1.

Judul : Anatomical Study of Stem, Petiole, Leaf, Tuber, Root and Flower of Dioscorea
hispida Dennst. (Dioscoreaceae) by Using Optical Microscope, SEM and TEM
2. Latar belakang masalah :
 Umbi Dioscorea hispida telah digunakan sebagai sumber pangan penting di
Malaysia, terutama di negara bagian Terengganu, dan beberapa bagian dunia.
 Konsumsi umbi Dioscorea hispida semakin berkurang semenjak beras menjadi lebih
mudah terjangkau sebagai sumber pangan.
 Pembukaan lahan dan pemukiman manusia memberikan dampak yang signifikan
pada Dioscorea hispida.
 Pengumpulan Dioscorea hispida kedua jenis kelamin sulit dilakukan dengan
pengetahuan dan referensi yang terbatas, karena tidak ada parameter morfologi
lain untuk membedakan antara tanaman jantan dan betina.
 TEM dan SEM adalah instrumen analisis yang paling banyak digunakan untuk
mengungkapkan banyak struktur, pada perbesaran di atas yang dapat diperoleh di
mikroskop optik, dalam konfigurasi tiga dimensi untuk mendukung taksonomi.
3. Tujuan :
 Mengidentifikasi dan menggambarkan beberapa fitur anatomi yang mendefinisikan
dan membatasi Dioscorea hispida berdasarkan pengamatan dengan teknik
konvensional menggunakan mikroskop optik, Transmission Electron Microscope
(TEM) dan Scanning Electron Microscope (SEM).
4. Metode :
 Dalam penelitian ini, Dioscorea hispida diidentifikasi oleh masyarakat setempat dan
koleksi spesimen herbarium. Spesimen hidup dikumpulkan untuk pemeriksaan
anatomi di laboratorium.
 Sampel tanaman dikumpulkan dari habitat hutan alam di bukit semak tepi sungai, di
Perkampungan Orang Asli Jalan Genting Lama, 13 Mil dari Jalan Gombak, Gombak,
Selangor, Malaysia, dan di Kampong Bari Besar, Setiu, Terengganu, Malaysia.
 Bagian tanaman termasuk batang, daun, umbi dan bunga yang digunakan dalam
penelitian ini baik segar atau difiksasi sebelum dibedah.
 Mikroskop optik: Karakter bunga kritis kecil dievaluasi dan diamati melalui
mikroskop bedah. Sebuah jarum digunakan untuk membuka bunga secara perlahan
untuk infiltrasi yang lebih baik pada tahap fiksasi dan penanaman. Sisa bagian
tanaman dipotong langsung menggunakan pisau cukur tajam dan difiksasi dalam
formalin-asam asetat-alkohol (F.A.A) untuk tampilan optik, untuk menghindari
perubahan traumatis dan kontaminasi artefak sebanyak mungkin. Sampel secara
bertahap melewati 100% TBA untuk menghilangkan dan mengganti air dengan
alkohol. Lilin parafin kemudian digunakan untuk menggantikan TBA untuk
penanaman. Sampel tertanam dipotong antara 5-10 mikrometer tipis, dengan
mikrotom putar (AO-820 Spencer Rotary Microtome, American Optical), diwarnai
dengan safranin O dan fast green, dan dipasang secara permanen pada slide untuk
dilihat nanti
 SEM: Mikroskop elektron FEI Quanta 200 ESEM dan JEOL JSM-6390 LA digunakan
untuk pengamatan pada kemampuan vakum rendah antara 10-130 Pa yang
 memungkinkan pencitraan bebas biaya dan analisis spesimen non-konduktif.
Instrumen memungkinkan pemeriksaan langsung dari permukaan sampel yang luas
pada tusukan.
 TEM: Pengamatan TEM dilakukan hanya pada bagian pelepah dan tangkai daun
saja. Sampel difiksasi dengan fiksatif gluteraldehid 2,5% dalam saline buffer fosfat
(PBS) 0,1 M pada pH 7,4 selama dua jam dan di bawah vakum, untuk memfasilitasi
penetrasi (fiksasi 1o). Kemudian, sampel dibilas berulang kali dengan buffer di atas
sebelum dan sesudah fiksasi sekunder melalui 2% osmium tetroksida, karena
osmium tetroksida akan memperbaiki lipid dengan baik. Untuk menghindari
perubahan lingkungan yang drastis, spesimen didehidrasi melalui serangkaian
konsentrasi larutan etanol selama 15 menit. Seri propilen oksida diganti secara
bertahap dan diperluas ke infiltrasi resin. Botol dibiarkan berdiri di rotator yang
bergerak untuk memfasilitasi infiltrasi. Sampel tersebut kemudian dipolimerisasi
dalam resin epoksi, dalam oven pada suhu 70 oC selama sehari. Blok resin
terpolimerisasi yang dihasilkan dipotong pada ketebalan 60 – 100 nanometer
dengan ultramikrotom (EM UC6, Leica). Bagian diwarnai dengan uranil asetat, dan
kemudian dengan timbal sitrat. Bagian kemudian dilihat di bawah TEM (STEM
CM12, Philips), dan mikrograf digital ditangkap dan disimpan
5. Hasil dan pembahasan :
Batang
 Batang aerial adalah tahunan, sulur-sulur kanan, terete, kokoh, puber ketika muda,
gundul, dengan duri.
