EFEKTIFITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK SAMBILOTO TERHADAP BAKTERI

Escherichia Coli DENGAN METODE DIFUSI CAKRAM

Oleh

Chusun1 dan Zagala Andro 2

1
Dosen Akademi Farmasi Bhumi Husada Jakarta
2
Alumni Akademi Farmasi Bhumi Husada Jakarta

ABSTRAK

Sambiloto (Andrographis Paniculata [Burm.f.]Ness) merupakan salah satu

tanaman obat yang banyak digunakan. Penggunaan simplisia sambiloto
(Andrographidis herba) tahun 2005 tercatat sebesar 6,242 kg. Sambiloto akan
dikembangkan menjadi obat fitofarmaka yaitu sebagai anti neoplasma. Selain itu, dapat
dimanfaatkan pula untuk antimikroba atau antibakteri, antihiperglikemik, anti sesak
17
napas dan untuk memperbaiki fungsi hati.
Di negara berkembang banyak ditemukan penyakit diare seperti di Indonesia dan
tanaman sambiloto merupakan salah satu tanaman tanaman obat keluarga yang
mudah ditemukan sehingga penulis tertarik melakukan penelitian dengan judul Uji
Efektivitas Antibakteri Ekstrak Herba Sambiloto (Andrographis herba) terhadap bakteri
Escherichia coli dengan metode Difusi Cakram.
Penelitian ini dilakukan menggunakan metode eksperimental yaitu menampilkan
data-data yang diperoleh setelah adanya perlakuan terhadap obyek.
Berdasarkan Hasil uji efektivitas antibakteri menunjukkan bahwa herba sambiloto
(Andrographidis herba) mempunyai efektivitas menghambat pertumbuhan bakteri
Escherichia coli. Semakin besar konsentrasi ekstrak maka semakin besar pula daya
hambat yang dihasilkan. Konsentrasi ekstrak yang paling efektif menghambat
pertumbuhan bakteri Escherichia coli yaitu pada konsentrasi 20 % dengan zona hambat
sebesar 5,06 mm.

