenta dan disfungsi endotel. Sumber utama spesies radikal dalam

hal ini adalah NO sintase (NOS), NADPH oksidase (NOX), elektron mitokondria rantai transpor

(ETC), dan xantin oksidase (XO).

Sintase Nitrit Oksida

Nitrit oksida (•NO) disintesis dari L-arginine di bawah aksi Nitric Oxide Synthetases

(NOS), yang mengkatalisis oksidasi L-arginin menjadi • NO dan L-sitrulin. Setidaknya ada 3

NOS protein yang dikodekan oleh gen yang berbeda. Neuronal nitric oxide synthase (nNOS),

yang merupakan konstitutif diekspresikan dalam neuron tertentu di otak, sintase oksida nitrat

yang dapat diinduksi (iNOS) yang ekspresinya biasanya diinduksi pada keadaan penyakit

inflamasi dan NOS endotel (eNOS) yang dikenal sebagai NOS konstitutif. NOS adalah enzim

yang dibentuk oleh kompleks homodimerik yang mencakup domain dengan aktivitas reduktase

dan satu dengan aktivitas oksidase. Produksi •NO hasil dari suksesi dari dua reaksi: yang

pertama menggunakan molekul O2 untuk menghidroksilasi L-arginin menjadi Nω-hidroksil-L-

arginin. Yang kedua melibatkan oksidasi NG-hidroksil-L-arginin, sehingga membentuk •NO dan

L-sitrulin. Kedua reaksi tersebut membutuhkan keberadaan kofaktor tetrahidrobiopterin (BH4).

Saat O2 di intraseluler •- produksi meningkat, •NO juga dapat bereaksi dengannya membentuk

ONOO−. Ini adalah oksidan yang kuat yang dapat memodifikasi protein dan lipid dengan nitrasi.

Selain itu, peroksinitrit mengoksidasi BH4, menghasilkan molekul aktif BH2. Dengan tidak

adanya BH4, eNOS bergeser dari homodimerik ke bentuk monomerik, sehingga menjadi tidak

berpasangan. Dalam konformasi bebas ini, ia tidak mensintesis •NO, tetapi menghasilkan O2 • -.
Di ekstraseluler, pelepasan eNOS ini memiliki dua konsekuensi penting: hilangnya vasodilatasi

karena hilangnya •NO, dan peningkatan stres oksidatif karena pembentukan O2•-. Akibatnya,

setiap disfungsi dalam regulasi aktivitas eNOS dapat menyebabkan konsekuensi metabolisme

yang parah. Pengendalian aktivitas eNOS melibatkan mekanisme regulasi kompleks yang

mencakup interaksi penghambatan dengan Caveolin (CAV1), modifikasi pasca-translasi

(myristoylation, palmitoylation, dan fosforilasi), kompartementalisasi sub-seluler, dan respon

stimulasi untuk peningkatan kadar kalsium intraseluler.

Peran NADPH sebagai sumber ROS

NOX adalah keluarga protein transmembran yang mentransfer elektron dari NADPH

melintasi membran menjadi O2, sehingga membentuk O2• -. Tujuh anggota terdiri dari keluarga

NOX, Anggota keluarga NOX paradigmatik adalah NOX2, yang membutuhkan protein sitosol

p47phox, p67phox, dan p40phox untuk aktivitas, serta p22phox yang terkait dengan membran,

dan gp91phox (sekarang bernama NOX2). Sebaliknya, NOX4 hanya membutuhkan protein

membran p22phox, dan aktivitasnya tampaknya konstitutif dan diatur pada tingkat ekspresi.

NOX1, 2, 4, dan 5 semuanya diekspresikan dalam jaringan pembuluh darah tetapi dengan tingkat

ekspresi variabel antara jenis sel. NOX4 adalah yang paling melimpah pembuluh darah, terutama

di ECs. Berbagai penelitian secara konsisten menunjukkan bahwa hipertensi dikaitkan dengan

peningkatan di OS, sebagian melalui deregulasi NOX. Pada kejadian hipertensi, telah ditetapkan

hubungan antara regulasi tekanan darah dan aktivitas NOX . Misalnya memberikan angiotensin

II (AngII) dapat menghasilkan hipertensi pada model hewan. Proses ini bergantung pada

peningkatan O2 turunan NOX • - yang diproduksi di seluruh dinding vaskular, yang

menyebabkan disfungsi seluler ekstraseluler. Namun, sebagian besar studi ini difokuskan pada

isoform NOX yang menghasilkan O2 • -, yang bisa merusak dan menyebabkan vasodilatasi.
Sebaliknya, tampak bahwa ekspresi NOX4 berlebih di endothelium menginduksi vasodilatasi

melalui produksi H2O2 dan meningkatkan ekspresi protein Enos.

Produksi Ros Di Mitokondria

Mitokondria adalah sumber utama produksi ROS. Kebanyakan ROS dari mitokondria

diproduksi oleh kompleks rantai transpor elektron (ETC). Selama fosforilasi oksidatif, electron

ditransfer dari donor elektron (NADH), diproduksi oleh siklus Krebs, ke akseptor elektron

semacam itu sebagai O2, melalui reaksi redoks. Reaksi ini dilakukan di ETC, yang merupakan

rangkaian lima kompleks protein yang terletak di membran dalam terlipat dari mitokondria.

