MAKALAH

PENGGUNAAN KROMATOGRAFI KOLOM PADA PEMISAHAN SENYAWA

ALKALOID DAN TRITERPENOID

Dosen Pengampu :

Disusun Oleh :

JERRY MANAKO

193110144

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS BANDAR LAMPUNG

LAMPUNG

2021
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Kromatografi digunakan sebagai untuk memisahkan substansi campuran menjadi
komponen-komponennya, misalnya senyawa Flavonoida dan isoflavonoida yang terdapat
pada tahu, tempe, bubuk kedelai dan tauco serta Scoparia dulcis, Lindernia anagalis, dan
Torenia violacea. Yang pada senyawa isoflavon memiliki banyak manfaat. Beberapa
kelebihan senyawa isoflavon yang potensial bagi kesehatan manusia, di antaranya adalah
sebagai antioksidan, antitumor/antikanker, antikolesterol , antivirus, antialergi, dan dapat
mencegah osteoporosis. Dan semua kromatografi bekerja berdasarkan metode
kromatografi.
Kromatografi juga merupakan pemisahan camuran senyawa menjadi senyawa
murninya dan mengetahui kuantitasnya. Untuk itu, kemurnian bahan atau komposisi
campuran dengan kandungan yang berbeda dapat dianalisis dengan benar. Tidak hanya
kontrol kualitas, analisis bahan makanan dan lingkungan, tetapi juga kontrol dan optimasi
reaksi kimia dan proses berdasarkan penentuan analitik dari kuantitas material. Teknologi
yang penting untuk analisis dan pemisahan preparatif pada campuran bahan adalah
prinsip dasar kromatografi.
Pemisahan senyawa biasanya menggunakan beberapa tekhnik kromatografi.
Pemilihan teknik kromatografi sebagian besar bergantung pada sifat kelarutan senyawa
yang akan dipisahkan. Semua kromatografi memiliki fase diam (dapat berupa padatan,
atau kombinasi cairan-padatan) dan fase gerak (berupa cairan atau gas). Fase gerak
mengalir melalui fase diam dan membawa komponen-komponen yang terdapat dalam
campuran. Komponen-komponen yang berbeda bergerak pada laju yang berbeda.
Salah satu yang akan dibahas pada makalah ini adalah kromatografi kolom.
Kromatografi kolom klasik merupakan yang tertua dari cara kromatografi yang banyak
itu, dan seperti yang di praktikkan secara tradisional, merupakan bentuk kromatografi
cair. Fase diam, baik dari bahan yang jerap (KCP) atau film zat cair pada penyangga
(KCC), ditempatkan dalam tabung kaca berbentuk silinder, pada bagian bawah tertutup
dengan katup atau keran, dan fase gerak.
1.2 Rumusan Masalah
1. Apa yang dimaksud dengan kromatografi kolom ?
2. Bagaiman penggunaan kromatografi kolom pada pemisahan alkaloid dan triterpenoid?

1.3 Tujuan
1. Untuk mengetahui apa yang dimaksud dengan kromatografi kolom.
2. Untuk mengetahui penggunaan kromatografi kolom pada pemisahan alkaloid dan
triterpenoid
 BAB II

