TEORI

1. KLT
2. BIOAUTOGRAFI
CARA KERJA
1. KLT
Alkaloid
Plat KLT dipotong sesuai dengan kebutuhan, lalu dimasukkan kedalam
inkubator yang mempunyai suhu 110°C dalam posisi tegak selama 30 menit.
Masing masing plat KLT dimasukkan dalam beaker glass alkaloid berisi
campuran etil asetat : metanol : air (6:4:2). Setelah proses pengelusian selesai
plat diangkat alkaloid disemprot dengan pereaksi dragendorf lalu dimasukkan ke
dalam inkubator dikeringkan pada suhu 110° C selama 5-10 menit, noda terlihat
berwarna jingga menunjukkan adanya senyawa alkaloid.
Flavonoid
Plat KLT dipotong sesuai dengan kebutuhan, lalu dimasukkan kedalam
inkubator yang mempunyai suhu 110°C dalam posisi tegak selama 30 menit.
Masing masing plat KLT dimasukkan dalam beaker glass yang pertama
flavanoid yaitu plat KLT dimasukkan di dalam beaker glass dengan berisi
campuran butanol : etil asetat : air (4:1:5). Setelah proses pengelusian selesai
plat diangkat flavanoid disemprot dengan perekasi Alumunium Chloride
(AlCl3). lalu dimasukkan ke dalam inkubator dikeringkan pada suhu 110° C
selama 5-10 menit, noda terlihat berwarna kuning menunjukkan adanya senyawa
flavanoid.
Saponin
Plat KLT dipotong sesuai dengan kebutuhan, lalu dimasukkan kedalam
inkubator yang mempunyai suhu 110°C dalam posisi tegak selama 30 menit.
Masing masing plat KLT dimasukkan dalam beaker glass yang pertama saponin
yaitu plat KLT dimasukkan di dalam beaker glass dengan berisi campuran
kloroform : metanol (8:2). Setelah proses pengelusian selesai plat diangkat lalu
disemprot dengan perekasi H2SO4 10% lalu dimasukkan ke dalam inkubator
dikeringkan pada suhu 110° C selama 5-10 menit, noda terlihat berwarna orange
menunjukkan adanya senyawa saponin.
Tanin
 Plat KLT dipotong sesuai dengan kebutuhan, lalu dimasukkan kedalam
inkubator yang mempunyai suhu 110°C dalam posisi tegak selama 30 menit.
Masing masing plat KLT dimasukkan dalam beaker glass yang pertama tanin
yaitu plat KLT dimasukkan di dalam beaker glass dengan berisi campuran
kloroform : metanol (8:2). Setelah proses pengelusian selesai plat diangkat lalu
disemprot dengan perekasi FeCl3 lalu dimasukkan ke dalam inkubator
dikeringkan pada suhu 110° C selama 5-10 menit, noda terlihat berwarna
hitam/abu menunjukkan adanya senyawa tanin.
2. BIOAUTOGRAFI
Pengujian secara KLT-Bioautografi
Ke dalam cawan petri dituang medium NA sebanyak 10 ml dan ditambahkan
suspensi bakteri uji yang dihambat pertumbuhannya pada saat skrining sebanyak
0,02 ml lalu dihomogenkan. Kromatogram hasil pemisahan senyawa secara KLT
kemudiaN diletakkan di atas permuk aan medium yang memadat. Setelah 60
menit, lempeng (kromatogram) diangkat dan dikeluarkan. Selanjutnya
diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37OC. Diamati daerah hambatan yang
terbentuk.