Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril

STERILISASI ALAT DAN PENGEMAS

(STERILIZATION EQUIPMENT AND PACKAGING)
CahyaniPutriNgulwiyah, Ina SuciPratiwi, IwanSantoso

Program StudiFarmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlam,

UniversitasSriwijaya

ABSTRAK
Sterilisasi merupakan pembebasan semua organisme-organisme yang
hidup,termasuk bakteri dan sporanya,secara kimia atau secara fisika. Fungsi dari sterilisasi
ini yaitu agar bakteri-bakteri yang berada pada alat-alat yang digunakan sebagai praktikum
tersebut dapat steril dan tidak terkontaminasi organisme mikro lainnya dari luar. Terdapat 3
cara untuk melakukan sterilisasi ini yaitu mekanik, fisik dan kimiawi. Dalam praktikum ini
akan dijabarkan mengenai cara fisik yaitu dengan uap air panas bertekanan dan
menggunakan alat khusus yaitu Autoklaf. Pada umunya, sterilisasi digolongkan menjadi 2
proses yaitu sterilisasi basah dan sterilisasi kering.Dan pada autoklaf termasuk dalam
pengoperasian sterilisasi basah dimana pada proses sterilisasinya memerlukan air. Tekanan
yang digunakan pada autoklaf ini umumnya 15 Psi atau sekitar 2 atm dan dengan suhu
1210C (2500F). Jadi tekanan yang bekerja ke seluruh permukaan benda adalah 15 pon tiap
inchi (15 Psi = 15 pounds per square inch). Lama sterilisasi yang dilakukan biasanya 15
menit untuk 1210C. Alasan digunakan suhu 1210C atau 249,80F adalah karena air mendidih
pada suhu tersebut jika digunakan tekanan 15 psi. Untuk tekanan 0 psi pada ketinggian di
permukaan laut (sea level) air mendidih pada suhu 1000C, sedangkan untuk autoklaf yang
diletakkan di ketinggian sama, menggunakan tekanan 15 psi maka air akan mendidih pada
suhu 1210C.

Kata kunci:sterilisasialatdanpengemas, analisis hasil.

ABSTRACT
Sterilization is the liberation of all living organisms, including bacteria and
spores, chemically or physically. The function of this sterilization is that the bacteria that
are in the tools diunakan as the lab can be sterile and not contaminated with other micro
organisms from the outside. There are three ways to do this sterilization is mechanical,
physical and chemical. In this lab we will clarify the physical way that the pressurized hot
water vapor and special tools that is autoclave. In general, sterilization classified into two
processes, namely the sterilization of wet and dry sterilization. And the autoclave
sterilization operation included in the wet where the sterilizing process memerlikan water.
Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya
Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril

The pressure used in the autoclave is generally 15 psi, or about 2 atm and at a temperature
of 1210C (2500F). So the pressure working across the surface of the object is 15 pounds per
inchi2 (15 Psi = 15 pounds per square inch). Old sterilization is usually 15 minutes to
1210C. Reasons to use a temperature of 1210C or 249,8 0F is because water boils at that
temperature if it is used a pressure of 15 psi. For the pressure of 0 psi at sea level elevation
(sea level) of boiling water at a temperature of 1000C, while the autoclave is placed at the
same height, using a pressure of 15 psi and the water will boil at a temperature of 1210C.

Keyword:sterilization and packaging, result of analizing.

Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya
Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril
1. PENDAHULUAN
Sediaan steril adalah bentuk
sediaan obat dalam bentuk terbagi-bagi
yang bebas dari mikroorganisme hidup.
Pada prinsipnya, yang termasuk sediaan
ini antara lain sediaan parenteral, preparat
untuk mata dan preparat irigasi (misalya
infus). Sediaan parental merupakan jenis
sediaan yang unik diantara bentuk sediaan
obat terbagi-bagi, karena sediaan ini
disuntikkan melalui kulit atau membran
mukosa ke bagian tubuh yang paling
efisien, yaitu membran kulit dan mukosa
maka sediaan in harus bebas dari
kontaminasi mikroba dan bahan-bahan
toksis lainnya, serta harus memiliki
tingkat kemurnian yang tinggi
(Priyambodo,2007).
Sterilisasiadalahsuatuusahauntukmembeb
askanalat-alatataubahandarisegalabentukk
ontaminasidarimikroba. Proses
sterilisasialatdan medium
dalamkegiatanpraktikumataupenanganans
ampelmikrobasangatdibutuhkansterilisasi.
Apabilatekniksterilisasitidakditerapkanma
kahasil yang
dicapaitidakmaksimaldanmenimbulkanbe
rbagaikontaminasibaikdarialatmaupun
media tumbuhmikroba (Santoso,2002).
Alat yang
akandigunakandalamsuatupenenlitianatau
praktikumharusdisterilisasiterlebihdahulu
untukmembebaskansemuabahanatauperal
atantersebutdarisemuabentukkehidupan.
Sterilisasimerupakansuatu proses
untukmematikansemuaorganisme yang
terdapatpadasuatubenda. Proses
sterilisasidapatdibagimenjadi 3 macam,
yaitupenggunaanpanas
(pemijarandanudarapanas), penyaringan,
danpenggunaanbahankimia
(etilenaoksida, asamperasetat,
Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya
formaldehidadanglutaraldehidaalkalin)
(Santoso,2002).
Pemanasan adalah metode yang
paling lazim digunakan. Efek mematikan
panas adalah mendenaturasi protein dan
asam amino dari suatu organisme. Pada
suhu sterilisasi, membran akan menjadi
labil, asam amino akan terdeaminasi,
terdepurinasi atau terdegradasi. Metode
sterilisasi kimia menggunakan disinfektan
atau mikrosida untuk membunuh
mikrobia. Disinfektan tersebut antar lain
alkohol, etilen oksida, klor dan
formaldehid. Penggunaan dan dosis
disinfektan ini bervariasi tergantung jenis
mikrobia yang akan di bunuh. Sedangkan
sterilisasi dengan penyaringan dilakukan
untuk bahan yang labil terhadap panas
dengan prinsip menahan mikroba.
Perangkat penyaringan dapat berupa
matriks berpori yang dikaitkan dengan
wadah yang tidak permeable
(Dwidjoseputro,1994).
Sterilisasi panas basah biasanya
dilakukan menggunakan autoklaf.
Autoklaf adalah alat untuk mensterilkan
berbagai macam alat dan bahan yang
digunakan dalam mikrobiologi
menggunakan uap air panas bertekanan.
Peralatanyang digunakan
perludisterilisasi agar
padasaatkontakdenganproduk,tidakmenye
babkankontaminasi.
Sebelumdigunakanautoklafterlebihdahulu
divalidasiuntukmembuktikanbahwaotokla
fberfungsidenganbaikdanmampumenghas
ilkan material yang steril. Tekanan yang
digunakan adalah 15 Psi atau sekitar 2
atm dangan suhu 121℃ (250°F) dalam
waktu 15 menit (Dwidjoseputro,1994).
Sterilisasi Panas Kering dilakukan
menggunakan oven pensteril. Metode ini
memerlukan temperatur yang lebih tinggi
Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril

dan waktu yang lebih panjang, sterilisasi ● Untukalat-alatgelas :cucidengan

panas kering biasanya ditetapkan pada air danHClencer.
temperatur 160-170℃ dengan waktu 1-2 Rendamdengandetergen 1% dan
jam. Umumnya digunakan untuk Na2CO3 0,1% selama 15 menit.
senyawa-senyawa yang tidak efektif Didihkandengan air panasselama
untuk disterilkan dengan uap air, seperti 15
minyak lemak, minyak mineral, dan menitdiamatihinggajernihjikabel
gliserin (berbagai jenis minyak). Metode umjernihulangi proses
ini efektif untuk mensterilkan alat-alat pendidihanbilasdenganaquadest
gelas dan bedah (Dwidjoseputro,1994). ● Untukalat-alatlogam :
2. PROSEDUR PRAKTIKUM didihkandalamlarutandetergen
Alat 1% selama 10
menitdirendamdalamlarutan
Alat yang digunakan selama Na2CO3 5% selama 5
proses pencucian dan sterilisasi alat dan menitbilasdenganaquadestmenga
pengemas adalah pengemas ampul, lir
pengemas vial, beker gelas, gelas ukur, ● Untukalat-alatkaret :Cucidengan
cawan porselen, pipet kaca, gelas air danHClencer 2%
pengaduk, gelas arloji, corong kaca, dandibilasdenganalkohol 70%,
pinset, sendok, kertas saring, kapas, oven, rendamdenganHClencer 2%
autoklaf, baskom, kompor, alumonium selama 2 hari.
foil, hot plate, tisu, kertas perkamen atau Rendamdalamlarutandetergen
kertas kopi, pengaduk kaca, dan gelas 1% dan Na2CO3 0,1% selama
piala. 15 menit. Rendamdalametanol
70% selama 10
menitdiamatihinggalarutanjernih.
3. Lakukanpengeringan
Bahan Untukalat yang
tahanpanasdikeringkandengan oven
Bahan yang digunakan selama proses
100-150° C selama 10 menit dalam
pencucian dan sterilisasi alat dan
kondisi cairan keluar. Alat yang tidak
pengemas adalah detergen (Indralaya),
tahan panas dikeringkan dengan tisu
etanol 70% (PT. Brataco Chemika,
4. Sebelumalat-alatdimasukkandalam
Bogor), akuades (Unsri Indralaya), asam
oven
klorida (PT. Brataco Chemika, Bogor),
danautoklafalat-alattersebutdibuskusd
natrium carbonat (PT. Brataco Chemika,
engankertasperkamen/ kertas kopi.
Bogor).
Untukalat yang
memilikimulutharusdisumbatdengank
Langkahkerja apas/ penutupdengankertasperkamen.
Tiapalatdibungkusrangkapduapebung
1. Lakukansortasialatberdasarkankatego kus.
rinya( plastik, kaca, danlogam) 5. Sterilisasi
2. Lakukanpencucian

Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya
Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril

Untukalat yang menghancurkan mikroorganisme baik

tahanpanasdisterilisasikanmenggunak
anmetodekeringyaitu oven 180° C
selama 30 menit dan 60 menit. Alat
yang tidak tahan panas
disterilisasikan dengan metode panas
basah yaitu autoklaf dengan suhu 121
° C selama 15 dan 30 menit,
sedangkan alat alat karet disterilisasi
dengan alkohol 70%.
6. Seluruhalatalatsterildibungkusdapatdi
simpandalamkondisitetapkeringdanpe
mbungkusnyautuh
7. Bilas dengan WFI steril,
teteskandengan media agar.
Dilakukaninkubasiselama 24 jam
lihatpertumbuhanmikrobabandingkan
efektifitaspeningkatan lama
waktusterilisasi
8. Lakukanperhitungannilai D value dan
Z value masingmasingalat.
Keterangan
:terjadipenguranganbakteridari
10.000 ke 1000 ataupengurangan
90% (satu pengurangan log).
MetodeSterilisasi
Padaproses
pencuciandansterilisasialatdanpengemas
menggunakanmetodesterilisasipanaskerin
gdanpanasbasah.
Sterilisasimetodepanaskeringyaitudengan
oven 180ºC selama 30 menitdan60 menit.
Sedangkanmetodepanasbasahmenggunak
analat autoclave dengansuhu 121ºC
selama 15 menitdan 30 menit.
3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Sterilisasi adalah proses untuk
menghilangkan, mematikan serta untuk
yang patogen maupun yang
bukanpatogen. Ada tiga alasan utama
untuk melakukan sterilisasi dan disinfeksi
yaitu untuk mencegah transmisi penyakit,
untuk mencegah pembusukan material
oleh mikroorganisme dan untuk
mencegah kompetisi nutrien dalam media
pertumbuhan sehingga memungkinkan
kultur organisme spesifik berbiak untuk
keperluan sendiri atau untuk
metabolitnya. Tahap awal untuk memulai
proses sterilisasi yaitu pencucian. Tahap
pencucian alat bertujuan untuk
menghilangkan bioburden serta
mikroorganisme hidup sehingga diperoleh
alat dan pengemas yang steril, bebas
pirogen serta bebas partikel sehingga
tidak mempengaruhi kualitas produk.
Pada saat melakukan sterilisasi,
wadah dan atau tutup yang disterilisasi
sebaiknya disterilkan sampai benar-benar
steril. Hal ini dimaksudkan agar wadah
dan atau tutup tersebut tidak mencemari
bahan obat yang akan dimasukkan ke
dalamnya. Tujuan pencucian dan
sterilisasi ini adalah untuk menghilangkan
zat-zat pengotor atau penghilangan semua
jenis organisme hidup, dan dalam hal ini
adalah mikroorganisme (fungi, patogen,
pirogen, virus, bakteri, protozoa)
sehingga diperoleh pengemasan yang
steril, bebas pirogen dan bebas partikel
melayang (ukuran partikel yang baik
adalah kurang dari 10 mikron) sehingga
tidak mempengaruhi produk dan isi.
Proses pencucian dilakukan
menggunakan larutan detergen yang
bersifat amfifilik yang berarti suka dalam
air dan lemak sehingga detergen akan
melarutkan lemak yang menempel pada
kemasan dengan menurunkan tegangan
permukaan dari cairan, larutan asam

Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya
Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril
klorida encer 2% untuk membersihkan
alat dari kotoran-kotoran yang larut asam
serta natrium karbonat digunakan sebagai
penjernih dan penetral sisa pencucian
dengan asam klorida. Netralnya kemasan
akan menghindari kontaminasi yang
dapat menghasilkan zat baru yang akan
merusak khasiat obat. Campuran dari
natrium karbonat dan detergen dapat
bersifat bakterisid yang mampu
membunuh atau menghentikan
pertumbuhan mikroba (Agoes, 2009).
Peralatan yang berbahan dasar karet
direndam dengan HCl encer 2% selama
dua hari, sedangkan peralatan kaca tidak
melalui proses perendaman namun tetap
bilas dengan asam klorida encer. Hal ini
disebabkan karena peralatan kaca hampir
tidak memiliki pori-pori sehingga kotoran
yang menempel cepat larut dan luntur.
Sebaliknya peralatan dengan bahan dasar
karet bersifat lentur dan berpori sehingga
dengan perendaman selama dua hari
dapat mengembangkan karet serta
melebarkan pori-pori. Dengan demikian
kotoran yang terdapat pada pori-pori karet
dapat dilarutkan dalam asam klorida
dengan sempurna. Analisis data hasil
pencucian alat dapat dilihat padakolspss
yang dapat dilihat di evaluasi analisis
hasil.
Tahapan selanjutnya pengeringan dan
pembungkusan alat dengan kertas kopi.
Tujuannya agar alat-alat tidak
terkontaminasi oleh bakteri dari luar dan
mencegah pecahnya peralatan akibat
konduksi panas yang berlebihan. Alat
yang memiliki rongga, mulut tabungnya
harus ditutup dengan kapas yang dilapisi
dengan kain kasa. Hal ini dilakukan untuk
menghindari terbentuknya uap air
didinding dan didalam alat-alat yang akan
dipanaskan sehingga proses sterilisasi
Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya
dapat berjalan lancar dan menghasilkan
media yang benar-benar steril.
Keuntungannya yaitu seluruh badan
tabung yang disterilkan bisa dikenai uap
pada temperatur dan waktu yang
diperlukan (Lucas, 2006).
Setelah dibungkus kemudian
dilakukan proses sterilisasi. Proses
sterilisasi yang dilakukan yaitu proses
sterilisasi panas kering menggunakan
oven pada suhu 180oC selama 30 menit
untuk alat-alat yang tahan panas seperti
gelas beker, corong kaca dan pipet
volume. Sterilisasi dengan metode panas
kering kurang efisien dan membutuhkan
suhu yang lebih tinggi serta waktu yang
lama. Hal ini disebabkan karena prinsip
dari metode panas kering berdasarkan
pada konduksi panas yang dihasilkan
oven pada permukaan peralatan yang
disterilisasi. Panas kering dapat
menyebabkan dehidrasi sel dan oksidasi
komponen-komponen di dalam sel
mikroorganisme. (Ansel, 2008).
Alat yang terbuat dari kaca
disterilisasi dengan metode panas uap
menggunakan autoklaf pada suhu 121oC
selama 15 menit, hal ini dikarenakan titik
didih air menjadi 121oC yang disebabkan
tekanan 1 atmosfer pada ketinggian
permukaan laut. Sterilisasi menggunakan
autoklaf dianggap sebagai metode yang
paling efektif karena metode ini bersifat
nontoksik, mudah diperoleh dan relatif
mudah dikontrol. Penggunaan tenaga uap
dalam metode ini menambah keefektifan
dari metode ini, dimana uap merupakan
suatu pembawa energi yang paling efektif
karena semua lapisan pelindung luar
mikroorganisme dapat dilunakkan
sehingga memungkinkan terjadinya
koagulasi. Prinsip sterilisasi dengan
autoklaf adalah terjadinya koagulasi yang
Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril

lebih cepat dalam keadaan basah Water For Injection lalu air hasil bilasan
dibandingkan keadaan kering (Voight, diteteskan ke media agar dan diamati
1995). pertumbuhan mikrobanya. Dari data
D value dari Kaca dengan menggunakan jumlah pertumbuhan mikroba dapat
Detergen, sunlight dan Kit didalam ditentukan nilai D-value dan Z-value.
autoklaf dan oven. D-value merupakan waktu atau dosis
Tests of Normality yang diperlukan untuk pengurangan satu
Kolmogorov-Smirn log pada populasi mikroba dalam kondisi
ova Shapiro-W tertentu. Banyak faktor yang
Statisti mempengaruhi nilai D-value seperti suhu,
variabel Statistic df Sig. c df jenis mikroorganisme dan komposisi
detergen detergen .307 4 . .729 4
medium yang mengandung
mikroorganisme. Setiap mikroorganisme
sunlight .307 4 . .729 4
memiliki nilai D-value yang
kit .307 4 . .729 4
berbeda-beda dan spesifik tergantung dari
sunlight detergen .307 4 . .729 4 tingkat resistensinya. Nilai D-value yang
sunlight .307 4 . .729 4 didapat pada kelompok 1 menggunakan
kit .307 4 . .729 4 oven yaitu 15 menit dan untuk kelompok
kit detergen .307 4 . .729 4 2 nilainya 30menit sedangkan nilai D
sunlight .307 4 . .729 4 value menggunakan autoklaf pada
kit .307 4 . .729 4 kelompok 1 dan kelompok 2 nilainya 7,5
menit. Perbedaan nilai D-value
a. Lilliefors Significance Correction
dipengaruhi oleh jumlah mikroba dari alat
yang disterilisasi pada sebelum maupun
Z value dari Alat Kaca dengan menggunakan sesudah sterilisasi (Hadietomo, 1985).
detergen, sunlight dan Kit. Z-value diartikan sebagai kenaikan
atau penurunan suhu yang diperlukan
untuk mengurangi atau menambah 1 log
D-value. Nilai Z-value digunakan untuk
mengukur resistensi dari mikroorganisme
terhadap sumber sterilisasi. Data nilai
Z-value dapat dilihat pada kelompok 1
dan 2 memiliki nilai Z-value yang sama
yakni sebesar 20,73 menit.

4. KESIMPULAN

Pada proses sterilisasi alat dan

pengemas hal pertama yang dilakukan
yaitu pencucuian yang dibedakan
berdasarkan jenis alatnya (gelas, plastik,
Setelah dilakukan sterilisasi, karet dan kaca) dengan tujuan untuk
dilakukan uji sterilitas alat dengan menghilangkan zat-zat pengotor serta
membilas peralatan tersebut dengan mikroorganisme hidup sehingga diperoleh
Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya
Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril

alat dan pengemas yang steril dan bebas Voight, R. 1995. Buku pelajaran
pirogen. Tahap selajunjutnya alat dan teknologi farmasi edisi II,
pengemas dikeringkan dan dibungkus PenerbiT UGM, Yogyakarta,
untuk mencegah kontaminasi oleh bakteri Indonesia.
dari luar dan mencegah pecahnya
peralatan akibat konduksi panas yang
berlebihan, kemudian disterilisasi dengan
metode panas uap (autoklaf suhu 121⁰C)
dan panas kering (oven suhu 180⁰C).
Hasil analisis dilihat dari ada tidaknya
pertumbuhan mikroba dimana hasil
menunjukan bahwa tidak ditemukan
pertumbuhan mikroba pada media agar,
sehingga proses sterilisasi berhasil
dilakukan

DAFTAR PUSTAKA

Agoes, Goeswien. 2009. Sediaan farmasi

steril,Penerbit ITB, Bandung,
Indonesia.

Ansel, H. C. 2008. Pengantar bentuk

sediaan farmasi edisi IV, Penerbit
UI Press, Jakarta, Indonesia

Dwidjoseputro, S. 1994.
Sterilisasi,Gramedia PustakaUtama,
Jakarta, Indonesia.

Hadioetomo, R.S. 1985. Mikrobiologi

dasar dalam praktek,
PT.Gramedia, Jakarta, Indonesia.

Lucas, S. 2006. Formulasi steril, Penerbit

Andi, Yogyakarta, Indonesia.

Priyambodo, B. 2007. Manajemen

farmasi industri, Global Pustaka
Utama, Yogyakarta, Indonesia.

Santoso, U  2002.
Kulturjaringantanaman,Umm-Pre
ss, Jakarta, Indonesia.

Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya
Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril

LAMPIRAN

Pencucian alat gelas

Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya
Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril

Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya
Jurnalpraktikumteknologifarmasisteril

Farmasi, FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasSriwijaya