Laporan Praktek Kerja Lapangan

LAPORAN PRAKTEK KERJA LAPANGAN
DI BALAI BESAR LABORATORIUM KESEHATAN
Disusun Oleh :
KELAS A
PROGRAM STUDI DIII ANALIS KESEHATAN

FAKULTAS SAINS, TEKNOLOGI DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS BINA MANDIRI GORONTALO
2020
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan yang Maha Esa karena atas limpahan rahmat,
karunia serta izin-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan
Laporan Praktek Kerja Lapangan di Balai Besar Laboratorium Kesehatan
Makassar.
Laporan ini disusun oleh penulis sebagai salah satu syarat pemenuhan tugas
pada penilaian Praktek Kerja Lapangan di Balai Besar Laboratorium Makassar
program studi D-III Analis Kesehatan T.A. 2019/2020.
Penulis menyadari bahwa laporan hasil Praktek Kerja Lapangan di Balai Besar
Laboratorium Makassar ini, tidak dapat terselesaikan dengan baik tanpa adanya
bantuan dari pihak-pihak tertentu yang telah turut membantu dalam penyusunan
laporan ini. Maka penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Bapak dr. Aswan Usman, M.Kes selaku kepala Balai Besar Laboratorium
Kesehatan (BBLK) Makassar yang telah memberikan izin kepada kami
untuk melakukan kegiatan Praktek Kerja Lapangan yang dilakukan di
beberapa Instalasi Laboratorium BBLK Makassar.
2. Ibu Hasni Latif, SKM selaku seksi bimbingan teknis yang telah menerima
mahasiswa Universitas Bina Mandiri Gorontalo dan mengantar ke ruangan
yang ada di Balai Besar Kesehatan Makassar.
3. Bapak Erfan AR Lainjong, SKM., M.Epid selaku ketua program prodi D-III
Analis Kesehatan
4. Bapak Agusrianto Yusuf, S.Pd., M.Si selaku dosen pembimbing I dalam
praktek kerja lapangan yang telah membantu dalam membimbing pembuatan
laporan ini.
i
5. Neneng Dwi Septiani, SKM., M.Epid selaku dosen pembimbing II praktek
kerja lapangan yang telah membantu dalam membimbing pembuatan laporan
ini.
6. Kakak-kakak tenaga Analis Kesehatan yang telah membantu dan
mendamping kami dalam melakukan berbagai kegiatan praktek kerja
lapangan di beberapa instalasi di Balai Besar Laboratoium Kesehatan
Makassar.
Penulis menyadari bahwa penyusunan laporan ini tidak lepas dari kekurangan
dan kelemahan. Saran dan kritik yang membangun sangat penulis harapkan demi
kesempurnaan laporan.
Semoga laporan ini bisa bermanfaat untuk dijadikan tambahan pengetahuan,
serta apabila terdapat kekurangan dengan segala kerendahan hati penulis mohon
maaf.
Makassar, Februari 2020
Penulis
DAFTAR IS
ii
I
KATA PENGANTAR.............................................................................................i
DAFTAR ISI.........................................................................................................iii
BAB I PENDAHULUAN......................................................................................1
1.1 Latar Belakang..........................................................................................1
1.2 Tujuan........................................................................................................4
1.3 Manfaat......................................................................................................4
1.4 Tempat dan Waktu Pelaksaan...................................................................5
BAB II HASIL PELAKSANAAN DAN PEMBAHASAN................................6
2.1 Gambaran Umum Balai Besar Laboratorium Kesehatan Makassar..........6
2.2 Instalasi – instalasi Yang Ada di Laboratorium BBLK Makassar..........11
2.2.1 Instalasi Pengambilan Spesimen..................................................11
2.2.2 Instalasi Patologi Klinik...............................................................12
2.2.3 Instalasi Media dan Reagensia.....................................................42
2.2.4 Instalasi Kimia Kesehatan............................................................57
2.2.5 Instalasi Mikrobiologi..................................................................82
2.2.6 Instalasi Imunologi.....................................................................105
BAB III PENUTUP...........................................................................................145
3.1 Kesimpulan............................................................................................145
DAFTAR PUSTAKA.........................................................................................146
LAMPIRAN........................................................................................................154
BAB I
PENDAHULUAN
3.1 Latar Belakang
Keberhasilan pembangunan akan meningkatkan taraf kehidupan sosial
ekonomi masyarakat untuk hidup sehat dan mendapat pelayanan kesehatan yang
makin baik. Ketetapan MPR Nomor IV/MPR/1999 tentang Garis-garis besar
Haluan Negara 1999-2004 menetapkan bahwa kebijakan pembangunan kesehatan
antara lain adalah meningkatkan mutu sumber daya manusia dan lingkungan yang
saling mendukung dengan pendekatan paradigma sehat dan meningkatkan serta
memelihara mutu lembaga pelayanan non kesehatan melalui pemberdayaan
sumberdaya manusia secara berkelanjutan.
Pelayanan laboratorium kesehatan merupakan bagian yang tidak terpisahkan
dari pelayanan kesehatan kepada masyarakat. Laboratorium kesehatan sebagai
salah satu unit pelayanan kesehatan, diharapkan dapat memberikan informasi
yang teliti dan akurat tentang aspek laboratorium terhadap spesimen yang diuji.
Masyarakat menghendaki mutu hasil pengujian laboratorium untuk terus
ditingkatkan seiring dengan kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi serta
perkembangan penyakit. Untuk memenuhi kebutuhan masyarakat terhadap
pelayanan kesehatan yang semakin meningkat, baik jumlah maupun mutunya,
maka peranan laboratorium kesehatan baik dalam bentuk rujukan kesehatan
maupun bentuk lainnya perlu dikembangkan dan ditingkatkan.
Pendidikan Diploma III Analis Kesehatan merupakan satu dari sekitar 20 jenis
pendidikan bertipe vokasional yang dikembangkan Departemen Kesehatan.
Mengacu pada Kurikulum Diploma III Analis Kesehatan tahun 2002, Pendidikan
Program Diploma III Analis Kesehatan berorientasi kepada pemenuhan
1
kebutuhan masyarakat dalam bidang pelayanan kesehatan masyarakat secara
umum yang di dalamnya terkait dengan pelayanan medis. Pendidikan Diploma III
Analis Kesehatan ini harus dapat menjawab tuntutan pelayanan kesehatan dan
dapat mengikuti perkembangan kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi
khususnya dalam bidang laboratorium kesehatan, sesuai dengan kebutuhan serta
prioritas pembangunan dengan memanfaatkan teknologi tepat guna termasuk
teknologi yang menunjang usaha peningkatan pelayanan kesehatan. Lulusan
Pendidikan Diploma III Analis Kesehatan yang terampil, dikembangkan
berdasarkan teori yang diajarkan oleh kampus, praktik dan kegiatan
pengembangan keterampilan lainnya seperti magang dan praktik kerjaa lapangan.
Praktek Kerja Lapangan (PKL) merupakan hal yang penting bagi mahasiswa
untuk belajar dari pengalaman kerja praktis di suatu institusi. Dengan adanya
magang diharapkan dapat meningkatkan kompetisi lulusan dan menjadi tambahan
pengetahuan serta wawasan dunia kerja. Termasuk dalam pengalaman praktis
pemagangan adalah melakukan identifikasi permasalahan, analisis dan
penyelesaian masalah, serta penerapan ilmu dan teknologi, khususnya bidang
analis kesehatan.
Lahan praktik sebagai sarana belajar mengajar utama untuk mewujudkan
keprofesionalitas mahasiswa dan juga sebagai wahana untuk meningkatkan
keterampilan secara utuh dari seorang mahasiswa yang telah mendapat pelajaran
teori pada proses belajar mengajar di kampus. F-STIK program studi DIII Analis
Kesehatan Universitas BMG dalam mengambil suatu langkah pendekatan dan
pembaruan calon tenaga analis kesehatan dengan penerapan ilmu dan teknologi
dilaksanakan Praktek Lapangan di Balai Besar Laboratorium Klinik Makassar
2
yang dilaksanakan mulai pada tanggal 13 Januari 2020 sampai dengan tanggal 8
Februari 2020.
Balai Besar Laboratorium Kesehatan Makassar di Provinsi Sulawesi Selatan
merupakan laboratorium rujukan untuk wilayah Indonesia Bagian Timur
(Sulawesi, Maluku dan Papua) dengan tugas dan fungsi selain untuk pemeriksaan
laboratorium klinik dan laboratorium kesehatan masyarakat, juga untuk
pemantapan mutu, jejaring kerja dan kemitraan, rujukan, pendidikan dan pelatihan
teknis serta penilitian dan pengembangan. Sudah terakreditasi ISO/IEC
17025:2005.
Dalam rangka memenuhi tuntutan kebutuhan masyarakat akan pelayanan
laboratorium yang lebih baik dan terpercaya serta mengantisipasi era globalisasi
yang penuh dengan persaingan bebas, maka keberadaan Balai Besar Laboratorium
Kesehatan Makassar dalam pelayanan kesehatan khususnya pemeriksaan
laboratorium kesehatan untuk memenuhi kebutuhan tersebut. Hasil pemeriksaan
laboratorium penting dalam penentuan diagnosis, prognosis, terapi, monitoring
terapi, dan pencegahan penyakit.
Pemeriksaan laboratorium (klinik, kesehatan masyarakat) di Balai Besar
Laboratorium Kesehatan Makassar senantiasa mengikuti perkembangan ilmu
pengetahuan dan teknologi serta ilmu kedokteran yang berkembang sedemikian
pesat, dengan menggunakan tenaga yang profesional, peralatan canggih
(automatic analyzer, polymeraze Chain Reaction (PCR) yang memungkinkan
pemeriksaan menjadi lebih cepat dan akurat serta mutu yang dapat dipercaya,
sesuai Visi dan Misi Balai Besar Laboratorium Kesehatan Makassar sehingga
3
diadakannya praktek kerja lapangan untuk meningkatkan pengetahuan dan
keterampilan mahasiswa di bidang laboratorium.
3.2 Tujuan
Tujuan dilakukan Praktek Kerja lapangan di Balai Besar Laboratorium Klinik
antara lain adalah:
1. Untuk mengaplikasikan ilmu pengetahuan, terutama yang telah diajarkan
dalam perkuliahan.
2. Untuk mengetahui jenis pemeriksaan yang dilakukan selama mahasiswa
melakukan Praktek Kerja Lapangan (PKL).
3. Untuk menambah keterampilan dan pengetahuan mahasiswa dalam kegiatan
dan pemeriksaan laboratorium.
4. Memberi pengalaman nyata bagi mahasiswa untuk menjadi tenaga analis
kesehatan yang profesional.
5. Melatih kerjasama dengan seasama analis kesehatan dan tenaga kesehatan
lainnya.
6. Melatih dan mengembangkan sikap dan keterampilan mahasiswa dalam
pemberian pelayanan kesehatan khususnya pelayanan laboratorium.
7. Peningkatan kopetensi mahasiswa dibidang pendiagnosaan penyakit.
3.3 Manfaat
a. Bagi Mahasiswa
1. Menambah pengetahuan tentang bagaimana bersikap profesional dalam
menangani pasien.
2. Menambah sumber informasi mengenai pemeriksaan Laboratorium mulai
dari pengambilan sampel, alat-alat yang digunakan sampai pelaporan hasil.
4
3. Menambah kemampuan mahasiswa tentang metode-metode pada
pengalaman kerja yang tidak didapatkan di bangku kuliah.
4. Menambah pengalaman kerja untuk menjadi tenaga medis, sekaligus
belajar untuk berbaur dengan masyarakat, khususnya pasien.
5. Dapat mengadopsi serta menambah wawasan atau pengetahuan baru dari
praktek kerja lapangan (PKL).
6. Dengan adanya PKL ini, mahasiswa dapat menambah wawasan dan
peningkatan keterampilan dibidang pendiagnosaan serta mengetahui
pengoprasian alat-alat kesehatan dan metode pemeriksaan.
7. Mahasiswa dapat menjalin kerjasama yang baik dengan petugas
laboratorium maupun petugas lain yang ada dilingkungan balai besar
laboratorium kesehatan.
b. Bagi Pihak Institusi Pendidikan
1. Sebagai masukan guna pengembangan ilmu khususnya dalam bidang
laboratorium kesehatan.
2. Mahasiswa dapat merekomendasi dan mempelajari sistem manajemen dan
pementapan mutu yang ada dipelayanan balai besar laboratorium
kesehatan.
3.4 Tempat dan Waktu Pelaksaan
Adapun tempat pelaksanaan Praktik Kerja Lapangan (PKL) yang
dilaksanakan di Balai Besar Laboratorium Kesehatan (BBLK) Makassar. Selama
21 hari mulai dari tanggal 13 Januari sampai dengan 7 Februari 2020.
5
BAB II
HASIL PELAKSANAAN DAN PEMBAHASAN
3.5 Gambaran Umum Balai Besar Laboratorium Kesehatan Makassar
Didirikan pada tahun 1929 oleh pemerintah Belanda dengan nama
Laboratorium Kesehatan Daerah jalan Jend. Sudirman 5 Makasar. Pada tahun
1949 diserahkan ke pemerintah Indonesia di bawah pimpinan DR. Woworuntu
Samuel Wellel Tanamal, beliau menemukan metode cara membedakan Vibrio
cholera dan Eltor dan metode pengecatan pemeriksaan virus rabies.
Pada tahun 1986 Laboratorium Kesehatan Daerah berubah nama menjadi
Balai Laboratorium Kesehatan Provinsi Sulawesi Selatan berdasarkan keputusan
Menkes no. 78/MENKES/SK/XI/86 Tahun 1995 pindah lokasi di jalan Perintis
Kemedekaan Km 11 Tamalanrea Makasar. Tanggal 31 Juli 2006 Balai
Laboratorium Kesehatan Propinsi Sulawesi Selatan ditingkatkan statusnya
menjadi BALAI BESAR LABORATORIUM MAKASAR (Kep.Menkes RI No.
558. Menkes/VII/PER/2006).
BBLK Makassar memiliki motto “Kepuasan Anda Harapan Kami”. Visi
BBLK Makassar yaitu memberikan pelayanan dan rujukan laboratorium yang
profesional, cepat, tepat, terdepan dalam mutu dan terpercaya. Dan Misi BBLK
Makassar yaitu :
1. Memberikan pelayanan laboratorium kesehatan yang bermutu tinggi dan
terjangkau seluruh masyarakat.
2. Meningkatkan efektifitas dan efisiensi dalam perencanaan, pelaksanaan
pengendalian pelayanan laboratorium kesehatan dan rujukan.
3. Meningkatkan mutu SDM
6
Adapun tugas pokok Balai Besar Laboratorium Kesehatan (BBLK) Makassar
dengan melaksanakan perencanaan, koordinasi, pelaksanaa dan evaluasi, yang
mencakup, antara lain :
1. Pemeriksaan lab klinik dan kesehatan masyarakat
2. Rujukan
3. Pendidikan dan pelatihan teknis
4. Penelitian dan pengembangan
Adapun fungsi Balai Besar Laboratorium Kesehatan (BBLK) Makassar adalah
sebagai berikut :
1. Perencanaan, koordinasi, pelaksanaan dan evaluasi pemeriksaan
laboratorium klinik.
2. Perencanaan, koordinasi, pelaksanaan dan evaluasi pemeriksaan
laboratorium kesehatan masyarakat.
3. Pemantapan mutu internal dan eksternal.
4. Pelaksanaan jejaring kerja dan kemitraan dibidang laboratorium kesehatan.
5. Perencanaan, koordinasi, pelaksanaan dan evaluasi rujukan.
6. Perencanaan, koordinasi, pelaksanaan dan evaluasi pendidikan dan
pelatihan teknis.
7. Perencanaan, koordinasi, pelaksanaan dan evaluasi penelitian dan
pengembangan.
8. Pelaksanaan urusan tata usaha.
Adapun kedudukan Balai Besar Laboratorium Kesehatan (BBLK) Makassar
adalah sebagai berikut :
1. Unit pelayanan teknis Depkes dibidang laboratorium kesehatan.
7
2. Bertanggung jawab kepada Dirjen Bina Pelayanan Medik.
3. Teknis fungsional dibina oleh Direktorat Bina Pelayanan Medik.
Adapun kebijakan mutu Balai Besar Laboratorium Kesehatan (BBLK)
Makassar adalah sebagai berikut:
1. Komitmen penuh sejarah profesional dalam menerapkan sistem manajemen
mutu berdasarkan ISO/IEC 17025: 2005.
2. Memberikan pelayanan terbaik demi kepuasan customer.
3. Senantiasa merujuk kepada standart Internasional dan Nasional.
4. Seluruh personel laboratorium memahami dokumentasi sistem manajemen
mutu berdasarkan ISO/IEC 17025: 2005 dan menerapkan dalam pekerjaan,
serta bertanggung jawab secara hukum dan teknis.
5. Menjamun seluruh personel laboratorium bebas dari berbagai tekanan dari
pihak manapun.
6. Mengusahakan perbaikan secara terus-menerus.
Dalam rangka memenuhi tuntutan kebutuhan masyarakat akan pelayanan
laboratorium yang lebih baik dan terpercaya serta mengantisipasi era globalisasi
yang penuh dengan persaingan bebas, maka keberadaan Balai Besar
Laboratorium Kesehatan Makassar dalam pelayanan kesehatan khususnya
pemeriksaan laboratorium kesehatan untuk memenuhi kebutuhan tersebut. Hasil
pemeriksaan laboratorium penting dalam penentuan diagnosis, prognosis, terapi,
monitoring terapi, dan pencegahan penyakit.
Balai Besar Laboratorium Kesehatan Makassar di Provinsi Sulawesi Selatan
merupakan laboratorium rujukan untuk wilayah Indonesia Bagian Timur
(Sulawesi, Maluku dan Papua); dengan tugas dan fungsi selain untuk
8
pemeriksaan laboratorium klinik dan laboratorium kesehatan masyarakat, juga
untuk pemantapan mutu, jejaring kerja dan kemitraan, rujukan, pendidikan dan
pelatihan teknis serta penilitian dan pengembangan. Sudah terakreditasi ISO/IEC
17025:2005.
Pemeriksaan laboratorium (klinik, kesehatan masyarakat) di Balai Besar
Laboratorium Kesehatan Makassar senantiasa mengikuti perkembangan ilmu
pengetahuan dan teknologi serta ilmu kedokteran yang berkembang sedemikian
pesat, dengan menggunakan tenaga yang profesional, peralatan canggih
(automatic analyzer, polymeraze Chain Reaction (PCR) yang memungkinkan
pemeriksaan menjadi lebih cepat dan akurat serta mutu yang dapat dipercaya,
sesuai Visi dan Misi Balai Besar Laboratorium Kesehatan Makassar.
Untuk memberikan pelayanan yang terbaik, BBLK Makassar siap melayani
permintaan pemeriksaan laboratorium ditempat, melayani konsultasi kesehatan
oleh Dokter yang berpengalaman Melayani General Check Up, melayani
Keterangan Sehat untuk melamar kerja melayani Keterangan Bebas Narkoba,
melayani Imunisasi Hepatitis.
9
Struktur Organisasi Balai Besar Laboratorium Kesehatan Makassar
Gambar 2.1 Struktur Organisasi Balai Besar Laboratorium Kesehatan (BBLK)
Makassar tahun 2020
3.6 Instalasi – instalasi Yang Ada di Laboratorium BBLK Makassar
10
3.7 Instalasi Pengambilan Spesimen
Selama kurang lebih 4 minggu praktik kerja lapangan di balai besar
laboratorium kesehatan makassar spesimen yang di antarkan ke instalasi
patologi klinik, imunologi, mikrobiologi, kimia kesehatan sebagai berikut:
Tabel 2.2.1 Jumlah Spesimen Untuk Instalasi Patologi Klinik
JUMLAH SPESIMEN SETIAP

JENIS PEKAN
NO. JUMLAH
SPESIMEN
I II III IV
Darah Tabung
1 40 20 35 20 115
EDTA
Darah Tabung
2 45 60 65 40 210
tutup merah
3 Urin 25 37 30 23 115
Tabel 2.2.2 Jumlah Spesimen Untuk Instalasi Imunologi

JENIS PEKAN
NO. JUMLAH
SPESIMEN
I II III IV
Darah Tabung
1 25 33 28 20 106
tutup merah
2 Urin 20 25 35 19 99
Tabel 2.2.3 Jumlah Spesimen Untuk Instalasi mikrobiologi
JUMLAH SPESIMEN
JENIS SETIAP PEKAN
NO. JUMLAH
SPESIMEN
I II III IV
11
1 Sputum 25 30 20 15 90
2 Pus (nanah) 5 8 6 4 23
3 Raitz serum 2 1 1 0 4
4 Makanan 20 15 25 15 75
5 Minuman 2 3 2 0 7
Darah tabung
6 2 3 4 0 9
EDTA
Tabel 2.2.4 Jumlah Spesimen Untuk Instalasi kimia kesehatan

JENIS PEKAN
NO. JUMLAH
SPESIMEN
I II III IV
1 Makanan 2 10 5 3 20
2 Air 5 10 20 5 40
3.8 Instalasi Patologi Klinik
Patologi klinik adalah bagian dari ilmu kedokteran klinik yang ikut
mempelajari masalah diagnostik dan terapi, ikut meneliti wujud dan
perjalanan penyakit pada seorang penderita atau bahan yang berasal dari
seorang penderita. Pada instalasi patologi klinik yang ada di BBLK (Balai
Besar Laboratorium Kesehatan) Makassar hanya memeriksakan beberapa
parameter saja yang berkaitan dengan patologi klinik yaitu pemeriksaan
Hematologi, Urinalisa dan Kimia Klinik.
12
Secara garis besar, pemeriksaan di instalasi ini terbagi menjadi beberapa
tahapan yaitu tahapan persiapan sampel dimana pada tahap ini adalah untuk
mendapatkan sampel yang representatif untuk pemeriksaan, tahapan
pelaksanaan control alat dan reagen (Quality control) yaitu tahap untuk
mendapatkan larutan pereaksi dan kurva kontrol yang baik, dan tahapan
analisa sampel untuk mengetahui dan menetapkan nilai atau range suatu
pemeriksaan dalam suatu sampel dan setelahnya adalah pencatatan hasil.
Instalasi patologi klinik dijalankan oleh beberapa karyawan yang telah
ditugaskan untuk bertanggungjawab sepenuhnya di instalasi tersebut.
Pembagian tugas di instalasi dapat dilihat pada struktur organisasi instalasi
patologi klinik.
STRUKTUR ORGANISASI INSTALASI

PATOLOGI KLINIK
KEPALA INSTALASI
Sitti Surdianah, SKM

NIP. 196704171988032002
HEMATOLOGI URINALISA KIMIA KLINIK
Rudiah, SKM Nasrianti Latif, Amd. AK Kusuma Wardani, Amd.AK

NIP. 196704171988032002 NIP. 196704171988032002 NIP. 198707242009122001
Yetty Widyastuti, Amd, AK Krisharianto B.P., Amd, AK Marhani, AMAK
NIP. 198502142015032001 NIP. 197712161997031005 NIP. 198405242006042002
Gambar 2.2 Struktur Organisasi Instalasi Patologi Klinik
13
Hasil dan Pembahasan
Pemeriksaan di Instalasi Patologi mencakup 3 jenis pemeriksaan
yaitu :
a. Hematologi
Hematologi adalah cabang ilmu kedokteran yang mempelajari
kondisi normal dan patologis darah yang meliputi struktur darah,
komponen darah, fungsi darah dan pembuluh darah. Pemeriksaan
hematologi adalah pemeriksaan yang dilakukan untuk mengetahui
keadaan darah dan komponen-komponennya. Darah terdiri dari bagian
padat yaitu sel darah merah (eritrosit), sel darah putih (leukosit),
trombosit dan bagian cairan yang berwarna kekuningan yang disebut
plasma. Pemeriksaan hematologi di instalasi tersebut terdiri dari
pemeriksaan darah lengkap (darah ritun dan LED).
1) Darah Lengkap
Nugraha (2018) menyatakan "Pemeriksaan hematologi rutin
adalah pemeriksaan hematologi yang umum dilakukan karena
sering diminta (rutin). Parameter pemeriksaan hematologi rutin
adalah hitung hematokrit, hemoglobin, jumlah eritrosit, indeks
eritrosit, hitung jumlah leukosit dan hitung jumlah trombosit.
Pemeriksaan hematologi rutin dalam bahasa Inggris dikenal dengan
istilah Complete Blood Count (CBC) yang jika diartikan ke dalam
bahasa Indonesia adalah "hitung darah lengkap", sedangkan
pemeriksaan darah lengkap yang umum dilakukan di Indonesia
adalah pemeriksaan hematologi rutin dengan hitung jenis leukosit
14
dan LED. Jadi, Istilah CBC yang benar merujuk pada pemeriksaan
Hematologi Rutin. Pada Instalasi paologi juga melakukan
pemeriksaan darah lengkap yang hanya terdiri dari pemeriksaan
darah rutin dan LED.
2) Darah rutin
Pada instalasi patologi diruangan hematologi pemeriksaan darah
lengkap yang terdiri dari darah rutin dilakukan dengan
menggunakan alat full automatic yaitu “Nihon Konden Celtac F”.
Pemeriksaan alat ini menggunakan 5 diff seperti yang digunakan
dibeberapa rumah sakit pada umumnya. Kontrol yang digunakan di
laboratorium patologi klinik ini adalah 3 level yaitu Low, normal
dan high.
Kontrol oleh setiap penanggung jawab maupun praktikan pada
saat akan melakukan pemeriksaan dilakukan setiap hari guna
memantau control alat maupun reagen untuk memastikan hasil yang
nantinya akan dikeluarkan adalah benar dan dalam keadaan baik,
juga dijadikan acuan atau pegangan apabila dikemudian hari
terdapat complain atau permintaan pertanggungjawaban.
Dijelaskan oleh instruktur ruangan hematologi, tujuan
dilakukannya control adalah 1) untuk memastikan kondisi alat yang
akan digunakan dan dalam keadaan yang sesuai dengan kondisi
suhu dan listrik yang ditentukan, 2) untuk meihat stabilitas reagen
yang digunakan, 3) sebagai jaminan mutu (QC) baik secara
internal/eksternal dan 4) melihat hasil kinerja pemeriksa.
15
Gambar 2.3. Alat Nihon Konden Feltac F
Pada proses pemeriksaannya sendiri dilakukan menggunakan
alat Full Automatic. Alur pada saat akan dilakukan pemeriksaan
adalah spesimen akan diterima melalui petugas pada bagian
spesimen. Spesimen setelah diterima, dilakukan pencatatan
penerimaan spesimen kemudian dipersiapkan untuk dilakukan
pemeriksaan menggunakan alat. Hal-hal yang perlu diperhatikan
sebelum melakukan pemeriksaan adalah mengamati spesimen
apakah terdapat gumpalan atau tidak, karena hal tersebut dapat
berpengaruh terhadap hasil. Adapun alat ini bekerja dengan :
a) Prinsip : “Instrumen menggunakan metode Cell yang disebut
Volumetric impedance. Pada metode ini larutan
elektrolit (diluent) yang telah dicampur dengan sel-
sel darah melalui aperture, hambatan antara kedua
elektroda tersebur akan naik sesaat dan akan terjadi
perubahan tegangan yang sangat kecil sesuai
dengan nilai tekanannya”.
b) Metode : “Volumetric Impedance”
c) Alat : Nihon Kohden Celtac F, Tabung EDTA Rak tabung.
16
d) Bahan : Darah dengan antikoagulan EDTA 10%
e) Cara Kerja :
1. Hidupkan UPS, tekan main power yang terletak pada bagian
belakang alat, sehingga lampu indikator main power akan
menyala.
2. Tekan tombol power yang terdaapat pada bagian depan alat,
maka alat secara otomatis akan melakukan Cleaning dan
Priming .
3. Tunggu sampai alat siap digunakan (ready).
4. Lakukan pembacaan control.
5. Masukkan data pasien lalu kirim data tersebut pada alat.
6. Masukkan sampel pada rak tabung lalu tekan tombo start dan
alat akan melakukan analysa.
7. Setelah selesai analysa maka hasil akan keluar secara
otomatis dalam bentuk print out.
Hasil yang keluar adalah dalam bentuk print out dengan
penulisan sebagai berikut :
17
Gambar 2.4. Hasil Print Out Hasil Pemeriksaan Hematologi
Darah Rutin
Adapun tolak ukur untuk melihat normal atau abnormalnya hasil
yang keluar adalah dengan melihat nilai normal pada setiap
parameter pemeriksaan seperti yang telah dirangkum menurut
Nugraha, 2018 nilai normal pemeriksaan hematologi adalah :
Tabel 2.2.5 Nilai Normal Pemeriksaan Hematologi Darah

