BAB I

PENDAHULUAN

A. Pendahuluan
PRINSIP KERJA HPTLC
Kromatografi lapis tipis berkinerja tinggi (hptlc) adalah
bentuk Kromatografi lapis tipis (klt) yang memberikan kekuatan
pemisahan superior bahan pelapis yang dioptimalkan, prosedur
baru untuk pakan fase bergerak, lapisan pengkondisian, dan
aplikasi sampel yang lebih baik. Ini mempromosikan pemisahan
yang lebih tinggi efisiensi, waktu analisis lebih pendek, jumlah fase
gerak yang lebih rendah, dan efisien Akuisisi data dan pengolahan
parameter utama yang mempengaruhi pemisahan Konstituen
dalam campuran adalah koefisien partisi, faktor retensi (rf), dan
faktor kapasitas masing - masing konstituen pada pelat,
selektivitas fase mobile dan stasioner ke zat terlarut, dan tinggi
pelat yang menentukan efisiensi pemisahan serta resolusi masing-
masing konstituen dalam campuran. Koefisien partisi didefinisikan
sebagai konsentrasi molar dari analit dalam fase stasioner ke fase
mobile. Rf, fundamental nilai kualitatif, dinyatakan sebagai rasio
jarak migrasi individu komponen campuran relatif terhadap fase
gerak.
Faktor kapasitas (k) adalah karakteristik mendasar dari suatu
zat yang menentukan perilaku kromatografi kualitatifnya. Hal ini
dapat dinyatakan sebagai rasio waktu retensi zat dalam stasioner
terhadap fase gerak dan dipengaruhi oleh sifat kimia dari dua
fase. Nomor pemisahan (SN) yang mempengaruhi kekuatan
pemisahan HPLC didefinisikan sebagai jumlah komponen paling
tinggi yang benar-benar terpisah dalam campuran di bawah TLC
isokratik yang bebas gradien. Efikasi pemisahan dua komponen
campuran dalam kromatogram disebut sebagai resolusi dan
dipengaruhi oleh selektivitas komponen antara fase stasioner dan
mobile, laju aliran fasa gerak yang dipengaruhi oleh ukuran
partikel dan kekuatan pelarut yang mempengaruhi faktor
kapasitas.
Dalam KLT, arus fase gerak tidak terkontrol seperti pada
metode kolom. Posisi fase gerak pada waktu t saat bergerak
melalui lapisan sorben saat yang diatur oleh kekuatan kapiler oleh
demikian digambarkan oleh (Zf) 2 ¼ kt, dimana Zf adalah Jarak
dipindahkan oleh fase gerak dari asal sampel dan k adalah
kecepatan konstan. Konstanta kecepatan tergantung pada faktor
eksternal termasuk kejenuhan tingkat fase uap dalam kontak
dengan fase diam. Hal ini juga terkait dengan sifat fase mobile dan
stasioner dengan persamaan.
FITUR HPTLC:
Kelebihan pengaturan off-line ini dibandingkan dengan
proses on-line, seperti kromatografi cair kinerja tinggi kolom
(KCKT), telah diuraikan dan mencakup hal-hal berikut:
• Secara teknis, mudah dipelajari dan dioperasikan.
• Beberapa analis bekerja bersamaan pada sistem.
• Turunkan waktu analisis dan sedikit biaya per analisis.
• Biaya perawatan rendah.
• Deteksi visual mungkin - karena ini adalah sistem terbuka.
• Ketersediaan sejumlah besar fase stasioner dengan
selektivitas unik untuk komponen campuran. Lapisan
kromatografi (sorben) tidak memerlukan regenerasi karena
pelat TLC / HPTLC dapat digunakan sekali pakai.
• Kemampuan untuk memilih pelarut untuk fase gerak tidak
dibatasi oleh transparansi UV rendah atau kebutuhan akan
kemurnian ultra tinggi. Fase seluler korosif dan menyerap
UV dapat digunakan.
• Tidak ada perlakuan sebelumnya untuk pelarut seperti
