IDENTIFIKASI

PROTEIN DAN ASAM AMINO

PRAKTIKUM 5

Nama : Hananta Bagus Sudiaka

NIM : 1193083
Kelas : Reg C13

1. UJI BIURET

a. Tujuan
Membuktikan adanya molekul – molekul peptide dari protein

b. Dasar teori
Ion Cu2+ dari larutan CuSO4 (dalam pereaksi biuret) dalam suasana basa akan
beraksi dengan polipeptida atau ikatan-ikatan peptida yang menyusun protein
membentuk senyawa kompleks berwarna ungu (violet).
Reaksi biuret positif terhadap dua buah ikatan peptide atau lebih, tetapi
negatif untuk asam amino bebas atau dipeptida. Reaksi pun positif terhadap
senyawa-senyawa yang mengandung dua gugus : -CH2NH2, -CSNH2, -C(NH)NH2
dan –CONH2. Biuret adalah senyawa dengan dua ikatan peptida yang terbentuk
pada pemanasan dua molekul urea.
 c. Sampel yang digunakan
Putih telur (albumin)
Larutan gelatin
Larutan susu (casein)

d. Alat dan bahan

Larutan NaOH 10% Penjepit tabung Larutan susu (casein)
Tabung reaksi Larutan CuSO4
Pipet tetes Putih telur (albumin)
Rak tabung Larutan gelatin

e. Prosedur
Sediakan 3 tabung reaksi
Tabung 1 Tabung 2 Tabung 3

masukkan 10 tetes masukkan 10 tetes masukkan 10

putih telur(albumin) larutan gelatin tetes larutan susu

ditambahkan 10 tetes ditambahkan 10 ditambahkan 10

larutan NaOH tetes larutan NaOH tetes larutan NaOH

ditambahkan 10 tetes ditambahkan 10 tetes ditambahkan 10 tetes

larutan CuSO4, kocok larutan CuSO4, kocok larutan CuSO4, kocok
kuat amati perubahan kuat amati perubahan kuat amati perubahan
yang terjad yang terjad yang terjad

f. Hasil

2. UJI XANTOPROTEIN

a. Tujuan
Membuktikan adanya asam amino tirosin, triptofan atau fenilalanin yang
terdapat dalam protein
 b. Dasar teori
Reaksi pada uji xanthoprotein didasarkan pada inti benzene yang terdapat
pada molekul protein. Jika protein yang mengandung cincin benzena (tirosin,
triptofan dan fenilalanin) ditambahkan asam nitrat pekat, maka akan terbentuk
endapan putih yang dapat berubah menjadi kuning sewaktu dipanaskan. Senyawa
nitro yang terbentuk dalam suasana basa akan terionisasi dan warnanya berubah
menjadi orange.

c. Sampel yang digunakan

Larutan susu (casein)
Larutan gelatin
Putih telur (albumin)

d. Alat dan bahan

Larutan Susu (casein) Larutan NH4OH Spirtus
Larutan gelatin Larutan HNO3 Korek api
Putih telur (albumin) Pipet tetes Penjepit tabung
Tabung reaksi Rak tabung Pembakar Spirtus
Penjepit tabung

e. Prosedur
Siapkan 3 tabung reaksi
Tabung 1 Tabung 2 Tabung 3

25 tetes larutan albumin 25 tetes larutan gelatin 25 tetes larutan casein

ditambahkan 10 tetes HNO3 ditambahkan 10 tetes HNO3 ditambahkan 10 tetes HNO3
pekat dipanaskan dengan nyala pekat dipanaskan dengan nyala pekat dipanaskan dengan nyala
api pembakar spirtus api pembakar spirtus api pembakar spirtus
 didinginkan dibawah air kran
dan ditambahkan dengan 5 pipet
penuh NH4OH melalui dinding
tabung amati perubahan yang
terjadi.
didinginkan dibawah air kran
dan ditambahkan dengan 5 pipet
penuh NH4OH melalui dinding
tabung amati perubahan yang
terjadi.
didinginkan dibawah air kran
dan ditambahkan dengan 5 pipet
penuh NH4OH melalui dinding
tabung amati perubahan yang
terjadi.

JANGAN DI KOCOK KARENA AKAN MEMBENTUK CINCIN

f. Hasil

3. UJI NINHIDRIN

a. Tujuan
Membuktikan adanya asam amino bebas dalam protein

b. Dasar teori
Semua asam amino atau peptida yang mengandung asam amino bebas akan
bereaksi dengan ninhidrin membentuk senyawa kompleks berwarnA BIRU.
Namun, prolin dan hidroksiprolin menghasilkan senyawa berwarna kuning.

c. Sampel yang digunakan

Larutan susu (casein)
Larutan gelatin
Putih telur (albumin)

d. Alat dan bahan

Larutan susu (casein) Rak tabung
Larutan gelatin Pereaksi ninhidrin
Putih telur (albumin) Penangas air
Tabung reaksi Pipet tetes
Penjepit tabung
 e. Prosedur
Sediakan 3 tabung reaksi
Tabung 1 Tabung 2 Tabung 3

Ditambahkan 4 Ditambahkan 4
Ditambahkan 4
tetes larutan tetes larutan
tetes larutan casein
albumin gelatin

Tambahkan 10 tetes Tambahkan 10 tetes Tambahkan 10 tetes

peraksi ninhidrin, peraksi ninhidrin, peraksi ninhidrin,
Panaskan diatas Panaskan diatas Panaskan diatas
penangas air hingga penangas air hingga penangas air hingga
mendidih selama 5 menit mendidih selama 5 menit mendidih selama 5 menit

AMATI PERUBAHAN YANG TERJADI

f. Hasil

4. UJI MILLON
a. Tujuan
Untuk menunjukkan asam amino fenolat seperti tirosin
b. Dasar teori
Senyawa yang mengandung radikal hidroksibenzen dapat bereaksi dengan
reagen millon membentuk senyawa kompleks berwarna merah. Hanya asam
amino fenolat seperti tirosin dan keturunannya yang memberikan reaksi positif.
Reagen millon merupakan larutan merkuri nitrat 50% v/v dalam asam nitrat.
Sekarang dapat menggunakan modifikasi reagen millon yaitu merkuri sulfat
dalam asam sulfat.

c. Sampel yang digunakan

Putih telur (albumin)
Larutan gelatin
 Larutan susu (casein)
d. Alat dan bahan
Putih telur (albumin) Rak tabung
Larutan gelatin Pipet tetes
Larutan susu (casein) Waterbath
Tabung reaksi Gelas ukur
Reagen millon (150 g/l larutan merkuri sulfat dalam 15% v/v asam sulfat)
e. Prosedur
Siapkan 3 tabung reaksi
Tabung 1 Tabung 2 Tabung 3

20 tetes larutan 20 tetes larutan 20 tetes larutan

albumin gelatin ditambahkan casein ditambahkan
ditambahkan 6 tetes 6 tetes reagen 6 tetes reagen
reagen millon millon millon

larutan dipanaskan larutan dipanaskan larutan dipanaskan

dengan nyala api dengan nyala api dengan nyala api
bunsen secara hati- bunsen secara hati- bunsen secara hati-
hati. hati. hati.

f. Hasil
Praktikan Korektor