DATA JURNAL

Judul Jurnal : Counteracting age-related VEGF signaling insufficiency promotes healthy

aging and extends life span

Penulis : M. Grunewald, S. Kumar, H. Sharife, E. Volinsky, A. Gileles-Hillel, T. Licht,

A. Permyakova, L. Hinden, S. Azar, Y. Friedmann, P. Kupetz, R. Tzuberi, A.
Anisimov, K. Alitalo, M. Horwitz, S. Leebhoff, O. Z. Khoma, R. Hlushchuk, V.
Djonov, R. Abramovitch, J. Tam, E. Keshet

Jenis Jurnal : Clinical Study

Publisher : The American Association for the Advancement of Science

Halaman : 1-9 ( 9 halaman )

Negara : USA

Bahasa : Inggris

DOI : https://doi.org/10.1126/science.abc8479

Time Line : 30 Juli 2021

Pendahuluan :

Penuaan merupakan faktor risiko untuk penyakit vaskular, tetapi penuaan vaskular itu sendiri
dapat berkontribusi pada kerusakan progresif fungsi organ. Insufisiensi pensinyalan faktor
pertumbuhan endotel vaskular (VEGF), yang disebabkan oleh peningkatan produksi reseptor
umpan, dapat mendorong penuaan fisiologis di berbagai sistem organ dan modulasi jalur ini
dapat mengakibatkan peningkatan rentang hidup.

Sistem vaskular adalah jaringan seluler terbesar yang dimiliki oleh semua organ. Semua sel
dalam tubuh kita bergantung pada pembuluh darah (BV) untuk penyediaan oksigen dan zat lain
yang terbawa darah, pembuangan limbah, dan suplai faktor angiokrin esensial yang disekresikan
oleh sel endotel. BV mengalami penuaan yang berhubungan dengan penurunan fungsi. Oleh
karena itu, hilangnya fungsi vaskular terkait usia cenderung mempengaruhi fisiologi organ.

Patologi yang mempengaruhi arteri meliputi pengerasan arteri, aterosklerosis, dan kejadian
oklusi vaskular lainnya, menyebabkan sejumlah penyakit kardiovaskular (CVD) yang
prevalensinya meningkat seiring bertambahnya usia. Proses terkait usia yang paling penting yang
mempengaruhi kapiler di semua organ adalah penurunan progresif dalam kepadatan
mikrovaskular (MVD). Faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF) adalah faktor
pertumbuhan yang sangat pleiotropik dengan fungsi vaskular dan nonvascular. VEGF
memainkan peran penting dalam mengontrol permeabilitas vaskular, mempertahankan
kelangsungan hidup BV yang baru terbentuk, mempertahankan sifat vaskular spesifik organ
seperti pembentukan dan pemeliharaan fenestrasi kapiler dan fungsi penghalang EC lainnya, dan
induksi spesifik organ tertentu

Tujuan Penelitian :

Untuk mengidentifikasi apakah menangkal gangguan terkait usia dari pensinyalan VEGF dapat
memberikan geroprotection yang komprehensif

Metode Penelitian :

 Sistem Tet-off transgenik digunakan untuk induksi VEGF-A164 spesifik hati

 Hilangnya fungsi VEGF, sVEGFR1 transgenik diinduksi secara kondisional menggunakan
transgen penggerak khusus EC
 Kadar serum VEGF dan sVEGFR1 dipantau menggunakan VEGF dan VEGFR1 ELISA
 Pensinyalan VEGF dengan mengukur fraksi fosforilasi VEGFR2 dari total VEGFR2
 Analisis longitudinal fenotipik :
1. Pengukuran rasio lemak berbasis MRI, ultrasonografi fotoakustik pengukuran
oksigenasi jaringan, visualisasi tulang x-ray dan pengukuran mikro-CT volume tulang
2. Pengukuran OCR dalam serat otot terisolasi menggunakan platform Seahorse; analisis
rotarod untuk mengukur kekuatan pembangkit otot; analisis metabolisme, TEE, dan
aktivitas fisik yang diukur dalam kandang metabolic
 3. Penuaan endotel diukur dengan mengukur aktivitas SA-b-gal di EC yang diurutkan
4. Inflamasi dievaluasi dengan infiltrasi leukosit dan dengan mengukur penanda inflamasi
dalam darah
5. Tumor dievaluasi dengan inspeksi visual