filtrasi dan degassing.
• Tidak ada kemungkinan gangguan dari analisis
sebelumnya karena fase stasioner dan mobile segar
digunakan untuk setiap analisis. Tidak terbawa, maka tidak
ada kontaminasi.
• Pengulangan evaluasi densitometrik dari sampel yang
sama dapat dicapai dalam kondisi yang berbeda tanpa
mengulangi kromatografi untuk mengoptimalkan kuantifikasi,
karena semua sampel fraksi disimpan di pelat TLC / HPTLC.
• Sampel jarang membutuhkan pembersihan.
• Throughput sampel tinggi karena beberapa sampel dapat
dikromatografi secara bersamaan.
• Pengeluaran pelarut dan pelarutan pelarut yang lebih
rendah karena jumlah fase gerak per sampel yang
dibutuhkan sedikit. Selain itu, meminimalkan risiko paparan
limbah organik beracun dan mengurangi kemungkinan
pencemaran lingkungan.
• Akurasi dan ketepatan kuantifikasi tinggi karena sampel
dan standar dikromatografi dan diukur berdasarkan kondisi
eksperimental yang identik pada pelat TLC / HPTLC tunggal.
• Batas analisis sensitivitas biasanya pada tingkat nanogram
(ng) sampai piktogram (pg).
• Penggunaan metode deteksi universal dan selektif yang
berbeda
HPTLC adalah adaptasi modern TLC dengan efisiensi
pemisahan dan pendeteksian yang lebih baik dan canggih.
METODOLOGI HPTLC:
Tetapkan tujuan analitik terlebih dahulu yang mungkin
kuantifikasi atau identifikasi kualitatif atau pemisahan dua
komponen / campuran multikomponen atau optimalisasi
waktu analisis sebelum memulai HPTLC. Metode untuk
menganalisa obat dalam bentuk dosis multikomponen oleh
HPTLC menuntut pengetahuan dasar tentang sifat sampel,
yaitu parameter struktur, polaritas, volatilitas, stabilitas, dan
kelarutan. Metode pengembangan melibatkan prosedur trial
and error yang cukup banyak. Masalah yang paling sulit
biasanya adalah memulai, dengan jenis fase gerak apa.
Pemilihan fase stasioner cukup mudah, yaitu mulai
dengan silika gel yang masuk akal dan hampir sesuai
dengan semua jenis obat. Pengoptimalan fase mobile
dilakukan dengan menggunakan tiga teknik level. Tingkat
pertama melibatkan penggunaan pelarut rapi dan kemudian
dengan menemukan beberapa pelarut tersebut yang dapat
memiliki kekuatan pemisahan rata-rata untuk obat yang
diinginkan. Tingkat kedua melibatkan penurunan atau
peningkatan kekuatan pelarut menggunakan heksana atau
air untuk tujuan masing-masing. Tingkat ketiga melibatkan
usaha campuran bukan pelarut rapi dari pelarut terpilih dari
tingkat pertama dan kedua yang selanjutnya dapat
dioptimalkan dengan penggunaan pengubah seperti asam
atau basa.
Analitik terdeteksi menggunakan mode fluoresensi
atau mode absorbansi. Tapi, jika analit tidak terdeteksi
dengan sempurna daripada memerlukan perubahan fase
diam atau fase gerak atau memerlukan bantuan derivatisasi
kromatografi pra atau pasca. Optimalisasi dapat dimulai
hanya setelah kromatogram yang masuk akal yang dapat
dilakukan dengan sedikit perubahan pada komposisi fase
gerak. Hal ini menyebabkan kromatogram yang masuk akal
yang memiliki semua puncak yang diinginkan dalam simetri
dan dipisahkan dengan baik.
FASE DIAM:
HPTLC dapat dianggap sebagai bentuk TLC
modern yang paling maju. Menggunakan pelat HPTLC yang
menampilkan partikel kecil dengan distribusi ukuran sempit.
Akibatnya, lapisan homogen dengan permukaan halus bisa
