2.

Biologi Mesenchymal Stem Cells (MSC): konsep, terminologi, sumber, fenotipe sel,
profil gen, dan penuaan

"Stem cell" adalah sel yang memiliki dua sifat utama: 1) Pembelahan asimetris dan 2)
Kapasitas diferensiasi. Tidak semua sel dalam tubuh kita mempunyai kedua sifat ini. Ada dua
sel utama: embryonic stem cells dan adult stem cells. Adult stem cells kini diterima dengan
baik. Perbaikan jaringan setelah cedera dan juga pembaruan homeostatik yang terus menerus
dari beberapa jaringan memperkuat gagasan ini (1). Pada tahun 1970, Friendstein
menjelaskan untuk pertama kalinya bahwa sumsum tulang tidak hanya menyimpan
hematopoetic stem cells (HSC), tetapi juga jenis sel lain yang memiliki sifat klonogenik in
vitro, yang mencirikan sel-sel ini berdasarkan sifatnya untuk membentuk koloni fibroblas di
sel primer pada kultur (CFU-F: colony-forming unit fibroblastic) (2).
Bertahun-tahun kemudian, Caplan dan rekan kerjanya menamai sel-sel ini sebagai
Mesenchymal Stem Cells (MSC) (5, 6). Pada tahun 1999, Pittenger et al menunjukkan bahwa
sel-sel ini adalah stem cell multipoten dengan potensi untuk berdiferensiasi menjadi sel lain
dari jaringan mesenkim (7). Sumber lain dari MSC telah dijelaskan sejak saat itu. MSC tidak
hanya ditemukan di sumsum tulang. Jaringan adiposa juga telah ditunjukkan sebagai tempat
potensial (8). Selain itu, pulpa gigi (9), limbus (10), selaput ketuban (11) cairan ketuban (12),
ginjal. Dalam kultur, semua sel ini memiliki fenotipe seperti fibroblas dan memiliki
kesamaan dalam uji imunofenotipe dan diferensiasinya.
International Society of Stem Cell Research (ISSCR) menyebut sel-sel ini sebagai sel-
sel multipotent mesenchymal stromal cells untuk fibroblast-like plastic adherent cells yang
diisolasi dari organ manapun (14). Dan jika sel ini mengikuti kriteria minimal stem cell, maka
sel ini bisa disebut Mesenchymal Stem Cells. Ada tiga kriteria utama untuk menentukan
indentitas MSC: 1) harus memiliki plastisitas (kemampuan organisme merubah fenotipenya
dalam merespon); 2) ekspresi CD105, CD73 dan CD90, dan kurangnya ekspresi molekul
permukaan CD45, CD34, CD14 atau CD11b, CD79alpha atau CD19 dan HLA-DR; 3) harus
memiliki potensi diferensiasi (15).
Meskipun sel-sel ini memiliki fenotip yang berbeda, mereka memiliki profil gen yang
berbeda. Marker molekular stem lineage markers dan gen yang mengatur proses
perkembangan dan regeneratif lebih dapat dijelaskan (17). Peroni et al, dalam sebuah
penelitian menunjukkan bahwa MSC dari sumsum tulang memiliki profil molekuler yang
identik jika dibandingkan dengan MSC dari jaringan adiposa. Namun demikian, perbedaan
dalam beberapa ekspresi gen dapat terjadi dengan kondisi kultur (17). Namun, tempat asal
MSC mengarah pada ekspresi jalur gen tertentu. Studi perbandingan MSC dari sumsum
tulang dan MSC dari tali pusat menunjukkan bahwa ada beberapa gen yang lebih banyak
diekspresikan dalam satu sel daripada yang lain. Contohnya, gen yang terkait dengan
aktivitas antimikroba dan osteogenesis lebih banyak diekspresikan dalam MSC dari sumsum
tulang; dan gen yang terkait dengan remodeling matriks dan angiogenesis lebih banyak
diekspresikan dalam MSC dari tali pusat (18).
Untuk mempertahankan sifatnya, sel punca ditempatkan di Niche. Niche adalah
lingkungan yang ditentukan oleh matriks ekstraseluler dan sel-sel lain yang mengeluarkan
beberapa faktor untuk mempertahankan sel induk di bawah yang tidak berdiferensiasi, karena
sel induk dewasa sangat sensitif terhadap sinyal eksternal (20-22). Jadi, jika Niche tidak
diatur dengan baik, misalnya dalam keadaan patologis, stem cell mungkin tidak bereaksi
seperti yang diharapkan: untuk memperbaiki dan mempertahankan homeostasis. Selain itu,
masalah dalam keseimbangan yang rumit antara Stem cell dan Niche juga dapat menyebabkan
kanker (23). Kerusakan DNA dalam sel induk melanosit menginduksi diferensiasi prematur,
yang mengarah ke apoptosis dan penuaan (24). Mengenai bahwa penuaan sel mungkin karena
perubahan DNA; ini mungkin penjelasan untuk korelasi terbalik antara usia dan populasi
adult stem cell dan fungsinya (25). Terlepas dari semua upaya, Niche potensial untuk adult
stem cell in vivo belum diketehui, namun Niche perisvaskular adalah salah satu tempat yang
mungkin (26, 27).