Analisis Statistik :

Perangkat lunak GraphPad Prism versi 7

Hasil Penelitian :

Pemeliharaan pensinyalan VEGF pada tikus tua mencegah penghalusan mikrovaskular

dan meningkatkan perfusi jaringan dan oksigenasi

Tingkat VEGF yang bersirkulasi pada tikus-tikus ini dua kali lipat lebih tinggi daripada tingkat
homeostatik VEGF sirkulasi. Pengukuran dan fenotipe didasarkan pada perbandingan
berpasangan dari tikus VEGF dan kontrol littermate. Sebagai kontrol adalah littermates yang
mewarisi hanya satu dari dua transgen yang diperlukan untuk induksi VEGF transgenik,
sehingga menentang kemungkinan pengaruh yang diberikan oleh situs integrasi transgen.
Pada tikus kontrol, kadar VEGF sistemik dan kadar VEGF pada organ perifer utama tidak
menurun secara signifikan seiring bertambahnya usia pada sebagian besar organ yang diperiksa.
Pensinyalan VEGF terganggu pada tikus kontrol (Mo) berusia 24 bulan tetapi tidak pada tikus
VEGF, yang mempertahankan tingkat fosforilasi VEGFR2 (tidak hanya di hati tetapi juga di
organ terpencil seperti otot tungkai).

Pemantauan longitudinal mengungkapkan penumpukan progresif sFlt1 dalam plasma sehingga

pada usia 1 tahun, kadar sFlt1 sudah dua kali lipat lebih tinggi daripada selama awal masa
dewasa.
Peningkatan ekspresi sFlt1 terkait usia di aorta, vena sentral hepatik, EC sinusoidal hepatik, dan
kapiler otot diidentifikasi sebagai sumber sirkulasi utama sFlt1.

Peningkatan produksi sFlt1 dapat dikaitkan dengan pergeseran terkait usia dalam penyambungan
alternatif menuju peningkatan produksi mRNA sFlt1.

Akumulasi sFlt1 sebelumnya pada tikus dewasa ke tingkat yang sebanding dengan yang
diproduksi secara alami pada tikus yang lebih tua yang menyebabkan pengurangan lebih lanjut
dari pensinyalan VEGF di hati dan otot tungkai belakang.
Penghalusan mikrovaskular substansial di hati, otot, dan jaringan adiposa coklat dan putih dari
24 tikus Mo tetapi penghalusan mikrovaskular hampir sepenuhnya dicegah pada tikus VEGF
yang sesuai usia.

Blokade VEGF eksperimental melalui induksi sFlt1 bersyarat menyebabkan hilangnya kapiler
yang dipercepat dan memperkuat pensinyalan VEGF berkelanjutan untuk pemeliharaan MVD.
Untuk memeriksa perubahan perfusi terkait usia, permukaan luminal BV perfusi secara selektif
ditandai dengan injeksi intravena, antibodi endotel vaskular (VE)-cadherin yang diberi label
fluoresensi. Penurunan perfusi diamati pada tikus kontrol 16 Mo tetapi tidak pada tikus VEGF
yang sesuai usia, yang mempertahankan tingkat perfusi seperti usia muda.

Pengurangan parah dalam oksigenasi otot tungkai belakang yang diamati pada 24 tikus Mo
berkurang pada tikus VEGF yang sesuai dengan usia.

Tikus yang diobati dengan VEGF memiliki rentang hidup yang panjang dan metabolisme
serta komposisi tubuh yang baik

Tikus VEGF dari kedua jenis kelamin menunjukkan kelangsungan hidup median diperpanjang
dan rentang hidup maksimal yang lebih besar dibandingkan dengan littermates kontrol, sebagian
besar tikus VEGF masih hidup ketika teman litter kontrol mereka mati.