didapat. HPTLC menggunakan pelat yang lebih kecil (10 ×
10 atau 10 x 20 cm) dengan jarak pengembangan menurun
secara signifikan (biasanya 6 cm) dan waktu analisis (7-20
menit). Pelat HPTLC memberikan resolusi yang lebih baik,
sensitivitas pendeteksian yang lebih tinggi, dan peningkatan
kuantifikasi situ dan digunakan untuk analisis kuantitatif
densitometrik industri farmasi.
TLC adsorpsi fase normal pada silika gel dengan fasa
gerak yang kurang polar, seperti kloroform-metanol, telah
digunakan untuk lebih dari 90% analisis obat-obatan dan
obat-obatan yang dilaporkan. Lipophilic C-18, C-8, C-2; fase
silika gel diubah secara fenil; dan pelat gel silika yang
diresapi hidrokarbon yang dikembangkan dengan fasa gerak
berair yang lebih polar, seperti air metanol atau dioksan,
digunakan untuk fase terbalik TLC.
Lapisan precoated lainnya yang digunakan meliputi
aluminium oksida, magnesium silikat, magnesium oksida,
poliamida, selulosa, kieselguhr, penukar ion, dan lapisan
silika gel polar yang dimodifikasi yang mengandung gugus
amino, siano, diol, dan tiol terikat.
Pemisahan isomer optik yang dilakukan pada lapisan
kiral yang dihasilkan dari silika gel modifikasi C-18 yang
diimpregnasi dengan garam Cu (II) dan turunan
hidroksiprolin murni enantiomer murni optik, pada lapisan
silika yang diresapi dengan selektif kiral seperti brucine, on
polimer agregat a-agonis molekular, atau pada selulosa
dengan fase gerak yang memiliki alat penyempitan kiral
seperti siklodekstrin telah dilaporkan sebagian besar untuk
asam amino dan turunannya.
Campuran sorben telah digunakan untuk membuat
lapisan dengan sifat selektifitas khusus. Pelat HPTLC harus
disimpan dalam kondisi yang sesuai. Sebelum digunakan,
piring harus diperiksa di bawah sinar putih dan sinar UV
untuk mendeteksi kerusakan dan kotoran pada adsorben.
Dianjurkan untuk memulangkan pelat untuk meningkatkan
reproduktifitas dan ketahanan hasil
FASE GERAK :
Pemilihan fase gerak didasarkan pada bahan
adsorben yang digunakan sebagai fase diam dan sifat fisik
dan kimia analit.
Sistem fase gerak umum yang digunakan
berdasarkan sifat selektivitasnya beragam adalah dietil eter,
metilena klorida, dan kloroform yang digabungkan secara
terpisah atau bersama dengan heksana sebagai pelarut
penyesuaian kekuatan untuk fase normal KLT dan metanol,
asetonitril, dan tetrahidrofuran yang dicampur dengan air.
untuk penyesuaian kekuatan dalam TLC fase terbalik.
Pemisahan dengan pasangan ion pada lapisan C-
18 dilakukan dengan fase gerak seperti buffer asetat
metanol 0,1 M (pH 3,5) yang mengandung 25 mM natrium
pentanesulfonat (15,5: 4.5).
Pengukuran volumetrik akurat dari komponen fase
gerak harus dilakukan secara terpisah dan tepat dalam gelas
volumetrik yang memadai dan diguncang untuk memastikan
pencampuran konten dengan benar.
Volume lebih kecil dari 1 ml diukur dengan
micropipette yang sesuai. Volume sampai 20 ml diukur
dengan pipet volumetrik lulus dengan ukuran yang sesuai.
Volume lebih besar dari 20 ml diukur dengan silinder lulus
dengan ukuran yang sesuai. Untuk meminimalkan kesalahan
volume, pelarut yang dikembangkan disiapkan dalam
volume yang cukup untuk satu hari kerja.
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