 Epidermis tersusun atas sel-sel dermal berlapis lilin, berdinding tebal dengan
kutikula bergelombang.
 Sel induk menunjukkan ukuran variabel dan butiran pati berbentuk kubus.
 Epidermis, korteks, sklerenkim dan bundel vaskular dibedakan dengan jelas.
 Berkas pembuluh ditemukan tersebar tidak teratur di jaringan dasar yang
merupakan susunan berbentuk V dari pembuluh metaxilem dan trakeid dengan unit
floem besar yang mengakhiri flensa V.
 Setiap bundel vaskular ditutupi dengan sel-sel sklerenkim.
Tangkai Daun (Petiole)
 Memiliki struktur yang mirip dengan batang dengan pulvinus basal yang panjang,
pentagonal, bersendi untuk setiap ujungnya, kutikula tipis dan bergelombang,
permukaan berbulu dan sembilan bundel pembuluh darah yang berorientasi pada
cincin di sekitar silinder pusat marginal.
 Setiap berkas pengangkut terdiri dari floem, xilem dan sklerenkim. Hasil
pengamatan TEM menunjukkan bahwa sel-sel pada tangkai daun kosong.
Daun
 Ditutupi rambut, dengan sel-sel berbentuk teka-teki pada tampilan permukaan.
Hanya rambut atau trikoma non-kelenjar yang diamati pada pelepah daun dan
lamina.
 Lamina memiliki 3-4 urat menonjol memanjang dari dasar ke puncak seperti pada
tanaman eudikotil yang khas.
  Kutikula lamina menebal secara soptik.
 Daun memiliki epidermis berlapis, dinding soptically berliku-liku pada sel abaksial,
sedangkan sel adaksial memiliki dinding lurus.
 Stomata dapat ditemukan pada permukaan abaksial dengan distribusi tidak teratur
dan tipe anomositik.
 Jaringan palisade dapat dibedakan dengan jelas yaitu memanjang, tersusun rapat
dan berorientasi vertikal, dengan potongan melintang pada sisi adaksial, sedangkan
jaringan bunga karang tersusun longgar atau kompak dengan ukuran sel tidak
beraturan atau berbentuk.
Umbi
 Umbi umumnya diperbarui setiap tahun, terjadi di permukaan tanah, besar, lobed,
ditutupi dengan akar mati, berbulu, dan menyajikan banyak butiran pati dalam
ukuran variabel dan sel parenkim mengisi bentuk bulat telur.
 Lapisan gabus berwarna coklat cerah dan terjadi sebagai lapisan pelindung.
 Sel-sel gabus ini ketika mati menjadi kulit kayu paling luar, seperti pada batang
berkayu yang mengalami pertumbuhan sekunder, yang juga ditunjukkan pada
Dioscorea alba.
Akar
 Dioscorea hispida memiliki akar serabut
 Akar berkembang dari umbi dan juga dari pangkal batang.
 Akar sepenuhnya mengalami lignifikasi. Lapisan epidermis yang tebal berkembang
sebagai lapisan pelindung. Akarnya mengandung banyak tiang xilem dan floem.
Bunga
 Bunga dioecious di mana bunga jantan dan betina berada pada tanaman yang
berbeda.
 Dalam penelitian ini, hanya bunga jantan yang ditemukan.
 Bunganya sangat kecil dan berkumpul bersama di sepanjang sumbu berbunga ke
atas, dengan 40 bunga, bergantian pada rachis.
 Bunga umumnya berwarna hijau kekuning-kuningan dan ditumbuhi rambut.
 Segmen dalam parianthus adalah deltoid dan segmen luar bulat telur lebar, 6
benang sari ditanggung di dasar perianth, filamen terete tebal, kepala sari lonjong,
bracteoles bulat telur lebar, dan lobus luar lebih kecil dan lebih tipis dari lobus
dalam. Benang sari terlihat jelas di dalam bunga.
6. Kesimpulan :
 Daun Dioscorea hispida memiliki ciri-ciri yang mirip dengan tumbuhan eudikotil,
tetapi batang, umbi, biji dan bunganya menyerupai tumbuhan monokotil.
 Luas permukaan Dioscorea hispida ditutupi dengan trikoma, memberikan
permukaan yang kasar, berbulu atau berbulu.
 Struktur bundel vaskular terdiri dari susunan pengakhiran berbentuk V dari unit
pembuluh metaxilem, trakeid dan floem.
 Distribusi granula pati diamati pada batang, tangkai daun, tangkai daun dan umbi.
Kristal rafida terdapat pada jaringan mesofil daun.
7. Hal temuan menarik yang dapat menjadi inspirasi/gagasan/ide:
 Hasil penelitian ini dapat dijadikan sebagai bahan referensi untuk taksonomi spesies
D. hispida berdasarkan anatominya mulai dari batang, petiole, daun, umbi, akar,
dan bunganya.