Periode morbiditas terkompresi yang jelas ini menunjukkan bahwa, terlepas dari umur panjang,
tikus VEGF mungkin memiliki rentang kesehatan yang meningkat.
Pertambahan berat badan terkait usia secara signifikan lebih rendah pada tikus VEGF dan
penurunan berat badan yang dipercepat yang menggambarkan tikus yang hampir mati tidak
terjadi pada tikus VEGF, yang mempertahankan berat badan yang stabil hingga beberapa minggu
sebelum kematian mereka.

Analisis berbasis echo-magnetic resonance imaging (echo-MRI) dari rasio massa tubuh lemak
menunjukkan bahwa penambahan lemak yang diamati selama tahun kedua kehidupan pada tikus
kontrol berkurang pada tikus VEGF yang cocok dengan usia dari kedua jenis kelamin.

Pemanfaatan karbohidrat dan hasil bagi pernapasan (RQ) jauh lebih tinggi pada tikus VEGF.
Peningkatan oksidasi karbohidrat dan RQ yang secara signifikan lebih tinggi diamati
menggunakan dua kerangka waktu yang berbeda untuk injeksi AAV: (i) pada usia 2 bulan
dengan fenotipe metabolik diperiksa 6 bulan kemudian atau (ii) pada usia 8 tahun bulan dengan
pemeriksaan 2 bulan kemudian.

Tidak ada perbedaan yang signifikan dalam pengeluaran energi total harian (TEE) pada usia 12
bulan atau pada usia 16 bulan antara kontrol dan VEGF jantan dan tikus betina VEGF yang
sudah tua memiliki TEE yang lebih tinggi secara signifikan daripada kontrol mereka. Dasar
untuk dimorfisme seksual yang nyata ini dalam aktivitas fisik dan TEE harian tidak diketahui.

Pengeluaran energi melalui termogenesis yaitu produksi panas dengan melepaskan ikatan
mitokondria yang dimediasi protein 1 (UCP1) juga di identifikasi. Karena termogenesis sebagian
besar terjadi di jaringan adipose (BAT). BAT pada tikus 24 Mo VEGF mempertahankan
histologi klasik BAT teraktivasi yang dicirikan oleh adiposit multivacuolated yang lebih kecil.
Demikian juga, UCP1 termogenik yang mengekspresikan adiposit krem diselingi dalam jaringan
adiposa putih (WAT) sering diamati pada tikus 24 Mo VEGF tetapi tidak pada tikus kontrol 24
Mo.

Pengobatan VEGF memperbaiki perubahan terkait usia yang merugikan pada jaringan
adiposa dan hati

Penuaan biasanya disertai dengan peningkatan deposisi lemak visceral dan penurunan lemak
subkutan, dan kedua proses tersebut berhubungan dengan hasil kesehatan yang negatif.

Akumulasi lemak progresif di rongga perut tikus kontrol dan pengurangan akumulasi lemak
terkait penuaan pada tikus VEGF divisualisasikan secara langsung menggunakan MRI.
Selanjutnya divalidasi dengan menimbang WAT visceral.

Perlindungan dari hilangnya lemak subdermal dibuktikan dengan menghitung lebih banyak
lapisan adiposit subkutan pada bagian kulit tikus VEGF 24 Mo dibandingkan dengan kontrol
littermates.
Penuaan umumnya berkorelasi dengan akumulasi progresif lemak dalam hepatosit (steatosis
hati), suatu kondisi predisposisi orang tua untuk cedera hepatosit dan patologi hati yang parah.

Berbeda dengan hati yang sangat steatosis dari kontrol littermates, deposisi lipid dalam hepatosit
sangat berkurang pada tikus VEGF, di mana derajat steatosis menyerupai lebih dekat yang
diukur pada tikus 3 Mo.

Sebaliknya, hilangnya fungsi VEGF oleh induksi sFlt1 prematur menyebabkan perburukan
steatosis hati.

