Tujuan
Menentukan kerentanan P. perniciosus dan P. tobbi untuk dua strain L. tropica yang sangat berbeda :
strain L810(IARA / IL / 2001 / LCR-L810 Amnunfly1), diisolasi dari alamterinfeksi P. arabicus dalam fokus
zoonosis di Israel utara dan strain SU23 (MHOM / TR / 1998 / SU23) diisolasi dari pasien CL di sebuahfokus
perkotaan di Sanliurfa, Turki.
Kedua strain ini juga berbeda karbohidrat terminal LPG mereka: sedangkan SU23 memiliki tipikal L.
tropica LPG dengan glukosa terminal, gula terminal dari LPG L810 sebagian besar adalah galaktosa yang
menyebabkan ketidakmampuannya berkembang di P. sergenti . Infeksi SU23 telah didemonstrasikan untuk
tikus dan tikus sementara L810 secara eksperimental ditularkan ke hyraxes oleh gigitan P. arabicus. Setelah
lewat melalui inang mamalia, strainnya dikriopreservasi. Leishmania promastigotes dibudidayakan pada
medium M199 (Sigma) mengandung 20% serum sapi janin yang dilemahkan panas.
Untuk semua infeksi lalat pasir, parasit dengan nomor bagian in vitro kurang dari 10 digunakan. Empat
koloni lalat pasir yang dipelihara dengan baik telah didirikan bekas. Phlebotomus tobbi yang berasal dari betina
yang ditangkap di Cukur-ova, Turki (satu-satunya koloni laboratorium spesies ini di dunia dan koloni P.
perniciosus yang berasal dari Murcia, Spanyol, digunakan sebagai spesies uji. Phlebotomus sergenti dan
Koloni P. arabicus berasal dari tempat yang sama dengan Leishmania isolat: P. arabicus dari Amnun, Israel
utara (asal L810), P. sergenti dari Sanliurfa, Turki (asal SU23).
Masing-masing diisolasi dan digunakan sebagai kontrol positif. Semuakoloni lalat pasir dipelihara
dalam kondisi standar (pada 26 ° C; makan sukrosa 50%; dengan cahaya 14:10 jam: fotoperiode gelap), Sekitar
dua puluh empat jam sebelum makanan menular 200 lalat pasir betina (berumur 5–9 hari) dari masing-masing
spesies dipisahkan. dinilai dan tidak diberi makanan sukrosa. Promastigotes dari log-fase kultur disuspensi
kembali dalam darah kelinci yang dilemahkan panas pada konsentrasi 10 6 promastigotes per mL dan
ditawarkan ke pasirterbang menembus kulit ayam.
Betina yang membengkak dipisahkan, dibuat dengan sukrosa dan dipelihara dalam kondisi standar.
Pembedahan dilakukan sebelum defe-kation (tahap awal infeksi) pada hari ke-2 pasca makan darah (PBM)
dan setelah buang air besar (infeksi stadium akhir) pada hari ke 8 PBM. Berlimpah tarian dan
lokalisasi parasit Leishmania di usus lalat pasir diperiksa dengan mikroskop cahaya. singkatnya, beban parasit
dinilai sebagai ringan (kurang dari 100 parasit per usus), sedang / sedang (100–1000 parasit per usus) dan berat
(lebih dari 1000 parasit per usus). Infeksi eksperimental P. perniciosus diulang empat kali per strain L. tropica .
Oleh karena itu pakan eksperimental P. tobbi dilakukan enam kali dengan SU23 dan delapan kali dengan stari
L810.
Pertamaa, dinfeksi P. perniciosus dan P. tobbi dengan antro-ponotic L. tropica SU23, dan vektor
alami P. sergenti yang disajikan sebagai kontrol positif. Pembedahan dilakukan pada tahap awal infeksi, pada
hari ke-2 PBM, menunjukkan tingkat infeksi yang serupa (91-97%) di antara ketiga spesies lalat pasir yang diuji
. Procyclic promastigotes terletak di dalam ruang endoperitrofik di dalam darah yang dikelilingi oleh matriks
peritrofik.
Pada hari ke-8 PBM, ditemukan infeksi stadium akhir yang berkembang sepenuhnya ketiga spesies lalat
pasir dan mayoritas betina yang dibedah menanggung beban parasit berat. Tingkat infeksi yang relatif tinggi,
91% dan 89%, ditemukan di P. perniciosus dan P. tobbi, masing-masing. Tingkat infeksi di P. sergenti lebih
rendah (67%) yang berhubungan baik dengan penelitian sebelumnya tentang spesies ini
Hampir semua wanita yang terinfeksi daritiga spesies lalat pasir, promastigotes berkoloni di usus tengah
dada (92–97%), dan di sebagian besar dari mereka promastigotes juga menjajah katup stomodeal (79%, 75%
dan 71% untuk P. perniciosus, P. tobbi dan P. sergenti , masing-masing), Perkembangan zoonosis L.
tropica L810 dari Israel, dan P. arabicus digunakan sebagai kontrol. Pada hari ke 2 PBM (Bagian 2), tingkat
infeksi tinggi (93-100%) dengan mayoritas infeksi berat (65–71%) diamati di semua spesies lalat pasir yang
diuji , semua parasit dilokalisasi di ruang endoperitrofik. Pada hari ke 8 PBM, tingkat infeksi yang sangat tinggi
diamati pada semua spesies yang diuji (90%, 95% dan 92% untuk P. perniciosus, P. tobbi dan P.
arabicus, secara berturut-turut) dan muatan parasit yang berat mendominasi (57% -68% untuk ketiganya jenis.