PEMBAHASAN

2.1 Kromatografi Kolom

Kromatografi merupakan metode analisis campuran atau larutan senyawa kimia
dengan absorpsi memilih pada zat penyerap, zat cair dibiarkan mengalir melalui kolom
zat penyerap, misalnya kapur, alumina dan semacamnya sehingga penyusunnya terpisah
menurut bobot molekulnya, mula-mula memang fraksi-fraksi dicirikan oleh warna-
warnanya (Puspasari, 2010, hal: 159).
Kromatografi kolom adalah kromatografi yang menggunakan kolom sebagai alat
untuk memisahkan komponen-komponen dalam campuran. Alat tersebut berupa pipa
gelas yang dilengkapi suatu kran di bagian bawah kolom untuk mengendalikan aliran zat
cair (Yazid, 2005, hal: 198).
Kromatografi Kolom adalah proses pemisahan yang tergantung pada perbedaan
distribusi campuran komponen antara fase gerak dan fase diam. Fase diam dapat berupa
pembentukan kolom dimana fase gerak dibiarkan untuk mengalir (kromatografi kolom)
atau berupa pembentukan lapis tipis dimana fase gerak dibiarkan untuk naik berdasarkan
kapilaritas (kromatografi lapis tipis). Perlu diperhatikan bahwa senyawa yang berbeda
memiliki koefisien partisi yang berbeda antara fase gerak dan diam. Senyawa yang
berinteraksi lemah dengan fase diam akan bergerak lebih cepat melalui system
kromatografi. Senyawa dengan interaksi yang kuat dengan fase diam akan bergerak
sangat lambat (Christian, 1994; Skoog, 1993).
Prinsip kerjanya didasarkan pada absorbsi komponen-komponen campuran dengan
afinitas berbeda terhadap permukaan fase diam. Absorben bertindak sebagai fase diamdan
fase geraknya adalah cairan yang mengalir membawa komponen campuran sepanjang
kolom. Sampel yang mempunyai afinitas besar terhadap absorben akan secara selektif
bertahan dan afinitasnya paling kecil akan mengikuti aliran pelarut.
Pemisahan kromatografi kolom adsorpsi didasarkan pada adsorpsi komponen-
komponen campuran dengan afinitas berbeda-beda terhadap permukaan fase diam.
Kromatografi kolom adsorpsi termasuk pada cara pemisahan cair-padat. Substrat padat
(adsorben) bertindak sebagai fase diam yang sifatnya tidak larut dalam fase cair. Fase
bergeraknya adalah cairan (pelarut) yang mengalir membawa komponen campuran
sepanjang kolom. Pemisahan tergantung pada kesetimbangan yang terbentuk pada bidang
antarmuka di antara butiranbutiran adsorben dan fase bergerak serta kelarutan relatif
komponen pada fase bergeraknya. Antara molekul-molekul komponen dan pelarut terjadi
kompetisi untuk teradsorpsi pada permukaan adsorben sehingga menimbulkan proses
dinamis. Keduanya secara bergantian tertahan beberapa saat di permukaan adsorben dan
masuk kembali pada fase bergerak. Pada saat teradsorpsi komponen dipaksa untuk