Selama proses ini, persentase kecil elektron dapat bocor keluar dan bereaksi dengan O2 untuk

menghasilkan O2• -. Superoksida yang tidak keluar dari mitokondria direduksi menjadi H2O2

oleh manganese superoxide dismutase (MnSOD) dan tembaga-seng superoksida dismutase

(CuZnSOD) masing-masing dalam ruang matriks dan antar-membran. H2O2 kemudian dapat

meninggalkan mitokondria, bereaksi dengan protein mitokondria, atau tereduksi menjadi H2O

oleh enzim peroksidase lokal.

Xantin dan ROS

Xanthine oxidase adalah bentuk enzim Xanthine oxidoreductase (XOR). Enzim ini ada

sebagai dua bentuk: xanthine dehydrogenase (XDH) dan xanthine oxidase (XO). Enzim ini

mengkatalisis oksidasi hipoksantin menjadi xantin dan selanjutnya dapat mengkatalisis oksidasi

xantin menjadi asam urat. Reaksi ini menghasilkan dua molekul H2O2 dan dua molekul O2.

XOR diekspresikan terutama di hati dan usus kecil, tetapi juga ada di ECs dan di sirkulasi.

Peningkatan aktivitas XO telah ditemukan pada kasus gangguan inflamasi jalan nafas, cedera

reperfusi iskemia, aterosklerosis, diabetes, dan gangguan autoimun

Sumber Seluler Stres Oksidatif di Plasenta Manusia di bawah Normal dan Kondisi
Patologis

Jenis Sel Plasenta dan Asal Usul Stres Oksidatif

Plasenta manusia terdiri dari berbagai jenis sel, seperti yang baru-baru ini ditunjukkan

oleh sel tunggal sekuensing dilakukan oleh Tsang et al. yang menunjukkan dua belas kelompok

sel utama yang diidentifikasi oleh mereka profil ekspresi. Di antara mereka, yang paling

melimpah adalah sel stroma, sel endotel, vili sitrofoblas (CTV), dan trofoblas ekstravili (EVT).

Selain itu, syncytiotrophoblast (SCT), hasil fusi dari trofoblas vili, secara jelas dipisahkan dari

sel lain garis keturunan trofoblas. Syncytiotrophoblasts dicirikan oleh sintesisnya dari mRNA itu

mengkode polipeptida β Chorionic Gonadotrophin, yang bersama-sama dengan Chorionic

Gonadotrophin α polipeptida, merupakan hormon Chorionic Gonadotrophin (hCG) manusia.

hCG disintesis oleh plasenta sejak implantasi dan syncytialization, kira-kira 8 hari pasca

pembuahan pada manusia. Menariknya, kelompok sel kekebalan juga diidentifikasi

(Macrophages, Dendritic sel, sel T), yang mungkin bertanggung jawab untuk menghasilkan stres

oksidatif. Bisa jadi stres oksidatif yang disebabkan oleh tekanan parsial oksigen rendah,

hiperoksia, atau pergantian hipoksia dan reoksigenasi, seperti yang terlihat di berbagai jaringan

yang sangat vaskularisasi seperti otak atau mata. Di plasenta normal, hipoksia adalah suatu

kondisi fisiologis yang dapat dideteksi selama trimester pertama (pada manusia), sebagaimana

diukur dengan metode in vivo. Fenomena yang biasanya terjadi ini mengaburkan perbedaan

antara regular fisiologi dan kemungkinan efek merugikan dari hipoksia pada tahap tertentu

perkembangan plasenta. Selain dari sel trofoblas, stres oksidatif dapat berasal dari sel endotel

(EC) yang ada di jaringan plasenta, sel stroma dari vili, atau sel imun (sel Hofbauer). Umumnya,

trofoblas dimodifikasi karena stres oksidatif dengan cara ekspresi gen. Ini dicapai oleh plasenta,

yang menghasilkan vesikula ekstraseluler yang dilepaskan ke sirkulasi ibu dan akan
mempengaruhi ekspresi gen pada sel endotel dan imun ibu. Vesikel ekstraseluler ini adalah

eksosom, berukuran 30–100 nm, dan mikrovesikel pada 100–1000 nm. Puing sel yang lebih

besar juga dilepaskan oleh plasenta, yang meliputi agregat inti dan badan apoptosis (20-500 µm

dan 1–4 µm, masing-masing).

Oksidatif Stres dari Trofoblast

Untuk menjelaskan asal mula stres oksidatif, banyak penelitian telah dilakukan pada

trofoblas model sel, khususnya sel HTR8 / SVneo yang telah terkena hipoksia / reoksigenasi (H /

R). Garis sel HTR-8 / SVneo dikembangkan dari trofoblas ekstra-vili trimester pertama yang

terinfeksi Antigen T. SV40 Besar. Terlepas dari bukti terbaru bahwa itu mungkin garis sel yang

heterogen, termasuk juga trofoblas murni (ditandai dengan CK-7) dan sel mesenkim (ditandai

dengan vimentin), telah banyak digunakan sebagai model yang cukup dari trofoblas ekstravili.