Proporsiinfeksi Leishmania yang sangat tinggi menjajah usus tengah dada (> 95% wanita yang terinfeksi
secara keseluruhan jenis); kolonisasi katup stomodeal dengan jumlah yang banyak promastigotes metasiklik
diamati di 81%, 86% dan 94% untuk P. perniciosus, P. tobbi dan P. arabicus,.
Singkatnya, dibeah 840 pasir yang diinfeksi secara eksperimental lalat (354 P. perniciosus , 129 P. tobbi ,
190 P. sergenti dan 167 P. arabicus ); tingkat infeksi dan lokalisasi infeksi di P. tobbi dan P.
perniciosus sepenuhnya sebanding dengan vektor alami yang digunakan sebagai kontrol itive. Kedua strain L.
tropica yang diuji, SU23 dan L810, tumbuh baik di semua spesies lalat pasir; tingkat infeksi tinggi, parasit berat
beban dan infeksi tahap akhir berkembang sepenuhnya dengan kolonisasi katup stomodeal dan promastigotes
metasiklik yang sangat motil diamati di semua kombinasi parasit-vektor ( Bagian 3 ).
Koloni P. perniciosus asal Eropa adalah tahan terhadap dua strain L. tropica yang sangat
berbeda . Persentase yang lebih tinggi dari infeksi tahap akhir ditemukan (91% untuk SU23 dan 90% untuk
L810) serta kolonisasi stomodeal yang lebih sering katup (79% untuk SU23 dan 81% untuk L810)
kemungkinan besar disebabkan oleh keragaman strain L. tropica .
Isolasi Leishmania dari pengungsi Afghanistan, mempelajari kedua strain parasit diisolasi di Timur
Tengah. Di sisi lain, kecil kemungkinan perbedaan yang diamati pada infektivitas untuk P.
perniciosus disebabkan oleh kondisi eksperimental Dua koloni P. perniciosus yang berasal dari Spanyol dan
Italia, digunakan sebagai alternatif dalam percobaan dan pertunjukan sangat mirip dengan pola infeksi L.
tropica . Apalagi koloni asal Spanyol identik dengan yang digunakan. Penemuan kami menunjukkan bahwa P.
tobbi dapat memainkan peran dalam transmisi L. tropica di Timur Tengah, Turki dan tenggara Eropa, dan P.
perniciosus dapat menjadi vektor parasit ini. Namun, ada spesies permisif lain yang termasuk dalam sub-
genera Larroussius dan Adlerius yang berpotensi terlibat penularan L. tropica di berbagai
daerah. Phlebotomus ( Adlerius ) halepensis , spesies yang tercatat di Turki dan Timur Tengah, berada secara
eksperimental terbukti sangat rentan terhadap sebuah tempat.
Pergerakan manusia yang dipercepat, bersama dengan perubahan iklim, dapat menyebabkan peningkatan
risiko penyebaran. Di Eropa, P.tobbi, P. perniciosus dan Larroussiu s spp lainnya. memiliki lebih luas distribusi
daripada P. sergenti , Sebuah vektor spesifik yng dipertimbangkan dalam risiko yang diprediksi untuk
pembentukan Leishmania tropica di Eropa Selatan. Di fokus perkotaan klasik L. tropica , lalat pasir dari
subgenus Lar- POLUSSİLS biasanya tidak melimpah, misalnya di Sanliurfa, Tur- kunci, kelimpahan relatif
mereka lebih rendah dari 1% .
Di sisi lain, di fokus pedesaan dengan penularan zoonosis- sion, Larroussius spp. adalah umum, misalnya
di empat endemik desa-desa di Israel utara kelimpahan relatif mereka melebihi 40% dan di Kenya, P
(Larroussius ) guggis- bergi tampaknya menjadi vektor utama. Mempertimbangkan dampak dari manusia yang
gigih migraii dari negara endemik I ropica ke Eropa selatan, dimana berbagai Larroussus spp. tersebar luas, kita
tidak bisa mengesampingkan keluar kemungkunan infeksi aslı. Berbeda dengan kebanvakan leishmaniases. CL
disebabkan oleh I ropica biasanya anthro- ponotik, peredarannya tidak membutuhkan reservoir hewan dan oleh
karena itu dapar menjadi risiko yang lebih unggi bagi manusia untuk terpapar gigitan lalat pasir ini.
Daftar Pustaka
Vaselek, S, Volf, P., 2019, Experimental infection of Phlebotomus perniciosus and Phlebotomus tobbi
with different Leishmania tropica strains, International Journal for Parasitology 49: 831-835.