HPTLC dari sisi peralatan tidak terlalu jauh berbeda

dengan TLC hanya biasanya pada fase diam ukuran pori
dari fase penyerap lebih kecil sehingga diharapkan terjadi
pemisahan yang lebih baik karena terjadi interaksi antara
analit dengan absorbent pada permukaan yang lebih luas,
kemudian ukuran dari lempeng lebih kecil karena
menggunakan suatu absorbent dengan pori yang lebih kecil
hal ini akan berpengaruh terhadap waktu pengembangan
yang memungkinkan lebih pendek atau singkat
(Chamberlain,1995).
Dari profil hasil kromatogram yang diperoleh dari
HPTLC lebih baik dari TLC karena pada HPTLC, HETP atau
efisiensi dari teori keping lebih baik dari pada TLC hal ini
disebabkan permukaan dari absorbent ukuran porinya lebih
kecil dari absorben dari TLC sehingga permukaan interaksi
analit dengan stationary fase lebih luas. HPTLC mempunyai
beberapa kelebihan di banding dengan TLC dalam hal:

 Tebal, keseragaman manghasilkan garis dasar stabil

dalam densitometry
 Jarak pengembangan dan waktu lebih singkat
 Pita difusi rendah manghasilkan keterpaduan pita sampel
 Mikrosample (nanograms dan picogram)
dapat dianalisis
 Sifat reproduksibilitas dalam hasil kromatografi.
Fase Diam/Sorbent TLC dan HPTLC (Sherma,2004)

Unsur yang dipandang penting pada lempeng: Format,

penunjang, lapisan, dan pengikat: lempeng Precoated TLC dengan
penunjang suatu gelas tersedia dalam format yang banyak, yang
berukuran 20 cm × 20 cm bisanya dipandang sebagai standar
untuk TLC awal. Pelat Gelas sangat kuat dan dapat dikembangkan
secara vertikal dan horizontal tanpa bergoyang, kemudian
pemastian ketetapan gerakan dari fase gerak pada lempeng.
Mereka benar inert ketika digunakan dengan semua larutan
pengembang dan derivating agent dan sebab itu dapat
diaplikasikan secara universal. Pemisahan optimum (migration)
jarak pada lempeng TLC adalah 12–15 cm. Jika hanya sedikit
sampel yang akan dipisahkan pada waktu lempengnya sama,
format yang lebih kecil seperti 10 cm × 20 cm atau 5 cm × 20 cm
(20 cm dalam pengembangan secara langsung), yang juga
memungkinkan perpindahan jarak optimum, terjadi. Jika efisiensi
pemisahan optimum sesungguhnya kurang penting (sebagai
contoh, jika sample mangandung hanya satu atau sangat banyak
komponen), Jarak pengembangan dapat dikurangi sampai kira-kira
8 cm dan lempeng format 20 cm × 10 cm (atau lempeng fraksional
sekecil 2.5 cm × 10 cm) mungkin kurang.
 Gambar. 1 Silika gel untuk TLC

lempeng Thin-layer chromatography (TLC) untuk diadsorbsi, partisi,

dan teknik ion exchange enam pilihan media dengan gelas,
polyester, dan dasar aluminum. Lapisan adsorbent silica-based
dalam Sigma-Aldrich lempeng TLC dipadukan dengan suatu
pengikat polymeric; lempeng silica gel yang lebih murni dipadukan
pada suatu pengikat gypsum (CaSO4/polimer). Atau dengan
mengunakan lempeng silika gel yang biasa di gunakan :
 Gambar. 2 lempeng silika gel untuk HPTLC (lebih kecil

dari TLC)

Spesifikasi dari masing-masing sorbent :