Penelitian terbaru telah menunjukkan, bahwa tekanan oksidatif yang diterapkan dalam konteks

model ini menyebabkan penurunan regulasi N-acetylglucosaminyltransferase III, Urutan kaya

AT khusus Binding protein 1 (SATB1), terlokalisasi dalam sel trofoblas plasenta, dan regulasi

abnormal dari kasus penyakit Parkinson Associated 7 (PARK7). SATB1 telah terbukti

menghambat jalur Wnt-β-Catenin, dan juga migrasi dan invasi trofoblas. Pengobatan H / R

dalam sel HTR-8 / SVneo juga menginduksi perubahan jalur Phospho Inositol 3 Kinase / Protein

Kinase B (AKT). Bersama dengan kekurangan serum, Ini memicu peningkatan kematian sel

nekrotik, yang bisa diselamatkan oleh relaxin, insulin hormon superfamili yang diekspresikan

oleh sistem reproduksi ibu. Itu juga telah ditampilkan trikloroetilen (TCE) atau penghambat

nyala seperti Polibrominasi difenil eter (PBDE, seperti BDE-47) memang memodifikasi respons

terhadap stres oksidatif dalam model ini. TCE metabolit DCVC (S- (1,2-dichlorovinyl) -l-

cysteine) menginduksi peradangan dengan melepaskan IL-6 berikut pembentukan ROS, sebagai
akibat dari fungsi mitokondria yang terganggu. Dalam garis sel trofoblas ini, molekul

antioksidan telah terbukti mampu membalikkan oksidatif aliran stres. Ini adalah kasus

Resveratrol, yang menormalkan aktivitas SOD di HTR8-SVneo H / R menekankan sel, serta

konsentrasi Malondialdehyde (penanda stres oksidatif yang menargetkan asam lemak tak jenuh),

dan penurunan apoptosis. Begitu pula dengan Sildenafil sitrat (Viagra) yang dioleskan pada sel H

/ R HTR-8 / SVneo dapat meningkatkan kelangsungan hidup sel jika ada NO dan cGMP.

Apoptosis yang dipicu oleh stres oksidatif juga dapat dilemahkan dengan pengobatan HBEGF

pada awalnya eksplan plasenta trimester, serta pada sel HTR-8 / SVneo. Di sel-sel ini, paparan

oksigen peroksida menginduksi penurunan regulasi ekspresi HLA-G, imunomodulator trofoblas

molekul yang memfasilitasi implantasi dan perkembangan plasenta. Ini biasanya mengarah pada

proliferasi penghambatan, apoptosis, dan penurunan invasi sel. Oleh karena itu, melalui eksposur

ke OS, EVTs dari plasenta dapat memicu respon imun yang berlebihan melalui sel desidua. Ini

bisa menyebabkan invasi endometrium yang menurun dan perakitan arteri spiralis yang rusak,

yang terakhir adalah ciri khas preeklamsia. Secara konsisten, Faktor Preimplantasi (PIF *), linier

asam amino 15 peptida yang disekresikan lebih awal oleh embrio yang layak, ditemukan sebagai

peningkat implantasi dan telah baru-baru ini telah terbukti melindungi terhadap stres oksidatif,

sehingga meningkatkan ekspresi HLA-G dan mendorong implantasi yang lebih baik.

Asal dan Regulasi Stres Oksidatif di Sel Hofbauer

Hanya ada sedikit penelitian yang membahas sel plasenta non-trofoblas dan menekankan

oksidatif. Pada awal 1998, tim Graham Burton di Cambridge mengungkapkan hal itu di plasenta

stroma, sel Hofbauer (makrofag plasenta) mengekspresikan katalase pada tahap awal kehamilan

manusia (6–17 minggu pasca pembuahan). Sementara enzim hampir tidak terdeteksi di SCT,

katalase adalah memang enzim utama untuk detoksifikasi hidrogen peroksida (H2O2). Para
penulis menafsirkan tingkat yang rendah sebagai indikasi tingkat stres oksidatif yang sama

rendahnya pada plasenta manusia muda. Hasil ini mungkin juga menunjukkan peran potensial sel

Hofbauer dalam detoksifikasi stres oksidatif. Pada 2013, Sisino et al. mempelajari efek

hiperglikemia pada sel Hofbauer di plasenta manusia dan model tikus. Mereka menunjukkan

bahwa sel-sel berpindah dari fenotipe M2 ke M1 (pro-inflamasi, menginduksi CD68, CCR7, dan

IL1β, dan menurunkan CD163, CD209-aka DC-SIGN1, dan IL10) sementara disertai dengan

aktivasi jalur stres oksidatif dan glukosa tinggi yang dimediasi HIF1α tanggapan. Para penulis

mengisolasi sel Hofbauer dari plasenta manusia dan mengobatinya dengan 25 mM glukosa,

mendorong transkripsi HIF1α dan NOS2 dan menyebabkan peningkatan yang signifikan NO

dalam media kultur. Penelitian yang awalnya bertujuan untuk memahami fungsi plasenta sel

pada diabetes gestasional, menunjukkan bahwa sel Hofbauer juga dapat menjadi sumber NO

dalam konteksnya dari patologi lainnya. Dengan demikian, mereka juga dapat berkontribusi pada

pembentukan Stres Nitrosatif pembentukan peroksinitrit dengan adanya stres oksidatif, bahkan

jika diinduksi oleh jenis sel lain. Sebaliknya, studi yang berbeda menunjukkan hubungan yang

diduga antara sel Hofbauer dan regulasi turun stres oksidatif. Holwerda dkk. tertarik pada

dinamika hidrogen sulfida (H2S) selama patogenesis preeklamsia. Mirip dengan NO, molekul ini

memiliki pro-angiogenik dan sifat anti-oksidatif, dan diatur oleh dua enzim utama: cystathionine-

