Yayang Fidia

1905101050020

Perbandingan Potensi Fitoremediasi Impatiens balsamina L. dan

Crotalaria retusa L. untuk Tanah yang Terkontaminasi Minyak Pelumas Bekas

Sumudu Sriyanthi Walakulu Gamage, Kanaji Masakorala, Murray T Brown, Shirani Manel
Kumari dan Widana Gamage

ABSTRAK
Tanah yang terkontaminasi minyak pelumas bekas (oli) telah menjadi ancaman
lingkungan yang muncul. Fitoremediasi adalah teknik yang hemat biaya, ramah lingkungan
dan baru dengan potensi besar untuk remediasi tanah yang terkontaminasi dengan minyak
pelumas bekas (oli). Oleh karena itu, tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui
potensi fitoremediasi dari Crotalaria retusa L. dan Impatiens balsamina untuk tanah yang
terkontaminasi ULO. Eksperimen pot balok terdominasi dilakukan untuk setiap spesies di
bawah kondisi rumah tanaman di tanah yang terkontaminasi ULO pada konsentrasi 5.000
mg kg1 (0,5% b/b)-30.000 mg kg1 (3% b/b). Persentase biodegradasi ULO di tanah rizosfer
dari kedua spesies setelah 90 hari paparan menunjukkan signifikan (p < 0,05) peningkatan
tergantung waktu dibandingkan dengan kontrol masing-masing dilakukan di tanah yang
terkontaminasi tanpa tanaman. Biodegradasi oli yang relatif lebih tinggi tercatat dari rizosfer
C. retusa L. dibandingkan dengan I. balsamina. Aktivitas mikroba total yang diukur dan
ukuran populasi yang dapat dibudidayakan dari bakteri yang memanfaatkan hidrokarbon
(HUB) menunjukkan bahwa fitoremediasi mungkin terjadi terutama melalui rhizodegradasi.
The Allium cepa bioassay mengungkapkan pengurangan potensi sitotoksisitas dan
genotoxicity dengan penurunan oli di tanah Fitoremediasi. Hasil lebih lanjut
mengungkapkan signifikan (p<0,05) korelasi positif dari N NO3, P terekstrak konsentrasidan
signifikan (p < 0,05) korelasi negatif pH tanah dengan persentase degradasi oli. Oleh karena
itu, fitoremediasi dengan menggunakan spesies tanaman uji tidak hanya mengurangi kadar
oli, sitotoksisitas dan toksisitas geno tetapi juga meningkatkan kualitas tanah secara
keseluruhan. Hasil ini menyoroti potensi fitoremediasi yang lebih tinggi dari C. retusa
daripada I. balsamina untuk tanah yang terkontaminasi oli.

1. Pendahuluan
Pencemaran tanah dengan minyak pelumas bekas (oli), atau mesin bekas minyak,
adalah masalah lingkungan yang muncul, terutama di kota-kota besar di seluruh dunia. Oli,
yang dihasilkan selama servis mobil dan mesin generator di stasiun layanan (Agamuthu et
al., 2010), berisi campuran bahan kimia organik dan anorganik yang sangat beracun
termasuk benzena, fenol, hidrokarbon poliaromatik (PAH) dan logam seperti V,Pb, Al, Ni dan
Fe (Okonokhua et al., 2007). Oleh karena itu, oli dianggap sebagai salah satu pencemar
lingkungan yang paling berbahaya, menimbulkan risiko ekologis terhadap lingkungan dan
efek kesehatan negatif pada biota dan manusia yang harus dibenahi (Ramadass et al., 2015).
Pendekatan yang berbeda telah digunakan untuk memulihkan terkontaminasi tanah
(Agamuthu et al., 2010) termasuk metode fisik, kimia dan biologi. Baik metode fisik maupun kimia
termasuk penggalian tanah, uap tanah, insinerasi, desorpsi termal, pencucian/pembilasan tanah,
enkapsulasi, oksidasi cairan superfisial, solidifikasi/stabilisasi, volatilisasi dll telah digunakan untuk
memulihkan hidrokarbon situs yang terkontaminasi (Abhilash et al., 2009; Peng et al., 2009; Walls,
2010;Khan dkk., 2014). Metode ini memiliki beberapa kelemahan karena mahal karena konsumsi
energi yang tinggi, mengganggu lingkungan dan kurang diterima oleh masyarakat (Kaimi et al.,
2006). Toremediasi tanaman adalah teknologi hijau dan inovatif yang menggunakan tanaman
(Gerhardt et al., 2009) dan mikroflora akar terkait untuk mengurangi efek berbahaya dari polutan
kimia seperti logam dan senyawa organik di tanah yang terkontaminasi (Peng et al., 2009).
Selanjutnya pendekatan ini memiliki beberapa keunggulan penting dibandingkan dengan ex situ
yang lebih konvensional pengobatan (Chaudhry et al., 2005), yaitu: ramah lingkungan, relatif
sederhana untuk diterapkan dan, beroperasi di tempat, hemat biaya, non-destruktif dan tidak
mengakibatkan kontaminasi sekunder. Untuk ini alasan dan karena sifat lokal yang ditanam secara
intrinsik menarik, ia memiliki tingkat penerimaan yang lebih tinggi oleh masyarakat (Sun et al., 2010;
Zhang dkk., 2010; Kuppusamy dkk., 2016; Megharaj dan Naidu, 2017). Berbagai kelompok tanaman,
termasuk spesies liar dan budidaya, kekeringan varietas tahan dan menyukai kelembaban, tanaman
dengan sistem akar berserat, rumput, semak dan pohon, semuanya terbukti bermanfaat dalam
fitoremediasi tanah tercemar organik (Jones et al., 2004; Liste dan Prutz, 2006). Data diperoleh dari
sejumlah percobaan lapangan dan rumah kaca memberikan bukti keberhasilan fitoremediasi minyak
bumi yang terkontaminasi tanah; misalnya, Euliss et al. (2008) melaporkan bahwa Carex stricta,
Tripsa cum dactyliodes dan Pannicum virgatum secara signifikan mengurangi total hidrokarbon petro
leum (TPH) sebesar 70% setelah satu tahun pertumbuhan dan Peng et al. (2009) menemukan 40-
60% penghilangan TPH oleh Mirabilis jalapa L. dalam waktu empat bulan. Palmroth dkk. (2002) telah
menemukan akumulasi minyak bumi kontaminan di pinus, poplar dan akar rumput. Tang dan Angela
(2019) telah menggunakan Epipremnum aureum, spesies tanaman dalam ruangan yang efektif dalam
fitoremediasi tanah tercemar minyak mentah.
Kemampuan untuk berkembang di lokasi yang terkontaminasi minyak dan potensi untuk
memulihkan situs tersebut bervariasi antar spesies (Akutam et al., 2014) dan, oleh karena itu, untuk
menerapkan fitoremediasi yang efektif membutuhkan pemilihan tanaman spesies yang tidak hanya
mentolerir kondisi lingkungan yang berlaku tetapi memiliki potensi pemulihan yang tinggi. Spesies
polong- polongan cocok untuk memulihkan tanah yang terkontaminasi minyak bumi telah
dilaporkan dalam beberapa penelitian (misalnya Gudin dan Syratt 1975; Inckot et al. 2011) dan telah
terbukti memiliki tingkat toleransi yang tinggi terhadap TPH dan lainnya spesies- karakteristik
menguntungkan spesifik (Vazquez-Luna, 2015). Dibandingkan dengan tanaman non polong-
polongan, mereka memiliki keunggulan sebagai mampu memperbaiki nitrogen atmosfer di tanah
dan, oleh karena itu, memiliki kemampuan untuk tumbuh di tanah dengan konsentrasi nitrogen
rendah, seperti halnya dengan lokasi yang terkontaminasi minyak bumi karena dampak negatif TPH
pada populasi mikroba nitrifikasi (Masakorala et al., 2014). Lebih jauh, tanaman polong-polongan
merangsang mikroorganisme di rizosfer melalui pelepasan nutrisi seperti asam amino, asam organik,
gula, fenolat dan berbagai metabolit sekunder dari akarnya (Walker dkk., 2003; Badri dan Vivanco,
2009; Vives-Peris et al., 2019) dan dalam gilirannya, rizo dan mikroorganisme endofit ini
meningkatkan pertumbuhan tanaman dengan memasok nutrisi hormon pertumbuhan dan
meningkatkan kemampuan bioavail hidrokarbon (Alaru et al., 2014; Jerez Ch dan Romero, 2016;
Remigi dkk., 2016; Saadani dkk., 2016).
Dalam penelitian kami sebelumnya, Crotalaria retusa L., spesies polong-polongan liar milik
famili Fabaceae, dan Impatiens balsamina L., spesies hiasan dari famili Balsaminaceae, diidentifikasi
sebagai spesies dengan tingkat toleransi yang diperlukan untuk tumbuh di tanah yang
terkontaminasi oli. Meskipun I. balsamina L. menunjukkan toleransi yang lebih rendah dibandingkan
dengan dengan C. retusa L. (Walakulu Gamage et al., 2020), sebagai tanaman hias toleransinya
relatif lebih tinggi atau sama dengan yang dipelajari sebelumnya spesies hias seperti Echinacea
purpurea (Heidari et al., 2018) dan Mirabilis jalapa (Peng et al., 2009). Baik I. balsamina L. dan C.
retusa L. adalah jenis tumbuhan tahunan yang menghasilkan bunga yang menarik, ciri khas yang
semakin menarik dalam fitoremediasi karena pemanfaatan spesies tersebut meningkatkan nilai
estetika lingkungan. Selanjutnya, ada kelangkaan informasi dalam literatur yang ada tentang
tanaman hias spesies yang berpotensi untuk memulihkan tanah yang terkontaminasi oli. Karena itu,
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui perbandingan potensi mediasi fitor C. retusa L. dan I.
balsamina L. untuk tanah terkontaminasi oli.