4.3 Faktor parakrin

Meskipun ada banyak cara untuk stem cell dapat memperbaiki cedera, mekanisme
utama yang dipertimbangkan adalah melalui fungsi parakrin dan endokrin. Saat ini, berbagai
sitokin dan faktor diketahui saling berinteraksi dan menguntungkan antara MSC dan sel lain.
4.3.1 Imunomodulasi
Di antara semua teori mengenai aksi parakrin untuk MSC, yang paling banyak dibahas
oleh penelitian adalah imunomodulasi. Penelitian telah menunjukkan bahwa peran utama
MSC dalam memperbaiki jaringan yang rusak bergantung pada meredakan peradangan di
tempat cedera.
Monosit/Makrofag
Karena makrofag merupakan salah satu sel yang memproduksi sitokin di lokasi cedera,
sel-sel ini adalah fokus utama saat imunomodulasi. Studi terbaru menunjukkan peran penting
dalam monosit MSC dan imunomodulasi makrofag. Maggini dkk. antara lain telah
menunjukkan bahwa MSC menghambat produksi sitokin pro-inflamasi makrofag, yaitu TNF-
a, IL-6 dan IFNg (87-89). MSC juga merangsang sitokin anti-inflamasi, produksi IL-10 dan
IL-12p40 (87, 88). Dengan cara ini, mengakibatkan aktivasi sel kekebalan dan proses
inflamasi terhambat dan mengurangi kerusakan jaringan. MSC juga meningkatkan fagositosis
sel apoptosis yang penting dalam membersihkan lokasi cedera. Selain itu, sel-sel ini
menghambat diferensiasi sel dendritik turunan monosit (90).

Sel Dendritik Sel

Dendritik (DC) memiliki peran penting dalam presentasi antigen dan modulasi profil
limfosit. MSC mampu menghambat pematangan DC melalui kontak sel ke sel dan produksi
PDGE2 dan IL-6, seperti yang terlihat melalui ekspresi downregulated dari molekul CD1a,
IL-12p70, MHC kelas II, CD80 dan CD86 (91, 92). Karena sel T sangat bergantung pada sel
penyaji antigen untuk diaktifkan, modulasi sel dendrit dianggap sebagai mekanisme yang
mungkin untuk induksi toleransi limfosit T. Selain itu, perlakuan MSC juga berdampak pada
migrasi DC, seperti terlihat pada penurunan ekspresi CCR7 dan pengurangan migrasi sebagai
respons terhadap CCL19 (92). Juga, DC tipe 1 dewasa menurunkan produksi TNF-a dan DC
tipe 2 meningkatkan ekspresi IL-10 yang juga dapat menginduksi limfosit profil Th2 (93).
Limfosit T
Penelitian telah menunjukkan bahwa modulasi limfosit T memiliki peran penting dalam
pada terapeutik MSC. Sebagai permulaan, dalam pengaturan penyakit, persentase yang cukup
besar dari MSC eksogen cenderung menumpuk di limpa dan kelenjar getah bening,
khususnya di sekitar sel imun seperti DC, limfosit T dan B, menunjukkan interaksi sel-
spesifik (94). MSC tidak dianggap menunjukkan sifat alogenik, karena memiliki
keistimewaan kekebalan, karena rendahnya HLA -DR dan ekspresi molekul kostimulatori
dan sifat imunomodulator dasarnya (95, 96). In vitro, MSC menghambat phytohemagglutinin
mitogen-induced dan mendorong proliferasi campuran limfosit reaksi alloantigen sel T (97-
99). Ini dilakukan oleh kontak sel ke sel dan faktor humoral secara spesifik, mensekresi IDO
dan Galectin-1. Stem sel ini juga menurunkan produksi TNF alpha dan IFN-gamma dan
meningkatkan sekresi IL-10 oleh sel T, kemungkinan dimediasi oleh IDO, PGE2 dan B7-H di
antara molekul lain (100-102). MSC juga menginduksi limfosit tipe Th2 dan diferensiasi sel
T regulator melalui, HLA-G5 dan molekul lainnya (103-105).
limfosit B
Meskipun banyak penelitian telah mengaitkan regulasi MSC dan limfosit T, hanya
sedikit yang menunjukkan peran langsung dalam fungsi limfosit B, dan banyak penelitian
yang dipublikasikan masih kontroversial. Yanfei et al telah menunjukkan bahwa limfosit B
mengalami penurunan proliferasi dan produksi antibodi ketika kultur dengan DC alogenik
yang diregulasi oleh MSC (106). Selain itu, penelitian lain menunjukkan bahwa MSC secara
langsung menghambat diferensiasi sel plasma limfosit B melalui faktor humoral (107, 108).
Di sisi lain, penelitian lain menunjukkan bahwa sel punca mesenkim menginduksi proliferasi
dan diferensiasi sel B menjadi plasmosit, ketika dirangsang dengan Toll-like receptor 9
agonist (109). Hasil yang berbeda ini mungkin disebabkan oleh rangsangan yang berbeda
yang digunakan dan efek rincinya pada hasil sel B masih harus ditemukan.
Sel NK / iNKT
Sedikit informasi yang masih diketahui tentang NK/Invariant Natural Killer T Cells
(iNKT) yang diperantarai MSC dibandingkan dengan jenis sel lainnya. Studi menunjukkan
bahwa MSC menghambat aktivasi sel NK dan iNKT dan produksi IFN-gamma dengan
sekresi mediator HLA-G5 dan PGE2 (110, 111). Sel NK menginduksi lisis MSC, mungkin
karena ekspresi molekul HLA kelas I yang rendah (112, 113). Perlu dipertimbangkan
mengenai efek MSC pada sistem kekebalan sehubungan dengan pengendalian tumor, karena
penghambatan sel NK (114)