γ-lyase (CSE) dan cystathionine-β-synthase (CBS). H2S menginduksi vasodilatasi melalui

penghambatan ketergantungan kalsium Saluran K + dalam sel otot polos pembuluh darah, dan

menginduksi faktor pertumbuhan pro-angiogenik, VEGF. Nya tindakan pada ekspresi VEGF

dapat dimediasi oleh regulasi turun miR-20a, miR-20b, miR-200c, dan MiR-133b. Baik CSE dan

CBS diekspresikan dalam sel endotel dari plasenta dan decidua, sedangkan CBS tampaknya juga

diekspresikan dalam sel Hofbauer. Dalam studi sebelumnya, kami menunjukkan bahwa plasma
preeklamsia ibu mampu menurunkan ekspresi CBS dalam sel endotel, menunjukkan bahwa sel

Hofbauer dapat menginduksi mekanisme antioksidan yang memodulasi stres oksidatif dan

mengurangi efeknya. Oleh karena itu, pada tingkat plasenta, tampak bahwa sistem yang

mengatur hydrogen penurunan sulfida melalui regulasi CSE bisa menjadi kemungkinan

terapeutik yang penting di konteks preeklamsia

Konsekuensi Stres Oksidatif pada Fisiologi Sel Plasenta

Model Sel

Model seluler dan hewan yang ekstensif telah digunakan untuk mengevaluasi efek stres

oksidatif plasenta. Beberapa aspek fisiologi sel telah dianalisis antara lain proliferasi, apoptosis,

migrasi, sinkronisasi, dan transportasi hara. Misalnya, pada sel TCL1, model EVT, paparan X /

XO, dan 0,1 mM H2O2 menginduksi penurunan yang signifikan dalam proliferasi dan

penghambatan invasi dan kemampuan untuk membentuk struktur seperti tabung di sel-sel ini.

Terminal dideoxynucleotidyl transferase dUTP Nick End Labeling (TUNEL) menunjukkan

bahwa stres oksidatif meningkatkan apoptosis di sel TCL1. Selain itu, paparan H2O2 juga

memiliki efek pro-apoptosis dan anti-proliferatif mengisolasi sitotrofoblas manusia. Sel

Koriokarsinoma BeWo adalah model sel trofoblas vili yang diakui (CTV). Setelah terpapar

forskolin, sel-sel ini berfusi, membentuk syncytium, kemudian menghasilkan dan mengeluarkan

hCG. Sebuah studi perbandingan sel BeWo dalam kondisi hipoksia (2% O2) atau normoksik

(20% O2) menunjukkan bahwa hipoksia menurunkan proliferasi sel, serta fusi ke dalam sekresi

SCT dan HCG. Tingkat gangguan fusi dapat dijelaskan dengan penurunan ekspresi sinkitin dan

sistem transportasi asam amino B (0), yang sangat penting untuk implantasi. Eksperimen yang
sama telah dilakukan pada sel koriokarsinoma, JEG-3, yang secara klasik digunakan sebagai

bahan model sel trofoblas (EVT). Sel JEG-3 dipapar H2O2 (10 sampai 500 µM) kemudian

dievaluasi perubahan proliferasi, apoptosis, dan sekresi hCG. Diketahui bahwa sel diperlakukan

dengan H2O2 menunjukkan penurunan sekresi hCG yang tergantung dosis. Paparan konsentrasi

H2O2 yang kuat juga mengubah fenotipe sel JEG-3. Mereka menjadi bulat dan menarik, terlepas

dari piring kultur, dan menampilkan kondensasi kromatin dan fragmentasi inti. JEG-3 sel terbuka

untuk stres oksidatif mengakibatkan peningkatan pelabelan TUNNEL, yang menunjukkan

tingkat yang lebih tinggi apoptosis. Proses apoptosis tampaknya dimediasi oleh aktivasi Regulasi

Seluler Ekstra Kinase (ERK) 1/2, p38 Mitogen Activated Protein Kinase (MAPK), dan c-Jun N-

terminal kinase (JNK) protein. Fenomena ini juga telah diamati pada eksplan dari trofoblas vili

yang dibudidayakan kondisi hipoksia (2% O2). Dalam kondisi ini, ekspresi BCL-2 mRNA

(penghambat apoptosis) menurun, sedangkan ekspresi aktivator apoptosis (Bax dan Bak)

meningkat. Sebuah studi baru-baru ini telah mengeksplorasi peran stres oksidatif dan C / EBPβ

dalam konteks PE dan keterlibatannya dalam regulasi kapasitas invasif sel trofoblas. Tingginya

