Ringkasan

 Promotor lac berisi dua situs pengikatan terpisah, satu untuk RNA polimerase dan satu
lagi untuk kompleks CAP / cAMP. Kompleks CAP / cAMP harus ada di tempat
pengikatan pada promotor lac untuk menginduksi operon secara normal. Meskipun
mekanisme pasti dimana CAP / cAMP menstimulasi pengikatan RNA polimerase ke
promotor tidak pasti, kontrol positif dari transkripsi operon lac sangat tergantung pada
hasil percobaan in vivo dan in vitro. Oleh karena itu, cAMP bertindak sebagai molekul
efektor untuk menentukan pengaruh CAP pada transkripsi lac operon.
 Glukosa dapat mencegah aktivasi adenylate cyclase, yang dapat mengkatalisis pembentukan
cAMP dari ATP. Dengan adanya cAMP konsentrasi rendah, CAP tidak dapat mengikat promotor
lac operon. Oleh karena itu, dengan adanya glukosa, transkripsi lac operon tidak pernah
melebihi 2% dari laju induksi yang diamati tanpa adanya glukosa.

Interaksi Protein-DNA yang mengontrol transkripsi pada Operon Lac

 Salah satu Interaksi kunci melibatkan pengikatan RNA polimerase ke situs pengikatannya
di promotor lac, dan interaksi penting lainnya adalah pengikatan CAP / cAMP ke situs
pengikatannya di promotor lac. Kombinasi CAP/cAMP dapat merangsang transkripsi gen
struktural lac Kecuali CAP / cAMP sudah terikat, RNA polimerase tidak dapat mengikat
secara efektif ke situs pengikatannya pada promotor lac.
 Dalam promotor lac, situs pengikatan CAP / cAMP dan RNA polimerase berdekatan satu
sama lain. Dikatakan bahwa pembengkokan DNA yang disebabkan oleh CAP / cAMP
mendorong situs terbuka RNA polimerase, sehingga meningkatkan pengikatan dan
transkripsi gen struktural.
 Kombinasi penekan lac dan operon lac dapat mencegah RNA polimerase
mentranskripsikan gen struktural dalam operon. Operon lac dikendalikan oleh tiga
operator: operator utama -O1- dan dua operator bantu -O2 dan O3. O1 adalah operator
asli yang diidentifikasi oleh Jacob dan Monod; O2 terletak di antara promotor dan gen Z,
O2 terletak di hilir O1 dalam gen Z, dan O3 terletak di hilir promotor. Represi maksimum
membutuhkan ketiga operator; namun, selama O1 dan O2 atau O3 ada, represi yang kuat
akan terjadi. Mengapa kita membutuhkan dua vektor untuk penekanan yang efektif?
Untuk menjawab pertanyaan ini, kita perlu mempelajari sequence spesifik binding dari
repressor ke operon
 Bentuk aktif dari lac repressor adalah tetramer, yang berisi empat salinan produk dari gen
lacI. Studi sinar-X dari struktur yang dibentuk oleh penekan lac dan situs pengikatan
sintetis 21 bp menunjukkan bahwa setiap penekan tetramerik mengikat dua urutan
operator bersama-sama. Oleh karena itu, tetramer terdiri dari dua dimer, yang masing-
masing memiliki situs pengikatan spesifik urutan. Satu dimer berikatan dengan O1 dan
yang lainnya berikatan dengan O2 atau O3. Oleh karena itu, penekan membengkokkan
DNA untuk membentuk jepit rambut (O1 dan O2) atau loop (O1 dan O3). Struktur
kompleks inhibitor O1-O3 yang diusulkan. Pada saat yang sama, ketika lac inhibitor
berikatan dengan O1 dan O3, CAP / cAMP terbentuk pada loop DNA.
 Loop DNA serupa dibentuk oleh pengikatan protein aktivator dan operon supresor lain
pada E. coli dan bakteri lain. Protein pengatur memiliki kemampuan untuk mengikat
DNA secara spesifik urutan, mengubah struktur DNA, dan merangsang atau menghambat
transkripsi gen struktural di sekitarnya.

Operon Triptofan di E. coli: Represi dan Atenuasi

 Operon trp pada E. coli mengontrol sintesis enzim yang mengkatalisis biosintesis asam
amino triptofan. Ada lima gen struktural pada trp yang mengontrol regulasi gen dalam
menyandikan enzim yang mengubah asam korismat menjadi triptofan. Ekspresi operon
trp diatur ke dua tingkat: Represi untuk mengontrol permulaan transkripsi, dan Atenuasi
untuk mengontrol penghentian transkripsi prematur.
a. Represi