Kata Kunci : Ekstrak Sambiloto, Efektifitas, Bakteri Escherichia Coli

PENDAHULUAN

Latar Belakang

Para Orang tua dan nenek moyang tidak banyak efek samping yang
kita dengan pengetahuan dan ditimbulkan seperti yang terjadi pada
16
peralatan yang sederhana telah pengobatan kimiawi. Kemajuan ilmu
mampu mengatasi masalah kesehatan. pengetahuan dan teknologi modern
Berbagai macam penyakit dan keluhan yang semakin pesat dan canggih di
ringan maupun berat diobati dengan zaman sekarang ini, ternyata tidak
memanfaatkan ramuan dari tumbuhan mampu menggeser atau
tertentu terutama didapat di sekitar mengesampingkan begitu saja
pekarangan rumah dan hasilnya pun peranan obat tradisional, tetapi justru
16
cukup memuaskan. hidup berdampingan dan saling
Kelebihan dari pengobatan dengan melengkapi obat modern. Hal ini
menggunakan ramuan tumbuhan terbukti dari banyaknya minat
secara tradisional tersebut ialah relatif masyarakat menggunakan obat
9
tradisional. Namun yang menjadi Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak
masalah dan kesulitan bagi para Herba Sambiloto (Andrographis herba)
peminat obat tradisional sampai saat terhadap bakteri Escherichia coli
ini ialah kurangnya dengan metode Difusi Cakram.
pengetahuan/informasi yang memadai
mengenai berbagai jenis tumbuhan Rumusan masalah
yang dapat dipakai sebaga ramuan Apakah Ekstrak Herba Sambiloto
obat tradisional untuk mengobati dapat menghambat pertumbuhan
penyakit tertentu dan cara bakteri dan pada konsentrasi
16
pembuatanya. berapakah ekstrak herba sambiloto
Sambiloto (Andrographis paling efektif pada bakteri Escherichia
Paniculata [Burm.f.]Ness) merupakan coli dengan metode difusi Cakram?
salah satu tanaman obat yang banyak
digunakan. Penggunaan simplisia Tujuan Penelitian
sambiloto (Andrographidis herba) tahun 1. Tujuan Umum
2005 tercatat sebesar 6,242 kg. Mengetahui efektivitas
Sambiloto akan dikembangkan menjadi antibakteri Ekstrak Herba
obat fitofarmaka yaitu sebagai anti Sambiloto terhadap bakteri
neoplasma. Selain itu, dapat Escherichia coli dengan metode
dimanfaatkan pula untuk antimikroba difusi cakram.
atau antibakteri, antihiperglikemik, anti 2. Tujuan Khusus
sesak napas dan untuk memperbaiki a. Mengetahui besarnya zona
17 hambat Ekstrak Herba
fungsi hati. Sambiloto pada Konsentrasi
Efek farmakologis dari herba tertentu terhadap bakteri
sambiloto berkhasiat bakteriostatik Escherichia coli metode difusi
pada Staphylococcus aureus, Cakram
Pseudomonas aeruginosa, Proteus b. Mengetahui adakah
vulgaris, Shigella dysentriae,dan perbedaan secara bermakna
3
Escherichia coli. diameter zona hambat Ekstrak
Escherichia coli merupakan kuman Herba Sambiloto pada
oportunis yang banyak ditemukan di konsentrasi larutan uji
dalam usus besar manusia sebagai terhadap Escherichia coli
floral normal. Sifatnya unik karena metode difusi Cakram.
dapat menyebabkan infeksi primer
pada usus misalnya diare pada anak Desain Penelitian
dan travelers diarrhea, seperti Penelitian ini dilakukan
kemampuanya menimbulkan infeksi menggunakan metode eksperimental
10
pada jaringan tubuh lain di luar usus. yaitu menampilkan data-data yang
Penelitian serupa pernah dilakukan diperoleh setelah adanya perlakuan
oleh Made Yendhi Sawitti, Hapsari terhadap obyek.
Mahatmi, dan Nengah Kerta
Besung dari Universitas Udayana Tempat dan Waktu Penelitian
Fakultas Kedokteran hewan Penelitian ini dilakukan di
tahun 2013 dengan menggunakan laboratorium Mikrobiologi Akademi
13 Farmasi Bhumi Husada Jakarta yang
perasan daun sambiloto. berlokasi Jl. RS Fatmawati raya No.7
Di negara berkembang banyak Cilandak Jakarta Selatan pada bulan
ditemukan penyakit diare seperti di Mei - Juni 2015.
Indonesia dan tanaman sambiloto
merupakan salah satu tanaman Variabel Penelitian
tanaman obat keluarga yang mudah 1. Variable Independen
ditemukan sehingga penulis tertarik Variablel independen dalam
melakukan penelitian dengan judul penelitian ini yaitu ekstrak herba
10
 sambiloto dengan berbagai berbau khas aromatik, rasa sangat
konsentrasi. pahit.
2. Variabel Dependen 2. Identifikasi secara mikroskopik