C / EBPβ dan ekspresi β-catenin yang rendah telah ditemukan pada plasenta preeklamsia

dibandingkan dengan sampel non-patologis, dan situasi serupa juga telah diamati pada eksplan

vili yang dibudidayakan di bawah hipoksia / reoksigenasi. Garis sel EVT HTR8 / SVneo, ketika

terkena kondisi yang sama, juga menunjukkan peningkatan C / EBPβ. Selain itu, knockdown C /

EBPβ secara signifikan meningkatkan β-catenin ekspresi dan mempromosikan kapasitas invasif

sel HTR8 / SVneo. Itu juga meningkatkan pertumbuhan dan migrasi eksplan vili dan

menghambat pembentukan intraseluler yang berlebihan ROS. Temuan ini dapat dikaitkan

dengan peningkatan aktivitas metaloproteinase MMP-2/9 dan penurunan ekspresi TIMP-1/2.

Penulis berhipotesis bahwa oksidatif, stres disebabkan overekspresi C / EBPβ dapat

mempengaruhi aktivitas MMPs dengan mengatur Wnt / β-catenin jalur pensinyalan, dengan

demikian menahan kapasitas invasif dari sel trofoblas dan berkontribusi pengembangan PE. Stres

oksidatif juga terlibat dalam perubahan mekanisme transpor di trofoblas sel. Misalnya, ROS,

termasuk H2O2, telah terbukti berpengaruh pada Ca2 + plasenta transporter polycystin-2 (PC2).

Secara khusus, percobaan penjepit patch telah menunjukkan bahwa ROS dan lipid peroksidasi

menghambat aktivitas PC2 di membran trofoblas. Sejak aktivitas PC2 mencegah Kelebihan Ca2

+ dalam sel plasenta, modifikasi transpor Ca2 + berpotensi menimbulkan dampak yang parah

fungsi plasenta.

Peran Stres Oksidatif pada Disfungsi Endotel Ibu di Preeklamsia

Preeklamsia: Penyakit Inflamasi yang Dimediasi oleh Stres Oksidatif pada Endotelium Ibu

Endotel vaskular terdiri dari satu lapisan sel epitel yang menutupi permukaan interior

pembuluh darah. Ini bertindak sebagai penghalang semi-selektif antara lumen dan yang lebih

eksterior tunik dinding pembuluh (media dan eksterna), dengan demikian mengontrol jalan

masuk dan keluar molekul dari aliran darah. Selain itu, ECs vaskular juga memiliki fungsi

parakrin dan autokrin, memungkinkan mereka untuk memodulasi vasomotilitas arteri

(vasokonstriksi / dilatasi), adhesi leukosit dan diapedesis, serta koagulasi dan fibrinolisis

trombosit, serta proliferasi dan diferensiasi sel otot polos di media tunika . Kontak langsung ECs

vaskular dengan darah aliran membuat mereka menjadi sensor yang ideal dari faktor-faktor

sirkulasi, namun pada saat yang sama, menjadikannya sebagai sensor yang ideal sensitif terhadap

faktor peredaran yang merusak. Dengan demikian, disfungsi sel endotel merupakan peristiwa

penting di perkembangan penyakit vaskular.

Sejumlah penelitian telah memberikan bukti untuk mendukung teori bahwa PE ibu adalah

konsekuensi disfungsi endotel vaskular yang diinduksi, setidaknya sebagian, oleh faktor-faktor
yang dilepaskan dari iskemik plasenta. Pada PE, baik endoteliosis glomerulus ginjal maupun

modifikasi structural dari vena umbilikalis dan endotel pembuluh darah uterus plasenta telah

diamati. Selanjutnya, pada wanita preeklamsia, penurunan vasodilatasi tergantung endotel telah

dibuktikan menggunakan teknik non-invasif. Selain itu, plasma preeklamsia mengandung

berbagai tingkat peningkatan penanda aktivasi endotel, termasuk molekul adhesi, sitokin, dan

pro-koagulan dan faktor anti-angiogenik (sFLT-1 dan sENG). Oleh karena itu, sebagian besar

gejala PE ibu dapat dijelaskan akibat disfungsi endotel. Misalnya, glomerulosis endotel

kemungkinan besar adalah etiologinya proteinuria. Vasodilatasi yang kurang dan bergantung

pada endotel menyebabkan hipertensi dan pemicu vasokonstriksi di berbagai organ,

menyebabkan hipoperfusi dan iskemia. Aktivasi EC juga mengarah untuk peradangan sistemik

dan edema. Aktivasi ECs oleh zat inflamasi mempromosikan kelainan perlekatan dan

permeabilitas leukosit. Permukaan EC mengekspresikan molekul adhesi leukosit seperti molekul

adhesi antar sel-1 (ICAM-1), molekul adhesi sel vaskular-1 (VCAM-1), Pilih-E (SELE), dan P-

pilih (SELP). Leukosit kemudian menempel pada EC melalui molekul permukaan ini dan

menghasilkan ROS dan protease, yang menyebabkan kerusakan endotel. Sejumlah data

eksperimental menyarankan bahwa ROS memainkan peran penting dalam mengatur produksi

molekul adhesi leukosit di ECs. Ekspresi ICAM-1, VCAM-1, dan chemoattractant protein-1