 Silika gel - untuk pemisahan polarisasi lamah sampai kuat

 High purity silika gel -asam washed untuk pemisahan dari

aflatoxins

 Sellulosa - untuk kromatografi partisi

 Sellulosa PEI - untuk pemisahan dari anion lemah (amino acids,

peptides)
  Aluminum oxida – alumina dasar, untuk pemisahan hormone and
antibiotika

 Chiral silika - untuk pemisahan dari isomer optis aktif melalui

pertukaran ligan

Dibawah ini daftar beberapa spesifikasi sorbent yang dapat

digunakan sebagai fase stationary yang sekarang biasa digunakan :

Cat. No. Ordering information layer size[cm] quantity

thickness[µm] /pack
034.5035 HPTLC lempengs cellulose F 100 10x10 2
5
034.5036 HPTLC lempengs cellulose F 100 20x10 5
0
034.5787 HPTLC lempengs cellulose 100 10x10 2
(without F) 5
034.5786 HPTLC lempengs cellulose 100 20x10 2
(without F) 5
034.5631 HPTLC lempengs silica gel 60 200 10x10 2
(without F) 5
034.5633 HPTLC lempengs silica gel 60 200 10x10 1
(without F) 00
034.5641 HPTLC lempengs silica gel 60 200 20x10 5
(without F) 0
034.3748 HPTLC lempengs silica gel 60 200 10x10 2
(without F), concentration zone 5
034.3749 HPTLC lempengs silica gel 60 200 20x10 5
(without F), concentration zone 0
034.5628 HPTLC lempengs silica gel 60 F 200 10x10 2
254 5
034.5629 HPTLC lempengs silica gel 60 F 200 10x10 1
 254 00
034.5564 HPTLC lempengs silica gel 60 F 200 10x10 2
254 GLP 5
034.5642 HPTLC lempengs silica gel 60 F 200 20x10 5
254 0
034.1764 HPTLC lempengs silica gel 60 F 100 20x10 2
254, extra thin layer 5
034.3727 HPTLC lempengs silica gel 60 F 200 10x10 2
254, concentration zone 5
034.3728 HPTLC lempengs silica gel 60 F 200 20x10 5
254, concentration zone 0
034.5613 HPTLC lempengs silica 200 20x10 2
gel 60 F 254 GLP 5
034.1552 HPTLC lempengs silica gel WR 200 20x10 2
60 F 254s 5
034.5445 HPTLC lempengs LiChrospher® 180 20x10 2
Si 60 F 254s 5
034.5547 HPTLC aluminium sheets silica 200 20x20 2
gel 60 (without F) 5
034.5548 HPTLC aluminium sheets silica 200 20x20 2
gel 60 F 254 5
034.5543 HPTLC aluminium sheets silica 200 10x10 25
gel 60 F 254s, RAMAN
034.5586 HPTLC aluminium sheets 100 20x20 5
LiChrospher® Si 60 F 254s
034.3726 HPTLC lempengs RP-2 F 254s 200 10x10 2
5
034.3725 HPTLC lempengs RP-8 F 254s 200 10x10 2
5
034.4296 HPTLC lempengs RP-18 W 200 20x10 2
(without F) 5
034.3124 HPTLC lempengs RP-18 W F 200 10x10 2
 254s 5
034.3724 HPTLC lempengs RP-18 F 254s 200 10x10 2
5
034.6464 HPTLC lempengs CN F 254s 200 10x10 2
5
034.2571 HPTLC lempengs CN F 254s 200 20x10 2
5
034.2572 HPTLC lempengs NH2 (without 200 20x10 2
F) 5
034.3192 HPTLC lempengs NH2 F 254s 200 20x10 2
5
034.5647 HPTLC lempengs NH2 F 254s 200 10x10 2
5
034.2668 HPTLC lempengs Diol F 254 200 10x10 2
5
034.5636 HPTLC lempengs MERCK Diol F 200 20x10 25
254
03 UTLC silica gel 60 w/o F 10 6x 2
4.5607 254 3.6 5