Variable dependen dalam Hasil identifikasi secara
penelitian ini adalah adanya zona mikroskopis pada serbuk herba
hambat yang terlihat disekitar sambiloto dengan menggunakan
cakram yang telah ditetesi larutan kloralhidrat menunjukan adanya
uji. fragmen epidermis bawah dengan
stomata dan sel batu,.
Populasi dan Sampel 3. Identifikasi kandungan saponin,
1. Populasi flavonoid dan tannin
Populasi pertama pada Hasil identifikasi secara kimia
penelitian ini adalah Herba terhadap serbuk herba sambiloto
Sambiloto (Andrographidis herba) menunjukkan adanya golongan
yang dibeli dari Badan Penelitian senyawa saponin, flavonoid dan
dan Pengembangan Tanaman tannin.
Obat dan Aromatik ,Cimanggu
,Bogor. Populasi kedua adalah Identifikasi kandungan saponin
bakteri Escherichia Coli yang dilakukan dengan penambahan 1
diperoleh dari Laboratorium tetes asam klorida 2N buih tidak
Mikrobiologi Universitas Indonesia. hilang, menunjukkan adanya
2. Sampel saponin.
Sampel pertama yang Identifikasi Flavonoid pada ekstrak
digunakan pada penelitian ini herba sambiloto, dapat dilakukan
adalah bakteri Escherichia coli dengan motode Kromatografi Lapis
yang diperoleh dari biakan yang Tipis. Fase diam yang digunakan
didapat dari Mikrobiologi yaitu silika gel GF 254,
Universitas Indonesia. Sampel sedangkan fase geraknya
kedua pada penelitian ini adalah choloform:metanol(5:5). Masukan 5
satu koloni bakteri Escherichia coli ml fase gerak ke dalam bejana
yang diambil secara random kromatografi, biarkan hingga cairan
dengan menggunakan kawat ose. dalam bejana jenuh. Cairkan ekstrak
kering dengan pelarut masing-
HASIL PENELITIAN masing, kemudian cairan ditotolkan
DAN PEMBAHASAN dilempeng kromatografi dengan
bantuan pipet kapiler, masukan
Hasil Identifikasi lempeng KLT kedalam bejana
Identifikasi tumbuhan yang di kromatografi, biarkan fase gerak
peroleh dari Badan Penelitian dan naik hingga batas dilusi. Hasil positif
Pengembangan Tanaman Obat dan jika warna noda dibawah sinar UV
Aromatik ,Cimanggu ,Bogor. kuning coklat.
menunjukkan bahwa tumbuhan
yang digunakan dengan nama Identifikasi kandungan tannin
spesies Andrographidis paniculata, pada serbuk herba sambiloto
famili Acanthaceae . dilakukan dengan penambahan besi
1. Identifikasi secara organoleptis (III) klorida terjadi warna hijau
Hasil identifikasi organoleptis kehitaman menunjukkan adanya
terhadap herba sambiloto adalah tannin. Dibawah ini hasil identifikasi
Tinggi sekitar 50 cm, Batang senyawa kimia herba sambiloto
berwarna hijau,Daun bagian atas
dari batang berwarna hijau dan
bunga kecil berwarna putih dengan
strip ungu. Serbuk simplisia herba
sambiloto berwarna hijau kelabu,
11
 dilarutkan dalam 25 ml aquadest
Pembuatan Ekstrak Etanol Herba aduk sampai larut dan sterilkan di
Sambiloto autoklaf.
Serbuk herba sambiloto ditimbang 5. Pembuatan media MHA (Mueller
sebanyak 20 gram dimasukkan ke Hinton Agar)
dalam sebuah bejana maserasi, Serbuk MHA ditimbang
tambahkan 150 ml etanol 70%, ditutup sebanyak 6,8 gram dilarutkan dalam
dan dibiarkan selama 5 hari terlindung 200 ml aquadest aduk lalu
dari cahaya, sambil sesekali diaduk. panaskan sampai mendidih/ jernih.
Setelah 5 hari, ekstrak disaring, ampas Sterilkan dalam autoklaf. Tuangkan
diperas. Ampas ditambah etanol 70% dalam petri dish sebanyak 9 ml.
secukupnya sampai 150 ml, diaduk dan
diserkai, sehingga diperoleh seluruh Hasil Uji Efektivitas Antibakteri
sari sebanyak 150 ml. Ekstrak cair Ekstrak Herba Sambiloto
kemudian dipekatkan dengan cara terhadap bakteri Echerichia coli
dipanaskan di atas waterbath.
Tabel 2
Pembiakan bakteri Escherichia coli Hasil uji efektivitas dari
Diambil satu sengkelit bakteri dari aktivitas antibakteri ekstrak
herba sambiloto terhadap
biakan murni Escherichia coli dengan
bakteri Escherichia coli
menggunakan ujung ose steril, lalu
digoreskan secara zig-zag pada Konsentrasi
Media Media Media Diameter
seluruh media nutrient agar miring dan Control
MHA 1 MH MH Rata –rata
secara merata. Kemudian diinkubasi A2 A3
5%
pada suhu 37⁰C selama 18-24 jam. 1,65 mm 1,10 mm 1,60 mm 1,45 mm