(MCP-1) adalah diinduksi oleh TNF-α dan dikendalikan oleh mekanisme yang bergantung pada

ROS. Nyatanya, induksi ini dapat dihambat dengan penggunaan antioksidan dan penghambatan

NOX. Ekspresi SELP juga diinduksi oleh TNF-α, dan dikaitkan dengan produksi ROS oleh NOX

dan XO. Kerusakan EC menyebabkan mereka kehilangan sifat struktural membrannya, dan

mengakibatkannya edema seluler, serta kebocoran plasma dari lumen pembuluh darah ke ruang

interstisial. Efeknya TNF-α dan trombin telah dengan jelas dibuktikan sebagai agen penyebab
peningkatan endotel permeabilitas. Edema vaskuler menyebabkan tekanan hidrostatik kapiler

menurun dan meningkat tekanan osmotik koloid (karena peningkatan viskositas darah), yang

mengubah perfusi kapiler dan menyebabkan hipoksia. Pembentukan edema endotel berhubungan

langsung dengan kalsium intraseluler konsentrasi. ROS mengganggu aktivitas enzim yang

mengendalikan masuknya kalsium intraseluler, seperti fosfolipase C (PLC), serta aktivitas

enzimatik yang mengatur kalsium intraseluler fluks, seperti kalsium-ATPase dari retikulum

endoplasma (SERCA). Hasilnya edema interstitial meningkatkan iskemia, menyebabkan

produksi ROS lebih lanjut dan dengan demikian menciptakan siklus mengabadikan diri.

Oleh karena itu, sebagian besar gejala PE terjadi akibat disfungsi sistemik dari endotel

ibu disebabkan oleh molekul anti-angiogenik yang dilepaskan oleh plasenta. Beberapa

komponen di plasma wanita preeklamsia (sitokin, neutrofil aktif, lipid peroksidasi, xantin

oksidase, hemoglobin janin, dll.) dapat bekerja pada ECs dan memicu stres oksidatif.Seperti

terlihat sebelumnya, sitokin, seperti TNF-α, hadir pada tingkat yang lebih tinggi pada

preeklamsia. plasma, dan dapat memulai OS di EC. TNF-α secara langsung menginduksi

kerusakan oksidatif melalui aktivasi NOX, yang kemudian mengarah pada produksi anion

superoksida yang dapat mengais • NO. Bisa juga merangsang OS mitokondria; TNF-α

mengaktifkan produksi radikal bebas di situs ubiquinone dan merusak ETC mitokondria di

kompleks III, yang mengakibatkan peningkatan produksi ROS. Selanjutnya, TNF-α dan faktor

sirkulasi lainnya yang ada dalam plasma PE dapat menyebabkan stres oksidatif di EC secara

tidak langsung dengan mengatur reseptor LDL teroksidasi seperti Lektin-1 (LOX-1) dan reseptor

untuk LDL teroksidasi (oxLDL) [115]. Di ECs, up-regulation LOX-1 menghasilkan peningkatan

serapan oxLDL, yang kemudian mengarah pada peningkatan produksi O2•- melalui aktivasi

NOX. TNF-α telah diduga juga dapat meningkatkan produksi radikal bebas melalui aktivasi XO,
meskipun demikian tampaknya kontroversial. NOX adalah sumber utama • O2 - generasi di EC,

dan banyak lagi faktor sirkulasi yang meningkat dalam konteks PE mampu mengaktifkan NOX.

In vitro penelitian telah menunjukkan bahwa sel HUVEC yang diobati dengan serum dari wanita

preeklamsia mengekspresikan secara berlebihan subunit NOX2, yang menghasilkan O2 dalam

jumlah tinggi • -. Selain itu, NOX2 memiliki ekspresi berlebih terlihat pada kultur primer

HUVEC yang diisolasi dari kehamilan preeklampsia jika dibandingkan dengan sel-sel tersebut

dari kehamilan non-patologis. Selain itu, antibodi autoimun agonis terhadap reseptor angiotensin

II tipe I (AT1-AA) telah terdeteksi dalam darah penderita preeklamsia. wanita. Sejak itu, AT1-

AAs yang bersirkulasi telah ditemukan pada pasien dengan banyak pasien lainnya penyakit

kardiovaskular. Selain itu, beberapa studi eksperimental telah menunjukkan bahwa AT1-AA

berpartisipasi dalam patogenesis PE. Stimulasi reseptor AT1 oleh hasil in vitro AT1-AA dalam

penghambatan invasi trofoblas. Juga, AT1-AA dapat mengaktifkan reseptor AT1 di ECs, sel otot

polos pembuluh darah, dan sel mesangial ginjal. Pemberian AT1-AA pada tikus bunting

menginduksi spektrum penuh gejala PE termasuk hipertensi, proteinuria, kapiler glomerulus.

