Performa Dan Keunggulan
Performa Dan Keunggulan
Keunggulan Organisme
Akuakultur Transgenik
Metode produksi ikan transgenik
Gen target Teknik kloning
gen
Ikan transgenik
Seleksi untuk
keturunan F1
performa spesifik
Seleksi untuk Performa spesifik
Isolasi DNA
F0 PCR
Embrio M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 N M
Transgene
-Actin
Mosaik:
Kondisi ikan “founder” dimana tidak
semua selnya mempunyai transgen
Identifikasi ikan “germ-line transmitter”
Ikan yang membawa transgen dalam sel germinalnya
Metoda:
1. Test progeni & analisa PCR dengan DNA cetakan
diekstraksi dari embrio hasil persilangan antara
“founder’ & ikan non-transgenik
F1 (0 - 40%)
F0
Embrio
Metode produksi ikan transgenik (3)
Gen target Teknik DNA
recombinan
F1 (0 - 40%)
∑ Copy
Target
gen
Kontrol
internal
20 35
semi-kuantitatif RT-PCR ∑ cycle
Real-time PCR system
1 2 3 C N P
Target gene
Internal control
3X
Real-time PCR: expression level
Produksi ikan F2 (heterosigot)
Xm Y
X XXm XY
F1 (0 - 40%)
X XXm XY
F2 (~50%)
F1
(Mendelian pattern)
Metode produksi ikan transgenik (3)
Gen target Teknik DNA
recombinan
Ikan transgenik
Seleksi untuk
keturunan F1
performa spesifik
Produksi ikan F2 homosigot
Normal
X Heterosigot F2
F1 Homosigot
M
F Xm Y
Xm XmXm XmY X
X XXm XY
F2
Semua transgenik
Meningkatkan laju pertumbuhan
Meningkatan resisten thd penyakit
Meningkatkan adaptasi thd kondisi lingkungan yg ekstrem,
seperti temperatur beku
Meningkatkan kualitas daging;
Mengubah jalur biosintesis utk meningkatkan konversi pakan;
Biosensor;
Memproduksi strain ikan baru;
Purposes……
Meningkatkan Laju Pertumbuhan
# Salmonid : 10 fold (Devlin et al., 1994)
# Mud loach : 35 fold (Nam et al., 2001)
# Nile tilapia : 7 fold (Kobayashi, 2006)
normal
normal
Nila:
tumbuh 2-7x lebih cepat
Transgenik:
31 cm; 291 g
Non-Transgenik:
9,4 cm; 9 g
β-actin expression
at caudal fin ◄
F0 fish
F0 TRANSGENIC GH NON-TRANSGENIC
(6 months; 200 g) (6 months; 80 g)
Body weight of 4-month old juvenile
Transgenesis: ikan lele dumbo
- pCcBA-PhGH (Cyprinus carpio β-actin promoter ligated with Pangasionodon hypophthalmus GH)
- Sperm mediated gene transfer, by electroporation
non transgenik
0 15 30 Hari
45 60 75 90
2,5 35,0%
efficiency (x100%)
Transgenic
Food conversion
2,0
Non-
transgenic
1,5
1,0
1 2 3 4 5 6 7 8
Age (week)
120
34,4% 36,5%
90
**
60 26,1%
**
30 29,6%
0
10 43 235 660
Biosensor
-Zebrafish (Danio rario) Principle:
Clean water
* *
*
RE GFP Poly (A)
*
-Medaka (Oryzias latipes) *
Polluted
* * ** * * *
** * * **
* ** ** ** * *
RE GFP Po ly (A)
Goals ……
(Gong, 2003)
THE END