I.

Prinsip kerja pemeriksaan asam lemak berdasarkan jurnal berjudul “Analytical

Methods” terdapat 6 metode yaitu :

A. Metode Kolorimetri.

1. Metode Sabun Tembaga.

Pada tahun 1956, Ayers 5 melakukan upaya pertamanya untuk menentukan FFA
dengan metode kalorimetri. Menurut prosedurnya, larutan tembaga atau kobalt
nitrat digunakan untuk itu mengubah FFA menjadi sabun yang tidak larut dalam
air. Endapan sabun berwarna diekstraksi dengan kloroform dan kuantifikasi
dilakukan dengan mengukur absorbansi pada 675 dan 527 nm untuk tembaga dan
kobalt.

2. Sistem FIA Otomatis.

Sistem otomatis pertama untuk analisis FFA pada minyak nabati menggunakan
metode sabun tembaga adalah analisa yang diperkenalkan pada tahun 1980-an.
Otomatisasi dilakukan dengan menggunakan analisis injeksi aliran (FIA) sistem
yang mampu menganalisis hingga 20 sampel / jam. Berbeda dengan sebelumnya
metode yang diterbitkan, berdasarkan pelarut organik, penghitungan dilakukan
dalam air tahap.

3. Metode Berbasis Fenolftalein.

Karena kekurangan metode resmi, Linares dkk., 16 mencoba mengotomatiskan

metode resmi. Dia menggunakan reagen yang sama dengan metode resmi IUPAC,
sedangkan penghitungan didasarkan pada pemantauan penurunan fenolftalein
(PHP) intensitas pada 562 nm sebagai hasil reaksi antara KOH dan FFA dalam
sampel minyak. Kemudian metode yang dimodifikasi dengan rentang analitik
serupa dilaporkan 17 menggunakan 3-7 ml 1-propanol murah sebagai pengencer
dan pembawa dibandingkan dengan large jumlah pelarut dalam metode resmi.

4. Metode Spektrofotometri lain – lain.

Sebuah pendekatan baru untuk penentuan FFA dalam medium tidak berair tanpa
titrasi adalah dilaporkan dalam literatur. Metode tersebut memanfaatkan fenol
merah sebagai indikator asam lemak, yang dilarutkan dalam misel terbalik yang
dibentuk oleh AOT [sodiumbis (2-ethylhexyl) sulfosuccinate] dalam isooctane.
 Kuantifikasi dicapai dengan memantau perubahan absorbansi pada 560 nm
(hilangnya warna merah).

B. Metode Elektrokimia

1. Teknik Voltametri.

Voltametri adalah kelas penting dari metode elektrokimia yang banyak digunakan
dalam analitik kimia dan berbagai proses industri. Dalam voltametri, informasi
tentang analik diperoleh dengan mengukur arus karena potensialnya bervariasi. 28
Biasanya digunakan untuk senyawa yang mudah teroksidasi / direduksi menjadi
sangat selektif dan sensitif metode kuantitatif. Secara elektrokimia FFA aktif
lemah dan dapat dikurangi atau teroksidasi menjadi sangat selektif dan sensitif
metode kuantitatif. Secara elektrokimia FFA aktif lemah dan dapat dikurangi atau
teroksidasi.

2. Metode Konduktivitas Listrik.

Baru-baru ini pendekatan baru untuk penentuan FFA dalam minyak nabati
berdasarkan Perubahan nilai konduktivitas listrik (EC) dari 0,04 M kalium
hidroksida (KOH) larutan selama reaksi campuran KOH-FFA dilaporkan. 36 Nilai
EC berubah dari Lapisan larutan KOH ditentukan, dan FFA ditentukan dari
kalibrasi merencanakan. Berbagai parameter dioptimalkan seperti konsentrasi
larutan KOH, holding waktu, jenis minyak nabati, pengaturan suhu, dan rasio
minyak terhadap larutan KOH ( m / v). Metode tersebut divalidasi menggunakan
penambahan standar dan metode AOCS. Hasil dan kinerja analitis dari prosedur
EC lebih baik daripada metode AOCS.

3. Metode pH-metrik.

Secara umum polaritas rendah dan viskositas tinggi minyak membuat penggunaan
pH tidak praktis metode metrik untuk penentuan FFA. metrik pH pengukuran
dengan mengekstraksi FFA dari minyak menjadi pelarut polar. Untuk
memfasilitasi ekstraksi, disarankan penggunaan trietanolamina basa lemah (TEA)
dalam sebuah campuran pelarut yang sesuai (dietil eter 80%, kloroform 19% dan
air 1%) untuk mengubah asam karboksilat menjadi garamnya. Meskipun metode
itu bisa diterapkan tetapi menunjukkan reproduktifitas yang buruk karena
ketidakstabilan elektroda dan reagen dasar di campuran pelarut. Kemudian metode
 tersebut dimodifikasi dengan mengganti trietanolamina dengan 1: 1 (v: v)
campuran iso-propanol dan air yang mengandung 0,2 M TEA dan 0,02 M.KNO
3.38-41 Daripada mengekstraksi FFA, campuran pelarut ini secara efektif
membuat emulsi dalam kisaran pengukuran pH.