Mediator utama dan sumber stres oksidatif di endotel preeklamsia. Faktor sirkulasi dalam darah

wanita preeklamsia dapat bekerja pada sel endotel (EC) untuk menginduksi stres oksidatif. Ini

termasuk spesies oksigen reaktif (ROS) yang diproduksi oleh neutrofil (oxLDL), autoantibodi

agonis melawan reseptor angiotensin (AT1-AA), hemoglobin janin bebas (HbF), bersirkulasi

Xantin oksidase (XO), dan sitokin (yaitu, TNF-α). Dalam ECs, beberapa sistem enzimatik

termasuk rantai transpor elektron, NADPH oksidase, dan siklooksigenase dapat menghasilkan

superoksida (O2• -). Dalam keadaan tertentu, ini dapat menyebabkan peningkatan ekspresi

Arginase II, peningkatan asimetris dimetil arginin (ADMA), dan hilangnya kofaktor

tetrahidrobiopterin (BH4), dan endotel sintase nitrat oksida sintase (eNOS) dapat menjadi
terlepas. Alih-alih • NO, eNOS yang tidak digabungkan menghasilkan (O2• -). Nitrat oksida

kemudian dapat bereaksi dengan O2• - untuk menghasilkan peroksinitrit (ONOO−), yang kuat

oksidan yang protein nitratnya dapat menyebabkan kerusakan DNA. Selain itu, ONOO− dapat

menghambat Enos aktivitas. Pembersihan superoksida • NO mengganggu vasodilatasi yang

bergantung pada endotel. ROS juga bias mengatur saluran kalium yang diaktifkan kalsium

KCa2.3 dan KCa3.1, yang penting pemicu listrik vasodilatasi. Seperti yang terlihat sebelumnya,

sitokin, seperti TNF-α, hadir pada level yang lebih tinggi dalam plasma preeklamsia, dan dapat

memulai OS di EC. TNF-α secara langsung menginduksi kerusakan oksidatif melalui aktivasi

NOX, yang kemudian mengarah pada produksi anion superoksida yang dapat mengais • NO.

Bisa juga merangsang OS mitokondria; TNF-α mengaktifkan produksi radikal bebas di situs

ubiquinone dan merusak ETC mitokondria di kompleks III, mengakibatkan peningkatan

produksi ROS. Selanjutnya, TNF-α dan faktor sirkulasi lainnya yang ada dalam plasma PE dapat

menyebabkan stres oksidatif dalam EC secara tidak langsung dengan mengatur reseptor LDL

teroksidasi seperti Lektin-1 (LOX-1) dan reseptor untuk LDL teroksidasi (oxLDL). Di ECs, up-

regulation LOX-1 menghasilkan peningkatan serapan oxLDL, yang kemudian menyebabkan

peningkatan produksi O2• - melalui aktivasi NOX. TNF-α telah diduga juga dapat meningkatkan

produksi radikal bebas melalui aktivasi XO, meskipun demikian tampaknya kontroversial. NOX

adalah sumber utama O2• - generasi di EC, dan banyak lagi faktor sirkulasi yang meningkat

dalam konteks PE mampu mengaktifkan NOX. In vitro penelitian telah menunjukkan bahwa sel

HUVEC diobati dengan serum dari wanita yang mengalami preeklampsia berlebihan subunit

NOX2, yang menghasilkan O2 dalam jumlah tinggi • - . Selain itu, ekspresi berlebih dari NOX2

terlihat pada kultur primer HUVEC yang diisolasi dari kehamilan preeklamsia dibandingkan

dengan sel-sel dari kehamilan non-patologis. Selain itu, autoimun agonis antibodi terhadap
reseptor angiotensin II tipe I (AT1-AA) telah terdeteksi di dalam darah wanita preeklamsia.

Sejak itu, AT1-AAs yang bersirkulasi telah ditemukan pada banyak pasien penyakit

kardiovaskular lainnya. Selain itu, beberapa studi eksperimental telah menunjukkan bahwa AT1-

AA berpartisipasi dalam patogenesis PE. Stimulasi reseptor AT1 oleh AT1-AA in vitro

menghasilkan penghambatan invasi trofoblas. Juga, AT1-AA dapat mengaktifkan reseptor AT1

di ECs, vascular sel otot polos, dan sel mesangial ginjal. Pemberian AT1-AA pada tikus bunting

menyebabkan a spektrum penuh gejala PE termasuk hipertensi, proteinuria, endotheliosis kapiler

glomerulus, dan peningkatan produksi sFLT1 dan sENG. Efek AT1-AA ini adalah konsekuensi

langsung dari Aktivasi AT1R. Ini mendorong serangkaian respons seluler, termasuk pelepasan

ET-1 dan aktivasi NOX. Kemudian, aktivasi NOX menyebabkan peningkatan produksi ROS,

yang dapat, di antaranya efek lain, merusak pelebaran yang bergantung pada endotel dengan

pemulungan • NO. Di ECs, efek lain dari peningkatan OS yang dimediasi NOX adalah

penurunan regulasi saluran kalium yang diaktivasi kalsium, KCa2.3 dan KCa3.1 (KcaS). Saluran

ini penting pemicu listrik dalam aktivitas vasomotor yang berkontribusi secara signifikan

terhadap ketergantungan endotel relaksasi (EDR). Jadi, regulasi KcaS yang ke atas

mempromosikan EDR, sedangkan regulasi ke bawahnya meningkatkan kontraktilitas vaskular

dan meningkatkan tekanan darah. Stres oksidatif memang memodulasi ekspresi tersebut saluran

ini. Sebuah studi in vitro baru-baru ini menunjukkan bahwa pengobatan EC dengan serum PE,

ox-LDL, progesteron, atau sFlt-1 semuanya menyebabkan penurunan kadar KCas.