berpindah oleh aliran fase bergerak yang ditambahkan secara kontinyu. Akibatnya hanya
komponen yang mempunyai afinitas lebih besar terhadap adsorben akan secara selektif
tertahan. Komponen dengan afinitas paling kecil akan bergerak lebih cepat mengikuti
aliran pelarut (Yazid, 2005, hal: 199).
Teknik pemisahan kromatografi kolom dalam memisahkan campuran, kolom yang
telah dipilih sesuai ukuran diisi dengan bahan penyerap (adsorben) seperti alumina dalam
keadaan kering atau dibuat seperti bubur dengan pelarut. Pengisian dilakukan dengan
bantuan batang pemanpat (pengaduk) untuk memanpatkan adsorben dengan gelas wool
pada dasar kolom. Pengisian harus dilakukan secara hati-hati dan sepadat mungkin agar
rata sehingga terhindar dari gelembung-gelembung udara. Untuk membantu homogenitas
pengepakan biasanya kolom setelah diisi divibrasi, diketok-ketok atau dijatuhkan lemah
pada pelat kayu. Sejumlah cuplikan dilarutkan dalam sedikit pelarut, dituangkan melalui
sebelah atas kolom dan dibiarkan mengalir ke dalam adsorben. Komponen-komponen
dalam campuran diadsorpsi dari larutan secara kuantitatif oleh bahan penyerap berupa
pita sempit pada permukaan atas kolom, dengan penambahan pelarut (eluen) secara terus-
menerus, masing-masing komponen akan bergerak turun melalui kolom dan pada bagian
atas kolom akan terjadi kesetimbangan baru antara bahan penyerap, komponen campuran
dan eluen. Kesetimbangan dikatakan tetap bila suatu komponen yang satu dengan lainnya
bergerak ke bagian bawah kolom dengan waktu atau kecepatan berbeda-beda sehingga
terjadi pemisahan. Jika kolom cukup panjang dan semua parameter pemisahan betul-betul
terpilih seperti diameter kolom, adsorben, pelarut dan kecepatan alirannya, maka akan
terbentuk pita-pita (zona-zona) yang setiap zona berisi satu macam komponen. Setiap
zona yang keluar dari kolom dapat ditampung dengan sempurna sebelum zona yang lain
keluar dari kolom. Komponen (eluat) yang diperoleh dapat diteruskan untuk ditetapkan
kadarnya, misalnya dengan cara titrasi atau spektofotometri (Yazid, 2005, hal: 200 –
201).
Pemisahan komponen campuran melalui kromatografi adsorpsi tergantung pada
kesetimbangan adsorpsi-desorpsi antara senyawa yang teradsorb pada permukaan dari
 fase diam padatan dan pelarut dalam fase cair. Tingkat adsorpsi komponen tergantung
pada polaritas molekul, aktivitas adsorben, dan polaritas fase gerak cair. Umumnya,
senyawa dengan gugus fungsional lebih polar akan teradsorb lebih kuat pada permukaan
fase padatan. Aktivitas adsorben tergantung komposisi kimianya, ukuran partikel, dan
pori-pori partikel (Braithwaite and Smith, 1995).