C. Metode Spektroskopi

1. Metode Inframerah Langsung.

Kemungkinan menggunakan spektroskopi FTIR untuk analisis FFA telah

diperiksa oleh jumlah ilmuwan selama dua dekade terakhir. Lanser dkk., 47
pertama kali melaporkan semi metode kuantitatif untuk analisis FFA dalam
minyak kedelai dengan FTIR berbantuan komputer menggunakan teknik
dekonvolusi. Dia mengumpulkan spektrum minyak menggunakan sel transmisi,
dan mengamati perubahan spektral di daerah karbonil pada kisaran 2000-1600 cm
1, dan berkorelasi dengan konten FFA yang diperoleh dengan metode AOCS
standar. Metodenya adalah berdasarkan pengembangan petak kalibrasi
menggunakan asam oleat sebagai standar menjadi kedelai bebas FFA minyak.
Batasan utama untuk membuat metode ini lebih kuantitatif adalah variasi spektral
pita ester di antara berbagai minyak, karena asam karboksilat C = O serapan
muncul bahu penyerapan hubungan trigliserida ester.

2. Metode Inframerah Tidak Langsung.

Untuk lemak dan minyak yang mungkin telah mengalami tekanan termal yang
signifikan atau ekstensif oksidasi, metode spektroskopi FTIR tidak langsung
dikembangkan untuk FFA berdasarkan ATR pendekatan untuk menghilangkan
efek matriks. 48 KOH / metanol 1% digunakan untuk ekstrak FFA dan ubah
menjadi garam kaliumnya. Anion karboksilat menyerap pada 1570 cm –1, jauh
dari gangguan absorpsi karbonil yang biasa ada di minyak teroksidasi. Untuk
mengatasi efek matriks, metode tidak langsung lebih sensitif dan akurat daripada
penentuan langsung FFA, meskipun metodenya mempersulit analisis. Metode ini
didasarkan pada pendekatan tidak langsung untuk menghindari efek matriks
yang terkait dengan pengukuran langsung pita asam karboksilat pada 1711 cm- 1.

3. Metode Inframerah Dekat.

 Metode inframerah dekat (NIR) untuk analisis FFA dalam minyak dan lemak
telah dilaporkan sebelum metode mid infrared (MIR). menggunakan spektroskopi
NIR untuk pertama kali untuk menentukan kualitas kedelai dan minyaknya yang
disimpan pada kelembaban yang berbeda level. Ia mengamati bahwa analisis NIR
pada 2260 nm menunjukkan koefisien korelasi yang baik sebesar 0,864 dengan
FFA yang dapat dititrasi. Selain itu, dilaporkan bahwa analisis NIR paling banyak
cocok dan cepat untuk mengevaluasi kerusakan hidrolitik pada kedelai yang
disimpan.

D. Spektrometri Raman

Spektrometri Raman transformasi Fourier dalam kombinasi dengan regresi PLS

digunakan untuk penentuan kandungan FFA tanpa reagen langsung dalam minyak
zaitun dan buah zaitun. Minyak secara langsung diselidiki dalam sel aliran sederhana,
sedangkan zaitun diukur dalam cangkir sampel khusus, yang diputar secara eksentrik
ke sinar laser horizontal selama akuisisi spektrum. Validasi eksternal dan internal
(tinggalkan satu kali) digunakan untuk menilai kemampuan prediksi model kalibrasi
PLS untuk kandungan FFA dalam minyak dan buah zaitun di kisaran 0,20–6,14 dan
0,15–3,79%, masing-masing.

E. Spektroskopi Resonansi Magnetik Nuklir

Spektroskopi resonansi magnetik nuklir (NMR) semakin banyak diterapkan pada

analisis komponen makanan dan makanan. Di bidang minyak dan lemak nabati, NMR
memberikan manfaat informasi tentang komposisi kelas lipid (jumlah relatif
triasilgliserol, diasilgliserol, FFA, sterol, fosfolipid, dan komponen minor lainnya).
Data NMR sesuai dengan yang diperoleh dengan menggunakan UV spektrofotometri,
menunjukkan bahwa NMR adalah metode yang sesuai untuk mengikuti perubahan
lipolitik. Disebutkan bahwa metode tersebut dapat digunakan untuk memantau
perubahan lemak dan minyak ikan selama pemrosesan atau penyimpanan. Kedua
metode AOCS dan NMR digunakan untuk menentukan tingkat degradasi minyak.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa FFA meningkat seiring dengan bertambahnya
waktu pemanasan.

F. Metode Thermogravimetri.
Metode termometri juga merupakan metode titrimetri yang menggunakan perubahan
suhu hasil dari reaksi kimia untuk menentukan titik akhir titrasi. Itu prinsipnya sama
dengan prinsip untuk titrasi otomatis potensiometri; satu-satunya perbedaan adalah
Jenis sensor (detektor) biasanya digunakan termistor. Vaughan dan Swithenbank 81
melaporkan kemajuan besar pertama dalam menentukan titik akhir dari reaksi asam /
basa dalam media non-air. Prosedur titrimetri baru telah dilaporkan untuk penentuan
FFA dalam minyak nabati menggunakan titrasi termometri otomatis dengan KOH
dalam isopropanol sebagai titran. 82 Titik akhir ditunjukkan oleh basis eksotermik
yang kuat- reaksi katalis antara aseton dan kloroform. Prosedurnya akurat, sensitif,
mudah digunakan, cepat, dan sangat dapat direproduksi tetapi tidak mendapat banyak
perhatian.