2. Bahan dan Metode

2.1. Pengumpulan dan persiapan sampel
Tanah dikumpulkan dari lapisan permukaan, pada kedalaman 5-10 cm, dari area yang tidak
terkontaminasi di Universitas Ruhuna, Matara, Sri Lanka di Juli 2017. Oli pelumas bekas diperoleh
dari mobil stasiun layanan di Kekanadura, Matara, Sri Lanka. Biji matang (gelap polong warna coklat
yang menghasilkan suara berderak) dari C. retusa dikumpulkan dari tanaman yang ditanam di rumah
tanaman, Universitas Ruhuna, Matara, Sri Lanka. Rupanya benih sehat dengan ukuran yang sama
digunakan untuk menguji mereka viabilitas menggunakan uji Tetrazolium/TTC (Souza et al., 2010).

2.2. Persiapan contoh tanah

Sampel tanah tidak terkontaminasi yang dikumpulkan dikeringkan dengan udara, diayak
dengan melewati mesh size 2 x 2 mm dan dihomogenkan. Tanah berduri dengan oli untuk
memberikan rangkaian kontaminasi 5.000 mg/kg (0,5%) 10.000 mg/kg (1%), 15.000 mg/kg (1,5%),
20.000 mg/kg (2%), 25.000 mg/kg (2,5%) dan 30.000 mg/kg (3%) b/b konsentrasi oli berdasarkan
hasil penelitian kami sebelumnya (Walakulu Gamage et al.,2020). Tanah yang telah disiapkan
kemudian dihomogenkan dan dibiarkan tidak terganggu selama dua hari untuk menstabilkan. Tanah
yang tidak tercemar bertekstur lempung berpasir dengan ciri-ciri kimia dan biologi sebagai berikut :,
kandungan total hidrokarbon minyak bumi (TPH) - 0 mg/kg, pH tanah - 5,36 ± 0,03, potensi air
gravimetri (GWP) - 5,37 ± 0,04%, bahan organik persentase (OM) - 14,64 ± 0,46%, konsentrasi Nitrat-
nitrogen (N-NO3) - 3,06 ± 0,02 mg/kg, fosfor yang dapat diekstraksi (P) - 3,06 ± 0,02 mg/kg (Walakulu
Gamage et al., 2020), aktivitas mikroba (MA) - 25,51 ± 0,23 g/g dan aktivitas enzim dehidrogenase
(DHA) - 1,34 ± 0,04 mg DPK/kg.18 jam.

2.3. Percobaan pot

Percobaan pot dilakukan di rumah tanaman Departemen Botani, Universitas Ruhuna, Sri
Lanka pada suhu sekitar 30 C. Empat kilogram tanah tercemar oli dimasukkan ke dalam plastik
berukuran 17 x 22 cm pot dan kapasitas menahan air disesuaikan dengan 70%. Sebuah acak desain
blok (RBD) digunakan dengan 4 ulangan (n = 4) per perlakuan dan kontrol. Di setiap pot perlakuan,
dua biji baik I. balsamina atau C. retusa ditanam dan disiram secara teratur. Tanah yang
terkontaminasi tanpa benih digunakan sebagai set kontrol. Tanaman disiram menggunakan air keran
secara teratur untuk mencegah pencucian oli dan nutrisi dari pot. Berdasarkan temuan penelitian
kami sebelumnya (Walakulu Gamage et al., 2020), di mana kami menunjukkan bahwa kedua spesies
memasuki kematangan reproduksi setelah 90 hari pertumbuhan, lamanya waktu ini dipilih untuk
periode percobaan.
2.4. Contoh

Setiap 30 hari, sampel tanah diambil dari zona rizosfer masing-masing pot perawatan. Pada
akhir percobaan (90 hari) semua tanaman dipanen. Akar dibilas secara menyeluruh dengan air keran
untuk menghilangkan tanah yang melekat dan digunakan untuk analisis.