Metode kromatografi kolom terbagi atas dua yaitu :

1. Metode kering

Pada metode kering kolom diisi dengan fase diam kering, diikuti dengan penambahan
fase gerak yang disiramkan pada kolom sampai benar-benar basah (Rahayu, 2014).

2. Metode basah

Pada metode basah bubur (slurry) disiapkan dengan mencampurkan eluen pada serbuk
fase diam dan dimasukkan hati-hati pada kolom. Dalam langkah ini harus benar-benar
hati-hati agar tidak ada gelembung udara. Larutan senyawa organik dipipet dibagian atas
fase diam, kemudian eluen dituangkan pelan-pelan melewati kolom (Rahayu, 2014).

2.2 Alkaloid
Alkaloid merupakan suatu golongan senyawa organik yang terbanyak ditemukan di
alam. Hampir seluruh senyawa alkaloid berasal dari tumbuh- tumbuhan dan tersebar
luas dalam berbagai jenis tumbuhan. Lebih dari 5000 senyawa alkaloid yang
ditemukan dalam tumbuhan mempunyai keaktifan fisiologis tertentu. Semua alkaloid
mengandung paling sedikit satu atom nitrogen yang biasanya bersifat basa (Lenny, 2006).
Fungsi alkaloid bagi tumbuhan yaitu sebagai zat beracun untuk melawan serangga atau
hewan pemakan tumbuhan, faktor pengatur tubuh, substansi cadangan untuk memenuhi
kebutuhan nitrogen, dan elemen-elemen lain yang penting bagi tumbuhan, dapat
mempertahankan keseimbangan basa mineral dalam memepertahankan keseimbangan ion
dalam tumbuhan karena alkaloid memiliki sifat basa. Sedangkan dalam pengobatan,
alkaloid memberikan efek fisiologis pada susunan syaraf pusat (obat anti rasa sakit
dan obat tidur), dalam jumlah besar sangat beracun terhadap manusia (Robinson, 1995).
Kebanyakan alkaloid diisolasi berupa padatan kristal dengan titik didih berkisar 87°C
- 238°C. Alkaloid sedikit amorf, beberapa berupa cairan seperti nikotin dan koniin.
Kebanyakan alkaloid tidak berwarna namun beberapa senyawa kompleks spesies
aromatik berwarna seperti berberin berwarna kuning dan betanin berwarna merah. Pada
umumnya alkaloid larut dalam pelarut organik namun ada beberapa yang larut dalam air
seperti pseudoalkaloid dan protoalkaloid, garam alkaloid dan alkaloid quartener sangat
larut dalam air (Sastrohamidjojo, 1996).
Alkaloid terdiri atas karbon, hidrogen, dan nitrogen, sebagian besar diantaranya
mengandung oksigen. Senyawa ini bersifat basa dan sifat ini bergantung pada adanya
pasangan elektron pada nitrogen. Jika gugus fungsional yang berdekatan dengan nitrogen
bersifat melepaskan elektron contoh gugus alkil, maka kesediaan elektron pada nitrogen
naik dan senyawa ini lebih bersifat basa. Bila gugus fungsional yang berdekatan bersifat
menarik elektron maka kesediaan pasangan elektron berkurang dan pengaruh yang
ditimbulkan alkaloid dapat bersifat netral atau bahkan sedikit asam (Sastrohamidjojo,
1996).
Alkaloida tidak mempunyai tatanan sistematik, oleh karena itu, suatu alkaloida
dinyatakan dengan nama trivial, misalnya kuinin, morfin dan strikhnin. Hampir semua
nama trivial ini berakhiran –in yang mencirikan alkaloid. Klasifikasi alkaloid dapat
dilakukan berdasarkan beberapa cara, yaitu (Robinson, 1995):
1. Berdasarkan jenis cincin heterosiklik nitrogen yang merupakan bagian dari struktur
molekul. Berdasarkan hal tersebut, maka alkaloid dapat dibedakan atas beberapa jenis
sperti alkaloid pirolidin, alkaloid piperidin, alkaloid isokuinolin, alkaloid kuinolin,
dan alkaloid indol.
2. Berdasarkan jenis tumbuhan darimana alkaloid ditemukan. Berdasarkan cara ini,
alkaloid dapat dibedakan atas beberapa jenis yaitu alkaloid tembakau, alkaloid
amaryllidaceae, alkaloid erythrine dan sebagainya. Cara ini mempunyai kelemahan,
yaitu : beberapa alkaloid yang berasal dari tumbuhan tertentu dapat mempunyai
struktur yang berbeda-beda.
3. Berdasarkan asal-usul biogenetik. Cara ini sangat berguna untuk menjelaskan
hubungan antara berbagai alkaloid yang diklasifikasikan berdasarkan berbagai jenis
cincin heterosiklik. Dari biosintesa alkaloid, menunjukkan bahwa alkaloid berasal
hanya dari beberapa asam amino tertentu saja.

Berikut salah satu struktur senyawa alkaloid dapat dilihat pada Gambar 2.2 berikut:
 Gambar 2.2: Struktur Sederhana Senyawa Alkaloid (Piridina)

Sebagian besar alkaloid bersifat heterogen dan mempunyai kerangka dasar polisiklik
termasuk cincin heterosiklik nitrogen serta mengandung subtituen yang tidak terlalu
bervariasi. Atom nitrogen alkali hampir selalu berada dalam bentuk gugus amin (-NR2)
atau gugus amida (-CO-NR2) dan tidak pernah dalam bentuk gugus nitro (NO2) atau
gugus diazo. Sedangkan subtituen oksigen biasanya ditemukan sebagai gugus fenol (-
OH), metoksi (-OCH3) atau gugus metilendioksi (-O-CH2-O) subtituen oksigen ini dan
gugus N-metil merupakan ciri sebagian besar alkaloid (Lenny, 2006). Alkaloid umumnya
mencakup senyawa-senyawa bersifat basa yang mengandung satu atau lebih atom
nitrogen (Robinson, 1995).