Secara umum bentuk dan ukuran dari pelat HPTLC lebih

kecil dari pelat TLC ini bisa sampai menjadi sepertiga dari Lempengf TLC
hal ini lebih simple namun memang relatif sedikit lebih mahal. Cara
membaca kode pada fase diam/solid
SILICA GEL 60 G F254

• Adalah Silica Gel dengan :

• Ukuran pori : 60 Å
• G = CaSO4.½ H2O sebagai binder/gypsum

• F = bahan fluorescen / fosforescen yg ditambahkan

• 254 = dituliskan sesudah F atau UV utk menandakan panjang
gelombang eksitasi bahan fluorescent atau fosforescen yang
ditambahkan (Snyder, et al, 1997)

a. Chamber / Ruang Pengembang

Pada dasarnya chamber atau tempat untuk pengembangan

dari kromatografi planar tidak terlalu spesifik untuk masing-masing

jenis kromatografi, yang membedakan chamber yang digunakan

adalah ukuran dari chamber, dimana ukuran dapat disesuaikan

dengan kebutuhan:

Bahan dari chamber pisa dari kaca atau bahkan dari plastik

yang kedap air, biasanya bentuknya bisa bulat seperti toples atau

kotak seperti gambar di bawah ini :

G
 gambar. 3 Glass Chamber

atau bahkan dalam suatu plastik seperti gambar dibawah ini :

Gambar. 8. Plastik chamber

Untuk kromatografi elektroforesis dalam chamber di bagi dua

bagian yang kedalam masing-masing chamber dimasukan satu
ujung dari kertas dan pada masing-masing chamber
dihubungkankan dengan suatu muatan listrik yang berbeda yaitu
muatan positif dan negatif, sehingga akan terjadi pemisahan, pada
kedua chamber tersebut dimasukan suatu suatu larutan elektrolit
agar bisa menghantarkan muatan pada kertas sebagai fase diam
dan larutan elektrolit disini sekaligus bertindak sebagai fase gerak
dari proses kromatografi. (Suherman, M. Mulja. 1995)
Instrumen Pendukung / Tambahan

a. Sprayer

Sprayer atu penyemprot bercak noda dari spot yang

dihasilkan tidak terlalu bervariasi dari metode planar kromatografi
mulai dari alat yang sederhana atau alat yang sudah kompleks
dapat digunakan dengan baik pada penampakan noda dari spot
yang sudah diperoleh dengan sebelumnya memasukan suatu
pereaksi penderivatisasi agar spot memendarkan cahaya, berikut
gambar dari sprayer mulai dari yang sederhana sampai dengan
keluaran terbaru:
 Gambar. 4 Sprayer

Berikut beberapa derivating agent yang bisa di gunakan :

(Snyder, et al, 1997)

b. Scaner

Scaner merupakan suatu alat yang dimaksudkan untuk

memperjelas suatu spot pada saat mengamati, bisanya pada alat ini

disertai dengan lampu baik itu lampu UV atau yang lainya yang dapat

memendarkan cahaya dari spot-spot analit setelah disemprot dengan

larutan penampak noda (derivating agent), berikut beberapa gambar

alat scaner :

Gambar.5 UV Scaner 254 nm dan 366 nm

c. Detektor

Detektor yang bisa di gunakan pada analisis kromatografi planar

adalah adalah detektor photon, diamana sifat dari analit dapat

dibuat atau di derivatisasi dengan senyawa yang membuat

senyawa tersebut berflourisensi dan dapat di deteksi atau di

scanning dengan detektor yang sesuai.

Detektor yang umum digunakan dalah detektor UV atau

flourisensi detektor berikut gambar dari beberapa detektor yang

terkait erat dengan kromatografi planar: beberpa UV detektor yang

bisa digunakan dalam deteksi spot hasil kromatogram dari planar

kromatografi.