2.5. Penentuan persentase biodegradasi minyak

Persentase biodegradasi minyak sampel tanah yang terkontaminasi oli adalah ditentukan
pada hari ke 30, 60 dan 90 menggunakan metode yang dijelaskan dalam Aga muthu et al., (2010).
Sepuluh gram tanah disuspensikan dalam 20 mL diklorometana dalam labu Erlenmeyer 250 mL dan
dikocok selama 1 jam pada suhu pengocok orbital (Pengocok Lab Companion SK 300 Benchtop, GMI
Inc. USA) pada 200 rpm. Suspensi minyak kemudian disaring melalui Whatman No. 4 kertas saring
dan filtrat disentrifugasi selama 20 menit pada 966 × g. NSsupernatan dituang ke dalam gelas kimia
kering yang bersih dengan berat yang diketahui. Prosedur ini diulang 5 kali untuk setiap sampel
untuk memulihkan jumlah maksimum minyak yang diekstraksi ke dalam pelarut. Pelarutnya adalah
diuapkan sepenuhnya pada penangas air pada suhu 40 0C. Gelas (berisi sisa minyak) ditimbang
kembali dan kandungan TPH dihitung menggunakan rumus berikut:

Persentase biodegradasi dihitung menurut berikut:

(berat akhir gelas yang berisi minyak −sisa berat gelas kosong )
Kandungan TPH =
berat contohtanah
Gambar 1. Persentase biodegradasi minyak tanah yang diambil dari (A) rizosfer dari Impatiens
balsamina; (B) rizosfer Crotalaria retusa dan (C) tidak ditanam kontrol yang terkontaminasi pada hari
ke 30, 60 dan 90 . Bilah kesalahan mewakili standar deviasi dari tiga independen pengukuran. Sarana
di dalam konsentrasi oli yang sama diikuti oleh a huruf yang berbeda (a, b dan c) dan berarti antara
konsentrasi oli yang berbeda diikuti dengan huruf yang berbeda (A, B, C, D, E dan F) secara signifikan
berbeda (p<0,05).

Efektivitas prosedur pemulihan ditentukan oleh:

[berat minyak ( kontrol )−berat minyak (terdegradasi ) ]

Persentase biodegradasi = x 100 %
[berat minyak ( kontrol ) ]

menganalisis sampel tanah kontrol yang terkontaminasi secara artifisial dengan konsentrasi oli. Hasil
penelitian menunjukkan recovery sebesar 99,60 ± 0,65%.

2.6. Pencacahan Bakteri Pemanfaatan Hidrokarbon (HUB)

Teknik pengayaan digunakan untuk menentukan HUB. Secara singkat, 1g tanah rizosfer
diambil dari komposit homogen sampel ditambahkan secara aseptik ke dalam labu Erlenmeyer steril
berisi kaldu garam mineral ditambah 100 L filter steril. Oli sebagai satu-satunya sumber karbon dan
diinkubasi dalam orbital shaker (120 rpm; Lab Companion SK 300 Benchtop shaker) pada suhu 37 C
selama 7 hari. Setelah ini periode, alikuot 100 L dipindahkan, menggunakan mikropipet, ke
permukaan pelat agar garam mineral (MSA) yang dikeringkan dengan baik dilapisi dengan 1% b/v oli
(100 L 1% b/v ULO: 15 mL media MSA ) dan sebarkan secara merata menggunakan batang kaca yang
disterilkan api. Semua isolat pada media MSA dilapisi dengan 1% oli dianggap sebagai pengurai oli
karena kemampuan mereka untuk tumbuh pada pelat berlapis oli. Jumlah bakteri yang
memanfaatkan hidrokarbon diperoleh setelah inkubasi 7 hari menggunakan teknik pengenceran
serial (Jett dkk., 1997; Ben-David dan Davidson, 2014). Hasil dinyatakan sebagai unit pembentuk
koloni (CFU/mL).
Jumlah koloni x faktor pengenceran
Unit pembentuk koloni (CFU/mL) =
Volume piring kultur

2.7. Penentuan aktivitas mikroba total

Total aktivitas mikroba ditentukan dalam setiap sampel tanah yang diambil pada hari 30, 60
dan 90 menggunakan metode yang dijelaskan dalam Adam dan Duncan (2001). Secara singkat, 2 g
tanah segar dicampur dengan 15 mL buffer Potassium phosphate 60 mM (pH 6,7) dan 0,2 mL
Fluorescien diacetate-(FDA) larutan stok (1000 mg FDA/mL) ditambahkan untuk memulai reaksi.
Labu diaduk secara menyeluruh dengan tangan dan diinkubasi selama 20 menit dalam inkubator
orbital (100 rpm; inkubator orbital Gallenhamp) pada 30 C. Setelah inkubasi, 15 mL campuran
kloroform/metanol (2:1 v/v) ditambahkan untuk menghentikan reaksi. Campuran dikocok secara
menyeluruh dengan tangan dan dipindahkan ke dalam tabung sentrifus 50 mL dan disentrifugasi
selama 3 menit dengan kecepatan 2000 rpm. Supernatan disaring melalui kertas saring Whatman
No. 2 ke dalam labu dan absorbansinya diukur pada 490 nm menggunakan Spektrofotometer UV-Vis
(Evolusi 260 Bio, Thermo Fisher Scientific Inc. Jerman). Konsentrasi fluoresen yang dilepaskan selama
pengujian dihitung dari kurva kalibrasi diproduksi dari 0 hingga 5 g fluorescein/mL.

2.8. Penentuan aktivitas enzim dehidrogenase (DHA)

Aktivitas dehidrogenase tanah ditentukan menurut Casida (1977). Lima gram masing-masing sampel
tanah dikumpulkan pada 30d, 60d, dan 90d dicampur dengan 10 mL 0,25% TTC berair
(triphenyltetrazolium klorida) dan diinkubasi dalam tabung tertutup pada 30 C selama 18 jam.
Setelah inkubasi, 10 mL metanol ditambahkan ke setiap tabung dan secara mekanis. dikocok selama
30 detik. Kemudian, sampel disaring melalui Whatmann no.5 kertas saring ditempatkan pada gelas
ukur. Jika filtrat masih berwarna merah warna, metanol tambahan dilewatkan melalui tanah sampai
semua formazan (warna merah) telah diekstraksi dan koreksi perhitungannya adalah dibuat untuk
metanol tambahan. Penyerapan ekstrak metanol TPF (Triphenylformazan) diukur pada 485 nm
menggunakan UV-Vis spektrofotometer (Evolution 260 Bio, Thermo Fisher Scientific Inc. Jerman).
Metanol digunakan sebagai seri larutan standar kosong dan TPF disiapkan untuk 50, 80, 100, 120,
140, 160, 180, 200 dan 250 mg/kg. Aktivitas enzim dehidrogenase dinyatakan sebagai mg TPF/ (g.h)
tanah kering.
Gambar 2. Hitungan Bakteri Pemakai Hidrokarbon (HUB) dalam tanah yang diambil dari sekitar
rizosfer (A) Impatiens balsamina; (B) Crotalaria retusa dan (C) yang tidak ditanam kontrol
terkontaminasi pada hari 30 , 60 dan 90 Error bar mewakili standar deviasi dari tiga pengukuran
independen. Sarana dalam ULO yang sama konsentrasi yang diikuti oleh huruf yang berbeda (a, b
dan c) dan rata-rata antara konsentrasi ULO yang berbeda diikuti oleh huruf yang berbeda (A, B, C,
D, E dan F) adalah berbeda nyata (p<0,05).
2.9. Penentuan sitotoksisitas dan genotoksisitas tanah
Sitotoksisitas dan genotoksisitas tanah yang diremediasi ditentukan pada hari ke 30, 60, dan
90 menggunakan uji hayati Allium cepa (Fiskesjo, 1985; Bakare dkk., 2000; Sharma dan Sharma,
2014). bawang sehat umbi dengan ukuran yang sama dipilih untuk percobaan. Seratus gram
sampel tanah yang terkontaminasi dan kontrol ditambahkan ke individu cangkir plastik tempat umbi
bawang ditempatkan kemudian dibiarkan berkecambah. Setelah inkubasi 48 jam, umbi bawang
merah dengan akar sehat dicabut pada puncak fase mitosis (9.00-10.00), dicuci secara menyeluruh
dengan air suling dan segera difiksasi dalam reagen fiksatif (etanol: asam asetat glasial 2:1 v/v)
selama 1 jam. Potongan dua milimeter akar bawang merah dihidrolisis menggunakan HCl 1N selama
15 menit pada suhu kamar dan labu mitosis kemudian disiapkan pada slide kaca menggunakan Biru
toluden (0,05%) sebagai pewarna. Bahan yang disiapkan diamati di bawah daya tinggi menggunakan
lensa minyak imersi dari mikroskop foto digital (Olympus DP 20, Olympus Cooperation, Jepang) dan
jumlah sel normal, membagi sel dan sel dengan penyimpangan kromosom adalah terhitung. Indeks
Mitotic dihitung menurut rumus:

Jumlah sel yang membelah

Indeks mitosis (MI) = x 100%
Jumlah total sel

2.10. Penentuan parameter fisikokimia dari tanah yang terkontaminasi

Sifat fisikokimia dasar (pH, potensi air gravimetri, nitrat-nitrogen (NO− 13 N ) konsentrasi,
fosfor yang dapat diekstraksi konsentrasi phorous) dari tanah yang terkontaminasi ULO sebelum (0d)
dan setelah remediasi (90d) diukur menurut metode dijelaskan dalam penelitian sebelumnya
(Walakulu Gamage et al., 2020).
2.11. Analisis statistik
Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan statistik standar perangkat lunak MINITAB
versi 17. ANOVA satu arah dilakukan untuk menentukan perbedaan yang signifikan antara sarana
individu yang diukur parameter dan ANOVA dua arah dilakukan untuk menentukan efek interaktif
konsentrasi dan spesies ULO terhadap pertumbuhan tanaman pertunjukan pada setiap interval
waktu. Korelasi produk Pearson analisis dilakukan untuk menentukan hubungan antara yang diukur
parameter fisikokimia dan biologi dengan persentase ULO degradasi. Signifikansi statistik
didefinisikan pada p <0,05 dan p < 0,001.
3. Hasil
3.1. Persentase biodegradasi minyak pelumas bekas
Persentase biodegradasi minyak yang dihitung dari tanah yang diambil dari rizosfer
Impatiens balsamina dan Crotalaria retusa di akhir 30d, 60d dan 90d menunjukkan tingkat
kontaminasi konsentrasi tergantung menurun (Gbr. 1-A, 1-B dan 1-C) dan tergantung waktu
meningkat. Pada 30 hari, persentase biodegradasi dalam tanah dengan 0,5% b/b ULO adalah 18,9%
dan 18,1% untuk C. retusa dan I. balsamina, masing-masing. Setelah 60 hari, nilai ini memiliki
signifikan (p <0,05) meningkat menjadi 31,9% dan 26,1% masing-masing

Gambar 3. Total aktivitas mikroba tanah yang diambil dari sekitar rizosfer (A) Impatiens balsamina;
(B) Crotalaria retusa dan (C) kontrol terkontaminasi yang tidak ditanam pada hari 30, 60 dan 90.
Batang kesalahan mewakili standar deviasi dari tiga pengukuran independen. Rata-rata dalam
konsentrasi ULO yang sama diikuti oleh a berbeda huruf (a, b dan c) dan rerata antar konsentrasi
ULO yang berbeda diikuti dengan huruf yang berbeda (A, B, C, D, E dan F) berbeda nyata (p<0,05).

dan pada akhir waktu percobaan (90 hari), persentase biodegradasi dalam tanah adalah 54,2% dan
47,9% untuk C. retusa dan I. balsamina, masing-masing. Sebaliknya, persentase biodegradasi minyak
dalam terkontaminasi (0,5% b/b ULO) tanah yang tidak ditanami (kontrol) setelah 30, 60 dan 90d
adalah 14,9%, 20,6% dan 31,2% masing-masing. Pengurangan yang tercatat dalam persentase
biodegradasi tanah diambil dari rizosfer C. retusa, dan I. balsamina dan tanah diambil dari kontrol
terkontaminasi yang tidak ditanam dengan 3% ULO pada akhir 30 hari, adalah 5,4%, 3,76% dan
3,43% masing-masing. Pada akhir 60 hari, ada peningkatan nilai-nilai ini masing-masing hingga
8,25%, 5,48% dan 5,6%.
 Peningkatan lebih lanjut dalam persentase biodegradasi yang dihitung dari ULO dicatat pada
akhir 90d dan nilainya adalah 22,0%, 18,2% dan masing-masing 9,15%. Oleh karena itu, hasil
menunjukkan bahwa waktu tergantung peningkatan persentase biodegradasi tanah yang diambil
dari masing-masing tingkat pencemaran dari perlakuan yang ditanam secara nyata (p<0,05) lebih
tinggi dibandingkan dengan tingkat kontaminasi yang sama pada kontrol yang tidak ditanam. Lebih
jauh, ada tingkat kontaminasi tergantung penurunan yang signifikan dalam biodegradasi ULO pada
semua perlakuan dan kontrol dengan peningkatan konsentrasi ULO. Pada akhir 90 hari, persentase
biodegradasi dari ULO pada perlakuan dengan C. retusa, I. balsamina dan kontrol yang tidak ditanam

dengan tingkat kontaminasi dari 0,5–3% b/b ULO telah dikurangi sebagai 54,2-22%, 47,9-18,2% dan
31,2-9,15% masing-masing. Ini mengungkapkan kelanjutan biodegradasi ULO bahkan di tanah
dengan tingkat tertinggi tingkat kontaminasi.

3.2. Jumlah HUB

Hitungan HUB yang dihitung menunjukkan ketergantungan tingkat kontaminasi penurunan (Gbr. 2-
A, 2-B dan 2-C) dan peningkatan tergantung waktu untuk tanah diambil dari rizosfer Impatiens
balsamina, Crotalaria retusa dan tanah yang diambil dari kontrol yang tidak ditanami dengan tanah
yang terkontaminasi. Lebih jauh, Hitungan HUB diambil dari semua perlakuan pada percobaan
tanam menunjukkan nilai yang secara signifikan lebih tinggi (p <0,05) dibandingkan dengan kontrol
yang tidak direncanakan. Jumlah HUB tertinggi (p <0,05) tercatat di tanah dengan C. retusa dan yang
terkontaminasi 0,5% b/b Korelasi ULO analisis mengungkapkan korelasi positif yang signifikan (p
<0,001) antara persentase biodegradasi ULO dan jumlah HUB yang tercatat pada hari ke 90 dengan
koefisien korelasi r = 0,986, r = 0,988 dan r = 0,990, untuk C. retusa, I. balsamina dan kontrol yang
tidak ditanam masing-masing.