Rutin
Jenis Pemeriksaan Nilai Rujukan Satuan
♂ : 13 – 17
Hemoglobin (HGB) g/dl
♀ : 12 – 15
Leukosit (WBC) 4.000 – 10.000 /mm3
♂ : 4,5 – 5,5
Eritrosit (RBC) Juta/mm3
♀ : 3,8 – 4,8
♂ : 40 – 50
Hematokrit (HCT) %
♀ : 36 – 46
MCV (Mean
Corpuscular 83 – 101 fL
Volume)
MCH (Mean
Corpuscular 27 – 32 Pg
Hemoglobin)
MCHC (Mean 31,5 – 34,5 g/dl
Corpuscular
Hemoglobin
18
Consentration)
Trombosit (PLT) 150.000 – 400.000 /mm3
Neutrofil (NE) 20 – 40 %
Limfosit (LY) 2 – 10 %
Monosit (MO) 1−6 %
Eosinofil (EO) 2−4 %
Basofil (BA) 0-1 %
Pemeriksaan hematologi adalah pemeriksaan yang sering
diminta dan dilakukan untuk mengetahui keadaan darah dan
komponennya sehingga kondisi kesehatan pasien dapat diketahui.
Melihat hasil yang diterima setelah print out hasil keluar dapat
dilihat bahwa nilai eritrosit, hemoglobin, MCV, MCH dan MCHC
normal namun terjadi peningkatan pada beberapa parameter
berkaitan dengan antibodi yaitu leukosit dan hitung jumlah leukosit
(neutrofil, basofil, eosinofil, monosit dan limfosit).
Darah terdiri dari sekitar 45% komponen sel dan 55% plasma.
Komponen sel tersebut adalah sel darah merah (eritrosit), sel darah
putih (leukosit) dan keping darah (trombosit). Sel darah merah
berjumlah 99% dari total komponen sel, sisanya1% sel darah putih
dan platelet. Plasma terdiri dari air 90% dan 10% sisanya dari
protein plasma, gas terlarut, berbagai produk sampah metabolisme,
nutrient, vitamin dan kolesterol (Corwin, 2009).
19
Pada range 4,5 – 5,5 jt/dl (normal eritrosit) kondisi viskositas
darah dalam tubuh dalam keadaan normal atau stabil sehingga
ekspor oksigen ke jaringan tubuh menjadi lancar. Sehinggan tubuh
dalam keadaan sehat namun, jika ada suatu kelainan dalam tubuh
seperti pada penyakit thalasemia dimana kadar atau jumlah sel darah
merah itu meningkat akan membuat viskositas atau kekentalan
darah itu meningkat. Peningkatan viskositas ini akan memicu
resiko-resiko lainnya seperti gagal jantung dan stroke.
MCH, ,MCV, MCHC itu pemeriksaannya dapat menentukan
jenis anemia namun dikonfirmasi dengan melakukan pemeriksaan
ADT (Apusan Darah Tepi).
Hematokrit merupakan suatu hasil pengukuran yang
menyatakan perbandingan sel darah merah terhadap volume darah.
Hematokrit memiliki satuan menggunakan persen, contoh 42%
(memiliki arti bahwa terdapat 42 ml sel darah merah di dalam 100
ml darah).
Sel darah merah, sel darah putih dan platelet dibentuk di hati
dan limpa pada janin dan di dalam sumsung tulang setelah lahir.
Proses ini disebut hematopoiesis. Hematopoiesis mulai terjadi
disumsung tulang dengan sel induk. Sel induk adalah sumber semua
sel darah. Sel-sel ini secara kontinu memperbarui dirinya dan
berdiferensiasi sepanjang hidup dan merupakan cadangan yang tiada
habisnya.
20
Peningkatan terjadi pada sistem imun yaitu antibodi sehingga
dapat diketahui terjadi invasi antigen dalam tubuh. Penentuan kadar
tinggi rendahnya parameter pemeriksaan tersebut tidak secara
langsung dilakukan. Setelah hasil keluar, dilakukan sistem verifikasi
untuk memastiikan bahwa hasil yang dikeluarkan benar-benar dapat
dipertanggung jawabkan.
3) Laju Endap Darah (LED)
Tes laju endap darah adalah pengukuran kecepatan pengendapan
eritrosit dalam suatu tabung dari sediaan darah yang mengandung
antikoagulan. Tujuan dilakukannya pemeriksaan laju endap darah
adalah penetapan nilai koagulan untuk mengikuti perjalanan suatu
penyakit kronik.
Laju endap darah (erithrocyte sedimentation rate, ESR) yang
juga disebut kecepatan endap darah (KED) atau laju sedimentasi
eritrosit adalah kecepatan sedimentasi eritrosit dalam darah yang
belum membeku, dengan satuan mm/jam. LED merupakan uji yang
tidak spesifik. LED dijumpai meningkat selama proses inflamasi
akut, infeksi akut dan kronis, kerusakan jaringan (nekrosis),
penyakit kolagen, rheumatoid, malignansi, dan kondisi stress
fisiologis (misalnya kehamilan). Sebagian ahli hematologi, LED
tidak andal karena tidak spesifik, dan dipengaruhi oleh faktor
fisiologis yang menyebabkan temuan tidak akurat. (laboratorium
kesehatan).
21
Laju endap darah adalah menurunnya atau mengendapnya sel
darah merah dalam darah dengan antikoagulan yang diukur dengan
tingginya kolom plasma yang terbentuk dalam waktu tertentu dan
dinyatakan dalam milimiter per jam. Pemeriksaan LED dapat
dilakukan dengan cara manual ataupun menggunakan alat otomatik.
LED dengan cara manual dapat dikerjakan dengan metode
westergren namun pengukuran LED dengan alat otomatik lebih
dipilih di rumah sakit karena jumlah permintaan yang banyak
Pemeriksaan LED dengan menggunakan metode manual masih
sering dijumpai karena LED merupakan salah satu parameter
pemeriksaan walau tidak spesifik namun berguna untuk memantau
suatu perjalanan penyakit.
Pada pemeriksaan LED digunakan alat semi automatic yaitu
dengan menggunakan tabung Ves-tec yang telah berisi larutan
Natrium citrate 3,8% yang ditambahkan dengan darah EDTA
sampai tanda batas. Pada alat semi automatic hasil akan keluar
setelah 20 menit.
Gambar 2.5. Alat Ves-Tec
22
Sebagai control pembanding cara pemeriksaan yang mendapat
rekomendasi dari International Committee for Standardization in
Hematology (ICSH) adalah cara Westergren.
Gambar 2.6. Alat Pemeriksaan LED metode Westergreen
a) Prinsip : “Laju Endap Darah (LED) adalah mengukur

kecepatan pengendapan sel darah merah di
dalam plasma. Satuannya adalah mm/jam”.
b) Metode : Westergreen
c) Alat : Tabung reaksi, pencatat waktu, Clinipete 20
µl, rak tabung, standar westergreen, spuit 3 ml
dan pipet westergreen.
d) Bahan : Darah vena
e) Cara Kerja :
1. Isi tabung reaksi dengan 20 µl EDTA 10%
2. Tambahkan darah 2 ml
3. Campur sampai homogen
4. Masukkan 0,25 ml NaCl kedalam tabung reaksi
5. Tambahkan darah EDTA satu kali pipet westergreen
kemudian campur sampai homogeny.
6. Pasang pada standar westergreen dan biarkan selama 1
jam
23
7. Catat hasilnya
f) Hasil :
Tabel 2.2.6 Hasil Pemeriksaan Hematologi LED
Sampel Satuan
20 mm/jam
Pada pemeriksaan LED hasil ditulis pada formulir atau bon
laboratorium pasien dengan satuan mm/jam. Hasil yang didapatkan
pada pemeriksaan LED adalah 22 mm/jam. Menurut Nugraha,
2018 batas normal pemeriksaan LED yaitu 1-20 mm/jam.
Sehingga hasil tersebut adalah tinggi atau abnormal.
b. Urine Lengkap
Pemeriksaan/parameter yang sering digunakan dalam pengelolaan
penyakit disebut urinalisis. Urin merupakan cairan sisa yang
diekskresikan oleh ginjal, dimana ginjal berfungsi untuk mengatur
jumlah air di dalam tubuh agar sesuai dengan kebutuhan. Jika air dalam
tubuh berlebih, maka ginjal akan mengeluarkan air lebih banyak selain
itu ginjal juga berfungsi untuk mengeluarkan racun dan obat-obatan dari
dalam tubuh yang diproduksi tubuh dalam bentuk urin yang kemudian
akan dikeluarkan dari dalam tubuh melalui proses urinasi.
Urinalisis atau tes urin rutin digunakan untuk mengetahui fungsi
ginjal dan mengetahui adanya infeksipada ginjal atau saluran kemih.
Tes ini terdiri dari dua macam, yaitu : tes makroskopik dan tes
mikroskopik. Tes makroskopik dilakukan dengan cara visual. Pada tes
ini biasanya menggunakan reagen strip yang dicelupkan sebentar ke
dalam urine lalu mengamati perubahan warna yang terjadipada strip dan
24
membandingkannya dengangrafik warna standar. Tes ini bertujuan
mengetahui pH, berat jenis, glukosa, protein, bilirubin, urobilinogen,
darah, keton, nitrit, lekosit esteras, dan vitamin C.
Tes mikroskopik urin atau sedimen urine dilakukan dengan memutar
centrifuge urin lalu mengamati endapan urindi bawah mikroskop. Tes
ini bertujuan untuk mengetahui : unsur-unsur organik sel-sel : eritrosit,
leukosit, epitel, silinder, silindroid, benang lendir unusur anorganik
kristal, garam amorf elemen lain bakteri, sel jamur, parasit Trichomonas
sp, spermatozoa.
Pada instalasi patologi di bidang urinalisa terdapat pemeriksaan
urine lengkap yang terdiri dari :
1) Pemeriksaan Kimia Urine
Warna Urin dipengaruhi oleh konsentrasi, adanya obat, senyawa
eksogen dan endogen serta pH. Warna Merah coklat ; menunjukan
urin mengandung hemoglobin, myoglobin, pugmen empedu, darah
dan pewarna. Dapat juga karena pemakaian klorpromazin,
haloperidol, rifampisin, fenition, ibuprofen. Warna merah coklat
dapat berarti urin bersifat asam (karena metronidazol) atau alkali
(karena laksatif, metildopa).Warna Kuning merah (pink)
menunjukkan adanya sayuran, bit, fenazopiridin atau katartik
fenolftalein, ibuprofen, fenitoin dan klorokuin.Warna biru kehijauan
menunjukkan pasien mengkonsumsi bit, adanya bakteri
Pseudomonas, pigmen empedu dan amitriptilin.Warna hitam
menunjukkan adanya alkaptouriaWarna gelap menunjukkan adanya
25
porfiria, malignant melanoma (sangat jarang ditemukan) Urin yang
berbusa mengandung protein atau asam empedu Kuning kecoklatan
menunjukkan primakuin, sulfametoksazol, bilirubin, urobilin
pH Ini adalah derajat keasaman air seni. pH urine pada orang
normal adalah 4,8 – 7,4. pH di bawah 7,0 disebut asam (acid) dan
pH di atas 7,0 dinamakan basa (alkali). Beberapa keadaan dapat
menyebabkan pH urine menjadi basa , misalnya : diet vegetarian,
setelah makan, muntah hebat, infeksi saluran kencing oleh bakteri
Proteus atau Pseudomonas, urine yang disimpan lama, terapi obat-
obatan tertentu, atau gangguan proses pengasaman pada bagian
tubulus ginjal. Sebaliknya, pH urine bisa menjadi rendah atau asam
dapat dijumpai pada : diabetes, demam pada anak, asidosis sistemik,
terapi obat-obatan tertentu.
Berat jenis (BJ) atau specific gravity (SG) dipengaruhi oleh
tingkat keenceran air seni. Pada orang normal, berat jenis urine
adalah 1,015 – 1,025. Seberapa banyak Anda minum atau berkemih
akan mempengaruhi BJ urine; semakin banyak berkemih, akan
semakin rendah BJ, demikian sebaliknya. Adanya protein atau
glukosa dalam urine akan meningkatkan BJ urine. Jika ada protein
dalam urine, maka setiap 1% proteinuria BJ bertambah 0,003. Jika
ada glukosa dalam urine, maka setiap 1% glukosuria BJ bertambah
0,004.
Glukosa Biasanya tidak ada glukosa dalam air seni. Adanya
glukosa dalam urine (disebut glukosuria) harus diwaspadai adanya
26
gangguan atau penyakit. Jika glukosuria bersama hiperglikemia
(peningkatan kadar gula dalam darah), maka kemungkinan adalah :
diabetes mellitus (DM), sindrom Cushing, penyakit pankreas,
kelainan susunan syaraf pusat, gangguan metabolisme berat
(misalnya pada kebakaran hebat, penyakit hati lanjut, sepsis, dsb),
atau oleh karena obat-obatan kortikosteroid, thiazide, obat
kontrasepsi oral). Jika glukosuria tanpa hiperglikemia dapat
dijumpai pada : kelainan fungsi tubulus ginjal, kehamilan, gula
selain glukosa dalam urine atau makan buah-buahan sangat banyak.
Protein Biasanya tidak ada protein yang terdeteksi pada
urinalisis. Adanya protein dalam urine disebut proteinuria.
Proteinuria menunjukkan kerusakan pada ginjal, adanya darah dalam
air kencing atau infeksi kuman. Beberapa keadaan yang dapat
menyebabkan proteinuria adalah : penyakit ginjal (glomerulonefritis,
nefropati karena diabetes, pielonefritis, nefrosis lipoid), demam,
hipertensi,multiple myeloma, keracunan kehamilan (pre-eklampsia,
eklampsia), infeksi saluran kemih (urinary tract infection).
Proteinuria juga dapat dijumpai pada orang sehat setelah kerja
jasmani, urine yang pekat atau stress karena emosi (Kumar, 2007).
Pemeriksaan kimia urine dilakukan dengan menggunakan alat
Uriscan Optima Plus metode carik celup dengan prinsip :
27
Gambar 2.7. Alat Optima Plus
a) Prinsip : “Urine analyzer mengevaluasi carik celup dengan
cara reflectance photometry menggunakan light-
emiting diodes pada panjang gelombang dan waktu
pengukuran yang dibuat secara tepat untuk reaksi
kimia dan perubahan warna dari bantalan
pemeriksaan yang diamati”.
b) Alat : Tabung reaksi, rak tabung dan urine analyzer
(Uriscan Optima Plus).
c) Bahan : Urine sewaktu, strip uriscan dan tissue.
d) Cara Kerja :
1. On kan alat dan tunggu sampai alat siap digunakan
2. Masukkan sampel urine ke dalam tabung reaksi sebanyak 12
ml
3. Ambil satu strip urine dan celup kedalam sampel tidak lebih
dari 1 detik (semua parameter harus basah)
4. Tiriskan strip diatas tissue
5. Letakkan strip diatas meja strip
28
6. Hasil berupa print out akan keluar secara otomatis.
Hasil yang keluar adalah normal dalam bentuk print out :
Gambar 2.8. Hasil Print Out Control normal dan abnormal serta hasil
Pemeriksaan Kimia Urine
2) Pemeriksaan Sedimen Urine
Pemeriksaan sedimen urine atau pemeriksaan urine secara
mikroskopik adalah pemeriksaan yang dilakukan secara manual
untuk mecari kemungkinan adanya unsure-unsur organik sel-sel :
eritrosit, lekosit, epitel, silinder, silindroid, benang lendir unusur
anorganik kristal, garam amorf elemen lain bakteri, sel jamur, parasit
Trichomonas sp. dan spermatozoa.
Pada pemeriksaan sedimen urine dilakukan dengan :
a) Prinsip : “Berat jenis unsure-unsur organic dan an-organik
dalam urine lebih besar daripada berat jenis urine
sehingga dengan dicentrifuge zat-zat tersebut
akan mengendap”.
29
b) Alat : Tabung reaksi, rak tabung, mikroskop, objek
glass dan centrifuge.
c) Bahan : Urine Sewaktu
d) Cara Kerja :
1. Urine yang sudah diperiksa kimianya di centrifuge selama 10
menit dengan kecepatan 2500 rpm (untuk mendapatkan
endapan).
2. Supernatant dibuang
3. Endapannya dikocok dan diambil satu tetes diletakkan di
objek glass yang bersih
4. Periksa di mikroskop dengan lensa objektif 10 x lalu ke lensa
objektif 40 x.
Hasil biasanya tampak pada mikroskop dan digambar untuk
kemudian di interpretasikan pada formulir hasil pemeriksaan
sedimen urine. Hasil yang didapatkan pada pemeriksaan sedimen
adalah sel leukosit, eritrosit, epitel, sel ragi, benang lender, dan
bakteri. Hasil tersebut tidak memiliki arti yang signifikan.
Nilai normal :
a. Eritrosit : 0-1 per LPB
b. Leukosit : 1-5 per LPB
c. Epitel : negatif silinder : 0-1 per LPK
d. Kristal-kristal dalam urine normal : dalam urine asam : asam
urat, natrium urat, calsium sulfat, dalam urine asam / netral /
agak basa : calsium oksalat, asam hipurat, dalam urine basa /
30
netral / agak asam : triple fosfat, dikalsium fosfat , dalam urine
basa : calsium carbonat, calsium fosfat, amonium biurat.
Penulisan hasil pada instalasi patologi klinik dari ruangan
urinalisa hanya dicatat hasil pemeriksaan sedimen saja sedangkan
untuk hasil kimia urine hasil print out diarsipkan karena hasil yang
ada di alat akan secara langsung terkirim ke sistem informasi
laboratorium.
c. Kimia Klinik
Kimia klinik adalah ilmu yang mempelajari teknik terhadap darah,
urin, sputum (ludah, dahak), cairan otak, ginjal, secret-sekret yang
dikeluarkan. Pemeriksaan laboratorium yang berdasarkan pada reaksi
kimia dapat digunakan darah, urin atau cairan tubuh lain. Terdapat
banyak pemeriksaan kimia darah di dalam laboratorium klinik antara
lain uji fungsi hati, otot jantung, ginjal, lemak darah, gula darah, fungsi
pankreas, elektrolit dan dapat pula dipakai beberapa uji kimia yang
digunakan untuk membantu menegakkan diagnosis anemi (Anonim,
2012).
Kimia klinis juga dikenal sebagai kimia patologi, biokimia klinis
atau medis biokimia, adalah bagian dari patologi klinis yang umumnya
berkaitan dengan analisis cairan tubuh. Seiring berkembangnya waktu,
laboratorium modern sekarang benar-benar dibuat semaksimal
mungkin dengan beban kerja yang tinggi. Pengujian dilakukan dengan
pepantauan dan kontrol kualitas.
31
Pemeriksaan yang biasanya dilakukan di ruangan kimia klinik
adalah GD puasa, GD 2 jam PP, GD sewaktu, GTT, kolestrol, HDL
kolestrol, LDL kolestrol, trigliserid, total lipid, total protein, albumin,
globulin, alkali pospatase, HBDH, bilirubin indirec, iktirus indek,
SGOT/ast, SGP/Alt, CPK, Chlorida, magnesium. CKMB, gamma GT,
Ureum, creatinin, uric Asid, kalium, Calsium dan Natrium.
Pemeriksaan yang dapat dilakukan ketika melakukan praktik
magang di ruangan kimia klinik adalah GD puasa, GD sewaktu,
kolestrol, HDL kolestrol, LDL kolestrol, trigliserid, SGOT/ast,
SGP/Alt, Ureum, creatinin dan urid Acid.
Pemeriksaan kimia klinik di instalasi patologi klinik bidang kimia
klinik adalah menggunakan alat full automatic “Thermo Scientific
Indiko”
Gambar 2.9. Thermo Scientific Indiko
a) Prinsip : “Cahaya polikromasi diubah menjadi cahaya
monokromasi oleh monokromator kemudian akan
diterjemahkan berupa hasil pada display alat”.
32
b) Metode : Metode yang digunakan pada masing-masing
parameter dengajn menggunakan alat
full automatic berbeda-beda.
c) Alat : Thermo scientific indico, rak sampel, cup sampel,
mikropipet 500 µl, tips biru dan wadah limbah.
d) Bahan : Serum
e) Prosedur Kerja :
1. Hidupkan alat terlebih dahulu dan tunggu hingga alat sudah
dapat digunakan
2. lakukan Quality control pada alat. Jika control normal maka
lanjutkan pemeriksaan namun jika control rendah/tinggi maka
lakukan pengecekan kualitas control dan tidak diperkenankan
melanjutkan pemeriksaan.
3. Pada layar monitor klik Add sampel dan lakukan pengisian
sampel ID kemudian klik confirm.
4. Isilah data pasien
5. Pilih rak dan posisi tabung sampel
6. Lakukan pemilihan parameter pemeriksaan sampel sesuai
dengan permintaan
7. Save data kemudian masukkan sampel ke dalam alat
8. Setelah masuk, tutup kembali dan klik start maka akan muncul
pada layar monitor lama analisa alat terhadap sampel dan
tunggu hingga hasil keluar.
33
Hasil yang keluar pada saat melakukan pemeriksaan pada sampel
Tn. J umur 67 thn jenis kelamin laki-laki adalah normal dengan
tampilan sebagai Berikut :
Tabel 2.2.7 Hasil Pemeriksaan Kimia Klinik
Parameter Hasil
Total kolesterol 112
HDL-Cholestrol 30
LDL-Cholestrol 50
Trigliserida 92
Urea 19
Kreatinin 0,58
Chlorida 83
Natrium 119
Kalium 3,5
HbA1C 7,2
Untuk melihat apakah hasil pemeriksaan dikatakan normal atau
tidak maka diberlakukan nilai rujukan yang ada pada instalasi patologi
klinik. Berdasarkan hasil kondisi pada tubuh adalah normal dengan
nilai rujukan sebagai berikut :
Tabel 2.2.8 Nilai Rujukan Hasil Pemeriksaan Kimia Klinik
Pemeriksaan Nilai Normal Satuan
Glukosa sewaktu 60-139 Mg/dl
Glukosa puasa 74-106 Mg/dl
Kolesterol total < 200 Mg/dl
34
Trigliserida 10-140 Mg/dl
Kolesterol HDL 40-60 Mg/dl
Kolesterol LDL <100 Mg/dl
Laki-laki : 3.5-7.2
Asam Urat Mg/dl
Perempuan : 2,6-6,0
Ureum 13-43 Mg/dl
Laki-laki : 0,9-1,3
Creatinin Mg/dl
Perempuan : 0,6-1,1
SGOT (Serum
glutamate
8-20 Pada suhu 30o C
oxaloasetic
transmirase)
SGPT (Serum
Laki-laki : 7-28
glutamate pyruvic Pada suhu 30o C
Perempuan : 5-25
transmirase)
Gula darah adalah istilah yang mengacu kepada tingkat glukosa
di dalam darah. Konsentrasi gula darah atau tingkat glukosa serum,
diatur dengan ketat di dalam tubuh. Glukosa yang dialirkan melalui
darah adalah sumber energi untuk sel-sel tubuh. Meskipun disebut
sebagi gula darah, selain glukosa, ditemukan juga jenisjenis gula
lainnya, seperti glukosa dan galaktosa. Namun demikian, hanya
tingkatan glukosa yang diatur insulin.
35
Asam urat adalah penyakit dari sisa metabolisme zat purin yang
berasal dari sisa makanan yang kita konsumsi. Asam urat disintesis
dalam hati yang dikatalisis oleh enzim xantin oksidase. Zat asam urat
ini biasanya akan dikeluarkan oleh ginjal melalui urin dalam kondisi
normal. Namun dalam kondisi tertentu,ginjal tidak mampu
mengeluarkan zat asam urat secara seimbang,sehingga terjadi
kelebihan dalam darah. Kelebihan zat asam urat ini biasanya akhirnya
akan menumpuk dan tertimbun pada persendian dan tempat lainnya
termasuk diginjal itu sendiri dalam bentuk Kristal-kristal.
Ureum adalah produk degradasi akhir, protein asam amino dan
deaminasi. Amonia yang terbentuk dalam proses ini dimetabolisme
menjadi urea di hati. Ini adalah jalur katabolisme yang paling penting
untuk menghilangkan kelebihan-kelebihan nitrogen dalam tubuh
manusia. Hampir seluruh ureum dibentuk di dalam hati, dari
metabolisme protein (asam amino). Urea berdifusi bebas masuk ke
dalam cairan intra sel dan ekstrasel. Zat ini dipekatkan dalam urin
untuk diekskresikan. Pada keseimbangan nitrogen yang stabil, sekitar
25 gram urea diekskresikan setiap hari. Kadar dalam darah
mencerminkan keseimbangan antara produksi dan ekskresi urea.
Ureum berasal dari penguraian protein, terutama yang berasal dari
makanan. Pada orang sehat yang makanannya banyak mengandung
protein, ureum biasanya berada di atas rentang normal. Kadar rendah
biasanya tidak dianggap abnormal karena mencerminkan rendahnya
36
protein dalam makanan atau ekspansi volume plasma. Namun, bila
kadarnya sangat rendah bisa mengindikasikan penyakit hati berat.
Kreatinin adalah hasil akhir metabolisme otot dengan kecepatan
hampir konstan dan diekskresikan dalam urin dengan kecepatan sama.
Kreatinin diekskresi oleh ginjal melalui kombinasi filtrasi dan sekreksi
konsentrasinya relatif sama, dalam plasma hari ke hari, kadar yang
lebih besar dari nilai normal mengisyaratkan adanya gangguan fungsi
ginjal. (Corwin, 2001).
Pemeriksaan kreatinin dalam darah merupakan salah satu
parameter penting untuk mengetahui fungsi ginjal. Pemeriksaan ini
juga sangat membantu kebijakan melakukan terapi pada penderita
gangguan fungsi ginjal. Tinggi rendahnya kadar kreatinin dalam darah
digunakan sebagai indikator penting dalam menentukan apakah
seseorang dengan gangguan fungsi ginjal memerlukan tindakan
hemodialisis.
Kadar kreatinin berbeda setiap orang, umumnya pada orang yang
berotot kekar memiliki kadar kreatinin yang lebih tinggi daripada yang
tidak berotot.
Kolestrol adalah lemak yang terdapat di dalam aliran darah atau
sel tubuh yang sebenarnya dibutuhkan untuk pembentukan dinding sel
dan sebagai bahan baku beberapa hormon. Namun apabila
kadarkolestrol dalam darah berlebihan, maka bisa mengakibatkan
penyakit, termasuk penyakit jantung koroner dan stroke.
37
Untuk mengetahui profil lemak darah seseorang, umumnya
dilakukan pemeriksaan fraksi lemak darah di laboratorium. Fraksi
lemak yang perlu diperiksa adalah kadar trigliserida, kadar kolesterol
total, kolesterol-LDL, dan kolesterol-HDL. Kadar kol-LDL sebaiknya
diukur secara langsung. Namun, untuk memperingan biaya
pemeriksaan, kol-LDL dapat juga dihitung dengan rumus Friedewald,
dengan syarat kadar trigliserida < 400 mg/dl.
Trigliserida adalah salah satu jenis lemak yang dibawa dalam
aliran darah dan juga merupakan zat yang disimpan di dalam jaringan
sebagai hasil dari konversi sebagian besar jenis lemak di dalam tubuh.
Trigliserida merupakan hasil konversi kalori tidak terpakai dan
disimpan untuk menyediakan cadangan energi bagi tubuh.
Kolesterol HDL merupakan kolesterol baik yang aman untuk
tubuh walaupun kadarnya tinggi. HDL (High Desity Lipoprotein)
tidak mengandung banyak lemak seperti ldl tetapi mengandung
banyak protein. L/dl berfungsi sebagai pengantar kolesterol sedangkan
hdl berfungsi sebagai pembersih dalam saluran pembuluh darah arteri.
Jadi hdl akan membersihkan ldl yang terlalu tinggi dalam pembuluh
darah arteri untuk kembali ke hati dan dicoba untuk didaur ulang
kembali. Jika kadar hdl tinggi resiko penyakit jantung sangat kecil
tetapi jika hdl rendah akan mengakibatkan penyakit jantung.
Kolesterol LDL (Low Densisty Lipoprotein) atau biasa disebut
sebagai kolesterol jahat. Kandungan ldl yang tepat dalam tubuh sekitar
60% sampai 70%. LDL akan membawa kolesterol ke seluruh tubuh
38
yang membutuhkan melalui jaringan arteri. Dia akan mengirimkan
kapan saja ketika sel tersebut membutuhkan. Tetapi ketika ldl terlalu
banyak, akan menimbun kolesterol pada arteri sehingga menyebabkan
plak-plak. Timbunan kolesterol tersebut akan menyumbat saluran
pembuluh arteri. Ldl berpengaruh dengan kadar lemak jenuh dalam
tubuh dan kandungan kolesterol yang kita makan. Sehingga ketika
kadar kolesterol tinggi, anda harus melakukan diet rendah lemak.
Glutamat Oksaloasetat Transaminase merupakan enzim yang
dijumpai dalam konsentrasi yang tinggi di sel hati dan miokard serta
dalam jumlah kecil di musculoskeletal, ginjal, pancreas, otak dan
eritrosit. Tujuan tes ini yaitu mendiagnosis dan mengevaluasi penyakit
hati dan penyakit jantung serta memantau efekobat yang hepatotoksik
dan nefrotoksik. Enzim GOT dan GPT mencerminkan keutuhan atau
integrasi sel-sel hati. Adanya peningkatn enzim hati tersebut dapat
mencerminkan tingkat kerusakan sel-sel hati. Makin tinggi
peningkatan kadar enzim GPT dan GOT, semakin tinggi tingkat
kerusakan sel-sel hati (Cahyono 2009).
Kerusakan membran sel menyebabkan enzim Glutamat
Oksaloasetat Transminase (GOT) keuar dari sitoplasma sel yang
rusak, dan jumlahnya meningkat didalam darah. Sehingga dapat
dijadikan indiator kerusakan hati (Ronald et al. 2004). Kadar enzim
AST (GOT) akan meningkat apabila terjadi kerusakan sel yang akut
seperti nekrosis hepatoseluler seperti gangguan fungsi hati dan saluran
empedu, penyakit jantung dan pembuluh darah, serta gangguan fungsi
39
ginjal dan pancreas. GOT banyak terdapat dalam mitokondria dan
sitoplasma sel hati, otot jantung, otot lurik dan ginjal (Sagita, 2006).
Pemeriksaan SGPT adalah indikator yang lebih sensitif terhadap
kerusakan hati dibanding SGOT. Hal ini dikarenakan enzim GPT
sumber utamanya di hati, sedangkan enzim GOT banyak terdapat
pada jaringan terutama jantung, otot rangka, ginjal dan otak. Enzim
aspartat aminotransferase (AST) disebut juga serum glutamat
oksaloasetat transminase (SGOT) merupakan enzim mitikondria yang
berfungsi mengkatalisis pemindahan bolak –balik gugus amino dari
asam aspartat ke asam α-oks aloasetat membentuk asam glutamat dan
oksaloasetat (Cahyono 2009).
Secara garis besar, tahapan pemeriksaan di ruangan kimia klinik
terbagi menjadi :
1) Pra analitik
Pra-analitik mencakup persiapan alat dan reagen, persiapan
ruangan kerja (kondusif dengan suhu sesuai kebutuhan alat),
melakukan QC (Quality control) dan persiapan kerja analis.
2) Analitik
a. Persiapan sampel
1. Urutkan sampel sesuai dengan kode lab terkecil.
2. Lakukan penomoran sampel dan cup sampel sesuai dengan
urutan kode lab.
3. Tempatkan cup sampel pad arak sampel.
4. Dipipet sampel pada cup sampel sebanyak 500 µl.
40
5. Input data pasien berdasarkan Lhus.
b. Running sampel
Klik F2 → 1. Sampel →klik new → input di pasien (confirm)
→ pilih no. rak sampel → pilih posisi sampel → pilih
parameter sampel → klik start.
3) Pasca analitik
Pelaporan hasil dilakukan tidak hanya data yang terkirim dari
alat ke sistem informasi laboratorium kesehatan tetapi tetap
dilakukan pencatatan secara manual oleh praktikan.
Sebelum pelaporan hasil harus dilakukan beberapa hal yaitu :
melihat kembali hasil pasien dan melakukan intervensi dengan
melihat :
a. Kondisi sampel
b. Parameter yang berkaitan dengan pemeriksaan terssebut
c. Catatan rekam medic pasien
d. Apabila terdapat kejanggalan terkait hasil maka dilakukan :
1) Konfirmasi dengan alat dan metode setara yang digunakan
atau setingkat lebih tinggi.
2) Konfirmasi kembali metode, alat dan lain sebagainya yang
berkaitan.
3) Lakukan verifikasi : LHUS (Lembar Hasil Uji Sementara)
dikonfirmasi dengan alat dan metode kemudian
dibandingkan dengan hasil dari sistem laboratorium.
41
4) Setelah semua telah dilaksanakan maka dapat dilakukan
publikai hasil.
3.9 Instalasi Media dan Reagensia
Dalam kurun waktu 4 minggu jumlah media yang di distribusikan ke
ruangan mikrobiologi sebagai berikut:
Tabel 2.2.9 Jumlah Media yang Terdistribusi
No. Nama Media / Larutan Jumlah
Media KIA
1. 70 tabung
(Kliger Iron Agar)
Larutan PBS (Phosphate Buffer Saline)
2. 130 tabung
pH 7,2
Media BHIB
3. 60 tabung
(Brain Heart Infusion Broth)
Media BAP
4. 40 tabung
(Blood Agar Plate)
Media LSB
5. 150 tabung
(Lauryl Sulfate Broth)
Media BGLB
6. 150 tabung
(Brillian Green Lactose Broth)
7. Media Escherichia Coli Broth 15 tabung
8. Media SBR (Sabouraud Agar) 20 tabung
Media MCA
9 50 tabung
(Mac Conkey Agar)
42
Pembahasan
Instalasi media reagen adalah instalasi yang sangat berhubungan erat
dengan instalasi mikrobiologi. Dimana segala bentuk pemeriksaan dan
pembiakan yang dilakukan membutuhkan medium yang didistribusikan
dari Instalasi Media Reagensia. Untuk membantu proses pembuatan
media tentunya membutuhkan beberapa alat agar pada proses kegiatan
yang dilakukan agar terhindar dari kontaminasi. Adapun alat-alat yang
digunakan sebagai berikut:
a. Alat Milli-Q
Gambar 2.10 Alat Milli-Q