2.2.1 Pemisahan Senyawa Alkaloid menggunakan Kromatografi Kolom

Pada dasarnya isolasi senyawa kimia dari bahan alam adalah sebuah cara untuk
memisahkan senyawa yang bercampur sehingga dapat menghasilkan senyawa tunggal
yang murni. Isolasi adalah cara pemisahan komponen-komponen kimia yang terdapat
dalam suatu bahan alam. Cara isolasi senyawa metabolit sekunder biasanya terdiri dari
ekstraksi, fraksinasi, pemisahan menggunakan berbagai teknik kromatografi, pemurnian
dengan cara rekristalisasi dan identifikasi serta karakterisasi. Pemisahan kandungan
tumbuhan terutama dilakukan dengan menggunakan salah satu dari empat teknik
kromatografi. Keempat teknik kromatografi itu adalah Kromatografi Lapis Tipis,
Kromatografi Kolom, kromatografi gas cair (KGC), kromatografi cair kinerja tinggi
(Harborne,1987).

Kromatografi kolom adalah salah satu metode pemisahan senyawa yang telah lama
ada dan masih banyak digunakan. Pemisahan senyawa menggunakan kromatografi
kolom sangat efisien untuk memisahkan senyawa-senyawa dalam jumlah banyak.
Pemisahan menggunakan kromatografi kolom berdasarkan pada adsorbsi dan partisi
(Gritter, 1991). Fase gerak yang dipilih pada penelitian ini disesuaikan dengan sifat
 kelarutan senyawa yang akan dianalisis. Pemisahan senyawa alkaloid ini menggunakan
fase gerak kloroform:metanol dengan perbandingan volume 9,5:0.5. Pemakaian fase
gerak tersebut berdasarkan pada penelitian sebelumnya yaitu Husna (2011) menganalisis
ekstrak etil asetat tanaman anting-anting dengan menggunakan KLT dengan fase gerak
kloroform:metanol (9,5:0,5) pendeteksi UV 366 nm serta penampak noda dragendroff
dan dihasilkan senyawa alkaloid dengan Rf 0,37-0,97.

Fase diam yang digunakan pada proses pemisahan kromatografi kolom adalah
silika gel G-60 (0,063 – 0,200 mm). Silika gel merupakan fase diam yang paling banyak
digunakan dalam pemisahan bahan alam. Silika gel memberikan luas permukaan yang
besar dikarenakan ukuran partikel silika gel yang kecil.

Hal yang paling berperan pada keberhasilan pemisahan dengan kromatografi kolom
adalah pemilihan adsorben dan eluen/pelarut, dimensi kolom yang digunakan serta
kecepatan elusi yang dilakukan. Pada kecepatan laju alir/elusi sebaiknya dibuat konstan.
Kecepatan tersebut harus cukup lambat agar senyawa berada dalam keseimbanagan antara
fasa diam dan fasa gerak. Di dalam kolom konsentrasi di fase gerak dan fase diam
menyebar akan secara homogen walau masih bergantung pada sifat fisika dan kimia
masing-masing komponen Semakin rendah kecepatan arus cairan, semakin baik
akibatnya bagi tercapainya keseimbangan adsorpsi dan akan semakin baik pula
pemisahannya. Tetapi kecepatan arus yang terlalu rendah dapat menimbulkan efek
difusi dalam fasa mobil yang harus dihindarkan sejauh mungkin. Sementara itu jika
aliran fase gerak tidak memberikan kesempatan kumpulan molekul komponen untuk
mencapai keadaan setimbang, maka akan terjadi deviasi yang disebabkan oleh transfer
massa yang tidak seimbang dari kumpulan molekul komponen di fase diam ke fase gerak
dan sebaliknya (Kristanti, 2008).