3.3. Total aktivitas mikroba di tanah yang terkontaminasi ULO

Total aktivitas mikroba (TMA) tanah yang diambil dari rizosfer balsamina Impatiens,
Crotalaria retusa dan tanah yang diambil dari yang tidak ditanam kontrol menunjukkan penurunan
ketergantungan tingkat kontaminasi (Gbr. 3-A, 3-B dan 3-C) dan tergantung waktu meningkat.
Setelah 30 hari, nilai tertinggi dari TMA diamati pada 0,5% b/b tanah ULO yang diambil dari rizosfer
C. retusa (12,39 g/g) dan I. balsamina (10,72 g/g). Di akhir percobaan (90d), nilai TMA untuk tingkat
kontaminasi ini memiliki meningkat secara signifikan menjadi 18,08 g/g dan 17,00 g/g, untuk
C.retusa dan I. balsamina masing-masing. Di tanah yang tidak ditanami yang terkontaminasi dengan
0,5% b/b. Tingkat kontaminasi ULO, nilai TMA adalah 9,31 dan 13,80 g/g pada 30d dan 90d masing-
masing. Di tanah yang paling terkontaminasi (3% b/b ULO), pada akhir percobaan, TMA turun
menjadi 10,62 g/g, 10.00 g/g dan 5,49 g/g dari tanah yang diambil dari rizosfer C. retusa, I.balsamina
dan tanah yang diambil dari kontrol terkontaminasi yang tidak ditanam, masing-masing. Analisis
korelasi mengungkapkan korelasi positif yang signifikan (p < 0,001) antara persentase biodegradasi
ULO dan nilai TMA pada 90 d di tanah yang diambil dari rizosfer C. retusa (r = 0,978), I. bal samina (r
= 0,979) dan kontrol yang tidak ditanam (r = 0,962) masing-masing Selain itu, terdapat korelasi
positif yang signifikan (p < 0,001) antara jumlah TMA dan HUB, dengan koefisien 0,979, 0,978 dan
0,894 untuk C. retusa, I. balsamina dan kontrol yang tidak ditanam masing-masing.

3.4. Aktivitas dehidrogenase (DHA) di tanah yang terkontaminasi ULO

Ketergantungan tingkat kontaminasi dan ketergantungan waktu meningkat dalam DHA
terbukti untuk semua perlakuan dan kontrol (Gbr. 4-A, 4-B dan 4-C). DHA tanah secara signifikan (p
<0,05) lebih tinggi pada perlakuan tanam dibandingkan dengan perlakuan yang tidak ditanam. Juga,
tingkat aktivitas secara signifikan (p <0,05) lebih tinggi dari rizosfer C. retusa daripada I. balsamina
dalam semua perawatan; misalnya setelah 30 hari, dalam 0,5% b/b tanah ULO DHA kadar diambil
dari rizosfer I. balsamina, C. retusa dankontrol yang tidak ditanam pada tingkat kontaminasi 0,5%
b/b adalah 4,88, 5,12 dan 2,56 mg TPF/kg.18h untuk I. balsamina, C. retusa, masing-masing. Ini
nilai meningkat menjadi 5,31, 5,62 dan 3,01 mg TPF/kg.18h, masing-masing oleh akhir percobaan.

3.5. Sitotoksisitas dan genotoksisitas tanah fitoremediasi

Nilai indeks mitosis (MI) yang dihitung menunjukkan tingkat kontaminasi penurunan
tergantung dan peningkatan tergantung waktu untuk semua perawatan dan kontrol (Gbr. 5-A, 5-B,
5-C). Menurut hasil, MI . tertinggi nilai dicatat dari tanah dengan 0,5% b/b ULO pada setiap waktu
Titik. MI yang dihitung pada hari ke 30 adalah 29,02%, 27,46% dan 25,72% untuk C. retusa, I.
balsamina dan kontrol terkontaminasi yang tidak ditanam, masing-masing. Setelah 60 hari, nilai
meningkat menjadi 35,28%, 28,11% dan 27,37%, masing-masing dan pada hari ke 90 mereka
meningkat lebih lanjut menjadi 41,26%, 38,61% dan 29,66% masing-masing. Analisis korelasi
mengungkapkan signifikan (p < 0,001) korelasi positif antara persentase ULO degradasi dan MI pada
hari 30, 60 dan 90 di kedua C. retusa (r = 0.928, 0.973 dan 0.986) dan I. balsamina (r = 0.946, 0.980
dan 0.977) perawatan. Abnormalitas kromosom (CA) yang diamati pada ujung akar dari Allium cepa
yang ditanam di tanah yang terkontaminasi yang diambil dari rimpang C. retusa dan I.balsamina
ditunjukkan pada Gambar. 6. Kelainan serupa seperti jembatan kromosom, kerusakan kromosom,
gelandangan kromosom, kromosom tertinggal, lengket dan lesi diamati dari perlakuan yang berbeda
dengan variasi frekuensinya sejajar dengan tingkat kontaminasi ULO.
Gambar 4. Aktivitas enzim dehidrogenase tanah yang diambil dari rizosfer (A) Impatiens balsamina;
(B) rizosfer Crotalaria retusa dan (C) tidak ditanam kontrol terkontaminasi pada akhir periode
percobaan 30 hari, 60 hari dan 90 hari. Batang kesalahan mewakili standar deviasi dari tiga
pengukuran independen.

3.6. Analisis parameter fisikokimia tanah

Nilai rata-rata parameter fisikokimia tanah yang diukur dari semua perlakuan dikumpulkan
pada 30 hari (tahap awal fitoremediasi) dan 90d (pada akhir percobaan) disajikan pada Tabel 1.
Ada tingkat kontaminasi yang tergantung signifikan (p <0,05) meningkat dan signifikan tergantung
waktu (p <0,05) penurunan pH tanah fitoremediasi dari kedua C. retusa dan I. balsamina. N TIDAK 1
3 dan konsentrasi fosfor yang dapat diekstraksi menurun dalam kontaminasi tingkat - cara
tergantung di semua perawatan. Pada 30d, konsentrasi tertinggi dari kedua parameter tersebut
dicatat pada tanah yang terkontaminasi 0,5% b/b ULO dengan N NO− 13 konsentrasi 2,12, 1,86 dan
1,67 mg/kg dan konsentrasi fosfor yang dapat diekstraksi sebesar 9,7, 8,1 dan 7,2 mg/kg dalam
tanah dari rizosfer C. retusa, I. balsamina dan tidak ditanam
kontrol, masing-masing. Tren serupa terlihat pada 90d, dengan tertinggi konsentrasi N NO− 1
3 (2,38, 2,18 dan 1,78 mg/kg) dan mengekstrak fosfor mampu (12,0, 9,3 dan 7,9 × 10− 2 mg/kg)
masing-masing untuk C. retusa, I. bal samina dan kontrol yang tidak ditanam. Analisis korelasi
mengungkapkan, korelasi positif yang sangat signifikan (p <0,001) dari N NO− 13 konsentrasi dan
fosfor yang dapat diekstraksi dengan persentase ULO degradasi dan sangat signifikan (p <0,001)
korelasi negatif dari pH tanah dengan persentase degradasi ULO. Parameter fisikokimia yang diukur
dari eksperimen kontrol yang dilakukan tanpa adanya tanaman di ULO yang terkontaminasi tanah
menunjukkan nilai yang lebih rendah daripada yang diukur dari perlakuan dengan tanaman. Semua
parameter fisikokimia yang diukur secara signifikan lebih tinggi pada perlakuan dengan C. retusa
dibandingkan dengan I. balsamina. Selanjutnya, diukur N NO− 13, konsentrasi P yang dapat
diekstraksi menunjukkan korelasi positif signifikan dan pH tanah menunjukkan signifikan (p < 0,001)
korelasi negatif dengan persentase degradasi ULO. Namun, matriks korelasi (Tabel 2 dan 3)
menunjukkan interkorelasi yang kompleks antara parameter fisikokimia dan biologi yang dianalisis.