10%
2,50 mm 2,65 mm 2,25 mm 2,67 mm
Pembuatan Suspensi dan Media 15%
3,55 mm 3,60 mm 3,30 mm 3,48 mm
1. Pembuatan suspensi bakteri
20%
Satu koloni bakteri Escherichia 5,50 mm 4,85 mm 4,85 mm 5,06 mm

coli di ambil dengan menggunakan Kontrol (+)

8,25 mm 8,65 mm 8,80 mm 8,56 mm
kawat ose, kemudian disuspensikan Kontrol (-)
0.00 mm 0.00 mm 0.00 mm 0 mm
dalam tabung reaksi yang berisi 9 ml
larutan NB (Nutrient Broth). Hasil penelitian efektivitas
2. Pembuatan suspensi Antibiotik antibakteri dari herba sambiloto
Antibiotik tetrasiklin 500 mg terhadap bakteri Escherichia coli
dalam tabung reaksi ditambah menunjukkan hasil bahwa herba
aquadest steril 10 ml ditutup dan sambiloto memiliki efektivitas
dikocok sehingga terjadi suspensi sebagai antibakteri dan mulai
tetrasiklin dalam aquadest. memberikan hambatan pertumbuhan
3. Pembuatan suspensi ekstrak herba bakteri pada hambatan sebesar 1.45
sambiloto mm yaitu pada konsentrasi 5% dan
Timbang herba sambiloto memberikan efek antibakteri yang
sebanyak yang dibutuhkan, sesuai cukup besar dengan hambatan
dengan masing-masing konsentrasi sebesar 5.06 mm pada konsentrasi
yaitu: 0,5 gram, 1 gram, 1,5 gram 20%, hal ini menunjukan bahwa
dan 2 gram kemudian masing- herba sambiloto memiliki daya
masing ditambah dengan aquadest hambat sebagai antibakteri
steril sebanyak 10 ml, tabung ditutup Escherichia coli dan terbukti
dan dikocok hingga terjadi suspensi semakin besar konsentrasi maka
ekstrak herba sambiloto dalam semakin besar pula daya hambat
aquadest. yang dihasilkan.
4. Pembuatan larutan NB (Nutrient
Broth) Hasil penelitian menunjukkan
Timbang 200 mg Nutrient Broth bahwa Tetrasiklin sebagai kontrol
12
 positif menghasilkan hambatan
pertumbuhan yang baik terhadap
bakteri Escherichia coli dengan
hambatan sebesar 8,56 mm pada
dosis 500mg. Sedangkan Aquadest
sebagai kontrol negatif tidak
sedikitpun memberikan efek pada
media.
Analisa Data
Data yang diperoleh dari penelitian
dengan cara mengamati, mencatat lalu
dianalisa secara statistik. Oleh karena
data lebih dari satu kategori maka
analisa dilakukan dengan cara
anova, untuk melihat apakah data
yang dihasilkan homogen dan
menunjukan perbedaaan rata-rata yang
nyata. Kemudian membandingkan
rata- rata konsentrasi ekstrak dengan
rata-rata kontrol positif dan kontrol
negatif dengan menggunakan uji post
hoc.
Hasil uji Anova data
konsentrasi ekstrak dan kontrol
positif
Tujuan : Untuk mengetahui ada
tidaknya perbedaan bermakna
diameter zona Hambat antar
kelompok setelah perlakuan
Hipotesis : Ho = Data diameter zona
hambat tidak berbeda bermakna
Ha = Data diameter zona hambat
berbeda
Pengambilan keputusan : ɑ = 0,05
Ho diterima jika nilai
signifikan ≥ 0,05
Ho ditolak jika nilai signifikan ≤ 0,05
Hasil uji Anova data konsentrasi
ekstrak dan kontrol negatif
Tujuan : Untuk mengetahui ada
tidaknya perbedaan bermakna diameter
zona Hambat antar kelompok setelah
perlakuan Hipotesis : Ho = Data
diameter zona hambat tidak berbeda
bermakna
Ha = Data diameter zona hambat
berbeda
Pengambilan keputusan : ɑ = 0,05
Ho diterima jika nilai signifikan ≥ 0,05
Ho ditolak jika nilai signifikan
0,05Hasil : Nilai signifikan ≤
0,05
Kesimpulan : Ho ditolak, data
diameter zona hambat terdapat
perbedaan bermakna
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
1. Hasil uji efektivitas antibakteri
menunjukkan bahwa herba
sambiloto (Andrographidis herba)
mempunyai efektivitas menghambat
pertumbuhan bakteri Escherichia
coli.
2. Semakin besar konsentrasi ekstrak
maka semakin besar pula daya
hambat yang dihasilkan.
Konsentrasi ekstrak yang paling
efektif menghambat pertumbuhan
bakteri Escherichia coli yaitu pada
konsentrasi 20 % dengan zona
hambat sebesar 5,06 mm.
Saran
1. Perlu dilakukan penelitian
berikutnya dengan ekstrak yang
konsentrasinya diatas 20%.
2. Perlu dilakukan penelitian dengan
menggunakan metode ekstraksi
lainya seperti soxhletasi. Destilasi,
dan perkolasi.
Daftar
Pustaka
1. Anonim. Farmakognosi II. Buku
Ajar Farmasi. Politeknik
Kesehatan Kementrian Kesehatan.
Jakarta. Hal 12
2. BPOM, Monografi ekstrak
tumbuhan obat indonesia Volume
1, 2003, badan pengawasan obat
dan makanan Republik
Indonesia, jakarta
3. Daliamartha.S,Atlas Tumbuhan
Obat Indonesia, jilid 1, jakarta ,
Pustaka Bunda,Group Puspa
Swara,Anggota Ikapi, 2003
4. Depkes RI, 1989. Material
Medika Indonesia. Jilid V. Dirjen
POM, Kementrian Kesehatan
≤
republik Indonesia, Jakarta
13
5. Depkes RI, 1989. Material
Medika Indonesia. Jilid IV. Dirjen
POM, Kementrian Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta
6. Depkes RI, 2000. Parameter
Standar Umum Ekstrak
Tumbuhan Obat. Departemen
Kesehatan RI, Dirjen POM,
Direktorat Pengawasan Obat
Tradisional, Jakarta
7. Depkes RI, 1986. Sediaan
galenika. Departemen Kesehatan
RI, Dirjen POM, Direktorat
Pengawasan Obat Tradisional,
Jakarta
10. Harmita,radji,maksum, 2008.
Buku ajar Analis hayati edisi
ketiga. buku kedokteran,depok. Hal
1- 26
11. karsinah,1993. Mikrobioklogi
kedokteran. edisi revisi, bina
rupa aksara,jakarta. Hal 122
12. Levinson W. 2008. Review of
Medical Microbiology. Amerika:
The McGraw-Hill Companies.
Available from URL :
http://id.wikipedia.org/wiki/Escheric
hia_coli. Diakses pada tanggal
11 Mei 2015