(Sumber : Data Primer, 2020)
Alat Milli-Q merupakan bagian yang sangat vital karena air yang
memenuhi standar laboratorium diperoleh dari alat ini. Air sumber
yang masuk ke alat ini berasal dari tangki penampung yang
tekanannya diatur sedemikian rupa. Apabila tekanan lebih dari 0,75
bar maka air secara otomatis mengalir dari tangki ke Milli-Q dan
43
aliran akan berhenti apabila tekanan kurang dari 0,75 bar (Dahlan,
2016).
Prinsip kerja alat ini dengan melibatkan langkah-langkah
penyaringan dan deionisasi berturut-turut untuk mencapai kemurnian
yang dicirikan dari segi resistivitas. Cara pengoperasian alat Milli Q
(alat pembuatan aquadest) yaitu pasang steker, kemudian tunggu
sampai tertulis “stand by” di layar, pilih “ready” maka aquadest siap
untuk ditampung.
b. Alat Laminar Air Flow
Gambar 2.11 Alat Laminar Air Flow

Laminar Air Flow adalah meja kerja steril untuk melakukan
kegiatan inokulasi atau penanaman. Laminar Air Flow merupakan
suatu alat yang digunakan dalam pekerjaan persiapan bahan
tanaman, penanaman dan pemindahan mikroorganisme. Alat ini
diberi nama Laminar Air Flow Cabinet, karena meniupkan udara
steril secara continue melewati tempat kerja sehingga bebas dari
44
debu dan spora-spora yang jatuh kedalam media pada waktu
pelaksanaan penanaman (Putri, 2010).
Aliran udara berasal dari udara ruangan yang ditarik ke dalam
alat melalui filter pertama (pre-filter) yang kemudian ditiupkan
keluar melalui filter yang sangat halus yang disebut HEPA (High
Efficiency Particulate Air Filter) dengan menggunakan blower
(Putri, 2010).
Prinsip kerja dari Laminar Air Flow (LAF) yaitu sebagai meja
kerja steril untuk kegiatan inokulasi dengan mengutamakan adanya
hembusan udara steril yang digerakkan oleh blower yang disaring
oleh HEPA Filter. Sebelum dioperasikan Laminar Air Flow harus
dinyalakan minimal 30 menit dan harus dilakukan penyemprotan
dengan alcohol agar alat dan ruang kerja tersebut terjamin
kesterilannya (SNI ISO/IEC 19028 :2008).
Cara pengoperasian Laminar Air Flow yaitu langkah pertama
dibersihkan dengan alcohol 70%. Kemudian nyalakan lampu UV
selama 15 menit lalu padamkan. Nyalakan lampu cabinet dan
blower. Masukkan bahan yang akan dikerjakan. Setelah digunakan
bersihkan kembali dengan alcohol 70%. Nyalakan lampu UV selama
15 menit. Matikan Laminar Air Flow dan tutup kembali.
45
c. Alat Autoclave
Gambar 2.12 Alat Autoclave

(Sumber : Data Primer, 2020
Autoclave adalah alat pemanas tertutup yang digunakan untuk
mensterilkan suatu benda menggunakan uap bersuhu 121℃ dan
bertekanan 1,5 kg/cm2 selama kurang lebih 15 menit. Alat-alat gelas
maupun medium yang sudah dimasukkan dalam botol medium harus
disterilkan (Irianto, 2006).
Prinsip kerja alat ini yaitu uap air dan bertekanan untuk mensterilkan
suatu bahan. Cara pengoperasian alat autoclave yaitu autoclave
dibersihkan terlebih dahulu sebelum digunakan. Kemudian isi
autoclave dengan aquadest. Hidupkan tombol ON, atur suhu dan
waktu sesuai dengan kebutuhan. Masukkan bahan yang akan
disterilkan. Tutup dan kunci rapat-rapat. Sampai batas waktu dan
suhunya biarkan sampai jarum tekanan menunjukkan nol. Buka
pelan-pelan autoclave dan keluarkan bahan.
46
d. Alat Inspissator
Gambar 2.5 Alat Inspissator

Alat inspisator ini adalah alat yang digunakan untuk mensterilkan
bahan-bahan yang akan digunakan agar tidk terjadi kontaminasi oleh
spora-spora. Prinsip kerja alat ini yaitu dengan proses Tyndalisasi
Intermitton atau Fruktination Sterilization atau sterilisasi bertahap
selama 3 hari dengan temperature 100℃ selama 15-45 menit
(KEMENKES RI, 2015).
Cara pengoperasian alat Inspisator yaitu pasang colokan listrik
ke sumber listrik. Nyalakan sumber air. Tekan tombol power pada
display. Tekan tombol MODE 1 kali untuk perubahan suhu. Tekan
tombol MODE 2 kali untuk perubahan waktu. Tekan tombol MODE
kurang lebih 4 detik untuk kembali ke display awal. Tekan tombol
RUN STOP untuk menjalankan pemanasan.
47
e. Alat Neraca Analitik
Neraca digital merupakan alat yang sering ada dalam
laboratorium yang digunakan untuk menimbang bahan yang akan
digunakan. Neraca digital berfungsi untuk membantu mengukur
berat serta cara kalkulasi fecare otomatis harganya dengan harga
dasar satuan banyak kurang. Cara kerja neraca digital hanya bisa
mengeluarkan label, ada juga yang hanya timbul ditampilkan layar
LCD-nya (Wahyu. 2016).
Selain itu, dengan adanya tingkat ketelitian yang tinggi maka hal
tersebut dapat meminimalkan kesalahan dalam pengambilan media
yang dibutuhkan. Jumlah media yang tidak tepat dalam pembuatan
media baik untuk kultur jaringan ataupun media bakteri tentunya
akan berpengaruh terhadap konsentrasi zat dalam media. Hal
tersebut dapat menyebabkan terjadinya kekeliruan dalam hasil
praktikum yang dilaksanakan (Wahyu. 2016).
Gambar 2.12 Alat Neraca Analitik

48
f. Alat Hot Plate Stirer dan Magnetik Stirer
Hot plate stirrer dan Stirrer bar, Pengertian Hotplate merupakan
peralatan laboratorium kimia yang berbentuk alas kotak dengan
mesin pemanas dan digunakan untuk memanaskan campuran zat
kimia/sampel. Sampel yang akan dipanaskan ditempatkan ke dalam
tabung erlenmeyer atau gelas kimia lainnya. Kemudian pada hotplate
terdapat tombol yang diputar untuk menghidupkan dan
mematikannya. Penggunaan alat ini cukup sederhana kita tinggal
menyalakan kemudian menempatkan sampel diatas hotplate,
kemudian diatur suhunya sesuai yang ditentukan. Hot plate stirrer
dan Stirrer bar (magnetic stirrer) adalah sebuah alat yang mirip
seperti tiang yang terletak di samping hotplate, tiang ini berfungsi
sebagai pengaduk untuk menghomogenkan suatu larutan dengan
pengadukan yang teartur. Plate yang terdapat dalam alat ini dapat
dipanaskan sehingga mampu mempercepat proses homogenisasi.
Pengadukan dengan bantuan batang magnet Hot plate dan magnetic
stirrer seri Hot-Plate & Stirrer (Digital) RSH-1DR misalnya mampu
menghomogenkan sampai 10 L, dengan kecepatan sangat lambat
sampai 1600 rpm dan dapat dipanaskan sampai 425°C (Wahyu,
2016).
49
Gambar 2.13 Alat Magnetik Stirer
g. Oven
Oven laboratorium atau drying oven merupakan alat yang
digunakan untuk sterilisasi atau pembersihan dengan menggunakan
udara kering. Alat sterilisasi ini dipakai untuk mensterilkan alat-alat
gelas seperti Erlenmeyer, Petridish (cawan petri), tabung reaksi dan
gelas lainnya. Bahan-bahan seperti kapas, kain dan kertas juga dapat
disterilkan dalam oven tetapi dalam temperatur tertentu, pada
umumnya temperatur yang digunakan pada sterilisasi cara kering
adalah sekitar 140-1700°C selama paling sedikit 2 jam. Perlu
diperhatikan bahwa lamanya sterilisasi tergantung pada jumlah alat
disterilkan dan ketahanan alat terhadap panas. Secara umum
digunakan sebagai perlengkapan dalam laboratorium mikrobiologi.
Perinsip dari oven ini sendiri adalah menghancurkan lisis mikroba
menggunakan udara panas kering (Wahyu, 2016).


50
Media Yang Dibuat Di Innstalasi Media dan Reagensia
a. Larutan Penyangga PBS pH 7,2
Larutan PBS (Phosphate Buffer Saline) atau disebut larutan
penyangga adalah larutan yang terdiri dari asam lemah dan garamnya
yang dapat menjaga dan mempertahankan pH. Larutan PBS terdiri
dari Natrium Klorida (NaCl), Natrium Phosphat, Kalium Phosphate,
dan Kalium Klorida yang dilarutkan dengan air suling (Waluyo,
2008).
Dalam bidang biologi dan bioteknologi larutan ini tidak bisa
dipisahkan dalam penggunaannya karena PBS mempunyai sifat pH
larutan tidak berubah jika ditambahkan dengan sedikit asam maupun
basa dan pH larutan tetap konstan jika diencerkan (Waluyo, 2008).
Karena sifat itulah PBS biasa digunakan dalam beberapa hal yaitu
untuk uji kandungan virus atau bakteri, pembuatan RBC, isolasi virus
AI isolasi virus IB, dan isolasi virus lainnya, isolasi bakteri, isolasi
bulk virus atau bakteri, pengujian hemaglutinasi (HA-test), uji
antibodi (HI-test), dan campuran dalam pembuatan vaksin baik dalam
bentuk emulsi maupun suspensi (Waluyo, 2008).
Cara pembuatan 1 liter larutan PBS (Phosphate Buffer Saline)
ditimbang Na2HPO4 1, 368 gr dan NaH2PO4 0,5152 gr. Masukkan
kedalam beaker glass 1000 ml. Tambahkan 800 ml air suling, kocok
dengan menggunakan magnetic stirrer selama 15 menit, tambahkan
air suling hingga volume akhir 2000 ml. Cek pH PBS dengan pH
meter yang sudah dikalibrasi sebelumnya. pH PBS harus
51
menunjukkan 7,2 - 7,4. Bila pH PBS > 7,4, maka tambahkan HCl 0,1
N. Bila pH PBS < 7,2, maka tambahkan NaOH 0,1 N. Bila pH telah
sesuai, kocok kembali selama 10 menit agar larutan benar-benar
homogen. Sterilkan PBS dengan autoklaf suhu 121°C selama 15
menit.
Gambar 2.15 Larutan Penyangga PBS pH 7,2

b. Media LSB (Lauryl Sulfate Broth)
Lauryl Sulfate Broth merupakan media selektif yang digunakan
untuk mendeteksi coliform dalam air dan beberapa makanan. Lauryl
Sulfate Broth digunakan dalam uji pendugaan Coliform yang dapat
mendeteksi fermentasi laktosa sehingga memproduksi gas. Lauryl
Sulfate Tryptose broth dibuat sebagai media pengaya dan penghasilan
gas berlimpah dari inokulasi Coliform (Aditiawan, 2016).
Cara pembuatan media LSB yaitu dengan menimbang padatan
media LSB sesuai yang dibutuhkan dan dilarutkan dalam aquades.
Kemudian dididihkan diatas hotplate hingga jernih. Setelah itu
masukkan kedalam tabung reaksi yang berisi ampul masing-masing 10
ml. sterilkan dalam autoklaf suhu 121°C selama 15 menit.
52
c. Media Citrat
Media Citrat adalah media gabungan, yang mengandung glukosa,
laktosa, phenol merah dan ferri sulfat. Bagian dasar menunjukkan
bagian fermentasi glukosa, sedangkan bagian tebing menunjukkan
bagian fermentasi laktosa. Gelembung udara dalam medium
menunjukkan adanya pembentukan gas dari fermentasi glukosa.
Warna hitam menunjukkan produksi H2S oleh kuman (Khairunnisa,
2018).
Untuk media Citrat ditimbang padatannya sesuai yang
dibutuhkan, kemudian dilarutkan dalam aquadest. Didihkan diatas hot
plate hingga jernih. Setelah itu masukkan kedalam tabung masing-
masing 3 ml. Tutup mulut tabung menggunakan kapas steril dan
sterilkan dalam autoclave dengan suhu 121℃ selama 15 menit. Untuk
media Citrat setelah disterilkan kemudian didinginkan dalam posisi
miring 10°.
Gambar 2.16 Media Citrat