Penghambatan ini tampaknya menjadi konsekuensinya dari peningkatan O2• - produksi melalui

ekspresi NOX2 dan NOX4 tinggi dan tingkat SOD yang berkurang . Radikal • NO sebenarnya

adalah vasodilator kuat yang menginduksi relaksasi otot polos. Namun, eNOS juga dapat

menghasilkan O2• - dan H2O2, terutama jika konsentrasi intraseluler sebesar L-arginin atau
kofaktornya, BH4, rendah. HUVECs diobati dengan 2% tampilan plasma preeclampsia

peningkatan ekspresi dan aktivitas arginase II, yang pada gilirannya mengurangi ketersediaan L-

arginin. Plasma PE juga diketahui dapat meningkatkan produksi O2• - dan ONOO− dalam sel

yang sama. Namun, penghambatan arginase II atau eNOS menurunkan O2• - produksi. Dengan

demikian, arginase II dapat menyebabkan melepaskan eNOS, mengurangi • NO produksi dan

mendukung O2 • - produksi. Secara biologis sistem, ONOO- bereaksi terutama dengan residu

tirosin dalam protein untuk menghasilkan 3-nitrotyrosines. Nitrasi protein dapat mengubah

struktur dan fungsinya. Selain itu, ONOO− juga bias menyebabkan kerusakan DNA dan

peroksidasi lipid. Dalam ECs, ONOO− meningkatkan ekspresi iNOS melalui mekanisme yang

bergantung pada NF-kB dan menghambat sintase prostasiklin. Selanjutnya, ONOO− juga

meningkatkan produksi vasokostriktor ET-1. Di plasenta, residu 3-nitrotyrosine telah diamati

pada kehamilan normal dan preeklamsia, terutama di endotel itu mengelilingi otot polos dan

stroma vili Banyak faktor yang ada dalam sirkulasi preeklamsia dapat mengaktifkan LOX-1,

termasuk anionic fosfolipid, trombosit, sitokin, dan puing dari sel apoptosis. Jadi, LOX-1 sangat

diekspresikan di arteri wanita preeklamsia dan LDL teroksidasi ditemukan meningkat dalam

plasma mereka. Kapan HUVECs dirawat selama 24 jam dengan 2% plasma dari wanita

preeklamsia, peningkatan LOX-1 ekspresi dan serapan LDL teroksidasi diamati. Hal ini

mengakibatkan kelebihan produksi OS, sebagaimana dibuktikan dengan peningkatan aktivitas

NOX, O2• -, dan ONOO−. Peroxynitrite secara khusus mampu mengatur LOX-1 ekspresi,

menunjukkan adanya mekanisme umpan balik di mana aktivasi LOX-1 menginduksi stres

oksidatif, yang pada gilirannya menginduksi LOX-1. Namun, mekanisme lain telah diajukan

untuk menjelaskan induksi LOX1 pada ECs preeklampsia. Salah satu mekanisme tersebut

melibatkan Methylglyoxal (MG), molekul yang sangat reaktif yang bereaksi dengan berbagai
residu asam amino dalam menghasilkan protein maju produk akhir glikasi (AGEs). MG

sebenarnya telah terdeteksi di pembuluh darah wanita dengan PE.

Selanjutnya, semicarbazide-sensitive monoamine oxidase (SSAO) -, enzim yang

menghasilkan MG, adalah meningkat pada kasus PE, sedangkan ekspresi enzim glioksalase yang

biasanya mendegradasi MG adalah dikurangi. Dalam EC yang dikultur, MG secara progresif

meningkatkan ekspresi arginase II dan LOX-1. Kapan pun arginase II atau NOS dihambat,

penurunan signifikan pada ekspresi LOX-1 dan O2 yang diinduksi MG• - tingkat, dan pewarnaan

nitrotyrosine diamati. Dengan demikian, MG dapat menginduksi ekspresi LOX-1 melalui

arginase II regulasi naik, kemungkinan melalui NOS uncoupling. Mekanisme lain diusulkan

untuk LOX-1 induksi telah dijelaskan dalam aorta tikus, dan melibatkan pensinyalan Toll Like

Receptor 4 (TLR4) melalui jalur p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK / NF-kB) Faktor

yang dilepaskan oleh plasenta preeklamsia juga dapat mempengaruhi ECs secara tidak langsung

dengan bertindak sel yang bersirkulasi. Jadi, di PE, produksi dan pelepasan O2 • - dan H2O2 dari

neutrofil yang bersirkulasi meningkat dan menyebabkan cedera EC. Studi in vitro menggunakan

HUVECs menunjukkan bahwa model kerusakan yang dimediasi neutrofil ini melibatkan

pengurangan ketersediaan hayati • NO dan ONOO-.. Selain itu, produksi dari O2• - dan

turunannya, H2O2, oleh neutrofil menghasilkan peningkatan ekspresi CD11b neutrofil dan

adhesi ke EC