4. Diskusi
Penapisan jenis tumbuhan yang berpotensi fitoremediasi merupakan salah satu syarat
utama keberhasilan fitoremediasi (Baruah et al.,2016). Potensi fitoremediasi suatu spesies
ditentukan oleh kapasitas untuk dekontaminasi atau pembersihan kontaminan di dalam tanah.
Dekontaminasi polutan minyak dapat dipromosikan oleh akar tanaman langsung dan/atau melalui
peningkatan komunitas mikroba di rizosfer (Afzal et al., 2012; Xie et al., 2012; Khan et al., 2013a;
Khan dkk., 2013b). Oleh karena itu, kinerja pertumbuhan akar di daerah yang terkontaminasi matriks
dapat mempengaruhi potensi fitoremediasi. Akar yang luas sistem dapat memfasilitasi mikroba,
nutrisi dan kontaminan untuk menghubungi satu sama lain (Cunningham et al., 1996). Oleh karena
itu, kehadiran tanaman dengan toleransi di lokasi yang terkontaminasi dapat merangsang mikroba
populasi untuk meningkatkan degradasi kontaminan. Hasil dari penelitian ini sesuai dengan pola
persentase biodegradasi minyak yang tercatat dalam penelitian sebelumnya dengan spesies
tanaman yang berbeda. Persentase yang lebih tinggi biodegradasi ULO di rizosfer C. retusa daripada
I. balsamina mungkin karena perbedaan spesifik spesies dalam ukuran sistem akar, mengeluarkan
eksudat akar, menghambat keragaman populasi mikroba dan ukuran populasi. Karena C. retusa
merupakan tanaman legum yang memanfaatkan atas fiksasi nitrogen simbiosis karena nitrogen
merupakan faktor pembatas utama yang berpengaruh terhadap degradasi bahan pencemar di dalam
tanah (Mahmud dkk., 2020). Peningkatan persentase biodegradasi tergantung waktu mungkin
dikaitkan dengan pertumbuhan tergantung waktu dari tanaman yang dipilih dalam tanah yang
terkontaminasi ULO. Meskipun enumerasi populasi mikroba pendegradasi hidrokarbon telah
dilakukan untuk memperkirakan ukuran populasi mikro organisme yang berpotensi untuk
bioremediasi hidrokarbon, sebenarnya ukuran populasi mungkin tidak terwakili karena tidak adanya
persyaratan pertumbuhan di media laboratorium untuk beberapa strain. Oleh karena itu, piring
teknik penghitungan mungkin meremehkan kepadatan populasi yang benar-benar layak (Alexander,
1978; Amann et al., 1995; Atlas, 1998). Namun, tingkat kontaminasi dan jumlah HUB tergantung
waktu yang dicatat dalam penelitian ini menyimpulkan tingkat kontaminasi adalah salah satu faktor
utama yang menentukan ukuran populasi HUB. Beberapa bakteri dengan toleransi ke hidrokarbon
mendorong pertumbuhannya dengan memanfaatkan senyawa minyak bumi secara efisien sebagai
sumber karbon (Xu et al., 2018). Namun, sebagai Ma et al., (2015) melaporkan tingginya kadar
hidrokarbon tidak hanya menghambat pertumbuhan HUB tetapi juga dapat menyebabkan kematian.
Oleh karena itu, dilaporkan secara signifikan rendah (p <0,005) jumlah HUB dari kedua pengobatan
dan kontrol dengan tingkat kontaminasi tinggi seperti 3% b/b ULO mungkin karena penghambatan
pertumbuhan HUB sebagai akibat dari toksisitas. Di tanam perawatan, yang diamati secara signifikan
lebih tinggi (p <0,005) jumlah HUB daripada itu pada kontrol yang tidak ditanam mungkin karena
efek gabungan dari ketersediaan ULO sebagai sumber karbon dan efek rizosfer positif di HUB.
Kehadiran dan aktivitas populasi mikroba tanah dan enzimnya kegiatan dianggap parameter
yang tepat untuk menyediakan biologis penilaian tentang kualitas dan fungsi tanah (Alrumman et al.,
2015; Kaczynska et al., 2015). Tanah bervegetasi dianggap dapat meningkatkan tingkat aktivitas
mikroba karena adanya permukaan tambahan untuk kolonisasi mikroba dan eksudat akar yang
dilepaskan oleh tanaman.

Menurut hasil penelitian ini, pH tanah menunjukkan waktu tergantung penurunan dan tingkat
kontaminasi tergantung peningkatan.

Gambar 5. Indeks mitosis tanah yang diambil dari (A) rizosfer Impatiens balsamina (B) rizosfer
Crotalaria retusa; dan (C) rangkaian terkontaminasi yang tidak ditanam di akhir periode percobaan
30 hari, 60 hari dan 90 hari. Batang kesalahan mewakili standar deviasi dari tiga pengukuran
independen.
Dengan demikian yang diamati secara signifikan lebih tinggi populasi mikroba dan aktivitas
mikroba dalam perawatan dengan tanaman mungkin karena efek tanaman yang ditanam di tanah
ULO. Ukuran populasi HUB dan aktivitas mikroba yang jauh lebih tinggi dilaporkan dari rizosfer C.
retusa dibandingkan dengan I. balsamina mungkin mungkin karena faktor spesifik spesies yang dapat
berkontribusi pada potensi fitoremediasi. Potensi uji hidrolisis fluorescein diacetate (FDA) dapat
digunakan sebagai pengukuran aktivitas mikroba total Adam dan Duncan (2001). Berbagai enzim
seperti esterase non-spesifik, protease dan lipase telah menunjukkan kemampuan untuk
menghidrolisis FDA dan ini mungkin indikasi penting dalam penentuan aktivitas enzim secara
keseluruhan dari tanah. Penurunan yang bergantung pada tingkat kontaminasi yang diukur dalam
aktivitas mikroba total dalam penelitian ini mungkin karena penghambatan pertumbuhan mikroba
dan aktivitas karena efek toksik dari ULO. Selanjutnya, hidrokarbon minyak bumi dapat menekan
aktivitas enzim mikroorganisme atau menutupi permukaan sel dan mineral organik. Ini adalah juga
tentu saja untuk menghambat interaksi antara situs aktif dari enzim dengan substrat larut (Kiss et al.,
1998). Aktivitas dehidrogenase (DHA) telah dianggap sebagai indikator untuk menilai aktivitas redoks
mikroba di tanah (Brzezinska et al., 2001) seperti yang ada di semua mikroorganisme hidup dan oleh
karena itu, DHA adalah