53
d. Media BHIB (Brain Heart Infusion Broth)
Brain Heart Infusion Broth (BHIB) adalah medium cair untuk
berbagai mikroorganisme baik yang aerob atau anaerob dari bakteri,
jamur, dan ragi. BHIB merupakan modifikasi dari media yang
dikembangkan oleh Rosenow dan Hayden. Tambahan otak sapi telah
menggantikan jaringan otak dan dinatrium fosfat juga menggantikan
buffer kalsium karbonat sehingga cocok untuk kultur Streptococcus,
Pneumococcus, dan Meningcoccus. Medium ini sangat fleksibel dan
mendukung pertumbuhan mikroorganisme dan medium cair harus
digunakan pada hari yang sama persiapan agar pertumbuhan
mikroorganisme menjadi optimal (Kusuma, 2019).
e. Media Blood Agar (BA)
Tujuan dan ruang lingkup Media BAP yaitu isolasi dan media
selektif gram positif Coccus, Enterococcus, dan Staphylococcus
aureus.
Alat yang digunakan yakni Erlenmeyer, Gelass ukur, Petridish
steril. Sedangkan bahan yang digunakan yakni Lab-Lemco powder
10,0 gram, Pepton 10,0 gram, Sodium Chloride 5,0 gram, Agar 15,0
gram, dan Aquadest 1,0 liter.
Cara Kerja pembuatan mediaya yakni timbang 40 gram bahan,
larutkan dalam 1 liter aquadest, campur dengan baik, dengan pH 7,2
± 0,2, sterilkan dalam autoclave 121°C selama 15 menit, biarkan
dingin sampai suhu mencapai 45-50°C, tambahkan darah domba
54
steril yang bebas fibrin 50-70 ml (5-7%), campur dengan baik,
kemudian tuang dalam petridish steril 15-20 ml.
Gambar 2.17 BAP

f. Media BGLB (Brillian Green Lactose Broth)
Media Brillian Green Lactose Broth (BGLB) khususnya
digunakan untuk pemeriksaan MPN coliform, yaitu pemeriksaan
yang digunakan untuk mengetahui perkiraan jumlah terdekat bakteri
coli dan coliform dalam 100 ml sampel. Penggunaan media BGLB
ini digunakan pada tahap uji penguat. Media ini digunakan dengan
maksud untuk media penyubur bagi bakteri coliform sekaligus
sebagai media selektif bagi bakteri selain bakteri coliform. Dengan
komposisi media yang mengandung laktosa dan garam empedu
inilah yang dapat mengizinkan dan mendorong bakteri-bakteri
coliform untuk tumbuh secara optimal (Label, 2008).
Cara pembuatan media BGLB sebagai berikut yaitu timbang
serbuk media BGLB sebanyak yang dibutuhkan. Dilarutkan dengan
aquadest sebanyak sesuai kebutuhan. Dihomogenkan larutan dengan
55
bantuan pemanasan dan pengadukan. Pelarutan tidak boleh sampai
mendidih (pelarutan harus sempurna sehingga tidak ada kristal yang
bersisa). Dipipet media sebanyak 10 ml ke dalam tabung reaksi yang
telah diisi tabung durham dengan posisi terbalik. Disterilisasi dengan
suhu 121°C selama 15 menit. Dikeluarkan media dari autoclave, jika
tidak segera digunakan, dibungkus dengan kertas, kemudian
disimpan pada pendingin.
Gambar 2.118 Media BGLB

g. Media MC (Mac Conkey)
Tujuan dan ruang lingkup yaitu media selektif untuk isolasi
gram negatif. Alat erlenmeyer, gelas ukur, dan petridish steril.
Sedangkan bahan Bacto Peptone 17, 0 gram, Bacto Proteose 3,0
gram, Bacto Lactose 10,0 gram, Bacto Bile Salt 1,5 gram, Sodium
Chloride 5,0 gram, Neutral Red 0,05 gram, Bacto Crystal Violet
0,005 gram, Bacto Agar 13,5 gram, dan Aquadest 1 liter.
Cara kerjanya yaitu timbang bahan 52 gram, larutan dalam 1
liter aquadest panaskan sampai larut sempurna, atur pH 7,1 ± 0,1,
56
sterilkan dalam autoklaf 121°C selama 15 menit, kemudian bagi
dalam petridsh steril ± 20 ml.
h. Media Sabouraud Agar (SBR)
Tujuan dan ruang lingkup media isolasi jamur dan ragi. Alat
erlenmeyer, gelas ukur, dan petridish steril. Sedangkan bahan
Peptone 10,0 gram, D (+) Glucose, 40,0 gram, Agar˗agar 15,0 gram,
dan Aquadest 1 liter.
Cara kerjanya yaitu timbang bahan 65 gram bahan, larutan
dengan aquadest, panaskan hingga larut sempurna, atur pH 5,6 ±
0,1, kemudian sterilkan dalam autoklaf 121°C, selama 15 menit, dan
kemudian bagi dalam petridsh steril.
i. Media Escherichia Coli Broth
Tujuannya yaitu media selektif untuk identifikasi bakteri
Coliform dan E. Coli. Alat Erlenmeyer, Gelas ukur, dan Tabung
durham. Sedangkan bahan Pepton from casein 20 gram, Lactose 5
gram, Bile salt mixture 1,5 gram, Sodium Chloride 5 gram, Di-
potassium hydrogen phosphate 1,5 gram, dan Aquadest 1 liter.
Cara kerjanya yaitu timbang 37 gram bahan, larutkan dalam 1
liter aquadest (untuk pembuatan double strength). Panaskan hingga
larut sempurna, atur pH 6,9 ± 0,1. Bagi dalam tabung yang sudah
berisi tabung durham 8-10 ml. Kemudian sterilkan pada suhu 121°C
selama 15 menit.
3.10 Instalasi Kimia Kesehatan
A. Pemeriksaan Analisis Makanan dan Minuman
57
1) Penentuan Kadar Gula Pereduksi dan Kadar Sukrosa
Penentuan kadar gula pereduksi dilakukan dengan metode Luff
Scrool. Metode Luff Schoorl didasarkan pada proses reduksi Cu2+
menjadi Cu+ oleh gula. Larutan Luff Schoorl mengandung ion Cu2+.
Gula pereduksi seperti glukosa dan fruktosa akan mereduksi CuO
menjadi Cu2O (SNI 2004). Tahapan reaksi yang terjadi pada
penetapan kadar gula dengan metode Luff Schoorl adalah sebagai
berikut :
R-CHO + 2CuO Cu2O + R-COOH
H2SO4 + CuO CuSO4 + H2O
CuSO4 + 2 KI CuI2 + K2SO4
2 CuI2 Cu2I2 + I2
I2 + 2 Na2S2O3 Na2S4O6 + 2 NaI
Kadar gula pereduksi ditunjukan oleh kadar gula sebelum inversi,
sedangkan kadar sukrosa ditunjukan oleh selisih kadar gula sebelum
dan sesudah inversi. Reaksi inversi gula sebagai berikut :
Sukrosa enzim Invertase

Glukosa + Fruktosa (3)
Untuk penentuan kadar sukrosa perlu dilakukakn hidrolisis
terlebih dahulu. Hidrolisis sukrosa juga dikenal sebagai inversi
sukrosa. Hasil hidrolisis sukrosa berupa campuran unit-unit mono
sakarida penyusunnya yaitu glukosa dan fruktosa. Glukosa dan
fruktosa dari hasil hidrolisis sukrosa ini disebut juga gula invert.
Inversi dapat dilakukan baik dengan memanaskan sukrosa bersama
asam atau dengan menambahkan enzim intervase. Tingkat kesalahan
58
pengukuran kadar gula dengan metode Luff Schoorl adalah sebesar
10% dan metode ini merupakan metode terbaik untuk mengukur
kadar karbohidrat.
Adapun alat-alat yang digunakan dalam penentuan kadar gula
pereduksi dan kadar sukrosa yaitu, batang pengaduk, labu ukur,
erlenmeyer, pipet volume, ball pipet, pipet tetes, waterbath.
Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam penentuan kadar
gula pereduksi dan kadar sukrosa yaitu aquadest, pb asetat, natrium
fosfat 10 %, larutan luff, KI 30 %, H 2SO4 25 %, tio sulfat 0,1 N
(indikator larutan kanji), HCl 25 %, NaOH 30 %, dan sampel yang
akan diujikan berdasarkan nomor identitas (ID).
Adapun langkah kerja dalam penentuan kadar gula pereduksi
dan kadar sukrosa adalah sebagai berikut :
a. Kadar Gula Pereduksi
1. Menimbang labu ukur
2. Menimbang dengan teliti 2 g sampel dalam labu ukur 250 ml
yang telah diketahui beratnya, mengencerkan dengan air
suling dan menambahkan 5 ml larutan pb asetat setengah
basa.
3. Untuk menguji penambahan pb asetat setengah basa tersebut
maka diteteskan larutan natrium fosfat 10 %, jika timbul
endapan putih berarti penambahannya sudah cukup.
59
4. Kemudian menambahkan 15 ml larutan natrium fosfat 10 %
untuk mengendapkan kelebihan pb asetat. Jika sudah timbul
endapan berarti penambahan natrium fosfat sudah cukup.
5. Setelah pengendapan sempurna, kemudian mengencerkan
larutan dengan air suling sampai tanda garis, kemudian
membiarkan selama 30 menit dan selanjutnya menyaring
larutan.
6. Memipet 5 ml saringan (larutan) ke dalam Erlenmeyer 500
ml, menambahkan 15 ml air suling, batu didih dan 25 ml
larutan luff. Menghubungkan Erlenmeyer dengan
pendinginan tegak, memanaskan sampai mendidih, dan
mendidihkan terus dengan nyala api yang kecil selama 10
menit. Mengangkat dan mendinginkan apan berarti
penambahan natrium fosfat sudah cukup.
7. Setelah pengendapan sempurna, kemudian mengencerkan
larutan dengan air suling sampai tanda garis, kemudian
membiarkan selama 30 menit dan selanjutnya menyaring
larutan.
8. Memipet 5 ml saringan (larutan) ke dalam Erlenmeyer 500
ml, menambahkan 15 ml air suling, batu didih dan 25 ml
larutan luff. Menghubungkan Erlenmeyer dengan
pendinginan tegak, memanaskan sampai mendidih, dan
mendidihkan terus dengan nyala api yang kecil selama 10
menit. Mengangkat dan mendinginkan selama 45 menit.
60
9. Menambahkan 15 ml laruta KI 30 % dan 25 ml H2SO4 25
% setelah larutan dingin (penambahan dilakukan secara hat
– hati), kemudian menitar dengan larutan natrium tio sulfat
0,1 N (indikator larutan kanji).
10. Mengerjakan penetapan blanko dengan menggunakan 25 ml
air dan 25 ml larutan luff
Rumus :
W 1 X fp
Gula Pereduksi = X 100 %
W
b. Kadar Sukrosa
1. Pipet 25 ml filtrat pada gula pereduksi dalam labu ukur 100
ml tambahkan 5 ml HCl 25 %.
2. Panaskan pada waterbath selama 10 menit (680C – 750C)
kontrol suhu.
3. Dinginkan.
4. Netralkan pH dengan NaOH 30 %, lalu cukupkan sampai
tanda garis, homogenkan.
5. Pipet 5 ml sampel, dan lakukan seperti penetapan gula
pereduksi.
Rumus :
Sukrosa % = ( % gula sesudah inversi - % gula pereduksi ) x
0,95
2) Penentuan Kadar Formalin
Formalin adalah senyawa formaldehida yang terkandung kurang
lebih 30 - 40 % didalam air. Formalin merupakan suatu bahan kimia
61
dengan berat molekul 30.03 yang pada suhu normal dan tekanan
atmosfer berbentuk gas tidak berwarna, berbau pedas (menusuk) dan
sangat reaktif (mudah terbakar). Bahan ini larut dalam air dan sangat
mudah larut dalam etanol dan eter. Dalam larutan formalin juga
ditambahkan larutan methanol sebanyak 10 -15 % untuk mencegah
terjadinya polimerisasi formaldehida. Formalin termasuk senyawa
jenis desinfektan yang biasanya digunakan dalam bidang industri
dan sering digunakan sebagai bahan pengawet yaitu untuk
mengawetkan mayat. Formalin biasa digunakan sebagai pengawet
makanan meskipun formalin tidak diijinkan dipakai sebagai bahan
pengawet makanan karena dapat mengancam kesehatan manusia
(Arifin, 2005).
O
Rumus struktur H C
H
Formalin adalah senyawa formaldehida yang terkandung kurang
lebih 30-40 % didalam air. Formalin merupakan suatu bahan kimia
dengan berat molekul 30.03 yang pada suhu normal dan tekanan
atmosfer berbentuk gas tidak berwarna, berbau pedas (menusuk) dan
sangat reaktif (mudah terbakar). Bahan ini larut dalam air dan sangat
mudah larut dalam etanol dan eter. Dalam larutan formalin juga
ditambahkan larutan methanol sebanyak 10 -15 % untuk mencegah
terjadinya polimerisasi formaldehida. Formalin termasuk senyawa
jenis desinfektan yang biasanya digunakan dalam bidang industri
dan sering digunakan sebagai bahan pengawet yaitu untuk
62
mengawetkan mayat. Formalin biasa digunakan sebagai pengawet
makanan meskipun formalin tidak diijinkan dipakai sebagai bahan
pengawet makanan karena dapat mengancam kesehatan manusia
(Arifin, 2005).
Menurut Concise International Chemical Assesment Document
(2002). Formalin merupakan senyawa bakteriostatik dalam
penggunaannya sebagai bahan pengawet makanan. Hal ini
dikarenakan penambahan formalin ini dapat menunda atau
mengurangi pertumbuhan bakteri dari makanan sehingga dapat
memberikan masa simpan yang lebih lama.
Kosumsi formalin dalam tubuh secara berkala dapat terakumulasi
didalam sel tubuh dan dapat bereaksi degan protein seluler (enzim)
dan DNA (mitokondria dan nukleus). Penggunaan formalin dalam
makanan sangat berdampak buruk pada tubuh baik dalam jangka
panjang maupun dalam jangka pendek. Beberapa dampak formalin
dalam jangka pendek antara lain terjadinya iritasi pada salura
pernafasan, pencernaan, muntah dan pusing. Sedangkan dampak
pada jangka panjang tergantung akumulasi jumlah formalin yang
dikosumsi dalam tubuh, diantaranya yaitu: kerusakan pada hati,
ginjal, limfa dan pankreas dan dapat memicu pertmbuhan kanker
(Mahdi, 2008).
Sebenarnya batas toleransi formaldehida yang dapat diterima
tubuh manusia dengan aman adalah dalam bentuk air minum,
menurut Internasional Programme On Chemical Safety (IPCS),
63
adalah 0,1 mg per liter atau dalam satu hari asupan yang dibolehkan
adalah 0,2 mg. Sementara formalin yang boleh masuk ke tubuh
dalam bentuk makanan untuk orang dewasa adalah 1,5 mg hingga 14
mg per hari. Berdasarkan standar Eropa, kandungan, berdasarkan
hasil iji klinis, dosis toleransi tubuh manusia pada ngan formalin
yang masuk dalam tubuh tidak boleh melebihi 0,66 mg/liter.
Sementara itu, berdasarkan hasil uji klinis, dosis toleransi tubuh
manusia pada pemakaian secara terus-menerus (Recommended
Dietary Daily Allowances/RDDA) untuk formalin sebesar 0,2
miligram per kilogram berat badan. (Concise International Chemical
Assesment Document, 2002).
Prinsip penentuan kadar formalin adalah senyawa formaldehid
bereaksi dengan asam kromatofat membentuk warna ungu atau
violet yang dapat diamati secara visual dengan menggunakan alat
spektrofotometer.
Adapun alat-alat yang digunakan dalam penentuan kadar formalin
yaitu, batang pengaduk, erlenmeyer, tabung neisler, cawan porselen,
neraca analitik, pipet volume, ball pipet, gelas ukur. Adapun bahan-
bahan yang digunakan dalam penentuan kadar formalin yaitu,
aquadest, asam phospat, HCHO 1, HCHO 2, dan sampel yang akan
diujikan berdasarkan nomor identitas (ID).
Adapun langkah kerja dalam penentuan kadar formalin adalah
sebagai berikut :
1. Timbang sampel 10 – 20 gram + aquadest 100 ml
64
2. Tambah 20 ml asam phospat
3. Destilasi
4. Tampung destilasi sebanyak 50 ml (tutup pake aluminium)
5. Siapkan tabung neisler
6. Pipet 4,5 ml HCHO 1 + 1 sendok HCHO 2
7. Tambahkan 3 ml sampel hasil destilasi
8. Homogenkan
Hasil :
Jika positif akan berubah menjadi warna Ungu, dilanjut ke spektro.
B. Pemeriksaan Kimia Air
1) Pemeriksaan kimia air menggunakan menggunakan titrimetri
Analisis titrimetri atau analisis volumetrik adalah analisis
kuantitatif dengan mereaksikan suatu zat yang dianalisis dengan
larutan standar (standar) yang telah diketahui konsentrasinya secara
teliti dan freaksi antara zat yang dianalisis dan larutan standar
tersebut berlangsung secara kuantitatif (Rodiani, dkk 2013).
Adapun pemeriksaan yang tergolong menggunakan titrimetri di
instalasi kimia kesehatan adalah pemeriksaan COD (Chemical
Oxygen Demand) dan pemeriksaan DO (Disolved Oxygen).
Chemical Oxygen Demand atau kebutuhan oksigen kimia
adalah jumlah oksigen yang diperlukan agar bahan buangan yang
ada di dalam air dapat teroksidasi melalui reaksi kimia. Peningkatan
kadar COD berbanding lurus dengan peningkatan pencemaran yang
terjadi diperairan. Oleh karena itu, dilakukan analisa kadar COD
65
pada sampel dengan menggunakan metode refluks terbuka yang
dilakukan dengan cara titrasi.
Adapun alat-alat yang digunakan dalam analisa kadar COD
yaitu neraca analitik, kertas timbang, spatula, glass beaker, batang
pengaduk, pipet ukur, pipet gondok, labu ukur, tabung COD, rak
tabung COD, karet penghisap, labu semprot, COD reaktor, buret,
dan erlenmeyer. Adapun bahan yang digunakan dalam analisa kadar
COD yaitu K2Cr2O7 0,25 N, Ag2SO4 yang dilarutkan dalam H2SO4
1%, serbuk Hg2SO4, ammonium ferro sulfat (NH4)2Fe(SO4)2,
indikator ferroin, dan sampel air yang diujikan berdasarkan nomor
identitas (ID).
Prinsip kerja dalam analisa kadar COD menurut Standar
Nasional Indonesia 06-6989.15-2004, yaitu zat organik dioksidasi
dengan campuran mendidih asam sulfat dan kalium dikromat
diketahui nomalitasnya dalam suatu refluk selama 2 jam. Kelebihan
kalium dikromat tidak tereduksi, dititrasi dengan larutan ferroin
ammonium sulfat (FAS).
Dalam hal ini bahan buangan organik akan dioksidasi oleh
Kalium bikromat menjadi gas CO2 dan H2O serta sejumlah ion
krom. Kalium bikromat atau K2Cr2O7 digunakan sebagai sumber
oksigen (oxidizing agent). Reaksi tersebut perlu pemanasan dan
juga penambahan katalisator perak sulfat (Ag2SO4) untuk
mempercepat reaksi. Apabila dalam bahan buangan organik
diperkirakan ada unsur klorida yang dapat mengganggu reaksi
66
maka perlu ditambahkan merkuri sulfat untuk menghilangkan
gangguan tersebut. klorida dapat mengganggu karena akan ikut
teroksidasi oleh kalium Bichromat sesuai dengan reaksi berikut ini:

→
+¿ 3C l +2C r + 7H O ¿
2−¿+ 14 H 2 3 2
¿
−¿+C r 2O 7 ¿
6Cl
Apabila dalam larutan air lingkungan terdapat Chlorida, maka
oksigen yang diperlukan pada reaksi tersebut tidak menggambarkan
keadaan sebenarnya. Seberapa jauh tingkat pencemaran oleh bahan
buangan organik tidak dapat diketahui secara benar. Penambahan
merkuri sulfat adalah untuk mengikat ionlor menjadi merkuri
Klorida mengikuti reaksi berikut ini:

→
−¿ HgCl 2 ¿
2+¿+2 C l ¿
Hg
Warna larutan air lingkungan yang mengandung bahan buangan
organik sebelum reaksi oksidasi adalah kuning. Setelah reaksi
oksidasi selesai maka akan berubah menjadi hijau. Jumlah oksigen
yang diperlukan untuk reaksi oksidasi terhadap bahan buangan
organik sama dengan jumlah kalium bichromat yang dipakai pada
reaksi tersebut diatas. Makin banyak kalium bichromat yang
dipakai pada reaksi oksidasi, berarti makin banyak oksigen yang
diperlukan. Ini berarti bahwa air lingkungan banyak tercemar oleh
bahan buangan organik. Dengan demikian maka seberapa jauh
tingkat pencemaran air lingkungan dapat ditentukan (Wardhana,
2001).
Penetapan COD pada ke duabelas sampel air limbah ini
menggunakan metode refluk terbuka yang melibatkan perubahan
67
bilangan oksidasi. Karena inilah metode refluk terbuka digolongkan
sebagai metode yang didasarkan pada reaksi reduksi-oksidasi
(redoks). Prinsip titrasi yang digunakan dalam metode ini adalah
titrasi kembali dimana Kalium Dikromat ditambahkan berlebih
terukur ke dalam larutan sampel, sisa dari Kalium Dikromat akan
bereaksi dengan Fero Ammonium Sulfat (FAS) dengan kehadiran
indikator ferroin memberikan warna TA (Titik Akhir) yaitu merah
coklat teh. Pemilihan jenis titrasi kembali didasarkan pada fakta
bahwa analat (zat organik) tidak dapat bereaksi langsung dengan
penitar (FAS) dimana telah diketahui bahwa keduanya adalah
sama–sama reduktor.
Adapun langkah kerja dari penetapan COD (Chemical Oxygen
Deman) ialah sebagai beirkut :
a. Lakukan preparasi blanko, standard dan sampel sebagai berikut :
Tabel 1. Preparasi Blanko, Standar dan Sampel Pemeriksaan

COD
Masukkan ke Blanko Standar Sampel
dalam botol (ml) (ml) (ml)
b. Tutup K2CO2O7
1 1 1
0,25 N
rapat-rapat
Ag2SO4.H2SO4
2 2 2
tabungnya 1%
lalu 0,04
Hg2SO4 0,04 (gram) 0,04 (gram)
(gram)
Homogenkan larutan. Reagen pereaksi telah selesai dibuat.
Aquabidem 2 - -
STD - 2 -
Sampel - - 2
Homogenkan larutan.
68
dihomogenkan dengan hati-hati, dimasukkan ke COD reaktor
yang sudah dipanaskan sebelumnya dengan suhu ±150oC,
dibiarkan 2 jam.
c. Setelah 2 jam tabung-tabung dikembalikan ke raknya sesuia
dengan urutannya, dinginkan dengan menggunakan kipas angin.
d. Setelah dingin blanko standar sampel dipindahkan ke
erlenmeyer
e. Ditambahkan 3-5 tetes indikator feroin, homogenkan. Titer
dengan larutan ammonium ferro sulfat yang telah diketahui.
Normalitasnya hingga berubah warna (warna kuning kehijauan –
hijau – biru – merah)
f. Dicatat volume akhir titrasi
g. Lakukan perhitungan kadar COD dengan menggunakan rumus
sebagai berikut :
COD ( mgL O )= ( A−B ) ( VN ) (8000)

2
Keterangan :
COD = Kadar Chemical Oxygen Demand (mg/L O2)
A = Volume titrasi FAS untuk blanko (mL)
B = Volume titrasi FAS untuk sampel (mL)
N = Normalitas FAS (N)
V = Volume sampel (mL)
Menurut Peraturan Gubernur Sulawesi Selatan No. 69 Tahun
2010 dan Peraturan Pemerintah No. 82 tahun 2001, nilai batas
ambang COD terbagi atas 4 golongan. Golongan I (air minum)
sebesar 10 mg/L O2, golongan II (prasarana/sarana rekreasi air)
69
sebesar 25 mg/L O2, golongan ketiga III (budidaya ikan air tawar)
sebesar 50 mg/L O2, dan golongan IV (mengairi pertanaman)
sebesar 100 mg/L O2.
Oksigen terlarut (dissolved oxygen, disingkat DO) atau sering
juga disebut dengan kebutuhan oksigen (Oxygen demand)
merupakan salah satu parameter penting dalam analisis kualitas air.
Nilai DO yang biasanya diukur dalam bentuk konsentrasi ini
menunjukan jumlah oksigen (O2) yang tersedia dalam suatu badan
air. Semakin besar nilai DO pada air, mengindikasikan air tersebut
memiliki kualitas yang bagus. Sebaliknya jika nilai DO rendah,
dapat diketahui bahwa air tersebut telah tercemar. Pengukuran DO
juga bertujuan melihat sejauh mana badan air mampu menampung
biota air seperti ikan dan mikroorganisme. Selain itu kemampuan air
untuk membersihkan pencemaran juga ditentukan oleh banyaknya
oksigen dalam air. Analisa kadar DO bertujuan untuk mengetahi
kadar oksigen terlarut dalam sampel. Analisa ini menggunakan
metode yodometri (Modifikasi Asida).
Adapun alat-alat yang digunakan dalam analisa kadar DO yaitu
botol winkler, stang buret, erlemeyer, pipet tetes, pipet ukur,dan
buret. Adapun bahan yang digunakan dalam analisa kadar DO yaitu
larutan NaOH-KI, larutan MnSO4, larutan H2SO4 pekat, larutan
indikator amilum, larutan Na2S2O3 0,125 N dan sampel air yang
diujikan berdasarkan nomor identitas (ID).
70
Prinsip kerja DO berdasarkan Satndar Nasional Indonesia SNI 06-
6989.14-2004, yaitu oksigen terlarut bereaksi dengan ion mangan
(II) dalam suasana basa menjadi hidroksida mangan dengan valensi
yang lebih tinggi (Mn IV). Dengan adanya ion yodida (I) dalam
suasana asam, ion managn (IV) akan kembali menjadi ion mangan
(II) dengan membebaskan yodin (I2) yang setara dengan kandungan
oksigen terlarut. Yodin terbentuk kemudian dititrasi dengan sodium
thiosulfat dengan indikator amillum.
Sampel yang akan dianalisis terlebih dahulu ditambahkan larutan
MnCl2 dan NaOH-Kl, sehingga akan terjadi endapan MnO2.
Dengan menambahkan H2SO4 atau HCl maka endapan yang terjadi
akan larut kembali dan juga akan membebaskan molekul iodium
(I2) yang ekivalen dengan oksigen terlarut. Iodium yang dibebaskan
ini selanjutnya ditritasi dengan larutan standar natrium tiosulfat
(Na2S2O3) dan menggunakan indikator larutan amilum (kanji).
Reaksi kimia yang terjadi ialah sebagai berikut :