2.3 Triterpenoid
Kata terpenoid mencakup sejumlah besar senyawa tumbuhan, dan istilah ini
digunakan untuk menunjukkan bahwa secara biosintesis semua senyawa tumbuhan itu
berasal dari senyawa yang sama. Jadi, semua terpenoid berasal dari molekul isoprene
CH2=C(CH3)-CH=CH2 dan kerangka karbonnya dibangun oleh penyambungan 2 atau
lebih satuan C5 ini. Kemudian senyawa itu dipilh-pilah menjadi beberapa golongan
berdasarkan jumlah satuan yang terdapat dalam senyawa ersebut ; dua (C10), 3 (C15),
empat (C20), enam (C30), atau delapan (C40) satuan. Terpenoid terdiri atas beberapa
macam senyawa, mulai dari komponen minak atsiri, yaitu monoterpene dan seskuiterpina
yang mudah menguap (C10 dan C15), diterpina yang lebih sukar menguap (20), sampai
ke senyawa yang tidak menguap, yaitu triterpenoid dan sterid (C30), serta pigmen
karotenoid (C40) (J. B. Harboene 1984).
Triterpenoid adalah senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari enam satuan
isoprena dan secara biosintesis diturunkan dari hidrokarbon C-30 asiklik, yaitu skualena,
senyawa ini tidak berwarna, berbentuk kristal, bertitik leleh tinggi dan bersifat optis aktif.
Senyawa triterpenoid dapat dibagi menjadi empat golongan,yaitu: triterpen sebenarnya,
saponin, steroid, dan glikosida jantung (Harborne,1987).
Menurut Harborne (1987) bahwa kandungan terpenoid/steroid dalam tumbuhan diuji
dengan menggunakan metode Liebermann-Bucchard yang nantinya akan memberikan
warna jingga atau ungu untuk terpenoid dan warna biru untuk steroid.Uji ini didasarkan
pada kemampuan senyawa triterpenoid dan steroid membentuk warna oleh H2SO4 pekat
pada pelarut asetat glasial yang membentuk warna jingga.
Triterpenoid adalah senyawa metabolite sekunder yang kerangka karbonnya berasal
dari enam satuan isoprena dan diturunkan dari hidrokarbon C 30 asiklik, yaitu skualena
(Widiyati, 2005). Triterpenoid adalah terpen yang mengandung 6 molekul isopren yang
membentuk rantai 30 karbon dengan rumus molekul C30H48.

Gambar 2.1 Asam Betulinat, contoh struktur triterpen

Penggabungan kepala dan ekor dari unit isopren dapat membentuk mono, sesqui, di, tri,
dan politerpen. Proses yang terjadi merupakan salah satu bentuk biosintesis yang terjadi
dengan melibatkan beberapa prekursor (koenzim dalam tumbuhan).
Sifat terpenoid mudah larut dalam lemak dapat diekstraksi dengan petroleum eter,
kloroform, eter terdapat dalam sitoplasma tumbuhan minyak atsiri terdapat dalam sel
kelenjar khusus di permukaaan daun karotenoid terdapat dalam kloroplas daun atau
kromoplas daun bunga (petal) dapat dipisahkan dengan kromatografi (silica gel atau
alumina) sering ditemukan keisomeran dalam terpenoid kebanyakan merupakan senyawa
alisiklik. Fungsi terpenoid mengatur pertumbuhan (absisin dan giberelin) warna
tumbuhan pigmen pembantu fotosintesis) memberi bau dan wangi yang khas sebagai alat
komunikasi dan pertahanan pada serangga hormone kelamin pada fungus.
Sebagian besar senyawa Triterpenoid mempunyai kegiatan fisiologi yang menonjol
sehingga dalam kehidupan sehari-hari banyak dipergunakan sebagai obat seperti untuk
pengobatan penyakit diabetes, gangguan menstuasi, patukan ular, gangguan kulit,
kerusakan hati dan malaria. Sedang bagi tumbuhan yang mengandung senyawa
Triterpenoid terdapat nilai ekologi karena senyawa ini bekerja sebagai anti fungus,
insektisida, anti pemangsa, anti bakteri dan anti virus.