Berkurangnya cedera hati pada tikus 24 Mo VEGF tercermin dalam penurunan kadar serum
enzim alanin transaminase dan aspartat transaminase.
Aktivitas Sal-beta-gal di hati tikus kontrol tua sebagian besar terkait dengan BV sinusoidal dan
jarang dengan hepatosit.

VEGF mengurangi fraksi EC senescent sehingga pada usia 2 tahun, tikus VEGF memiliki EC
senescent yang sebanding jumlahnya dengan tikus kontrol 6 Mo.
Ekspresi p16 hepatik diregulasi ke atas di hati tikus kontrol 24 Mo tetapi sangat berkurang di hati
tikus VEGF yang sesuai usia.

Perawatan VEGF melindungi dari kehilangan otot dan tulang yang berkaitan dengan usia

Penuaan dikaitkan dengan hilangnya massa otot rangka secara progresif dan penurunan kapasitas
pembangkit tenaga otot (sarcopenia).

Nukleus yang salah posisi dan terletak di pusat, yang mencerminkan respons otot pasca cedera
pada otot yang menua dan berpenyakit, sering diamati pada otot tungkai belakang dari 24 tikus
kontrol Mo tetapi secara signifikan lebih sedikit pada otot dari littermates yang diobati dengan
VEGF.

Mitokondria terlokalisasi subsarcolemmal, yang sebelumnya terbukti berkontribusi pada

peningkatan fungsi otot yang diinduksi oleh olahraga, lebih banyak terdapat pada serat otot tikus
VEGF tua.
Miofibril yang diisolasi dari otot rangka tikus 24 Mo VEGF memiliki tingkat respirasi basal dan
maksimal yang lebih tinggi secara signifikan dan tingkat produksi ATP yang lebih tinggi
daripada miofibril yang diisolasi dari kontrol yang sesuai dengan usia. Sebaliknya, miofibril
yang diisolasi dari otot rangka tikus yang diinduksi 16 Mo sFlt1 memiliki OCR yang secara
signifikan lebih rendah.

Tikus VEGF yang menua tetap berada di batang yang berputar secara signifikan lebih lama
daripada kontrol yang sesuai dengan usia, dengan 32 tikus Mo VEGF berkinerja sebaik tikus
kontrol setengah usia mereka.
Tikus 10 Mo yang terinfeksi AAV-VEGF 2 bulan sebelumnya dapat berpegangan pada batang
yang berputar 49% lebih lama.
Peningkatan kinerja rotarod dikaitkan dengan peningkatan MVD pada otot tikus yang diobati
dengan AAV-VEGF.

Pelemahan tulang yang disebabkan oleh hilangnya jaringan tulang (osteoporosis) adalah
penyebab paling umum dari kerusakan tulang pada orang tua, terutama wanita pascamenopause.
Penipisan tulang substansial yang diamati pada tikus kontrol lama berkurang pada tikus VEGF
tua yang memiliki, rata-rata, 33% lebih banyak tulang daripada teman litter kontrol.

Perubahan terkait usia pada otot dan tulang sering dimanifestasikan dalam kyphosis, yang dapat
diukur dari gambar x-ray: tikus 24 Mo VEGF memiliki indeks kyphosis 38% lebih tinggi (yaitu,
kurva luar tulang belakang yang lebih rendah) daripada teman litter kontrol.

Perawatan VEGF mengurangi "peradangan" dan beban tumor spontan

Peradangan kronis multiorgan terkait usia, adalah ciri mendasar dari penuaan. Fraksi granulosit
yang meningkat di antara leukosit yang bersirkulasi, yang menunjukkan peradangan yang sedang
berlangsung, diamati pada sebagian besar tikus kontrol lama yang diperiksa tetapi tidak pada
tikus VEGF yang sesuai dengan usia.

Tikus 24 Mo VEGF menunjukkan kadar CRP rendah yang sebanding dengan yang terdeteksi
pada tikus 3 Mo.

Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP 1) hampir tidak meningkat pada tikus VEGF yang
sesuai usia. ). Sebaliknya, induksi sFlt1 menyebabkan percepatan akumulasi MCP-1 dalam darah
pada usia 16 bulan.
Pengurangan inflamasi pada tikus VEGF tua juga dibuktikan dengan jumlah infiltrat inflamasi
perivaskular yang dapat dilihat secara histologis, fokus inflamasi nekrotik yang lebih sedikit, dan
penurunan jumlah sel imun positif CD45 yang diinfiltrasi yang disebutkan dalam suspensi sel
tunggal hati dan WAT.
Lebih sedikit tikus VEGF yang menunjukkan satu atau lebih lesi neoplastik dibandingkan
dengan tikus kontrol dengan usia yang sama ketika diperiksa.

Diskusi :

Proses terkait penuaan terjadi pada tingkat biologis yang berbeda, tidak hanya pada tingkat
seluler tetapi juga pada tingkat sistem pendukung organ, di mana penuaan vaskular tampaknya
memainkan peran utama. Data hasil penelitian menunjukkan bahwa peningkatan produksi
penghambatan reseptor VEGF mengarah pada insufisiensi pensinyalan VEGF dan kegagalan
yang dihasilkan untuk mempertahankan MVD yang memadai. Defisit mikrovaskular
menyebabkan perfusi terganggu, oksigenasi jaringan berkurang, aktivitas mitokondria terganggu,
dan perubahan metabolisme. Organ yang aktif secara metabolik, seperti jaringan adiposa, otot
rangka, dan hati, kemudian secara progresif kehilangan fungsinya. Sedikit peningkatan VEGF
yang bersirkulasi melawan banyak proses yang merugikan. Hal ini menunjukkan bahwa menjaga
homeostasis vaskular yang tepat selama penuaan dapat memberikan geroprotection yang
komprehensif seperti pertambahan berat badan terkait usia, steatosis hati, osteoporosis,
peradangan, dan peningkatan beban tumor.

Kesimpulan :

Gangguan homeostasis mikrovaskular adalah kekuatan pendorong dalam penuaan multiorgan,

hal ini menunjukkan bahwa memanfaatkan pemulihan homeostasis vaskular yang dibantu VEGF
dapat berfungsi sebagai metode untuk mendorong peningkatan multifaset dalam rentang
kesehatan.

Saran Penelitian :

Studi lebih lanjut mungkin mengungkapkan sistem organ tambahan yang mendapat manfaat dari
VEGF dan/atau manipulasi vascular.
 CRITICAL APPRAISAL
Keseluruhan

1. Apa jenis artikelnya?

 Study experimental
2. Apa judulnya?
 Counteracting age-related VEGF signaling insufficiency promotes healthy aging and extends
life span
3. Siapa penulisnya?
 M. Grunewald, S. Kumar, H. Sharife, E. Volinsky, A. Gileles-Hillel, T. Licht, A.
Permyakova, L. Hinden, S. Azar, Y. Friedmann, P. Kupetz, R. Tzuberi, A. Anisimov,
K. Alitalo, M. Horwitz, S. Leebhoff, O. Z. Khoma, R. Hlushchuk, V. Djonov, R.
Abramovitch, J. Tam, E. Keshet

Pendahuluan

4. Apa masalah penelitiannya?

 Sistem vaskular mengalami penuaan, yang mengarah pada kerusakan fungsional yang
progresif, melibatkan pembuluh darah besar dan kecil, dengan yang terakhir ditandai
dengan penghalusan kapiler atau kegagalan terkait usia untuk mempertahankan
kepadatan mikrovaskular (MVD) yang memadai. Mekanisme homeostatis utama
yang mencegah reduksi MVD bergantung pada aktivitas angiogenik dari VEGF.
Alasan VEGF gagal melakukannya selama penuaan tidak diketahui.
5. Apakah ada yang menyebutkan penelitian sebelumnya tentang jenis ini?
 Ya ada, penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa penurunan neurogenesis
hipokampus yang bergantung pada usia, regenerasi hati, dan kapasitas latihan otot
rangka dapat dikurangi dengan peningkatan pensinyalan VEGF.