→
MnC l 2 + NaOH Mn ¿
2 Mn ¿
→
I 2+ 2 N a2 S 2 O3 N a2 S 4 O6 + NaI
Adapun cara kerja dalam pemeriksaan kadar oksigen terlarut
dalam air yaitu
a Sampel dimasukkan ke dalam botol winkler sampai penuh
b Tutup dengan hati-hati agar tidak terbentuk gelembung
c Tambahkan NaOH-KI 1 mL dan MnSO 4 1 mL ke dalam botol
sampel kemudian homogenkan dan diamkan selama 3 menit.
71
d Setelah terbentuk endapan kuning kecoklatan kemudian
tambahkan H2SO4 pekat 2 mL, tutup dan homogenkan hingga
endapan larut
e Pindahkan sampel ke Erlenmeyer dan tambahkan indikator
amilum 3-5 tetes
f Titrasi dengan larutan Na2S2O3 (Natrium Tiosulfat) hingga
tidak berwarna
g Catat volume titran yang keluar kemudian hitung
menggunakan rumus berikut :
DO ( mgL O )= V1000 ×V
2
Sampel
Titran × N Titran × 8
Menurut Peraturan Gubernur Sulawesi Selatan No. 69 Tahun
2010 dan Peraturan Pemerintah No. 82 tahun 2001 bahwa
penentuan batas ambang minimal nilai DO ialah sama, dimana
terbagi menjadi 4 golongan. Dimana pada golongan I (air minum)
nilai batas ambang dari DO yaitu 6 mg/L O 2, sedangkan untuk
golongan II (prasarana/sarana rekreasi air) memiliki batas ambang
4 mg/L O2.
Sedangkan untuk golongan ketiga III (budidaya ikan air tawar)
memiliki nilai batas ambang 3 mg/L O2 sedangkan untuk golongan
ke IV (mengairi pertanaman) memiliki batas ambang 0 mg/L O2.
2) Pemeriksaan Kimia Air Menggunakan Spektrofotometri UV-Vis
Prinsip kerja spektrofotometer adalah berdasarkan hukum
Lambert-Beer, yaitu seberkas sinar dilewatkan suatu larutan pada
panjang gelombang tertentu, sehingga sinar tersebut sebagian ada
72
yang diteruskan dan sebagian lainnya diserap oleh larutan.
Besarnya sinar (A) berbanding lurus dengan konsentrasi zat
penyerap (C) dan jarak yang ditempuh sinar (a) dalam larutan
(tebal larutan, b). Pada spektrofotometer UV-VIS, zat diukur dalam
bentuk larutan. Analit yang dapat diukur dengan spektrofotometer
sinar tampak adalah analit berwarna atau yang dapat dibuat
berwarna (Warono dan Syamsudin, 2013).
Pada instalasi kimia kesehatan salah satu pemeriksaan kimia air
menggunakan spektrofotometri UV-Vis yaitu nitrat.
Nitrat di perairan merupakan makro nutrien yang mengontrol
produktivitas primer di daerah eufotik. Kadar nitrat di perairan
sangat di pengaruhi oleh asupan nitrat dari badan sungai. Sumber
utama nitrat berasal dari buangan rumah tangga dan pertanian
termasuk kotoran hewan dan manusia (Putri, 2019).
Salah satu faktor yang mempengaruhi keberadaan nitrat di
perairan adalah sumber nitrat itu sendiri. Nitrat di badan air dapat
berasal dari proses difusi oleh atmosfer, fiksasi, hasil degradasi
bahan organik serta buangan limbah organik akibat aktifitas
manusia. Salah satu buangan limbah yang berpotensi meningkatkan
konsentrasi nitrat di kolom air adalah pemanfaatan pupuk di lahan
pertanian. Tidak semua partikulat pupuk yang masuk kedalam
tanah akan terserap oleh tumbuhan sebagai sumber makanan,
sebagian diantaranya tersimpan dalam tanah dan sewaktu-waktu
dapat release ke kolam air. Proses erosi dan pengikisan di lahan
73
pertanian memungkinkan nitrat yang sebelumnya terjebak dalam
tanah akan masuk ke sungai dan bermuara ke laut (Putri, 2019).
Prinsip analisa kadar nitrat (NO3) yaitu ion NO3 dengan cara
dipanaskan akan bereaksi dengan brucin akan berwarna kuning.
Adapun alat-alat yang digunakan dalam analisa kadar nitrat
yaitu labu ukur, pipet tetes, pipet skala, karet penghisap, tabung
neiser, neraca analitik, kertas saring, tisu, waterbath, kaca arloji,
gelas kimia, rak tabung, spektrofotometer UV-Vis dan kuvet.
Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam analisa kadar
nitrat yaitu sampel, aquades, NaCl, H2SO4 dan brucin.
Adapun langkah kerja dalam menganalisa kadar nitrat pada
Spektrofotometer UV-Vis adalah sebagai berikut :
a. Sambungkan alat Spektrofotometer UV-Vis ke sumber listrik
dan nyalakan.
b. Atur spektrum dari spektrofotometer hingga mendapatkan
panjang gelombang yang sesuai.
c. Ke dalam tabung neiser dilakukan preparasi sebagai berikut :
Tabel 2 Preparasi Blanko, Standar dan Sampel Pemeriksaan

Nitrat
Masukkan ke dalam Blanko Standar Sampel
tabung neiser (ml) (ml) (ml)
Aquadest 10 - -
Standar - 10 -
Sampel - - 10
NaCl 30% 2 2 2
H2SO4 10 10 10
Brucin 1% 0,5 0,5 0,5
74
Homogenkan
d. Tutup dengan penutup tabung neisser.
e. Dipanaskan pada waterbath dengan suhu 950C ± selama 20
menit.
f. Dinginkan pada air mengalir.
g. Baca pada alat spektrofotometer (400-425 nm).
Dalam penentuan kadar nitrat (NO3), perlu untuk membuat
kurva kalibrasi. Kurva kalibrasi atau disebut juga kurva standar
diguanakn menentukan konsentrasi suatu zat dalam suatu sampel
yang tidak diketahui dengan membandingkan yang tidak diketahui
kedalam seperangkat sampel standar dari konsentrasi yang telah
diketahui. Kurva kalibrasi nitart menggunakan blanko dan larutan
standar (kerja) nitrat 0.2 ppm, 0.4 ppm, 0.6 ppm, 0.8 ppm, 1.6 ppm,
2 ppm. Adapun kurva kalibrasi yang didapatkan dari larutan
standar (kerja) ialah sebagai berikut
75
Gambar 2. Kurva Kalibrasi Analisa Kadar Nitrat
3) Uji Warna Secara Visual
Cara uji warna ini digunakan untuk menentukan warna air
secara visual. Pengujian ini dilakukan terhadap contoh uji air
dengan warna tidak lebih dari 70 satuan unit Pt-Co, dilakukan
pengenceran langsung pada tabung nessler (Haris, 2005).
Warna alami dari air yang dapat disebabkan oleh adanya ion
logam (besi dan mangan), humus, plankton, tumbuhan air dan
dinyatakan dalam satuan warna unit Pt-Co, pengamatan ini
dilakukan dengan menggunakan mata (Haris, 2005).
Prinsip dari uji warna secara visual yaitu membandingkan warna
dari contoh uji dengan warna larutan baku yaitu larutan platina
kobal dengan mata.
Adapun alat-alat yang digunakan pada uji warna secara visual
yaitu tabung nessler, rak tabung, pipet skala, karet penghisap, labu
ukur, kertas saring, corong pemisah dan tisu.
Adapun bahan-bahan yang digunakan pada uji warna secara
visual yaitu kaliumheksakloroplatinat (K2PtCl6), kobalt klorida
(CaCl3.6H2O), HCl pekat dan aquadem.
Adapun cara pembuatan larutan induk warna 500 unit Pt.co
sebanyak 100 ml sebagai berikut.larutkan 1,1246 gr K2PtCl6 dan
0,100 gr CaCl3.6H2O dengan 10 ml HCl pekat kedalam labu ukur
100 ml dan encerkan dengan air bebas mineral hingga 100 ml.
larutan induk ini mempunyai warna 500 unit Pt.co.
76
Adapun cara pembuatan larutan standar dari uji warna secara
visual adalah sebagai berikut.
Tabel 3. Pembuatan larutan standar uji warna secara visual
500 Pt.Co Aquadem

Pt.Co
(ml) (ml)
5 Pt.Co 0,5 45,5
7,5 Pt.Co 0,75 49,25
10 Pt.Co 1,0 49
12,5 Pt.Co 1,25 48,75
15 Pt.Co 1,5 48,5
17,5 Pt.Co 1,75 48,25
20 Pt.Co 2,0 48
Masukkan kedalam tabung nessler
Adapun cara penetapan contoh uji (sampel) yaitu sebagai berikut.

a. Masukkan 50 ml sampel kedalam tabung nessler.
b. Tempatkan tabung nessler pada alas yang berwarna putih
c. Bandingkan warna sampel secara visual dengan larutan baku
(standar) yang paling mendekati atau berada diantara dua skala
larutan baku.
d. Apabila warna lebih dari 70 Pt.Co, dilakukan pengenceran
langsung pada tabung nessler.
C. Pemeriksaan Toksikologi
1) Uji Analisa Kadar Pestisida
77
Pestisida adalah bahan yang digunakan untuk mengendalikan,
menolak, memikat, atau membasmi organisme pengganggu. Nama
ini berasal dari pest ("hama") yang diberi akhiran cide
("pembasmi"). Sasarannya bermacam-macam, seperti serangga,
tikus, gulma, burung, mamalia, ikan, atau mikrobia yang dianggap
mengganggu. Pestisida biasanya, tapi tak selalu, beracun. dalam
bahasa sehari-hari, pestisida seringkali disebut sebagai "racun".
Tergantung dari sasarannya, pestisida dapat berupa insektisida
(serangga) fungisida (fungi/jamur) rodentisida (hewan
pengerat/Rodentia) herbisida (gulma) akarisida (tungau) bakterisida
(bakteri) (Novizan. 2002).
Formulasi pestisida, dimana bahan terpenting yang bekerja aktif
dalam pestisida terhadap hama sasaran dinamakan bahan aktif
(Active ingridient atau bahan tehnis). Dalam pembuatan pestisida di
pabrik (manufacturing plant), bahan aktif tersebut tidak dibuat
secara murni, tetapi dicampur sedikit dengan bahan-bahan
pembawa lainnya. Bahan aktif dengan kadar bahan aktif yang
tinggi tersebut tidak dapatdigunakan sebelum diubah bentuk dan
sifat fisiknya dan dicampur dengan bahan lainnya. Pencampuran ini
dilakukan agar bahan aktif tersebut mudah disimpan, diangkut dan
dapat digunakan dengan aman, efektif dan ekonomis. Produk jadi
yang merupakan campuran fisik antara bahan aktif dan bahan
tambahan yang tidak aktif (inert ingridient) dinamakan formulasi
(formulated product).
78
Formulasi sangat menentukan bagaimana pestisida dengan
bentuk dan komposisi tertentu harus dipergunakan, berapa dosis
atau takaran yang harus dipakai, berapa frekuensi dan interfal
penggunaan, serta terhadap sasaran apa pestisida dengan formulasi
tersebut dapat digunakan dengan efektif. Untuk keamanan distribusi
dan penggunaannya pestisida diedarkan dalam beberapa macam
formulasi, yaitu sebagai berikut (Kemenkes, 2012).
Prinsip kerja dalam analisa kadar pestisida yaitu residu pestisida
golongan organuklorin dan organufosfat yang terdapat dalam bahan
control, air diekstraksi dengan dietil eter-heksanal pestisida
golongan karbonat diekstraksi dengan metal klorida.
Adapun alat-alat yang digunakan dalam pestisida adalah corong
pisah dan gelas ukur. Adapun bahan yang digunakan dalam
pestisida serbuk natrium sulfat anhidrat, Dietil eter ideksan 15%,
metal klorida.
Adapun langkah kerja dari penetapan kadar pestisida sebagai

berikut:
a Ukur 1 L bahan , masukan kedalam corong pisah.
b Tambahkan 25-50 mL dietil eter heksan dan 100 gram natrium
sulfat.
c Ekstraksi dengan menghomogenkan larutan selama 2 menit
biarkan terpisah.
d Ulangi ekstraksi larutan dengan masukan 50 mL dietil eter-
heksan.
79
2) Uji Analisa Kadar Clorida (Cl)
Peraturan Menteri Kesehatan RI (Republik Indonesia) nomor
492/Menkes/IV/2010 menyatakan bahwa air minum yang sehat
harus memenuhi persyaratan fisik, kimia, dan mikrobiologi.
Beberapa persyaratan tersebut antara lain air harus jernih atau tidak
keruh, tidak berwarna, rasanya tawar, pH netral, tidak mengandung
zat kimia beracun, kesadahannya rendah, dan tidak boleh
mengandung bakteri patogen seperti Escherichia coli.
Berdasarkan peraturan tersebut jelas disebutkan bahwa salah
satu syarat yang harus dipenuhi dalam kualitas air minum dengan
parameter kimia adalah Cl-. Kadar Clorida maksimum Menurut
Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor
492/MENKES/PER/IV/2010, batas maksimal kadar klorida dalam
air minum adalah 250 mg/L (Permenkes, 2010).
Klor merupakan unsur yang di serap dalam bentuk ion Cl -oleh
akar tanaman dan dapat di serap pula berupa gas atau larutan ole
bagian atas tanaman, misalnya daun. Kadar, Cl- yang terbaik pada
tanaman sekitar 2000-20.000 ppm berat tanaman kering. Kadar Cl-
yang terbaik pada tanaman adalah anatara 340-1200 ppm dan
dianggap masih dalam kisaran hara mikro.
Klor dalam tanah tidak diikat oleh mineral, sehingga sangat
mobil dan mudah tercuci oleh air dranaise. Sumber Cl- Sering
berasal dari air hujan. Oleh karena itu, hara Cl- kebanyakan bukan
menimbulkan defisiensi, tetapi justru menibulkan masalah
80
keracunana tanaman. Klor berfungsi sebagai pemindah hara
tanaman, meningkatkan osmosis sel, mencegah kehilangan air yang
tidak seimbang.
Anion klorida (Cl-) merupakan anion anorganik yang terdapat
dalam sampel perairan yang jumlahnya lebih banyak daripada
anion-anion halogen yang lain. Ion klorida Cl- dalam larutan bisa
dalam senyawa natirum klorida, kalium klorida, kalsium klorida
Kelebihan ion klorida dalam air minum dapat merusak ginjal. Akan
tetapi, kekurangan ion klorida dalam tubuh juga dapat menurunkan
tekanan osmotik cairan ekstraseluler yang menyebabkan
meningkatnya suhu tubuh (Ngibad K. dan Herawati D 2019 ).
Adapun langkah kerja dari penetapan kadar Klorida pada Air
ialah sebagai berikut:
Prinsip :
AgNO3 + Cl- → AgCl (s) + NO3-
(Endapan putih)
Saat setelah titik ekuivalen:

AgNO3 + K2CrO4 → Ag2CrO4(s) + NO3-
(Endapan merah bata)
Adapun cara kerjanya sebagai berikut :
a Diukur sampel air 50 ml diamasukkan kedalam Erlenmeyer.
b Ditamabahkan K2CrO4 50% 0,5 -1 ml.
c Dihomogenkan.
d Di titrasi dengan AgNO4 yang di standarisasi sampai terjadi
perubahan warna dari kunig muda menjadi merah batas.
81
e Lakukan perlakuan yang sama dengan balanko.
f Catat volume titran yang keluar kemudian hitung
menggunakan rumus berikut:
mg Cl/l =
( V . titrasi sampel – V . titrasi Blanko ) x NAgNO 3× 35450
V
Analisa kadar klorida air dilakukan menggunakan titrasi
argentometri metode Mohr. Metode Mohr dapat digunakan untuk
menetapkan kadar klorida dalam suasana netral dengan larutan
standar AgNO3 dan penambahan K2CrO4 sebagai indikator.
Titrasi ini dilakukan dalam suasana netral atau dengan sedikit
alkalis, pH 6,5 – 9,0. Apabila ion klorida telah habis diendapkan
oleh ion perak, maka ion kromat akan bereaksi membentuk
endapan perak kromat yang berwarna coklat/merah bata sebagai
titik akhir titrasi.
Kadar klorida yang tinggi dapat berbahaya bagi kesehatan
diantaranya dapat bersifat merusak atau korosif pada kulit dan
peralatan, selain itu juga berpotensi merusak sistem pernafasan
manusia dan hewan.
3.11 Instalasi Mikrobiologi
Laboratorium mikrobiologi yang ada di Balai Besar Laboratorium
Klinik (BBLK) terbagi atas beberapa ruangan sesuai dengan parameter
pemeriksaanya. Yaitu terdiri dari laboratorium pemeriksaan jamur, parasit,
82
mikroba air, mikroba makanan dan minuman, mikrobiologi klinis, biologi
molekuler, dan laboratorium TB (tuberculosis).
Pemeriksaan yang paling sering dilakukan pada instalasi mikrobiologi
ialah pemeriksaan mikroba pada makanan serta minuman, dan
pemeriksaan mikrobiologi klinis.
1. Pemeriksaan mikroba pada makanan
Pemeriksaan mikroba pada makanan ini bertujuan untuk mengetahui
keadaan hygienitas makanan apakah memenuhi syarat kesehatan atau
tidak. Untuk mengidentifikasi adanya bakteripada sampel makanan
terdapat 4 tahapan yaitu tahap pra-pengayaan nonselektif untuk
menghomogenisasi sampel, tahap pengkayaan selektif, penanaman
pada media selektif, konfirmasi berdasarkan uji biokimia.
a. Tahap Pra-Pengayaan
Pada tahap ini sampel diambil secara steril dan timbang
menggunakan neraca analitik sebanyak 10 gram, lalu dimasukkan
kedalam bag Stomacher dan ditambahkan larutan Bufferd Pepton
Water (BPW) pH 7,2 sebanyak 90 ml. Larutan ini memungkinkan
untuk perbaikan sel yang rusak dan memberikan nutrisi untuk
bakteri Eschercia Coli dibandingkan bakteri yang lain. Kemudian
dihaluskan mengunakan alat Stomacher dengan kecepatan 230 rpm
selam 30 detik. Selanjutnya dipipet 1 ml sampel, dimasukkan
kedalam tabung yang berisi media E. Coli Broth (ECB) dan
diinkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu 37° C
b. Tahap Pengkayaan Selektif
83
Setelah sampel diinkubasi, maka selanjutnya melakukan tahap
pengakayaan selektif atau selective enrichment pada media B. E.
coli. Pada tahapan pengakayaan selektif ini terjadi optimalisasi
pertumbuhan E- Coli dan dihambatnya pertumbuhan bakteri-
bakteri penyerta lainnya yang dapat mengganggu pertumbuhan E-
Coli , sehingga dapat semakin meminimalkan hasil negatif palsu.
Inokulasi bakteri E- Coli dilakukan dengan mengambil 1 ujung ose
dari medi ECB kemudian distriking ke media B E. Coli, kemudian
diinkubasi selama 1 X 24 jam suhu 37C.
c. Tahap pewarnaan gram dan inokulasi pada media KIA
Pada hari selanjutnya pengamatan pada koloni yang tumbuh
pada media B.E Coli dan dilakukan pewarnaan gram pada koloni
yang terduga E. Coli. Pewarnaan gramini dilakukan untuk
memastikan apakah bakteri yang timbul adalah basil gram negative.
Setelah dipastikan dilakukan inokulasi koloni yang terduga E. Coli
tadi pada media KIA lalu diinkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu
370 C.
d. Uji Biokimia
Setelah dilakukan pengamatan pada media KIA, selanjutnya
dilakukan uji konfirmasi dengan cara uji biokimia menggunakan
media Urea, Sitrat, BEA, LIA, PAD, SIM, MR, VP, Malonat,
Media gula-gula (glukosa, laktosa, sukrosa, manitol dan maltosa).
e. Pengamatan Reaksi Uji Biokimia
84
Selanjutnya, dilakukan pengamatan reaksi pada uji biokimia
dimana ini merupakan metode yang digunakan untuk melihat
kemampuan mikroorganisme dalam memfermentasikan gula.
2. Pemeriksaan mikrobilogi klinis
a. Pewarnaan gram
Pewarnaan gram adalah pewarnaan diferensial yang sangat
berguna dan paling banyak digunakan dalam laboratorium
mikrobiologi, karena merupakan tahapan penting dalam langkah
awal identifikasi pewarnaan ini didasarkan pada tebal atau tipsnya
lapisan lemak pada membrane sel bakteri.Jenis bakteri berdasarkan
pewarnaan gram dibagi menjadi dua yaitu gram positif dan gram
negatif.Bakteri gram positif memiliki dinding sel yang tebal dan
membrane sel-sel lapis. Sedangkan baktri gram negatif mempunyai
dinding sel tipis yang berada di antara dua lapis membran sel
(Karmana, 2008).
Menurut Pelczar, (2007) Bakteri gram positif yaitu bakteri yang
mempertahankan zat warna Kristal violet. Bakteri jenis ini akan
berwarna ungu di bawa mikroskop, sedangkan bakteri gram negatif
akan kehilangan zat warna Kristal violet setelah dicuci dengan
alkohol. Perbedaan klasifikasi antara kedua jenis bakteri ini
terutama didasarkan pada perbedaan struktur dinding sel bakteri.
Menurut Fitria, (2009) bakteri gram negatif memiliki 3 lapisan
dinding sel. Lapisan terluar yaitu lipopolisakarida (lipid)
kemungkinan tercuci oleh alkohol, sehingga pada saat diwarnai
85
dengan safranin akan berwarna merah. Bakteri gram positif
memiliki sel lapis dinding sel berupa peptidoglikan yang tebal.
Setelah pewarnaan dengan Kristal violet, pori-pori dinding sel akan
menyempit oleh alkohol sehingga dinding sel tetap berwarna biru.
Prosedur kerja pewarnaan gram yaitu : dibuat preparat
berbentuk ovale keringkan, lewatkan diatas api sebanyak 3 kali.
Rendam preparat tersebut dengan larutan Kristal violet selama 1
menit perendaman ini dilakukan untuk memberi warna pada
mikroorganisme target, kristal violet bersifat basa sehingga mampu
berikatan dengan sel mikroorganisme yang bersifat asam.
Kemudian bilas dengan air mengalir dan rendam preparat tersebut
dengan larutan lugol selama 1 menit. Pemberian lugol pada
pengecetan gram bertujuan untuk memperkuat pengikatan warna
oleh bakteri. Di bilas dengan air mengalir dan ditetesi alkohol 96%
selama 10-20 detik bilas dengan air kemudian tambahkan larutan
safranin selama 10 detik untuk memberikan warna pada
mikroorganisme non target, kemudian bilas dengan air mengalir
dan keringkan.
b. Uji kultur
Vitek 2 Compact merupakan sistem identifikasi otomatis untuk
mikroorganisme. Alat ini digunakan untuk mengidentifikasi jenis
bakteri dan uji antibiotik dalam waktu 4 jam. Seluruh proses
penanaman (inokulasi), inkubasi, validasi dan penafsiran
(interpretasi) hasil akan dilakukan secara otomatis oleh alat.
86
Bahkan pemeriksaan yang sudah selesai dapat mengeluarkan hasil
rekam cetak (print-out) secara otomatis, sedangkan kartu
ID/AST(Identification/ Antimicroba Sensitivity Test) oleh
sistemnya secara otomatis akan dibuang ke tempat sampah. Hasil
pemeriksaan ini juga dapat langsung terhubungkan (koneksi)
dengan LIS (Laboratory Information System).Di samping kartu
Vitek-2 dan larutan salin steril tidak ada lagi zat pereaksi
(reagensia) tambahan yang diperlukan. (Prihatini, 2007)
Kartu Vitek-2 terdiri atas 2 jenis kartu, kartu ID untuk
pengenalian (identifikasi) dan kartu AST untuk uji kepekaan
(sensitifitas) antibiotik.Setiap kartu dilengkapi dengan angka sandi
batang (barcode). (Prihatini, 2007)
Adapun prosedur keraja dari alat Vitek-2 sesuai dengan Standar
Operasional Prosedur (SOP)
1. Persiapan alat
Hidupkan sistem Vitek 2 compact: Tekan tombol ON pada
conditioner, UPS, dan komputer. Masukkan user name dan
password, selama beberapa menit awal instrumen dinyalakan
akan berada pada status Warming. Tunggu instrumen hingga
menunjukkan status OK
2. Persiapan Sampel
Gunakan isolate bakteri yang muda dan koloni murni,
siapkan masing-masing 2 tabung untuk setiap isolate. Setiap
tabung diisi dengan 3 ml larutan NaCl 0,45 %. Ambil koloni
87
bakteri, buat suspense larutan NaCl dan homogenisasi. Untuk
kekeruhan inokulum dengan menggunakan alat Densicheck
dengan cara : tabung inokulum yang akan diukur dibersihkan
terlebih dahulu pada bagian luarnya dengan tissue, masukkan
tabung ke lubang pengukuran pada Densicheck, putar 360º
selama 2 detik. Angka hasil pengukuran akan muncul dalam
satuan McFarland. Bakteri Gram negative dan positif = 0,5 –
0,63 McFarland. Yeast = 1,8 – 2,2 McFarland. Jika kekeruhan
kurang maka tambahkan koloni bakteri, jika kekeruhan berlebih,
maka ambil sejumlah volume inokulum dan encerkan dengan
menambahkan larutan NaCl.
Untuk tes sensitivitas antibiotik ambil 145 µl untuk bakteri
gram negative atau 280 µl untuk bakteri gram positif dari tabung
inokulum pertama ke tabung kedua dengan menggunakan
mikropipet dan tip yang steril. Susun tabung pertama untuk
identifikasi kemudian tabung kedua untuk tes sensitivitas
antibiotik pada cassette. Letakkan kartu Vitek 2, sesuai dengan
urutan untuk identifikasi dan untuk sensitivitas antibiotik.
3. Memasukan data
Masukan informasi pasien yaitu lab ID, nama pasien, tipe
sampel (specimen), kemudian tekan OK.
4. Masukan keruang pengisian dan incubator
a) Masukkan cassette ke ruang pengisian Tekan “START
FILL”
88
b) Pengisian akan memerlukan waktu beberapa menit
c) Jika selesai, maka alarm berbunyi, tanda incubator akan
berkedip-kedip dan cassette segera dipindahkan ke
incubator
d) Jika selesai, maka alarm berbunyi, tanda incubator akan
berkedip-kedip dan cassette harus segera dikeluarkan
e) Proses incubator akan berlangung beberapa jam dan hasil
akan tercetak secara otomatis.
3. Pemeriksaan TB ( Tuberculosis)
Pemeriksaan Tuberkulosis (TB atau TBC) bertujuan untuk
mengetahui adaya bakteri Mycobacterium tuberculosis dan untuk
mengetahui adanya resistensi dan sensitifitas bakteri Mycobacterium.
Penyakit tuberculosis (TB) merupakan penakit infekksi yang lebih
sering mengifeksi organ paru-paru dibandingkan bagian tubuh lainya
dan penularanya melalui udara, sehingga diperlukan fasilitas pelayanan
laboratorium sesuai dengan standar. Laboratorium TB melayani
pemeriksaan TB yang mencakup pengamatan mikroskopis, kultur dan
Genexpert (Departemen Mikrobiologi FKUI, 2009).
a. Pengamatan mikroskopis
Lebih dari 90% penderita tuberculosis berada di negara dengan
tingkat pendapatan menengah dan rendah. Strategi Direct Observed
Treatmeant Short-course (DOTS) memfokuskan pada penemuan
kasus secara pasif untuk pasien BTA positif. Bagi pasien yang
datang ke pelayanan kesehatan dengan gejala batuk lebih dari 2-3
89
minggu , dahak diperiksa tiga kali (sewaktu pagi sewaktu/SPS)
untuk pemeriksaan mikroskopis Genexpert (Departemen
Mikrobiologi FKUI, 2009).
Diagnosis tuberculosis di negara ini terutama mengandalkan
pengenalian kuman (basil) tahan asam di dahak dengan metode
mengecat menurut Ziehl Neelsen (ZN) dan diamati menggunakan
mikroskop atau serng dikatakan pengamatn secara mikroskopis.
Pengamatan secara mikroskopis bertujuan untuk mendeteksi
BTA yang merupakan ciri-ciri bakteri Mycobacterium
tuberculoisis. Pemeriksaan BTA secara mikroskopis menggunakan
alat dan bahan yaitu, kaca sediaan yag baru, bersih jangan
menggunakan kaca objek yang bekas karena akan mempengaruhi
hasil, lidi atau batang bamboo dengan ujung berserabut, lampu
spritus, wadah pembuangan berisi desnfektan, wadah pembuangan
untuk aplikator wadah, dan reagen untuk pewarnaan ZN yaitu
carbolfuchsin 1%, asam alkohol 3% , dan metyhlen blue 0,1%.
Bahan pemeriksaan dibuat sediaan pada obyek glass yang baru dan
bersih. Selanjutnya ambil sampel dahak pada bagian yang purulent
dengan lidi apuskan dhak diatas kaca sedian pada permukaan yang
sama dengan nomor identitas. Apusan dibentuk oval 2x3 cm
kemduain ratakan dengan gerakan spiral kecil-kecil, jangan
membuat gerakan spiral bila sediaan sudah kering karena akan
menyebabkan aerosol, keringkan di dalam suhu kamar, dan lidi
langsung dibuang ke dalam wadah yang berisi desinfektan.
90
Sediaan yang sudah kering difiksasi dan dilakukan pengecatan
Ziehl Neelsen Setelah dicuci dan kering diperiksa di bawah
mikroskop 1000 X dengan bantuan oil emersi Basil Tahan Asam
(BTA) akan tampak bentuk batang, lurus atau bengkok,
sendirisendiri atau bergerombol, berwarna merah diatas dasar biru,
kemudian dibaca menurut skala IUAT (International Unit Againt
Tuberculosis) (Kemenkes, 2012).
b. Pewarnaan Ziehl Neelsen (ZN)
Pewarnaan Ziehl Neelsen (ZN) merupakan teknik pewarnaan
yang digunakan untuk mewarnai golongan Mycobacterium
(Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae). Carap
pewarnaan Ziehl Neelsen (ZN) yaitu, letakan sediaan diatas rak
dengan jarak 1 jari, selanjutnya diteteskan larutan carbolfuchsin
1% hingga menutupi seluruh permukaan sediaan, panaskan sediaan
dengan sulut api sampai keluar uap, dinginkan selama 10 menit.
Bilas sediaan secara perlahan dengan air mengalir, kemudian
buang sisa air pada sediaan, tuang asam alkohol 3% pada sediaan
biarkan selama 3 menit , lalu bilas dengan air sampai bersih, bila
masih tampak warna merah lakukan decolorisasi ulang selama 1
menit,tujuan dilakukan decolorisasi yaitu untuk melunturkan zat
warna yang tersisa., selanjutnya tuang metylen blue 0,1% hingga
menutupi seluruh sediaan dan biarkan selama 1 menit. Bilas
dengan air mengalir , keringkan sediaan pada rak pengering lalu
diamati dibawah mikroskop (Kemenkes,2012).
91
Tabel 2.1 Interpretasi Hasil Untuk Pemeriksaan Secara
Mikroskopis
Menurut penelitan kepekaan mikroskopis BTA mencapai
83,8% . spesimen dengan hasil BTA negative tetapi menunjukan
hasil kultur TB positif hal ini dikarenakan untuk mendapatkan
hasil mikroskopis BTA positif memerlukan sedikitnya 10.000
kuman per mL dahak, sedangkan kultur memerlukan sedikit
mikobakteria yaitu 10-1000 kuman per mL dahak. BTA yang
tampak pada sampel sebaiknya dipertimbangkan sebagai dugaan
tuberculosis, karena dilakukan dengan teknik pengecatan yang
tidak khusus untuk mengenali Mycobacterium Tuberculosis.
Kejadian positif palsu mikroskopis BTA sangat rendah jika
dilakukan dengan kendali mutu yang baik (Raisuli dkk, 2017).
Pemeriksaan mikroskopis BTA ini relative murah, mudah dan
dapat diterapkan secara luas, cara pemeriksaan mikroskopis ni
banyak keterbatasan beberapa penelitian menunjukan kepekaan
beragam antara 20-80%. Disamping itu kepekaan pemeriksaan
mikroskopis juga rendah di kasus dengan jumlah bakteri yang
92
sedikit , seperti si dikasus anak dan koinfeksi Human
immunodeficiency Virus (HIV)-TB. Hal lain yang menambah
permasalahan adalah mutu hasil pemeriksaan mikroskopis. BTA
sangat bergantung beban kerja, keterampilan dan teknisi yang
membaca slide (Raisulli dkk, 2017).
a. Pemeriksaan secara Kultur Media
Untuk kultur bakteri Mycobacterium tuberculosis biasanya
menggunakan kultur media padat dan media cair. Untuk kultur
media padat digunakan media Louwenstein – Jensen dan media
cair menggunakan media Mycobacterium Growth Indicator
Tube (MGIT).
Menurut Anisful dkk (2015), Media LJ yaitu media yang
berbasis telur yang digabungkan dengan penggunaan elektrolit
malachite green direkomendasikan sebagi isolasi kultur dan
kerentanan terhadap obat.. Cara kultur merupakan cara yang
paling sensitif untuk mendiagnosis tuberkulosis terutama untuk
dahak yang sedikit bakterinya dan sulit ditemukan dengan cara
mikroskopis dan Pembiakan juga penting untuk dapat
melakukan tes kepekaan bakteri terhadap obat-
obatan.Pemeriksaan kultur dikatakan sebagai pemeriksaan gold
standar, hambatannya adalah waktu yag cukup lama untuk
menunggu pertumbuhan yaitu mencapai 6 minggu dan sring
memberiksan hasil yang negative untuk kasus paucibacillary.
93
Sebelum dilakukan kultur harus didekontaminasi dahulu
dengan NaOH 6%, Na Citrat 2,9 % dan NaLC 4 %.Tujuannya
adalah untuk mencernakan sputum sehingga BTA yang
terperangkap dapat lepas dari jaringan pada sputum.
Selanjutnya di fortex dan didiamkan 15 menit ditambahkan
larutan PBS pH 6,8 sampai dengan 45 ml selanjutnya
disentrifuge 3000 g Selama 15 menit buang supernatan
kemudian tambahkan larutan PBS pH 6,8 1 ml tujuanya yaitu
untuk mempertahakan konstan pH. Pada media padat
dimasukan 2-3 tetes sedangkan pada media cair ditambahkan
500 ul (Kemenkes RI,2012).
Pada media cair, tabung dimasukan dalam rak khusus dan
dimasukan kedalam mesin MGIT. Hasil pemeriksaan
didapatkan dari mesin setelah 5-19 hari. Mesin MGIT akan
mengeluarkan sinyal merah jika ada yang positif. Kultur pada
media padat dianggap negatif apabila tidak ada pertumbuhan
sampai akhir pengamatan yaitu 8 minggu dan jika ada
pertmbuhan koloni yang berwarna kuning susu atau krem,
bergerombol seperti bunga kol berarti kultur dianggap positif
(Yuni, 2008).
94
Tabel 2.2 Pembacaan Hasil Biakan Media Padat (LJ)
b. Pemeriksaan menggunakan GeneXpert
Teknik GeneXpert MTB/RIF merupakan pemeriksaan
molekuler secara automatis untuk mendeteksi M.tuberculosis
dan sekaligus mendeteksi resistensi M. tuberculosis terhadap
rifampisin. Pemeriksaan ini menggunakan metode heminested
real-timepolymerase chain reaction (PCR) assay untuk
mendeteksi mutasi pada regio hot spot rpoB, kemudian
diperiksa dengan beacon molecular sebagai probe. Pengujian
dilakukan pada platform GeneXpert MTB/RIF,
mengintegrasikan sampel yang akan diolah dalam cartridge
plastik sekali pakai. Cartridge ini berisi semua reagen yang
diperlukan untuk dapat melisiskan bakteri, ekstraksi asam
nukleat, amplifikasi, dan deteksi gen yang sudah diamplifikasi.
Hasil pemeriksaan dapat diperoleh dalam waktu 2 jam.
Pemeriksaan ini bersifat automatis dan tidak perlu tenaga ahli
khusus (Mukhtar Ikhsan, 2016).
95
Menurut WHO (2013) teknik/ metode geneXpert MTB/RIF
adalah suatu alat uji yang menggunakan catridge berdasarkan
Nucleic Acid Amplification Test (NAAT) secara automatis
untuk mendeteksi kasus TB dan resistensi rifampisin dan
memberikan hasil dalam waktu kurang lebih 2 jam. Uji
GeneXpert MTB/RIF berdasarkan prinsip multipleks, semi-
nested quantitative real-time PCR dengan amplifikasi gen target
rpoB dan untuk meningkatkan sensitivitas, GeneXpert
MTB/RIF menggunakan molecular beacon.
PCR adalah suatu metode in vitro untuk amplifikasi sekuen
DNA target spesifik secara enzimatik dengan menggunakan
sepasang primer oligonukleotida spesifik yang terdapat pada
dua daerah (region) yang sekuennya telah diketahui. PCR
ditemukan pertama kali oleh Kary Mullistahun 1983 dan telah
digunakan secara luas dalam bidang biologi molekuler genetika
molekuler, diagnosis kedokteran, dan kedokteran forensik. Pada
dasarnya reaksi PCR mengambil prinsip replikasi DNA, yaitu
pembukaan untai ganda, penempelan primer, dan perpanjangan
rantai DNA baru oleh DNA polimerase dari arah 5’ ke 3’.
Hanya saja pada metode PCR, tidak digunakan enzim ligase
dan primer RNA (Mukhtar Ikhsan, 2016).
Proses PCR merupakan suatu rangkaian siklus temperatur
yang terjadi secara berulang. Satu siklus PCR terdiri 3 tahap,
yaitu: denaturasi, annealing, dan ekstension. Denaturasi adalah
96
proses pemisahan satu untai ganda DNA menjadi dua untai
tunggal DNA. DNA untai tunggal ini, berperan sebagai cetakan
(template), tempat penempelan primer, dan tempat kerja DNA
polimerase. Pemisahan untai ganda DNA, dapat terjadi melalui
proses pemanasan yang umumnya dilakukan pada suhu 90-
95ºC selama 30 detik. Selanjutnya pada tahap annealing suhu
reaksi diturunkan menjadi –50ºC selama 30-60 detik, untuk
penempelan primer oligonukleotida pada sekuens yang
komplementer pada molekul DNA cetakan. Tahap ketiga dalam
siklus PCR adalah ekstension yang dilakukan pada suhu 72ºC,
yang merupakan suhu optimum untuk kerja enzim Tag DNA
polimerase. Proses ini berlangsung selama lebih kurang 1,5
menit. Ekstensien merupakan proses pemanjangan primer
membentuk sekuen DNA yang komplementer dengan DNA
cetakan. Ketiga tahap tersebut berlangsung selama beberapa
kali sampai tingkat amplifikasi yang diinginkan. Pada
umumnya amplifikasi berlangsung sebanyak 25-40 siklus,
bergantung pada jumlah DNA yang diinginkan (Mukhtar
Ikhsan, 2016).
1. Prinsip Kerja
Perangkat ini bekerja dengan metode real time PCR yaitu
dengan menyederhanakan pengujian molekuler,
mengintegrasikan dan mengotomatis 3 proses berupa
persiapan sampel, amplifikasi dan deteksi. Perangkat ini
97
menggunakan catridge, reagen atau pereaksi, cairan buffer
dan pembersih. Kemudian hasil pengujian akan dideteksi
dengan menggunakan laser enam warna (Zulfiana amalia,
2017).
System ini terdiri atas mesin GeneXpert, computer dan
perangkat lunak. Setiap pemeriksaan menggunakan catridge
sekali pakai dan dirancang untuk meminimalkan kontaminasi
silang. Pemeriksaan GeneXpert MTB/RIF dapat mendeteksi
MTB kompleks dan resistensi terhadap rifampisin secara
silmultan dengan mengaplifikasi sekuen spesifik gen rpoB
dari MTB kompleks menggunakan lima probe molecular
beacons (probe A-E) untuk mendeteksi mutase pada daerah
gen rpoB (Zulfiana amalia, 2017).
Untuk pemeriksaan GeneXpert MTB/RIF menggunakan
catridge yang berisi semua elemen yang di butuhkan untuk
reaksi, meliputi liquid buffer, reagen lyophilized, dan wash
solution. Alat ini bekerja dengan cara menangkap bakteri
setelah proses pencucian kemudian DNA bebas dan masuk
ke tempat pembuangan. GeneXpert MTB/RIF dirancang
menggunakan system tertutup dengan tujuan untuk
mengurangi atau mengeliminasi resiko kontaminasi
amplikon. Sebelum melakukan pemeriksaan perlu di lakukan
pengolahan specimen dahak yaitu memberi label identifikasi
pada setiap catridge, kemudian buka penutup dahak dan
98
tambahkan sampel buffer dengan perbandingan 1 bagian
volume sampel dan 2 bagian volume sampel buffer yang
tersedia, lalu tutup kembali pot dahak, kemudian kocok
dengan kuat sampai campuran dahak dan sampel buffer
menjadi homogeny, kemudian diamkan selama 10 menit
pada suhu ruang, bila masih ada gumpalan, kocok kembali
agar campuran dan biakan selama 5 menit pada suhu kamar,
lalu buka penutup catridge dan pot dahak, gunakan pipet
yang disediakan untuk memindahkan spesimen dahak yang
telah diolah sebanyak 2 ml (sampai garis batas pada pipet)
kedalam catridge selama perlahan-lahan untuk mencegah
terjadinya gelembung yang bisa menyebabkan error,
kemudian tutup catridge secara perlahan dan masukkan
catridge kedalam mesin GeneXpert (Zulfiana amalia, 2017).
Hasil Interpretasi
MTB detected RIF a. DNA MTB terdeteksi
resistance detected b. Mutasi gen probe terdeteksi
kemungkinan besar resisten
terhadap rifampisin
MTB detected RIF DNA MTB mendeteksi mutase gen
resistance not detected probe tidak terdeteksi kemungkinan
besar sensitif terhadap rifampisin
MTB detected RIF DNA MTB terdeteksi mutasi gen
resistance indeterminate probe/ resistensi rifampisin tidak
99
dapat ditemukan karena sinyal
penanda resistensi tidak cukup
terdeteksi
MTB not detected DNA MTB tidak terdeteksi
Invalid Keberadaan DNA MTB tidak dapat
di temukan karena kurva SPC tidak
menunjukkan kenaikan amplikon,
proses sampel tidak benar reaksi
PCR terhambat
Error Keberadaan DNA MTB tidak dapat
di temukan Quality control internal
gagal atau terjadi kegagalan sampel
No result Keberadaan DNA MTB tidak dapat
ditemukan karena data reaksi PCR
tidak mencukupi.
Tabel 2.3 Interpretasi Hasil Untuk Pemeriksaan
menggunakan GeneXpert.
4. Pemeriksaan Mikroba Air
Pemeriksaan air merupakan salah satu pemeriksaan yang sangat penting
dilakukan. Dalam air biasanya terdapat mikroba yang dapat bersifat
pathogen atau membahayakan mahluk hidup. Mikroba yag biasanya
terdapat dalam air yaitu bakteri Coliform dan E. coli. Maka dari itu
pemeriksaan air bertujuan untuk menilai kualitas dari air tersebut.
100
Bakteri coliform merupakan golongan mikroorganisme yang lazim
digunakan sebagai indikator, di mana bakteri ini dapat menjadi sinyal
untuk menentukan suatu sumber air telah terkontaminasi oleh patogen atau
tidak. Berdasarkan penelitian, bakteri Coliform ini menghasilkan zat
etionin yang dapat menyebabkan kanker. Selain itu, bakteri pembusuk ini
juga memproduksi bermacam-macam racun seperti indol dan skatol yang
dapat menimbulkan penyakit bila jumlahnya berlebih di dalam tubuh
(Pracoyo, 2006).
Ciri-ciri bakteri coliform antara lain bersifat aerob atau anaerob
fakultatif, termasuk ke dalam bakteri gram negatif, tidak membentuk
spora, dan dapat memfermentasi laktosa untuk menghasilkan asam dan
gas pada suhu 35°C-37°C. Contoh bakteri coliform antara lain Escherichia
coli, Salmonella spp., Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, dan lain-lain
(Hajna, 1943).
Adanya bakteri coliform di dalam makanan atau minuman menunjukan
kemungkinan adanya mikroorganisme yang bersifat enteropatogenik dan
atau toksigenik yang berbahaya bagi kesehatan. Bakteri coliform dapat di
bedakan menjadi dua golongan yaitu ;
1. Bakteri coliform golongan fekal misalnya Escherichia coli
2. Bakteri coliform golongan non fekal.misalnya Enterobakter aerogenes
E. coli merupakan bakteri yang berasal dari kotoran hewan maupun
manusia sedangkan E.aerogenes Biasanya di temukan pada hewan atau
tanaman-tanaman yang telah mati. Coliform fekal (kadang-kadang
coliform feses atau fecl coliform) adalah, bakteri fakultatif-anaerob
101
berbentuk batang, gram negatif, dan non-sporulasi. Coliform fekal mampu
tumbuh dan menghasilkan asam dan gas dari laktosa dalam waktu 48 jam
di 44 ± 0,5 º C. Fekal Coliform, seperti bakteri lainnya, biasanya dapat
dihambat pertumbuhannya dengan air mendidih atau dengan
memperlakukan dengan klorin. Mencuci bersih dengan sabun setelah
kontak dengan air yang tercemar juga dapat membantu mencegah infeksi.
Sarung tangan harus selalu dipakai ketika melakukan tes coliform fecal.
Rekomendasi EPA dan untuk suplai air rumah tangga, untuk pengobatan,
jumlah Coliform fekal kurang dari 2000 colonies/100 mL, dan untuk
Standar air minum kurang dari 1 koloni / 100 ml.
Adapun jenis pemeriksaan yang dilakukan untuk melihat adanya
keberadaan mikroba dalam air mengggunkaan metode MPN. Metode
MPN dapat digunakan untuk menghitung jumlah koloni mikroba yang
terdapat diantara campuran mikroba lainnya. Sebagai contoh, jika
digunakan Lactose Broht maka adanya bakteri yang dapat
memfermentasi lactosa ditunjukkan dengan terbentuknya gas di
dalam tabung durham. Cara ini bisa digunakan untuk menentukan
MPN Choliform terhadap air atau minuman karena bakteri Choliform
termasuk bakteri yang dapat memfermentasi laktosa. Dalam metode
MPN menghitung jumlah jasad renik biasa digunakan dalam contoh
yang berbentuk cair, Meskipun dapat pula digunakan untuk contoh
berbentuk padat dengan terlebih dahulu membentuk suspensi 1:10 dari
contoh tersebut (Waluyo, 2009).
102
a. Pemeriksaan MPN bakteri Coliform dan E. coli metode membran
filter
Metode membran filter merupakan metode dengan proses
penyaringan. Dimana metode ini akan menyaring maikroba
kontaminan melalui kertas saring yang digunakan. Adapun prinsip
dari metode ini yaitu menyaring cairan sampel melewati saringan
yang sangat tipis dan memiliki pori-pori yang lebih kecil dari ukuran
sel mikroba sehingga sel yang ada pada sampel akan terjebak pada
saringan. Sampel yang digunakan yaitu air minum. Penggunaan alat
membran filter tergantung dari permintaan pasien, apabila permintaan
pasien terdapat 2 parameter pemeriksaan yaitu pemeriksaan bakteri
Coliform dan E. coli maka digunakan alat membran filter namun jika
hanya salah satu parameter misalnya pemeriksaan bakteri Coliform
ataupun pemeriksaan bakteri E.coli maka kembali ke metode
konvennsional yaitu tabung ganda.
Setelah proses filtrasi, kertas saring diletakkan pada media CCA
(Chromocult Coliform Agar) dimana merupakan media selektif untuk
perhitungan bakteri Coliform dan E. coli dalam air menggunakan
metode filtrasi membran dengan waktu inkubasi 24 jam. Cara
pembacaan hasil utuk metode ini yaitu setelah media CCA diinkubasi
selama 24 jam akan terbentuk koloni pada media dimana koloni untuk
bakteri coliform akan berwarna ungu sedangkan koloni untuk bakteri
E. coli akan berwarna biru dan dilakukan perhitungan jumlah koloni
secara manual.
103
Keuntungan metode membran filter ialah mempunyai proses yang
lebih cepat, hanya membutuhkan beberapa tahap dan media, lebih
murah dibandingkan metode MTF, lebih mudah dibawa-bawa
perlengkapannya, dan dapat memproses jumlah air yang lebih besar.
kerugiannya ialah air yang memiliki kekeruhan yang tinggi membatasi
volume sampel, populasi yang tinggi dari dasar bakteri menyebabkan
pertumbuhan terlalu cepat, metal dan fenol dapat diadsorb ke dalam
filter sehingga dapat menghambat pertumbuhan bakteri (Prescott dkk.
2002).
b. Pemeriksaan MPN bakteri Coliform dan E. coli metode enzimatik
Pemeriksaan dengan metode enzimatik mengggunakan senyawa
atau enzim ONPG dan MUG. Jika uji positif coliform, senyawa
ONPG akan berubah menjadi kuning karena terjadi hidrolisis terhadap
senyawa ONPG. Kemudian senyawa MUG akan mengeluarkan warna
biru yang berpendar pada sinar UV apabila dalam air positif terdapat
E. coli.
Cara pemeriksaan menggunakan metode ini yaitu mengukur
sampel 100 ml kemudian ditambahkan coliert sebagai pengganti
media. Dihomogenkan lalu dimasukkan kedalam cetakan. Ctakan
yang sudah berisi sampel diletakkan pada alat quanty tray sealer. Lalu
inkubasi selama 24 jam.
Pemeriksaan MPN bakteri Coliform dan E. coli metode enzimatik
menggunakan alat quanty tray sealer. Alat ini memiliki dua cetakan
yaitu cetakan berwarna merah dengan jumlah tabel, 49 tabel atas dan
104
48 tabel bawah yang digunakan untuk pemeriksaan air baku sebelum
diolah menjadi air minum sedangkan cetakan berwarna abu-abu
memiliki 51 tabel yang diggunakan untuk pemeriksaan air minum.
Kelemahan metode tersebut adalah biaya yang dikeluarkan lebih
mahal.
3.12 Instalasi Imunologi
Instalasi imunologi merupakan salah satu instalasi yang terdapat
dalam Balai Besar Laboratorium Kesehatan (BBLK) Makassar. Instalasi
Imunologi dikepalai oleh ibu Rofika S.KM dimana bertugas dalam
pelayanan pemeriksaan laboratorium untuk membatu menegakkan
diagnosa suatu penyakit yang dapat dideteksi melalui antibodi dalam tubuh
yang terbentuk akibat antigen yang masuk ataupun mendeteksi antigen itu
sendiri.
Pemeriksaan laboratorium yang dilakukan pada instalasi imunologi
berkisar 31 jenis pemeriksaan. Namun tidak semua pemeriksaan tersebut
dapat dilakukan setiap saat karena jumlah reagen yang terbatas ataupun
permintaan pemeriksaan yang kurang dilakukan. Jenis pemeriksaan yang
sering dilakukan pada intalasi imunologi ialah pemeriksaan narkoba,
HBsAg, HIV, anti streptolisin O (ASTO), C-Reaktif Protein (CRP), widal,
Free Thyroxin (FT4), Thyroid Stimulating Hormone (TSH), golongan
darah dan Treponema Palidium Hemaaglutinasi Assay (TPHA) sampel
yang digunakan diimunologi ialah sampel darah, serum dan urine.
105
Pembahasan
1. Pemeriksaan Widal
Salmonella adalah suatu genus bakteri enterobakteria gram-negatif
berbentuk batang. Morfologi Salmonella typhosa berbentuk batang,
tidak berspora dan tidak bersimpai tetapi mempunyai flagel feritrik
(fimbrae), pada pewarnaan gram bersifat gram negatif, ukuran 2-4
mikrometer x 0.5 - 0.8 mikrometer dan bergerak, pada biakan agar
darah, koloninya besar bergaris tengah 2 sampai 3 millimeter, bulat,
agak cembung, jernih, licin dan tidak menyebabkan hemolisis. Tumbuh
pada suasana aerob dan fakultatif anaerob, pada suhu 15 - 41oC (suhu
pertumbuhan optimum 37 oC) dan pH pertumbuhan 6 - 8. Salmonella
sp. yang hanya menginfeksi manusia, diantaranya S. typhii, S.
paratyphi A, S. paratyphi C. Kelompok ini termasuk agen yang
menyebabkan demam tifoid dan paratifoid, yang menjadi penyebab
sebagian besar serangan salmonella. Demam tifoid merupakan
penyakit sistemik yang menjadi masalah kesehatan dunia. (Sutedjo
A.Y, 2008).
Demam tifoid terjadi baik di negara tropis maupun negara
subtropis, terlebih pada negara berkembang. Besarnya angka kejadian
demam tifoid sulit ditentukan karena mempunyai gejala dengan
spectrum klinis yang luas. Insidensi demam tifoid berbeda pada tiap
daerah. Demam tifoid lebih sering menyerang anak usia 5-15 tahun.
Menurut laporan WHO tahun 2003, insidensi demam tifoid pada anak
umur 5-15 tahun di Indonesia terjadi 180,3/100.000 kasus pertahun dan
106
dengan prevalensi mencapai 61,4/1000 kasus pertahun.(Sutedjo A.Y,
2008).
Demam tifoid disebabkan oleh infeksi bakteri Salmonella enterica,
terutama serotype Salmonella thypii (S. typhii). Bakteri ini termasuk
kuman Gram negatif yang memiliki flagel, tidak berspora, motil,
berbentuk batang,berkapsul dan bersifat fakultatif anaerob dengan
karakteristik antigen O, H dan Vi. Demam merupakan keluhan dan
gejala klinis yang timbul pada semua penderita demam tifoid ini.
(Sutedjo A.Y, 2008).
Namun, pada anak manifestasi klinis demam tifoid tidak khas dan
sangat bervariasi sesuai dengan patogenesis demam tifoid. Untuk
menentukan diagnosis pasti dari penyakit ini diperlukan pemeriksaan
laboratorium. Pemeriksaan laboratorium yang dapat digunakan adalah
pemeriksaan darah tepi, pemeriksaan bakteriologis dengan isolasi dan
biakan kuman, uji serologis, dan pemeriksaan kuman secara molekuler.
Pemeriksaan laboratorium menunjukkan bahwa Demam typhoid
memiliki masa inkubasi yang paling panjang, menghasilkan suhu
badan yang tertinggi, dan memiliki angka mortalitas yang tertinggi. S.
typhii dapat di isolasi dari darah dan kadang-kadang feses dan urin
penderita yang menderita demam enterik. Sindrom paratyphoid lebih
lemah dibanding typhoid (Sutedjo A.Y, 2008).
Uji Widal ada dua macam yaitu uji Widal tabung yang
membutuhkan waktu inkubasi semalam dan uji Widal peluncuran yang
hanya membutuhkan waktu inkubasi 1 menit saja. Umumnya sekarang
107
lebih banyak digunakan uji Widal cara meluncurkan, karena
merupakan uji serologis yang cepat dan mudah dalam
melaksanakannya. Sensitivitas dan terutama spesifisitas tes ini amat
dipengaruhi oleh jenis antigen yang digunakan. Menurut beberapa
peneliti uji Widal yang menggunakan antigen yang dibuat dari jenis
strain kuman asal daerah endemis (lokal) memberikan sensitivitas dan
spesifisitas yang secara bermakna lebih tinggi daripada bila dipakai
antigen yang berasal dari strain kuman asal luar daerah endemis
(impor).
Uji Widal sampai sekarang masih digunakan secara luas terutama
di negara berkembang termasuk Indonesia. Walaupun mempunyai
banyak keterbatasan dan penafsiran uji Widal, untuk menegakkan
diagnosis demam tifoid harus hati-hati karena beberapa faktor yang
dapat mempengaruhi hasil pemeriksaannya. Yaitu antara lain keadaan
gizi, saat pemeriksaan, pengobatan antibiotica yang mendahuluinya,
daerah endemis, status imunologis, vaksinasi, penggunaan obat
imunosupresif, reaksi silang serta teknik pemeriksaan (WHO 2016
dalam Yulia. R. I dkk, 2017).
Kegunaan uji Widal untuk diagnosis demam tifoid masih
kontroversial di antara para ahli karena hasil yang berbeda-beda. Uji
Widal bernilai diagnosis yang tinggi untuk demam tifoid (94,3%),
asalkan dapat diketahui titer antibodi di orang normal dan penderita
demam nontifoid. Pang dan Puthucheary mengatakan bahwa uji Widal
masih merupakan pilihan cara yang praktis sehubungan kesulitan
108
dalam memeriksa bakteri di negara berkembang (WHO 2016 dalam
Yulia. R. I dkk, 2017).
Uji Widal masih diperlukan untuk menunjang diagnosis demam
tifoid, ambang atas titer rujukannya baik anak maupun orang dewasa
perlu ditentukan. Besar titer antibodi yang bermakna untuk diagnosis
demam tifoid di lndonesia belum terdapat kesesuaian. Dari hasil
beberapa penelitian menunjukkan bahwa kegunaan uji Widal untuk
diagnosis demam tifoid bergantung prosedur yang digunakan di
masing-masing rumah sakit atau laboratorium. Uji Widal dianggap
positif bila titer antibodi 1/160, baik untuk aglutinin O maupun H
dengan kriteria diagnostik tunggal atau gabungan. Bila dipakai kriteria
tunggal maka aglutinin O lebih bernilai diagnostik daripada aglutinin H
(Mogasale. V dkk, 2016 dalam Velina. V. R dkk, 2016).
Antibodi (immunoglobulin) adalah sekelompok lipoprotein dalam
serum darah dan cairan jaringan pada mamalia. Antibodi memiliki
lebih dari satu tempat pengkombinasian antigen. Kebanyakan antibodi
makhluk hidup mempunyai 2 tempat pengkombinasian yang disebut
bivalen. Beberapa antibodi bivalen dapat membenuk beraneka antibodi
yang mempunyai lebih dari 10 tempat pengkombinasian antigen
(Widodo. D, 2015).
Antigen adalah bahan yang asing untuk badan, terdapat dalam
manusia atau organisme multiseluler lain yang dapat menimbulkan
pembentukan antibodi terhadapnya dan dengan antibodi itu antigen
dapat bereaksi dengan khas. Sifat antigenik dapat ditentukan oleh berat
109
molekulnya. Salmonella dan jenis-jenis lainnya dalam family Entero
bacteriaceae mempunyai beberapa jenis antigen, yaitu antigen O
(somatik), H (Flagella), K (Kapsul) dan Vi (Virulen). (Widodo. D,
2015).
Prinsip dari pemeriksaan ialah adanya antibodi terhadap
Salmonella typhi dan atau paratyphi pada sampel akan bereaksi dengan
suspensi antigen salaminella pada reagen akan membentuk reaksi
aglutinasi. Dengan menggunakan metode yang dipakai pada
pemeriksaan ini adalah slide aglutinasi. Teknik aglutinasi ini dapat
dilakukan dengan menggunakan uji hapusan (slide test) atau uji tabung
(tube test). Uji hapusan dapat dilakukan secara cepat dan digunakan
dalam prosedur penapisan sedangkan uji tabung membutuhkan teknik
yang lebih rumit, tetapi dapat digunakan untuk konfirmasi hasil dari uji
hapusan.
Adapun alat yang digunakan dalam pemeriksaan widal untuk
diagnosa penyakit demam tipoid ialah mikropipet 40μl, tip kuning,
slide bening atau warna latar putih dan rotator.
Adapun bahan atau reagen yang akan digunakan dalam
pemeriksaan widal ini ialah serum, portress dimana terdapat reagen
antigen suspensi Salmonella typhi O, antigen suspensi Salmonella
typhi H, antigen suspensi Salmonella paratyphi HA dan antigen
suspensi Salmonella paratyphi HB.
Cara kerja dalam pemeriksaan widal ialah sebagai berikut :
a. Diteteskan 40μl sampel serum
110
b. 1 tetes antigen O, H, HA dan HB
c. Sebarkan dikeliling lingkaran slide
d. Letakkan diatas rotator selama 2 menit dengan kecepatan 100 rpm
e. Bila positif lakukan penegenceran sebagai berikut :
Volume Serum Titer Antibodi
80 μl 1/20
40 μl 1/40
20 μl 1/80
10 μl 1/160
5 μl 1/320
5 μl (pengenceran 2x) 1/640
Tabel II.II Pengenceran Pemeriksaan Widal