8. Drs.Tan Hoan Tjay & Drs. Kirana
Rahardja. Obat – Obat Penting.
Edisi keenam. PT Elex Media
Komputindo, jakarta 2007. Hal 78
9. Fardiaz,S.1992.Mikrobiolgi
Pangan I.Jakarta. Gramedia
Pustaka Utama. Hal 236
URL :
http://download.portalgarudaorg/jo
urnalfakultas
kedokteranhewan/pdf. diakses
pada tanggal 2 Mei 2015
13. 13. Made Yendhi Sawitti, Hapsari
Mahatmi dan Sri I Nengah
Kerta Busung. 2013, Daya Hambat
Perasaan Daun Sambiloto
Terhadap Pertumbuhan Bakteri
Escherichia Coli , Universitas
Udayana Fakultas Kedokteran
hewan. Available from

14. Redaksi ArgoMedia, 2008. 273

Ramuan Tradisional. ArgoMedia
pustaka, Jakarta. Hal 243

15. Staf Pengajar Fakultas

Kedokteran UI. 1994. Buku Ajar
Mikrobiologi Kedokteran. Bina rupa
aksara. Jakarta

16. Thomas A.N.S,1992,Tanaman

Obat tradisional edis
2,kanisius.Jakarta

17. W.P.Winarto, Tim

Karyasari,2004,Sambiloto: budi
daya& pemanfaatan untuk obat,
Penebar swadaya

14
15