6. Mengapa penelitian ini dilakukan (alasannya)?

 VEGF adalah faktor pertumbuhan yang sangat pleiotropik dengan fungsi vaskular dan
nonvaskular. Pengerasan arteri, aterosklerosis, dan kejadian oklusi vaskular lainnya,
menyebabkan sejumlah penyakit kardiovaskular (CVD) yang prevalensinya
meningkat seiring bertambahnya usia. Proposisi bahwa penuaan vaskular adalah
pendorong utama penuaan, tetapi bukti eksperimental terbatas.

7. Apa maksud dan tujuan penelitian?

 Untuk mengetahui gangguan terkait usia dari pensinyalan VEGF dapat memberikan
geroprotection yang komprehensif.
 8. Apa hipotesis penelitian ?
 Insufisiensi pensinyalan VEGF untuk penuaan multiorgan dan menunjukkan bahwa
mungkin memberikan geroprotection yang komprehensif.

Metode dan Bahan

9. Bagaimana peneliti mencoba menjawab pertanyaan penelitian?

 Peneliti melakukan penelitian eksperimental dengan menggunakan hewan coba tikus
dengan sistem Tet-off transgenik yang digunakan untuk induksi VEGF-A164 spesifik
hati dan bersyarat pada tikus yang berasal dari persilangan BALB/cOlaHsd dan
C57BL/6J

10. Bagaimana pengambilan sampel dilakukan?

 Dengan menginduksi VEGF-A₁₆₄ pada hewan coba dan dilakukan pemantauan
kadar serum VEGF dan sVEGFR1
11. Bagaimana pengelompokannya (dikategorikan)?
 Tikus yang berasal dari persilangan BALB/cOlaHsd dan C57BL/6J yang diinduksi
VEGF-A₁₆₄ dan tikus kontrol littermate yang dipertahankan dalam kondisi yang
identik.

12. Apa kriteria inklusi?

 Tikus yang berasal dari persilangan BALB/cOlaHsd

13. Apa kriteria eksklusinya?

 Tidak dijelaskan dalam artikel ini apa kriteria eksklusinya

14. Prosedur apa yang diikuti?

 Tidak dijabarkan dengan jelas mengenai prosedur apa yang diikuti dalam penelitian
ini

15. Variabel mana yang diukur?

 Kadar serum VEGF dan sVEGFR1
16. Peralatan/instrumen apa yang digunakan untuk pengumpulan data?
 Metode ELISA, Analisis longitudinal fenotipik (MRI, USG, X-ray, mikro-CT,
platform Seahorse, analisis rotarod, analisis metabolisme, TEE, dan aktivitas fisik
yang diukur dalam kandang metabolic, pengukuran aktivitas SA-b-gal di EC,
inflamasi dievaluasi dengan infiltrasi leukosit, pengukuan penanda inflamasi, inspeksi
visual) RT-PCR, EM, dan imunohistokimia.

17. Metode/tes statistik apa yang digunakan? Apakah mereka cocok untuk evaluasi?
 Perangkat lunak GraphPad Prism versi 7
Hasil

18. Apa kata kuncinya?

 Dalam artikel ini tidak dicantumkan kata kunci pencariannya

19. Apakah semua subjek yang hadir di awal penelitian diperhitungkan pada akhir
penelitian?
 Tidak dijelaskan apakah subject diikutkan semua dari awal hingga akhir penelitian ini

20. Apakah hasilnya dapat diandalkan?

 Hasil mungkin dapat diandalkan tetapi harus ada penlitian lebih lanjut mengenai
korelasi antara regulasi VEGF dan patologi manusia terkait usia dan umur panjang.