Dari cara pemeriksaan diatas telah didapatkan hasil sebagai
berikut :
ID Hasil
19001359 O: 1/80, H: 1/40, HA: Neg (-), HB: Neg (-)
19001243 O: 1/640, H: 1/320, HA: Neg (-), HB: Neg (-)
Tabel II.III Hasil Pemeriksaan Widal

Berdasarkan hasil pada ID 19001359 didapatkan titer O: 1/80
dan H: 1/40 dimana titer tersebut bisa menandakan seseorang terkena
penyakit demam tipoid. Namun pada orang yang sudah terkena
penyakit demam tipoid sebelumnya, tidak akan memberikan gejala
klinis, namun ketika imunitas turun akan memberikan gejala klinis.
111
Sedangkan pada sampel ID 19001243 didapatkan titer O: 1/640
H: 1/320 yang akan memberikan gejala klinis yang parah sehingga
perlu dilakukan pengobatan secara intensif.
2. Pemeriksaan VDRL carbon antigen
Sifilis merupakan infeksi sistemik yang disebabkan oleh
spirochaete, Treponema pallidum (T. Pallidum) dan merupakan salah
satu bentuk infeksi menular seksual. Selain sifilis, terdapat tiga jenis
infeksi lain pada manusia yang disebabkan oleh treponema, yaitu: non
venereal endemic syphilis (telah eradikasi), frambusia (T. pertenue),
dan pinta (T. careteum di Amerika Selatan). Sifilis secara umum dapat
dibedakan menjadi dua: yaitu sifilis congenital (ditularkan dari ibu ke
janin selama dalam kandungan) dan sifilis yang didapat/acquired
(ditularkan melalui hubungan seks atau jarum suntik dan produk darah
yang tercemar) (Kemenkes RI, 2013).
Menurut Kemenkes RI (2013), secara umum, tes serologi sifilis
terdiri atas dua jenis, yaitu :
1. Tes Non-Treponema
Termasuk dalam kategori ini adalah tes RPR (Rapid Plasma
Reagin) dan VDRL (Venereal Disease Research Laboratory). Tes
serologis yang termasuk dalam kelompok ini mendeteksi
imunoglobulin yang merupakan antibodi terhadap bahan-bahan lipid
sel-sel T. Pallidum yang hancur. Antibodi ini dapat timbul sebagai
reaksi terhadap infeksi sifilis. Namun antibodi ini juga dapat timbul
pada berbagai kondisi lain, yaitu pada infeksi akut (misalnya infeksi
112
virus akut) dan penyakit kronis (misalnya: penyakit otoimun kronis).
Oleh karena itu, tes ini bersifat non-spesifik, dan bisa menunjukkan
hasil positif palsu. Tes non-spesifik dipakai untuk mendeteksi infeksi
dan reinfeksi yang bersifat aktif, serta memantau keberhasilan terapi.
Karena tes non spesifik ini jauh lebih murah dibandingkan tes
spesifik treponema, maka tes ini sering dipakai untuk skrining. Jika
tes non spesifik menunjukkan hasil reaktif, selanjutnya dilakukan tes
spesifik treponema, untuk menghemat biaya.
2. Tes Spesifik Treponema
Termasuk dalam kategori ini adalah tes TPHA (Treponema
Pallidum Haemagglutination Assay), TP Rapid (Treponema
Pallidum Rapid), TP-PA (Treponema Pallidum Particle
Agglutination Assay), FTA-ABS (Fluorescent Treponemal Antibody
Absorption).
Tes serologis yang termasuk dalam kelompok ini mendeteksi
antibodi yang bersifat spesifik terhadap treponema. Oleh karena itu,
tes ini jarang memberikan hasil positif palsu.Tes ini dapat
menunjukkan hasil positif/reaktif seumur hidup walaupun terapi
sifilis telah berhasil. Tes jenis ini tidak dapat digunakan untuk
membedakan antara infeksi aktif dan infeksi yang telah diterapi
secara adekuat.Tes treponemal hanya menunjukkan bahwa seseorang
pernah terinfeksi treponema, namun tidak dapat menunjukkan
apakah seseorang sedang mengalami infeksi aktif. Tes ini juga tidak
dapat membedakan infeksi T pallidum dari infeksi treponema
113
lainnya. Anamnesis mengenai perilaku seksual, riwayat pajanan dan
riwayat perjalanan ke daerah endemis treponematosis lainnya
dibutuhkan untuk menentukan diagnosis banding.
Treponema pallidum subspesies pallidum merupakan agen
penyebab sifilis. Organisme tersebut merupakan parasit obligat bagi
manusia. Treponema pallidum berbentuk spiral, negatif - Gram
dengan panjang antara 6-20 μm dan diameter antara 0,09-0,18 μm.
Pada umumnya dijumpai 16-18 busur, yang terdiri atas membran
luar (outer sheath), ruang periplasma dengan flagel periplasma, dan
lapisan peptidoglikan. Terdapat 3 macam gerakan yaitu rotasi cepat
sepanjang aksis panjang heliks, fleksi sel, dan maju seperti gerakan
pembuka tutup botol.
Treponema pallidum dapat berenang dalam lingkungan viscous
(contohnya rongga mulut, traktus intestinal), tetapi hanya dapat
berputar dalam air karena gesekan minimal. Kontak dengan udara,
antiseptik, atau cahaya matahari akan membunuh mikroba tersebut.
Jika diletakkan di luar tubuh dalam lingkungan gelap dan lembab
hanya bertahan tidak lebih dari 2 jam. Transmisi seksual sifilis
dimungkinkan karena inokulasi pada abrasi akibat trauma seksual
yang menyebabkan respons lokal sehingga terjadi erosi, lalu ulkus.
Kejadian tersebut diikuti dengan penyebaran treponema ke kelenjar
getah bening regional dan penyebaran hematogen pada bagian lain
tubuh. Hingga kini belum sepenuhnya dimengerti bagaimana
mekanisme kuman menyerang jaringan.
114
Pemeriksaan VDRL merupakan pemeriksaan penyaring atau
Skrining Test, dimana apabila VDRL positif maka akan dilanjutkan
dengan pemeriksaan TPHA (Trophonema Phalidum
Heamaglutinasi). Pemeriksaan VDRL serum bisa memberikan hasil
negatif palsu pada tahap late sifilis dan kurang sensitif dari RPR.
Karena uji ini tidak langsung mendeteksi terhadap keberadaan
Treponema pallidum itu sendiri, maka uji ini bersifat non-spesifik.
Hasil uji serologi tergantung pada stadium penyakit misalnya pada
infeksi primer hasil pemeriksaan serologi biasanya menunnjukkan
hasil non reaktif. Hasil serologi akan menunjukan positif 1-4 minggu
setelah timbulnya chancre. Dan pada infeksi sekunder hasil serelogi
akan selalu positif dengan titer yang terus meningkat. Pasien yang
terinfeksi bakteri treponema akan membentuk antibody yang terjadi
sebagai reaksi bahan-bahan yang dilepaskan karena kerusakan sel-
sel. Andibody tersebut disebut regain.
3. Prinsip
Adanya antibodi pada serum pasien akan bereaksi dengan
antigen yang menempel pada eritrosit ayam kalkun atau domba
membentuk flokulasi (gumpalan) atau aglutinasi.
Adapun alat yang digunakan dalam pemeriksaan VDRL ialah
mikropipet 50µl dan 20 µl, tip kuning, slide kertas, rotator,
sedangkan, serum dan Fortress yang didalamnya terdapat reagen
RPR karbon antigen, RPR positif control dan RPR negatif control.
Cara kerjanya ialah sebagai berikut :
115
1. Pipet sampel serum sebanyak 50µl
2. Diteteskan pada lingkaran slide
3. Tambahkan 02µl reagen Fortress
4. Kemudian diteteskan pada lingkaran slide
5. Dan diputar pada rotator dengan kecepatan 100 rpm selama 8
menit
6. Amati ada tidaknya flokulasi
Berdasarkan cara kerja diatas didapatkan hasil negatif kerena
tidak terjadi aglutinasi yang sesuai dengan interpretasi hasil yaitu
hasil positif bila terjadi aglutinasi pada area lingkaran test dan positif
lemah jika terjadi aglutinasi kecil pada area lingkaran test sedangkan
negatif tidak terjadi aglutinasi pada area lingkaran test. Yang dapat
dikatakan pesien tidak terkena infeksi bakteri T. pallidium penyebab
penyakit sifilis.
3. Pemeriksaan Golongan Darah Metode Slide
Darah merupakan cairan tubuh yang berwarna merah dan terdapat
di dalam sistem peredaran darah tertutup dan sangat penting untuk
kelangsungan hidup manusia. Darah berfungsi memasukkan oksigen
dan bahan makanan keseluruhan tubuh serta mengambil karbon
dioksida dan metabolik dari jaringan. Mengetahui golongan darah
seseorang sangat penting diketahui untuk kepentingan medis yaitu
salah satunya untuk transfusi. (Oktari. A dan Silvia. N. D, 2016).
Secara umum darah memiliki 4 golongan yaitu: golongan darah A
dimanagolongan darah A mempunyai antigen A dan anti B,
116
golongan darah B yaitu golongan darah yang memiliki antigen B dan
anti A, golongan darah O golongandarah yang memiliki antibodi
tetapi tidak memiliki antigen, dan golongan darah AB golongan
darah yang memiliki antigen tetapi tidak memiliki antibodi
pemeriksaan golongan darah ABO dilakukan untuk menentukan
jenis golongan darah pada manusia. Penentuan golongan darah ABO
pada umumnya dengan menggunakan metode slide. Metode ini
berdasarkan pada prinsip reaksi antara antigen pada permukaan
eritrosit dengan aglutinasi yang terdapat dalam serum/plasma yang
membentuk aglutinasi atau gumpalan. Metode slide merupakan salah
satu metode yang sederhana, cepat dan mudah untuk pemeriksaan
golongan darah. (Oktari. A dan Silvia. N. D 2016).
Metode slide merupakan salah satu metode yang sederhana, cepat
dan mudah untuk pemeriksaan golongan darah. Antigen-antigen
golongan darah yang sangat penting adalah antigen A, dan B. Ciri
antigen itu berada pada ujung karbohidrat yang melekat langsung
pada dinding sel atau melekat pada rangkaian protein yang menonjol
dari hamparan bilipid. (Andriani. Y, 2015).
Serum merupakan cairan darah yang berwarna kuning. Didalam
serum terdapat dua protein yaitu albumin dan globulin. Antibodi
berada didalam serum dikarenakan Antibodi golongan darah
merupakan protein globulin, yang bertanggung jawab sebagai
kekebalan tubuh alamiah untuk melawan antigen asing. (Andriani.
Y, 2015).
117
Komposisi serum sama dengan plasma yaitu 91% air, 8% protein,
dan 0,9% mineral. Akan tetapi didalam serum tidak ada faktor
pembekuan (fibrinogen). Dikarenakan serum tidak diberi anti
koagulan, fibrinogen dapat diubah menjadi benang – benang fibrin
sehingga terjadi pembekuan darah. Dimana antikoagulan ini
mengikat kalsium sebagai faktor pembekuan sehingga fibrinogen
tidak di ubah menjadi benang-benang fibrin. (Andriani. Y, 2015).
Adapun langkah-langkah kerja dalam pemeriksaan golongan darah
dengan metode slide adalah sebagai berikut:
1. Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan.
2. Posisikan pasien senyaman mungkin.
3. Desinfeksi ujung jari yang akan di tusuk menggunakan kapas
alkohol 70%.
4. Lalu lakukan penusukan menggunakan auto clik.
5. Tetesan darah pertama di usap menggunakan kapas atau tisu.
6. Tetesan selanjutnya di teteskan pada kertas golongan darah dalam
lingkaran A, B, AB, dan D (Rhesus).
7. Tambahkan 1 tetes anti sera A, B, AB, dan D (Rhesus) ditiap
lingkaran.
8. Lebarkan menggunakan pengaduk plastik.
9. Kemudian amati aglutinasi yang terjadi.
Berdasarkan hasil pengamatan di dapatkan golongan darah O
dengan rhesus (+) dengan ID sampel 19001345. Yang berdasarkan
interprestasi hasil sebagai berikut :
118
Golongan darah Antigen Antibody
A A Anti B
B B Anti A
AB AB -
O - Anti A – Anti B.
Tabel 2.1 Interpretasi Hasil Golongan Darah

4. Pemeriksaan Anti Streptolisin O (ASTO)
Streptokokus grup A (Streptokokus beta hemolitik) dapat
menghasilkan berbagai produk ekstraseluler yang mampu
merangsang pembentukan antibodi. Antibodi itu tidak merusak
kuman dan tidak memiliki daya perlindungan, tetapi adanya antibodi
tersebut dalam serum menunjukkan bahwa di dalam tubuh baru saja
terdapat Streptokokus yang aktif. Antibodi yang terbentuk adalah
Antistreptolisin O, Antihialuronidase (AH), antistreptokinase (Anti-
SK), antidesoksiribonuklease B (AND-B), dan antinikotinamid
adenine dinukleotidase (anti-NADase). Demam rematik merupakan
penyakit vascular kolagen multisystem yang terjadi setelah infeksi
Streptokokus grup A pada individu yang memiliki faktor
predisposisi. Penyakit ini masih merupakan penyebab terpenting
penyakit jantung didapat (acquired heart disease) pada anak dan
dewasa muda di banyak negara terutama Negara berkembang.
(Pradeep. A. M, 2010 dalam Suryadi. I. B.B, 2015).
Keterlibatan kardiovaskuler pada penyakit ini ditandai oleh
adanya inflamasi endokardium dan miokardium melalui suatu proses
119
autoimun yang menyebabkan kerusakan jaringan.Serangan pertama
demam reumatik akut terjadi paling sering antara umur 5 –15 tahun.
(Pradeep. A. M, 2010 dalam Suryadi. I. B.B, 2015).
Demam reumatik jarang menyerang anak dibawah umur lima
tahun. Demam reumatik akut menyertai faringitis Streptokokus beta
hemolitik grup A yang tidak diobati. Pengobatan yang tuntas
terhadap faringitis akut hampir meniadakan risiko terjadinya demam
reumatik.Diperkirakan hanya 3 % dari individu yang belum pernah
menderita demam reumatik akan menderita komplikasi ini setelah
menderita faringitis Streptokokus yang tidak diobati.ASTO (Anti
Streptolisin O) merupakan antibodi yang paling banyak dikenal dan
paling sering digunakan untuk indikator terdapatnya infeksi
Streptokokus. (Pradeep. A. M, 2010 dalam Suryadi. I. B.B, 2015).
Lebih kurang 80 % penderita demam reumatik menunjukan
peningkatan titer antibodi terhadap Streptokokus. Penelitian
menunjukkan bahwa komponen Streptokokus yang lain memiliki
rekativitas bersama dengan jaringan lain. Ini meliputi reaksi silang
imunologi diantara karbohidrat Streptokokus dan glikoprotein katup,
diantaranya membran protoplasma Streptokokus dan jaringan saraf
subtalamus serta nuclei kaudatus dan antara hialuronat kapsul dan
kartilagoartikular. (Pradeep. A. M, 2010 dalam Suryadi. I. B.B,
2015).
Menurut Pradeep. A.M (2010) ada dua prinsip dasar penetuan
ASTO, yaitu:
120
1. Netralisasi atau penghambat hemolysis
Streptolisin O dapat menyebabkan hemolisis dari sel darah
merah, akan tetapi bila Streptolisin O tersebut di campur lebih
dahulu dengan serum penderita yang mengandung cukup anti
streptolisin O sebelum di tambahkan pada sel darah merah, maka
streptolisin O tersebut akan di netralkan oleh ASO sehingga tidak
dapat menibulkan hemolisis lagi.(Pradeep. A. M, 2010 dalam
Suryadi. I. B.B, 2015).
Pada tes ini serum penderita di encerkan secara serial dan di
tambahkan sejumlah streptolisin O yang tetap (Streptolisin O di
awetkan dengan sodium thioglycolate). Kemudian di tambahkan
suspensi sel darah merah 5%. Hemolisis akan terjadi pada
pengenceran serum di mana kadar/titer dari ASO tidak cukup
untuk menghambat hemolisis tidak terjadi pada pengencaran
serum yang mengandung titer ASO yang tinggi. (Pradeep. A. M,
2010 dalam Suryadi. I. B.B, 2015).
2. Aglutinasi pasif
Streptolisin O merupakan antigen yang larut. Agar
dapatmenyebabkan aglutinasi dengan ASO. Maka Streptolisin O
perlu disalutkan pada partikel-partikel tertentu. Partikel
yangsering dipakai yaitu partikel lateks.Sejumlah tertentu
Streptolisin O (yang dapat mengikat 200 IU/ml ASO) di
tambahkan pada serum penderita sehingga terjadi ikatan
121
Streptolisin O – anti Strepolisin O (SO – ASO).(Pradeep. A. M,
2010 dalam Suryadi. I. B.B, 2015).
Bila dalam serum penderita terdapat ASO lebih dari 200
IU/ml, maka sisa ASO yang tidak terikat oleh Streptolisin O akan
menyebabkan aglutinasi dari streptolisin O yang disalurkan pada
partikel – partikel latex. Bila kadar ASO dalam serum penderita
kurang dari 200 IU / ml, maka tidak ada sisa ASO bebas yang
dapat menyebabkan aglutinasi dengan streptolisin O pada
partikel-partikel latex (Pradeep. A. M, 2010 dalam Suryadi. I.
B.B, 2015).
Tes hambatan hemolisis mempunyai sensitivitas yang cukup
baik, sedangkan tes aglutinasi latex memiliki sensitivitas yang
sedang. Tes aglutinasi latex hanya dapat mendeteksi ASO dengan
titer di atas 200 IU/ml. (Pradeep. A. M, 2010 dalam Suryadi. I.
B.B, 2015).
Prinsip dari pemeriksaan ASTO ialah adanya antibodi terhadap
Streptolisin O pada sampel akan bereaksi dengan Streptolisin O
yang dilabel partikel latex reagen akan memebentuk reaksi
aglutinasi. Metode yang digunakan yaitu Aglutinasi.
Adapun alat yang digunakan dalam pemeriksaan kali ini ialah
mikropipet, tip kuning, slide dengan warna latar belakang hitam
dan rotator.
122
Adapun bahan yang akan digunakan dalam pemeriksaan ini
ialah serum, reagen humatex AS yang didalamnya terdapat
kontrol positif, kontrol negative, buffer, latex ASTO.
Cara kerja dari pemeriksaan ASTO terdiri dari uji kualitatif
dan uji semi kualitatif tahapan kerjanya ialah sebagai berikut :
a. Uji kualitatif
1. Pipet kontrol negatif kontrol positif dan sampel serum
didalam lingkaran slide pemeriksaan sebanyak 40µl.
2. Tambahkan masing-masing 1 tetes reagen latex ASTO.
3. Sebutkan dikeliling lingkaran slide.
4. Letakkan diatas rotator selama 2 menit dengan kecepatan
100 rpm.
5. Lihat hasil uji, apabila terdapat aglutinasi lanjutkan ke uji
semi kuantitatif.
b. Uji semi kualitatif
Uji semi kuantitatif dilakukan sebagai berikut :