sering dianggap sebagai indeks untuk menentukan mikrobiologi umum aktivitas di dalam tanah
(Moeskops et al., 2010). Dengan demikian dapat digunakan sebagai vital indikator untuk menilai
pemulihan dari tanah yang terkontaminasi hidrokarbon (Alrumman et al., 2015) dan keberhasilan
fitoremediasi. Tambahan ULO dapat menjadi stimulasi dan penghambatan terhadap DHA tergantung
pada konsentrasi ULO dan sifat tanah (Ramadass et al., 2015) dan mikroorganisme yang menghuni
tanah. Hidrokarbon alifatik dan aromatik dalam ULO dapat berfungsi sebagai sumber karbon untuk
pertumbuhan mikroorganisme sehingga meningkatkan DHA. Di sisi lain, tingkat ULO tergantung
peningkatan signifikan dalam DHA tanah mungkin karena adaptasi mikroorganisme yang mensekresi
enzim ke lingkungan yang penuh tekanan (Wei dkk., 2019). Selanjutnya, DHA yang tercatat secara
signifikan lebih tinggi dalam tanah yang diambil dari rizosfer C.retusa daripada di I. balsamina
mungkin karena spesies spesifik efek rizosfer positif tinggi C. retusa . Achuba dan Peretiemo-Clarke
(2008), Ikeura dkk. (2016) mengamati peningkatan progresif DHA tanah di tanah yang
terkontaminasi dibandingkan dengan kontrol.
Li dkk. (2005) mengamati peningkatan tingkat kontaminasi yang bergantung pada tanah
DHA setelah 4 hari waktu percobaan. Oleh karena itu hasil saat ini penelitian ini sesuai dengan
temuan yang dilaporkan sebelumnya. Minyak pelumas bekas mengandung hidrokarbon poliaromatik
turunan minyak bumi seperti fenol, toluena, benzena dan senyawa lainnya yang mungkin memiliki
potensi mutagenik dan efek karsinogenik yang tinggi pada biota dalam ekosistem yang berbeda dan
pada manusia (Van Gestel et al., 2003; Zhao dkk., 2012). Oleh karena itu, penilaian toksisitas pada
terkontaminasi tanah dan tanah yang diremediasi sangat penting untuk memberikan informasi yang
lebih akurat mengenai penilaian risiko ekologis (Al-Mutairi et al., 2008) yang penting dalam menilai
keberhasilan fitoremediasi.
Sitotoksisitas dan tingkat genotoksisitas kontaminan tertentu dapat dipantau dengan:
kenaikan dan penurunan indeks mitosis (MI) yang dapat digunakan sebagai bio indikator
sitotoksisitas dan genotoksisitas dalam studi pemantauan bio mental lingkungan (Fernandes et al.,
2007, Sudhakar, R., et al., 2001). Selanjutnya, uji Allium cepa telah digunakan secara luas dalam
pemantauan bio studi yang dilakukan oleh para peneliti sebelumnya untuk menyelidiki klastogenik
efek zat genotoksik dengan menggunakan penyimpangan kromosom dan
uji nukleat mikro sebagai titik akhir mikroskopis genotoksisitas (Ateeq dkk., 2002; Matsumoto dan
Marin-Morales, 2004; Fernandes dkk.,2007; Carita dan Marin-Morales, 2008; Leme dan Marin-
Morales, 2008).Menurut hasil, minyak pelumas bekas telah menginduksi kromosom penyimpangan
pada sel meristematik Allium cepa dengan membentuk lengket kromosom, jembatan, fragmen
kromosom dan lesi nuklir.
Fragmen kromosom dapat disebabkan oleh kerusakan kromosom karena terhadap efek
klastogenik bahan kimia yang ada dalam media yang terkontaminasi (Yi dan Meng, 2003; Leme dan
Marin-Morales, 2009). Kehilangan kromosom adalah konsekuensi dari gelendong mitosis yang tidak
aktif selama siklus pembelahan sel karena efek aneugenik (Uhl et al., 2003). Karena itu, peningkatan
MI tergantung waktu yang dihasilkan dan frekuensi rendah yang diamati penyimpangan kromosom
untuk tanah yang diambil dari rizosfer tanaman yang diuji menyimpulkan pengurangan efek
sitotoksik dan genotoksik dari minyak pelumas bekas hasil fitoremediasi. Yang dipamerkan kuat
korelasi positif antara MI dan persentase degradasi ULO di rizosfer tanah lebih lanjut menyoroti
pengurangan toksisitas oleh yang diuji tanaman melalui degradasi ULO selama fitoremediasi proses.
Parameter fisikokimia tanah dari lingkungan apa pun diubah baik oleh kontaminan organik
maupun anorganik (Edwin-Wosu dan Nkang, 2020). Analisis parameter fisikokimia tanah tercemar
ULO sangat penting untuk mengevaluasi kualitas tanah sebelum dan sesudah perbaikan. Dalam
penelitian ini, parameter fisikokimia utama dari tanah diukur pada akhir waktu percobaan 30 dan 90
hari dengan bertujuan untuk mengetahui pengaruh fitoremediasi terhadap parameter fisikokimia
tanah.
Pada awal (0d) percobaan, ada tidak ada perbedaan pH, N NO− 13 konsentrasi dan dapat
diekstraksi konsentrasi fosfor karena tanah terkontaminasi secara artifisial. Oleh karena itu,
perbedaan parameter tanah pada akhir 30 hari dan 90d (setelah remediasi) dipertimbangkan untuk
mengevaluasi pengaruh fitoremediasi terhadap parameter tanah dan kondisi tanah yang
dibandingkan ke tanah yang tidak tercemar.
Di lingkungan alami, pH tanah sangat dipengaruhi oleh tanah proses biogeokimia. Oleh
karena itu, pH tanah dianggap sebagai "variabel tanah induk" yang memiliki efek pada berbagai
fisikokimia tanah dan sifat biologis yang penting untuk pertumbuhan tanaman Neina (2019). Seperti
proses biologis tanah lainnya, pH tanah berpengaruh pada proses biodegradasi dengan mengubah
aktivitas mikroba, komunitas mikroba dan keanekaragaman, enzim-enzim yang vital dalam proses
biodegradasi bahan pencemar. Umumnya, pH tanah basa atau sedikit asam meningkatkan
biodegradasi dan biasanya pH berkisar antara 6,5–8,00 yang dianggap sebagai optimal untuk
biodegradasi minyak (Singh et al., 2003; Singh dan Walker, 2006; Pawar, 2015).

Gambar 6. Fotomikrograf penyimpangan kromosom yang berbeda yang diamati pada sel
meristematik akar akar Allium cepa yang ditanam di tanah yang terkontaminasi diambil dari rizosfer
C. retusa dan I.balsamina seperti yang ditunjukkan dari A sampai Z di mana, (A) Jembatan anafase-
telofase, (B) jembatan ganda pada anafase, (C) anafase diagonal, (D) anafase multipolar, (E)
metafase ireguler dengan perlekatan kromosom, (F) fragmen kromosom pada anafase multipolar,
(G) lesi inti ganda, (H) perlekatan kromosom pada metafase tidak teratur, (I) non-disjungsi dan
jembatan pada anafase, (J) anafase lengket dengan kromosom gelandangan, (K) berinti ganda aneh
sel pada anafase, (L) kehilangan kromosom pada profase, (M) gangguan spindel pada metafase, (N)
anafase multipolar dengan laggards, (O) cincin kromosom pada awal metafase bola, (P) Kromosom
gelandangan pada anafase, (Q) Lesi nuklear pada interfase, (R) metafase tidak teratur dengan
kromosom lengket, (S) kromosom tersebar, (T) anafase lengket, (U) kehilangan kromosom pada
profase, (V) kromosom gelandangan pada anafase, (W) jembatan kromosom rusak pada anafase, (X)
metafase C, (Y) profase akhir dengan kromosom cincin, (Z) sel tali dengan lesi nuklir. Fotomikrograf
(a) hingga (d) mewakili perilaku kromosom dalam mitosis sel meristematik akar akar Allium cepa
yang ditanam pada tanah kontrol. Fotomikrograf ditangkap menggunakan mikroskop foto digital
(Olympus DP 20, Olympus Cooperation, Jepang), perbesaran 1000x.
 Tanah kontrol menunjukkan pH asam dan dengan pH kontaminasi minyak memiliki telah
meningkat. pH terukur dari tanah yang terkontaminasi berkisar antara sedikit asam hingga basa.
Perubahan pH ini mungkin disebabkan oleh reaksi kimia antara hidrokarbon minyak bumi dan
elemen tanah. Sun dan Zhou (2007) dan berpengaruh secara langsung maupun tidak langsung
terhadap sifat fisiko kimia dan biologi tanah (Lauber et al., 2009; Masakorala dkk., 2014; Matsumoto
dkk., 2018; Neina, 2019). Oleh karena itu, perubahan pH tanah dapat mengubah populasi mikroba
dan aktivitasnya yang bertanggung jawab atas biodegradasi ULO. Hasil ditingkatkan biodegradasi
pada tingkat kontaminasi tingkat rendah seperti 0,5–1% b/b ULO menyarankan pH sedikit asam (6,5
hingga 6,9) sebagai kondisi yang menguntungkan untuk biodegradasi ULO.
Kontaminan dapat memiliki dampak negatif yang tinggi pada beberapa mikroba masyarakat
(Waldron et al., 2009). Seperti Masakorala dkk. (2014) cahaya tinggi, populasi mikroba nitrifikasi
mungkin ditekan oleh kontaminan hidro karbon yang mengakibatkan tingkat kontaminasi tergantung
pengurangan N-NO3 kandungan dalam tanah yang terkontaminasi hidrokarbon. Di dalam
biodegradasi kontaminan, mikroorganisme memiliki kemampuan untuk memanfaatkan nitrat untuk
asimilasi N (John et al., 2011). Karena pemanfaatan oleh mikroorganisme, tanah N-NO3 dapat
dikurangi pada tanah yang terkontaminasi.
 Lebih lanjut Ramadass et al., (2015) telah melaporkan tingkat kontaminasi penurunan
tergantung nitrifikasi di tanah yang terkontaminasi ULO karena dikenakan toksisitas oleh
kontaminan ULO. Enzim urease berperan sangat peran penting dalam mineralisasi Nitrogen. Karena
urease sangat enzim ekstraseluler sensitif untuk senyawa xenobiotik dan stress kondisi (Gianfreda et
al., 2005), hidrokarbon minyak bumi secara negative berpengaruh pada aktivitas urease dalam tanah
(Masakorala et al., 2014). Oleh karena itu, ini mungkin menjadi alasan lain yang mungkin untuk
pengurangan N-NO3 . yang dilaporkan konsentrasi di tanah yang terkontaminasi ULO. Demikian ULO
yang dilaporkan penurunan tergantung tingkat kontaminasi dan peningkatan tergantung waktu di
tanah yang diambil dari rizosfer mungkin disebabkan oleh pengurangan efek toksik ULO sebagai
akibat dari fitoremediasi. Lebih jauh, e menghasilkan peningkatan yang signifikan dalam N NO− 13
konsentrasi di tanah yang dimediasi fitor oleh C. retusa dibandingkan dengan di I. balsamina
mungkin karena terhadap kemampuan fiksasi nitrogen C. retusa karena merupakan tanaman
polong-polongan.
Pengurangan tingkat kontaminasi yang dihasilkan bergantung pada konsentrasi P yang dapat
diekstraksi dari tanah yang terkontaminasi ULO dibandingkan dengan tanah yang tidak tercemar
mungkin disebabkan oleh beberapa alasan seperti penghambatan transformasi mikroba bahan
organik yang mengakibatkan rendahnya mineralisasi fosfor (Nwite dan Alu, 2015) dan pengurangan
mikroba mobilisasi fosfor anorganik di dalam tanah oleh mikroorganisme dengan dampak negatif
kontaminan (Barua et al., 2011). Alasan untuk konsentrasi P yang dapat diekstraksi secara signifikan
lebih tinggi dari tanah fitoremediasi mungkin penghapusan yang disebutkan di atas kemungkinan
penyebab pengurangan konsentrasi P yang dapat diekstraksi sebagai hasil fitoremediasi.
Korelasi positif yang kuat yang dihasilkan antara yang diukur parameter mikroba (MA dan
HUB) dan ketersediaan nitrogen dan fosfor di tanah yang terkontaminasi ULO menyiratkan
keseimbangan antara asimilasi nutrisi dan potensi mineralisasi komunitas mikroba (Gianfreda et al.,
2005; John et al., 2011) di rizosfer. Oleh karena itu, efek rizosfer spesifik spesies dari spesies
tanaman yang diuji mungkin menjadi kekuatan pendorong utama degradasi ULO dan ketersediaan
nitrogen dan fosfor.
Koefisien korelasi yang dihitung sangat signifikan (r) dari parameter fisiko-kimiawi dan
biologis yang terukur terbukti peningkatan yang signifikan dalam parameter yang diukur sebagai
hasil dari fitoremediasi. Karena matriks korelasi menunjukkan korelasi antar yang kuat antara
parameter yang diukur, sulit untuk menetapkan hubungan arah dan efek langsung antara tingkat
kontaminasi ULO dan mengukur parameter. Oleh karena itu, perbaikan tanah mungkin tidak hanya
karena efek pengurangan ULO di tanah fitoremediasi, tetapi juga perbaikan lingkungan fisikokimia
dan biologi tanah.
Namun, fitur karakteristik seperti sistem root yang tersebar luas dengan percabangan lateral
dan kepadatan rambut akar yang tinggi, efek rhizo spheric spesies spesifik dari kedua spesies yang
diuji dan pembentukan bintil akar dan fiksasi nitrogen simbiosis C. retusa (Walakulu Gamage et al.,
2020) mungkin berpengaruh dalam meningkatkan sifat fisiko-kimia tanah dari tanah fitoremediasi
diamati dalam penelitian ini.

5. Kesimpulan
Persentase biodegradasi minyak pelumas bekas (ULO) di rizosfer C. retusa dan I. balsamina
memberikan dukungan untuk potensi phy toremediasi dari kedua spesies yang diuji. Total aktivitas
mikroba dan, ukuran populasi yang dapat dibudidayakan dari hidrokarbon yang memanfaatkan
bakteri (HUB) menunjukkan bahwa fitoremediasi terjadi terutama melalui gradasi rimpang. Dengan
perkembangan biodegradasi ULO, sitotoksisitas dan genotoksisitas ULO menurun dan juga disertai
dengan perbaikan sifat fisikokimia tanah. Karena efek ULO yang saling berkorelasi dalam tanah
sangat signifikan, hubungan sebab akibat antara konsentrasi ULO yang tersisa dan konsentrasi ULO
lainnya parameter fisikokimia dan biologi tanah yang diukur atau toksisitas titik akhir tidak dapat
ditetapkan untuk sepenuhnya menjelaskan dampak ediasi fitor terhadap sifat-sifat tanah. Namun,
apa yang terlihat dari ini penelitian adalah bahwa fitoremediasi tidak hanya mengurangi konsentrasi
ULO, dan karenanya potensi toksisitas, tetapi juga meningkatkan kualitas keseluruhan tanah. Hasil
kami juga menyoroti perbedaan dalam fitoremediasi potensi C. retusa dibandingkan dengan I.
balsamina. Potensi yang lebih besar dari mantan kemungkinan besar karena efek rizosfer spesifik
spesies. Pernyataan Kepentingan Bersaing Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak
mengetahui persaingan keuangan minat atau hubungan pribadi yang tampaknya dapat
mempengaruhi pekerjaan yang dilaporkan dalam makalah ini.