1. Silicon Photodiodes
2. Germanium Photodiodes
3. InGaAs Photodiodes
4. Extended InGaAs Photodiodes
Prinsip kerjanya secara umum adalah lempeng yang terdapat

spot didalamnya dikenai sinar dan nanti akan berflourisensi

kemudian flourisensinya akan ditangkap oleh detektor kemudian

intensitasnya akan terukur dan akan sebanding dengan kadarnya.

 Gambar. 6 UV- detektor 254 nm dan 366 nm

d. Alat Penderivatisasi

Alat ini dilmaksudkan untuk membuat senyawa yang terdapat pada

spot dapat terdeteksi yaitu dengan cara derivatisasi selain dengan cara

disemprotkan dengan sprayer bisanya alat ini di gunakan untuk

fosforscent dan ini mengandung fosforscent anorganik yaitu spot yang

terbentuk di celupkan pada media yang mengandung zat penderivasi.

Gambar. 7 Derivating tool

e. Spray Cabinet
Alat ini untuk sebagai ruang untuk menyemprot spot dengan

zat penampak noda/zat penderivatisasi

 Gambar. 8 Spray Kabinet
f. Lempeng heater

Alat ini untuk memanaskan lempeng sebelum dipakai atau

untuk mengaktifkan dengan cara menguapkan uap air yang
dikandungnya selain dengan menggunakan oven biasa:

Gambar. 9 Plate

g. Lempeng Coater

Alat ini dapat di gunakan jika kita akan membuat sendiri

lapisan penyerap yang akan dilapiskan pada penunjang kaca atau

plastik atau alumunium.

Gambar. 10 Coater Plate

h. Pipet sampel/drods/Penetes Sampel

Adalah suatu kapiler dengan ukuran tertentu yang berguna

untuk meneteskan sampel pada lempeng atau fase diam, berikut
dapat dilihat alah satunya ;

Gambar. 11 Droper/Penetes Sampel

BAB III

PENUTUP

Kesimpulan
HPTLC adalah adaptasi modern TLC dengan efisiensi
pemisahan dan pendeteksian yang lebih baik dan canggih.
Dari profil hasil kromatogram yang diperoleh dari HPTLC
lebih baik dari TLC karena pada HPTLC, HETP atau efisiensi dari
teori keping lebih baik dari pada TLC hal ini disebabkan permukaan
dari absorbent ukuran porinya lebih kecil dari absorben dari TLC
sehingga permukaan interaksi analit dengan stationary fase lebih
 luas. HPTLC mempunyai beberapa kelebihan di banding dengan
TLC dalam hal:

 Tebal, keseragaman manghasilkan garis dasar stabil

dalam densitometry
 Jarak pengembangan dan waktu lebih singkat
 Pita difusi rendah manghasilkan keterpaduan pita sampel
 Mikrosample (nanograms dan picogram)
dapat dianalisis
 Sifat reproduksibilitas dalam hasil kromatografi.

DAFTAR PUSTAKA

1. Chamberlain J, 1995, The Analysis Drugs in Biological Fluids,

Second Edition, CRC press, NewYork, P 105-117..
2. Day. R.A, and Underwood, A.L. 1996. Analisis Kimia Kuantitatif,
Edisi kelima, Erlangga press, Jakarta. P 551-554
3. Sherma Joseph, 2004, Planar Chromatography. Department of
Chemistry, Lafayette College, Easton, Pennsylvania 18042,
Analytical Chemistry, Vol. 76, No. 12, June 15,
4. Snyder, R.L., Kirkland, J.J., and Glajch, J.L., 1997, Practical HPLC
method development, 2nd edition, p.686-697, John Wiley &
Son, Inc., New York
5. Suherman, M. Mulja. 1995. Analisis Instrument. Airlangga
University Press, Surabaya, P 223-234.