2.3.1 Pemisahan Senyawa Triterpenoid Menggunakan Kromatografi Kolom

Silika gel G-60 sebanyak 10 gram diaktivasi menggunakan oven pada suhu 110 oC
selama 2 jam lalu didinginkan dalam desikator selama 15 menit. Kolom bagian bawah
diisi glass wool dan eluen (n-heksana:etil asetat). Dibuat bubur silika gel dengan
dimasukkan silika gel dalam gelas kimia lalu ditambahkan campuran eluen n-heksana
dan etil asetat 16:4, diaduk hingga homogen dan tidak ada gelembung udara. Bubur
silika gel dimasukkan ke dalam kolom dan didiamkan selama 24 jam. Sampel diambil 0,1
gram dicampur dengan 1 mL campuran eluen n-heksana dan etil asetat 16:4. Selanjutnya
kran sedikit dibuka dan dikeluarkan eluen hingga tersisa di atas fase diam namun tidak
melebihi fase diam. Setelah itu, kran ditutup dan dimasukkan campuran sampel dan eluen
menggunakan pipet. Selanjutnya ditambahkan campuran eluen n-heksana dan etil asetat
16:4. Kran dibuka, dilakukan elusi kemudian hasil elusi ditampung setiap 2 mL dalam
botol vial. Selain itu, elusi dilakukan untuk menjaga agar silika gel dalam kolom selalu
terendam eluen (Septiandari, 2016). Diulangi perlakuan dengan menggunakan campuran
eluen n-heksana dan etil asetat perbandingan 17:3 dan 18:2.
 BAB III

KESIMPULAN

Dari pembahasan pada makalah ini maka dapat disimpulkan :

1. Kromatografi kolom adalah kromatografi yang menggunakan kolom sebagai alat

untuk memisahkan komponen-komponen dalam campuran. Kromatografi Kolom

adalah proses pemisahan yang tergantung pada perbedaan distribusi campuran

komponen antara fase gerak dan fase diam.

2. Pemisahan menggunakan kromatografi kolom berdasarkan pada adsorbsi dan partisi

Fase gerak yang dipilih pada penelitian ini disesuaikan dengan sifat kelarutan

senyawa yang akan dianalisis. Fase diam yang digunakan pada proses pemisahan

alkaloid dan triterpenoid dengan kromatografi kolom adalah silika gel G-60 (0,063 –

0,200 mm).
 DAFTAR PUSTAKA

Gritter, R.J. 1991. Pengantar Kromatografi. edisi kedua. Diterjemahkan oleh Kokasih
Padmawinata. Bandung: Penerbit ITB.

Harborne, J. B., 1987, Phytochemical Methods, 13-15, 102-109, diterjemahkan oleh

Padmawinata.K dan Soediro I , Terbitan kedua, ITB, Bandung.

Husna, ana nihayah. 2011. Identifikasi Senyawa Dan Aktivitas Antimalaria In Vivo Ekstrak
Etil Asetat Tanaman Anting-Anting (Acalypha Indica L.). Skripsi Tidak Diterbitkan
Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.

Kristanti novi, 2008. Buku ajar fitokimia. Surabaya: Airlangga University Press.

Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi ke-4 Terjemahan Kosasih
Padmawinata. Bandung: ITB Press.

Sastrohamidjojo, Hardjono. 2007. Spektroskopi . Yogyakarta: Liberty.

Septiandari, N. 2016. Isolasi Senyawa Triterpenoid Fraksi Petroleum Eter Hasil Hidrolisis
Ekstrak Metanol Alga Merah (Eucheuma spinosum) Menggunakan Kromatografi
Kolom Cara Kering dan Basah. Skripsi. Malang: Universitas Islam Negeri Maulana
Malik Ibrahim Malang.