4.3.2 Faktor angiogenik

Dukungan angiogenik yang diberikan oleh MSC dapat dianggap sebagai satu lagi efek
suportif, karena pembentukan kembali suplai darah sangat penting untuk pemulihan jaringan
yang rusak. Efek pro-angiogenik MSC telah ditunjukkan dalam beberapa penelitianin vitro
dan in vivo (115-118). Diketahui bahwa MSC mengekspresikan dan mensekresi Stromal cell-
derived factors 1 (SDF-1), vascular endothelial growth factor (VEGF), dan sitokin lain yang
penting untuk angiogenesis (Basic Fibroblast Growth Factor (bFGF); Matrix
metalloproteinases (MMPs). VEGF telah diidentifikasi sebagai komponen kunci dalam
perkembangan pembuluh darah, tetapi VEGF saja mungkin tidak cukup untuk mencapai
perkembangan fungsional dan matur dari pembuluh darah. Pembuluh darah yang diinduksi
VEGF sering bocor dan tidak terhubung dengan tepat ke pembuluh darah yang ada (119,
120). Aktivitas SDF-1 sangat penting untuk kelangsungan hidup sel endotel, percabangan
pembuluh darah dan perekrutan perisit (121). Menariknya, SDF-1a bukan hanya sinyal
mobilisasi yang mampu merekrut sel progenitor positif CXCR4 ke dalam jaringan hipoksia
tetapi juga sinyal retensi untuk sel punca yang diturunkan dari sumsum tulang
angiocompentent. Ia juga merekrut perisit dan sel otot polos untuk menstabilkan dan
mematangkan pembuluh darah yang baru terbentuk (122, 123). Dengan demikian, SDF-1
telah terbukti meningkatkan neovaskularisasi dengan endothelial progenitor cell (EPC)
rekrutmen ke fokus iskemik (122, 124). Selain itu, VEGF adalah salah satu sitokin
angiogenik kuat yang juga dapat memobilisasi EPC dari sumsum tulang dan menghambat
apoptosis EPC (125).
Dalam ischemic hind limb model, angiogenesis yang dimediasi VEGF-A sebagian
bergantung pada aktivasi jalur SDF-1—CXCR4 (124). Secara bersama-sama, kemokin SDF-
1 kemungkinan memainkan peran penting dalam angiogenesis yang dimediasi ASC (126).
Menariknya, penelitian telah menunjukkan bahwa sel punca mesenkim memiliki sifat
angiogenesis yang sama. Shintani dkk menunjukkan bahwa implantasi sel mononuklear
sumsum tulang autologus ke dalam otot rangka iskemik berhasil meningkatkan angiogenesis
dan pembentukan pembuluh darah kolateral baik pada penelitian pada hewan maupun pada
percobaan pada manusia (127-129). Kelompok yang sama menemukan bahwa implantasi
ASC secara signifikan meningkatkan angiogenesis pada model tikus dengan iskemia tungkai
belakang, dengan melepaskan kemokin seperti SDF-1 (126).