21. Apakah hasilnya valid?

 Validitas penelitian ini tidak dijelaskan dalam artikel

22. Yang hasilnya signifikan secara statistik?

 Pada beberapa hasil pengamatan memang terdapat perbedaan yang signifikan yang
ditunjukkan dalam uraian tabel penelitian

23. Manakah hasil yang secara statistik tidak signifikan?

 Tidak dijelaskan apakah ada hasil yang tidak signifikan

24. Apakah tabel/grafik mudah dipahami?

 Ya, semua tabel yang ditunjukkan dalam hasil penelitian ini mudah dipahami
Diskusi

25. Apakah hasil menjawab pertanyaan penelitian?

 Ya, dari hasil penelitian diketahui bahwa sedikit peningkatan VEGF yang bersirkulasi
melawan banyak proses yang merugikan. Hal ini menunjukkan bahwa menjaga
homeostasis vaskular yang tepat selama penuaan dapat memberikan geroprotection
yang komprehensif.

26. Apa interpretasi penulis terhadap data tersebut?

 Tidak dijelaskan dalam artikel ini

27. Apakah analisis data relevan dengan pertanyaan penelitian?

 Ya, analisis data relevan dengan pertanyaan penelitian

28. Bagaimana hasil yang berbeda/mirip jika dibandingkan dengan penelitian lain?
 Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa penurunan neurogenesis hipokampus
yang bergantung pada usia, regenerasi hati, dan kapasitas latihan otot rangka dapat
dikurangi dengan peningkatan pensinyalan VEGF sedangkan pada penelitian ini
menunjukkan bahwa peningkatan produksi VEGFR1 sistemik (sVEGFR1)
disebabkan oleh pergeseran terkait usia dalam penyambungan alternatif mRNA
VEGFR1, yang menunjukkan bahwa menjaga homeostasis vaskular yang tepat
selama penuaan dapat memberikan geroprotection yang komprehensif.
 29. Apa kekuatan penelitian ini?
 Tidak dijelaskan apa kekuatan dari penelitian dalam artikel ini

30. Apa keterbatasan penelitian ini?

 Tidak dijelaskan apa keterbatasan dari penelitian dalam artikel ini

31. Apakah ada ekstrapolasi dari temuan di luar?

 Tidak ada penjelasan mengenai hal ini

Kesimpulan

32. Apa kesimpulannya?

 Studi ini memberikan bukti kuat untuk proposisi bahwa penuaan vaskular adalah
pendorong tinggi penuaan organisme secara keseluruhan. Ini menempatkan
insufisiensi pensinyalan VEGF untuk penuaan multiorgan.

33. Apakah kesimpulan penulis didasarkan pada data dan analisis yang dilaporkan?
 Gangguan homeostasis mikrovaskular adalah kekuatan pendorong dalam penuaan
multiorgan. Ini menunjukkan bahwa memanfaatkan pemulihan homeostasis vaskular
yang dibantu VEGF dapat berfungsi sebagai metode untuk mendorong peningkatan
multifaset dalam rentang kesehatan
 34. Apakah kesimpulannya masuk akal dan logis?
 Ya, kesimpulannya masuk akal dan logis.

35. Akankah hasilnya berguna dalam praktik klinis atau untuk penelitian lebih lanjut?
 Ya, hasil penelitian ini dapat digunakan untuk penelitian lebih lanjut mengenai
apakah perawatan VEGF dapat dimanfaatkan untuk membalikkan fenotipe penuaan
yang sudah baik dan korelasi antara regulasi VEGF dan patologi manusia terkait usia
dan umur panjang.

36. Apakah penelitian itu layak dilakukan?

 Ya penelitian layak dilakukan namun memerlukan evaluasi terkait hasilnya atau
penelitian lebih lanjut

37. Apakah pembaca memiliki pertanyaan yang belum terjawab oleh artikel?
 Tidak ada, namun penelitian lebih lanjut perlu dilakukan

Referensi

38. Apakah referensi yang dikutip sesuai dengan kebutuhan jurnal?

 Ya, referensi yang digunakan sudah sesuai

39. Apakah semua kutipan itu benar?

 Ya semua kutipan yang digunakan benar

40. Apakah semua referensi dikutip dalam teks?

 Ya, semua referensi dikutip dalam setiap teks