Pengenceran Sampel Serum Titer
Serum 200 µl/ml
1:2 400 µl/ml
1:3 600 µl/ml
1:4 800 µl/ml
1:5 1000 µl/ml
Tabel 2.2 Titer Berdasarkan Pengenceran
Berdasarkan hasil pemeriksaan yang telah dilakukan
didapatkan hasil pada ID 19001351 negatif atau tidak terjadi
rekasi aglutinasi yang menandakan pasien tidak mengidap
penyakit demam rematik.
5. Pemeriksaan HBsAg
123
Hepatitis virus adalah radang hati yang disebabkan oleh virus.
Dikatakan akut apabila inflamasi (radang) hati akibat infeksi virus
hepatitis yang berlangsung selama kurang dari 6 bulan, dan kronis
apabila hepatitis yang tetap bertahan selama lebih dari 6 bulan.
Keadaan kronis pada anak-anak lebih sukar dirumuskan karena
perjalanan penyakitnya lebih ringan daripada orang dewasa.
Hepatitis adalahsuatu proses peradangan pada jaringan hati yang
memberikan gejala lemah badan, mual, kencing seperti air disusul
dengan mata dan badan yang menjadi kuning. Salah satu parameter
diagnosis laboratorium untuk hepatitis A adalah HBsAg rapid tes
(Rosida. A, 2016).
Dalam istilah kedokteran, HBsAg adalah singkatan dari Hepatitis
Bsurface Antigen. Yaitu suatu protein permukaan virus hepatitis B.
Singkatnya, ketika pemeriksaan HBsAg didapatkan hasil
reaktif/positif, maka dalam tubuh orang itu sudah terdapat virus
hepatitis B, terlepas apakah itu sifatnya akut atau kronik, aktif atau
kronik karier/dormand. (Pearce, Evelyn. C. 2006).
Hepatitis B adalah suatu penyakit hati yang disebabkan oleh virus
Hepatitis B, suatu anggota famili hepadnavirus yang dapat
menyebabkan peradangan hati akut atau kronis yang dapat berlanjut
menjadi sirosis hati atau kanker hati. Hepatitis B akut jika perjalanan
penyakit kurang dari 6 bulan sedangkan Hepatitis B kronis bila
penyakit menetap, tidak menyembuh secara klinis atau laboratorium
124
atau pada gambaran patologi anatomi selama 6 bulan. (Pearce,
Evelyn. C. 2006).
Prinsip dan metode yang digunakan ialah serum penderita yang
mengandung antigen dari hepatitis B (HBsAg) akan berikatan
dengan anti-HBs antibodi monolilonal yang dilabel pada membran
card/strip membentuk ikatan Ag-Ab yang kompleks. Ikatan tersebut
bergerak sepanjang membran card/strip dan membentuk garis
berwarna pink dan menggunakan metode Imunokromatografi.
Adapun alat yang digunakan dalam pemeriksaan HBsAg ialah
mikropipet, tip kuning, timer. Bahan/Reagen yang digunakan ialah
serum dan multi SD Bioline HBsAg.
Prosedur kerja pemeriksaan HBsAg ialah sebagai berikut :
1. Pipet serum sebanyak 100µl, masukkan kedalam sumur sampel.
2. Diamkan selama 15-20 menit.
3. Baca hasil, pembacaan hasil tidak boleh lebih dari 20 menit.
Berdasarkan pemeriksaan hasil yang didapatkan negatif pada
sampel dengan nomor ID 19001345 dimana berdasarkan
interprestasi hasil negatif jika terdapat satu garis pink pada deret C
(kontrol) dan positif pada dua garis pink, 1 pada deret C (kontrol)
dan 1 pada test (T). Sedangkan hasil invalid jika tidak terjadi garis
pink pada deret C (kontrol).
6. Pemeriksaan TPHA (Treponema Pallidum Hemagglunation)
Sifilis adalah salah satu jenis infeksi menular seksual yang
disebabkan oleh bakteri Treponema pallidum. Bakteri ini
125
menyebabkan infeksi jika masuk ke tubuh melalui luka terbuka di
kulit atau lapisan dalam yang terdapat pada kelamin. Sifilis paling
sering menular melalui hubungan seksual, namun bisa juga tertular
dari ibu hamil ke bayinya. Jika tidak ditangani segera, sifilis bisa
menyebabkan kerusakan pada otak, jantung, dan pembuluh darah.
Selain itu, sifilis juga bisa menyebabkan kebutaan, kelumpuhan,
hingga kematian. Apabila terjadi pada ibu hamil, sifilis bisa
menyebabkan bayi lahir tidak normal, bahkan kematian saat lahir.
Karena itu, penting bagi orang yang berisiko tinggi terkena sifilis
untuk menjalani deteksi dini, mengingat tingkat akurasi skrining
sifilis tahap awal bisa mencapai 75% hingga 85% (Vanila, 2011).
Treponema Pallidum Hemagglutination Assay (TPHA)
merupakan suatu pemeriksaan serologi untuk sipilis dan kurang
sensitif bila digunakan sebagai skrining (tahap awal atau primer)
sipilis. Untuk skirining penyakit sipilis biasanya menggunakan
pemeriksaan VDRL atau RPR apabila hasil reaktif kemudian
dilanjutkan dengan pemeriksaan TPHA sebagai konfirmasi (Vanila,
2011).
TPHA merupakan tes yang sangat spesifik untuk melihat apakah
adanya antibodi terhadap treponema. Jika di dalam tubuh terdapat
bakteri ini, maka hasil tes positif. Tes ini akan menjadi negatif
setelah 6 – 24 bulan setelah pengobatan. Bakteri-bakteri yang lain
selain keluarga treponema tidak dapat membuat hasil tes ini menjadi
positif (Faoziyah C dkk, 2013).
126
Pemeriksaan TPHA dilakukan berdasarkan adanya
antibodi Treponema Palidum yang akan bereaksi dengan antigen
treponema yang menempel pada eritrosit sehingga terbentuk
aglutinasi dari eritrosit-eritrosit tersebut (Vanilla, 2011).
Prinsip dari pemeriksaan ialah adanya antibody Treponema
Palidum akan breaksi dengan antigen treponema yang menempel
pada eritrosit ayam kalkun atau domba sehingga terbentuk aglutinasi
dari eritrosit-eritrosit tersebut. Dengan menggunakan metode
hemaaglutinasi tidak langsung (indirek hemaaglutinasi) untuk
mendeteksi antibodi spesifik terhadap T. pallidum (Belanti, J.A.
1993).
Efek samping yang timbul dari pemeriksaan sifilis adalah akibat
prosedur pengambilan darah, namun jarang terjadi. Efek samping
tersebut antara lain adalah Infeksi, Pusing, Perdarahan, Hematoma
(Boedina, S. K. 2001).
Kelebihan dari pemeriksaan TPHA ialah teknik dan pembacaan
hasilnya mudah, cukup spesifik dan sensitive (dapat mendeteksi
titer-titer yang sangat rendah). Bakteri lain selain dari
family Treponema tidak dapat memberikan hasil positif, Namun,
metode TPHA memiliki beberapa kekurangan, antara lain harganya
mahal, pengerjaannya membutuhkan waktu inkubasi yang lama,
hampir 1 jam, hal-hal yang perlu diperhatikan dalam pemeriksaan
TPHA ialah jangan menggunakan serum yang hemolisis karena
dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan.Serum atau plasma harus
127
bebas dari sel darah dan kontaminasi mikrobiologi. Jika terdapat
penundaan pemeriksaan, serum disimpan pada suhu 2-8℃ dimana
dapat bertahan selama 7 hari dan bila disimpan pada suhu -20 ℃ ,
serum dapat bertahan lebih lama.Serum atau plasma yang beku
sebelum dilakukan pemeriksaan harus dicairkan dan dihomogenkan
dengan baik sebelum pemeriksaan.Reagen harus disimpan pada suhu
2-8℃ jika tidak digunakan dan jangan disimpan di freezer.Dalam
melakukan pemeriksaan harus menyertakan kontrol positif dan
kontrol negatif (Belanti, J.A. 1993).
Adapun alat yang digunakan dalam pemeriksaan TPHA ialah
mikropipet 190 μL, 25 μL, 10 μL, tip kuning, mikro plate dan
timer.Adapun bahan atau reagen yang akan digunakan dalam
pemeriksaan TPHA ialah serum dan Plasmatec TPHA test kit yang
didalamnya berisi diluent, kontrol sel, kontrol negatif, kontrol positif
dan test sel.
Cara kerja dalam pemeriksaan TPHA ialah sebagai berikut :

1) Pipet diluent 190 μL, masukkan pada sumur 1.
2) Tambahkan 10 μL sampel serum pada sumur 1 lalu mix.
3) Ambil 25 μL, pada sumur 1 pindahkanpada sumur 2 dan 3.
4) Pipet 25 μL kontrol negatif masukkan pada sumur 4.
5) Pipet 25 μL kontrol positif msukkan pada sumur 5.
6) Tambahkan 75 μL test sel pada sumur 2, 3, 4 dan 5.
7) Inkubasi selama 45-60
Hasil yang didapatkan ialah sebagai berikut :

ID sampel Rujukan Hasil
128
19001355 Negatif Negatif
Tabel II.I Hasil Pemeriksaan TPHA
Berdasarkan interprestasi hasil dari pemeriksaan TPHA ialah
Negatif yaitu tidak terjadi aglutasi atau eritrosit berkumpulditengah
sedangkan positif terjadi aglutinasi atau eritrosit menyebar. Dimana
menjadi penanda bahwa pasien tidak terinfeksi bakteri Treponema
palidium yang menyebabkan penyakit sifilis yang normalnya bakteri
yang merupakan antigen tidak terdapat dalam tubuh.
7. Pemeriksaan C-Reaktif Protein (CRP)
C-Reaktif Protein adalah salah satu dari protein fase aktif yang
didapatkan dalam serum normal walaupun dalam jumlah yang kecil.
Pada keadaan tertentu dimana didapatkan adanya reaksi radang atau
jaringan(meurosis), yaitu baik,infektif maupun yang tidak infektif.
Kadar CRP dalam serum dapat meningkat sampai 1.000x. (Handojo,
2009).
C Reactive Protein merupakan protein fase akut yang dibentuk di
hati (oleh sel hepatosit) akibat adanya proses peradangan atau
infeksi.2 Setelah terjadi peradangan, pembentukan CRP akan
meningkat dalam 4 sampai 6 jam, jumlahnya bahkan berlipat dua
dalam 8 jam setelah peradangan. Konsentrasi puncak akan tercapai
dalam 36 jam sampai 50 jam setelah inflamasi. Kadar CRP akan
terus meningkat seiring dengan proses inflamasi yang akan
mengakibatkan kerusakan jaringan. Apabila terjadi penyembuhan
akan terjadi penurunan kadar CRP secara cepat oleh karena CRP
memiliki masa paruh 4 sampai 7 jam. 2,3 Kinetik metabolism CRP
129
sejalan dengan derajat peradangan dan derajat penyembuhan yang
terjadi. Oleh karena itu CRP sangat baik untuk menilai aktivitas
penyakit dalam keadaan akut. Pemeriksaan ini relatif tidak mahal
dan dapat diperoleh hasilnya dalam waktu cepat serta tidak
memerlukan volume darah yang banyak (Belanti, J.A. 1993).
Banyak protein plasma meningkat secara akut sebagai respon
terhadap penyakit, infeksi dan hekrosis jaringan. Protein ini
mencakup glikoprotein alfa-1-asam, alfa-1-antitripsin, seruplasmin
hapto glogin, fibrinogen, dan protein C reaktif (CRP) yang paling
bermanfaat dari zat ini adalah CRP, berdasarkan cepatnya
peningkatan sebagai respon terhadap penyakit akut dan cepatnya
pembersihan setelah stimulus mereda. (Sacher, 2004).
C-Reaktif Protein adalah globula alfa abnormal yang cepat timbul
dalam serum penderita dengan penyakit karna infeksi atau karna
sebab lain. Protein ini terdapat dalam darah seseorang yang sehat.
Protein ini dapat menyebabkan presipitasi hidrat orang C dari
pneumokokus. (Patel, V.B dkk, 2001 dalam Dung. G. R, 2011).
C-Reaktif Protein merupakan protein fase, meningkat keadaannya
24 jam pasca infeksi. Peradangan atau kerusakan jaringan mampu
meningkat unsur pokok dari mikroorganisme dan juga struktur sex
manusia atau disebut juga CRP karena mempunyai kemampuan
untuk berkaitan dengan C. Pneumococeal Polisakarida. (Andarewari,
2015)
a. Sintesa dan Stuktur dari CRP
130
CRP dissent didalam hati, peningkatan sintesa CRP dalam
sel-sel parenkim diinduksi oleh interleukin I yang berasal dari
rangkaian makrofag. (Religare, 2010 dalam Andarewari, 2015).
CRP meningkat 1000x atau lebih berperan pada imunitas non
spesifik yang dengan bantuan Ca2+ dapat meningkat berbagai
molekul, antara lain fosforol klorin yang ditemukan pada bakteri
atau jamur. Kemudian menggerakkan system komplemen dan
membantu merusak organisme pathogen dengan cara opsonisasi
dengan meningkatkan fagositosis. (Coruoan, J. Elizabeth. 2000).
Dalam waktu yang relatif singkat setelah terjadinya reaksi
radang akut atau kerusakan jaringan, sintesa dalam sekresi dari
CRP meningkat dengan tujuan dan hanya dalam waktu 12-48
jam setelah mencapai nilai puncaknya. Kadar dari CRP akan
menurun dengan tajam bila proses peradangan atau kerusakan
jaringan mereda dalam waktu 24-48 jam setelah mencapai harga
normalnya kembali. (Handojo, 2009).
b. Fungsi Biologik CRP
Fungsi dan peranan CRP dalam tubuh (invivo) belum
diketahui seluruhnya. Banyak hal-hal yang masih merupakan
hipotesa-hipotesa meskipun CRP bukan merupakan antibody,
tetapi CRP mempunyai beberapa fungsi biologik yang
menunjukkan peranannya pada proses peradangan dan
metabolisme daya tahan tubuh terhadap infeksi. (Handojo,
2009).
131
Menurut Handojo (2009) beberapa hal yang diketahui
mengenai fungsi biologiknya adalah:
1. CRP dapat meningkatkan C-polisakarida (CPS) dan
berbagai laktatmelalui reaksi prespitasi atau aglutinasi.
2. CRP dapat meningkatkan aktifasi dan motilitas sel-sel
fagosit seperti granulosit dan monosit-makrofag.
3. CRP dapat mengaktifkan komplemen, baik melalui jalur
klasik maupun jalur alternatif.
4. CRP dapat menghambat agregasi trombosit, baik yang
ditimbulkan adrenalin, ADP maupun kolagen.
5. CRP mempunyai daya ikat selektif (selective-binding)
terhadap limfosit
6. T. dalam hal ini CRP diduga memegang peranan dalam
peraturan fungsi-fungsi tertentu selama proses peradangan.
Prinsip dari pemeriksaan ialah C-Reaktif Protein dalam
sampel bereaksi dengan anti C-Reaktif protein yang dilabel pada
partikel latex akan membentuk aglutinasi dan metode yang
dipakai yaitu aglutinasi.
Adapun alat yang digunakan ialah mikropipet, tip kuning,
slide dengan warna latar belakang hitamdan rotator.
Adapun bahan atau reagen yang akan digunakan dalam
pemeriksaan ialah serum, humatex CRP yang didalamnya
terdapat reagen kontrol positif, kontrol negative, buffer dan latex
C-Reaktif Protein.
132
Cara kerja dalam pemeriksaan CRP terdiri dari uji kualitatif
dan uji semi kualitatif dimana cara kerjanya ialah berikut :
1. Uji kualitatif
a. Pipet kontrol negatif kontrol positif dan sampel serum
didalam lingkaran slide pemeriksaan sebanyak 40µl.
b. Tambahkan masing-masing 1 tetes reagen latex CRP
c. Sebutkan dikeliling lingkaran slide
d. Letakkan diatas rotator selama 2 menit dengan kecepatan
100 rpm
e. Lihat hasil uji, apabila terdapat aglutinasi lanjutkan ke uji
semi kuantitatif
2. Uji semi kualitatif
Uji semi kuantitatif dilakukan sebagai berikut :

Pengenceran Sampel Serum Titer
1:2 6 mg/L
1:4 12 mg/L
1:8 23 mg/L
1:16 48 mg/L
1:32 96 mg/L
Berdasarkan uji diatas didapatkan hasil pada ID
19001351 positif dengan titer 12 mg/L dimana hasil tersebut
abnormal yang memiliki resiko tinggi mengidap rematik atau
radang.
8. Pemeriksaan HIV/AIDS
133
HIV merupakan singkatan dari Human Immunodeficiency Virus
(HIV) merupakan retrovirus yang menjangkiti sel-sel sistem
kekebalan tubuh manusia (terutama CD4 positif T-sel dan makrofag
komponen-komponen utama sistem kekebalan sel), dan
menghancurkan atau mengganggu fungsinya. Infeksi virus ini
mengakibatkan terjadinya penurunan sistem kekebalan yang terus-
menerus, yang akan mengakibatkan defisiensi kekebalan tubuh.
Sistem kekebalan dianggap defisien ketika sistem tersebut tidak
dapat lagi menjalankan fungsinya memerangi infeksi dan penyakit-
penyakit. Orang yang kekebalan tubuhnya defisien
(Immunodeficient) menjadi lebih rentan terhadap berbagai ragam
infeksi, yang sebagian besar jarang menjangkiti orang yang tidak
mengalami defisiensi kekebalan (Fajar, 2013).
Acquired immune deficiency syndrome (AIDS) disebabkan oleh
infeksi HIV dan ditandai dengan berbagai gejala klinik, termasuk
immunodefisiensi berat disertai infeksi oportunistik dan
kegananasan, dan degenerasi susunan saraf pusat. Virus HIV
menginfeksi berbagai jenis sel sistem imun termasuk sel T CD4+,
makrofag dan sel dendritik. Tingkat HIV dalam tubuh dan timbulnya
berbagai infeksi tertentu merupakan indikator bahwa infeksi HIV
telah berkembang menjadi AIDS (Fajar, 2013).
Adanya infeksi HIV dapat dideteksi secara kualitatif dengan
metode Imunokromatografi Rapid Test sebagai screening test untuk
membantu diagnosa AIDS. Pemeriksaan ini bertujuan untuk
134
mengetahui adanya antibodi spesifik secara kualitatif terhadap
infeksi virus HIV dalam serum penderita dengan menggunakan
metode Imunokromatografi Rapid Test (Harti, dkk, 2014).
Prinsip dari pemeriksaan ialah serum/plasma atau darah penderita
yang mengandung antibodi spesifik terhadap HIV. Pada saat
melewati membrane selulosa pada strip tes anti HIV yang telah
dilabel dengan kombinasi antigen HIV yaitu rekombinan gp 41, P24,
dan gp 120 untuk HIV-1 pada T1 dan rekombinan gp 36 untuk HIV-
2 pada T2 akan bereaksi dan bergerak sepanjang membran tes
sehingga membentuk garis berwarna merah mudah, tidak
terdapatnyaa garis berwarna merah mudah pada T1 dan T2 berarti
tidak terdapat antibody HIV dalam serum/plasma atau darah.
Adapun alat yang digunakan dalam pemeriksaan HIV ialah
mikropipet, tip kuning dan timer sedangkan bahan yang digunakan
ialah serum dan diluent SD Bioline HIV.
Prosedur pengujiannya sebagai berikut :
1. Lepaskan alat uji dari kantongnya dan letakkan di atas permukaan
yang rata.
2. Beri label perangkat uji dengan nomor ID pasien atau spesimen.
3. Untuk spesimen kapiler darah murni (fingerstick): Bersihkan
ujung jari dengan sapuan alkohol, lancet di bagian tengah dan
tusuk ujung jari. Usaplah setetes darah pertama dengan kapas.
4. Sentuh loop spesimen 5 μl yang tersedia pada spesimen, yang
memungkinkan pembukaan loop untuk mengisi dengan cairan.
135
5. Memegang loop spesimen secara vertikal, menyentuhnya ke
bantalan sampel di tengah (S) dengan baik dari perangkat untuk
mengeluarkan 5 μl spesimen (serum, plasma, atau darah murni)
ke bantalan spesimen.
6. Balikkan botol Running Buffer dan tahan secara vertikal (tidak
pada suatu sudut) di atas spesimen dengan baik. Tambahkan 3
tetes (105 μl) buffer perlahan, turun perlahan, ke dalam (S)
dengan baik.
7. Baca hasil tes 15 menit setelah penambahan Running Buffer.
Dalam beberapa kasus, garis uji mungkin muncul dalam waktu
kurang dari 15 menit, namun 15 menit diperlukan untuk
melaporkan hasil yang tidak reaktif. Baca hasilnya di area yang
cukup terang. Jangan membaca hasilnya setelah 20 menit.
Berdasarkan prosedur kerjanya telah didapatkan hasil non
reaktif pada sampel dengan ID 19001355 karena tidak terbentuk
dua garis yaitu pada garis C (kontrol) dan pada garis T (tes).
9. Pemeriksaan FT4 (Free Thyroxin)
Kelenjar tiroid merupakan kelainan terhadap hormon tiroid
pemeriksaan hormon tiroid mulai berkembang setelah diperkenalkan
teknik radioimmunoassay (RIA) pada awal tahun 1970-an, diikuti
dengan immunoradiometric assay (IRMA), enzyme-linked
immunoassay (ELISA), enzyme-linked immunofluorescence assay
(ELFA) dan enzyme immunoassay (EIA), serta yang terbaru
electrochemiluminescent assay (ECLIA). Cara ECLIA menjadi
136
metode yang paling peka dibandingkan yang terdahulu.
(Suryaatmadja 2010).
Cara ini dikembangkan sejak akhir tahun 1980-an dan pada
Kursus Laboratory Endocrinology di Singapore tahun 1989 sudah
dinyatakan sebagai metode yang menjanjikan untuk analisis hormon.
Kepekaan bergeser dari kadar µg/dL menjadi ng/dL bahkan pg/gL.
Cara ini sudah diterapkan pada otomasi (automated analyzer).
Dengan demikian, selain makin peka, juga ketelitian dan ketepatan
analisis hormon makin baik (Suryaatmadja, 2010).
Penyakit dan kelainan kelenjar tiroid merupakan kelainan
endokrin tersering kedua setelah diabetes mellitus. Kelainan tiroid
memberikan pengaruh ke hampir seluruh tubuh karena hormon tiroid
mempengaruhi banyak organ. (Suryaatmadja, 2010).
Untuk mempelajari dan mendiagnosis kelainan tiroid perlu
memahami sumbu Hipotalamus-Hipofisis-Tiroid, hormon- hormon
yang bekerja pada sumbu tersebut, serta pengaruhnya pada organ-
organ lain, serta sebaliknya, pengaruh luar terhadap sumbu tersebut
(Suryaatmadja 2010). Pemeriksaan hormon tiroid meliputi
pemeriksaan T3, T4, TSH dan FT4. (Suryaatmadja, 2010).
Prinsip pembacaan FT4 menggunakan metode ELFA (Enzim
Linked Fluoresent Imuno Assay). Dengan waktu pemeriksaan 40
menit sampel diambil dan di transfer kedalam SPR yang
mengandung antigen FT4 berlabel fosfatase alkalin (conjugate).
Kompetisi terjadi antara antigen sampel dan antigen berlabel untuk
137
FT4 yang melapisi bagian dalam SPR. Kemudian dibaca pada
panjang gelombang 450nm.
Semua langkah pengetesan dilakukan secara otomatis. Solid
phase Receptacle (SPR) berguna sebagai reaksi fase padat dan alat
pemipet selama pemeriksaan. Semua reagensia yang dibutuhkan
telah tersedia direagen strip yang tertutup.
Adapun alat yang digunakan dalam pemeriksaan FT4 ialah
mikropipet 100µl, Vidas dan tip kuning. Sedangkan bahan yang
digunakan ialah Serum, Reagen FT4 dan Strip SPR
Cara kerja dalam pemeriksaan FT4 terdiri dari uji kualitatif dan
uji semi kualitatif dimana cara kerjanya ialah berikut :
1. Siapkan standar, control dan sampel.
2. Pipet sampel serum 100µl masukkan kedalam lubang pertama.
3. Masukkan sesuai dengan urutannya serta masukkan juga SPR
dibagian.
4. Kemudian input dan klik start, kemudian inkubasi 60 menit.
Berdasarkan cara kerja, didapatkan hasil FT4 yaitu 10,48 ng/dl
dengan Sampel ID 20011642 dimana berdasarkan interpretasi hasil
yaitu 0,7-1,56 ng/dl bisa dikatakan normal.
10. Pemeriksaan TSH
Thyroid-stimulating hormone (TSH), yang disebut juga dengan
tirotropin, adalah glikoprotein yang disekresikan oleh bagian
anterior dari kelenjar hipofisis. Thyroid-stimulating hormon selama
ini belum banyak dibicarakan walau pun TSH ikut berperan dalam
aksis hipotalamus-hi pofisis-tiroid. TSH memainkan peran fisiologis
138
yang penting pada pengaturan aksis hipotalamus-hipofisis-tiroid
dengan mengatur pelepasan hormon tiroid dari kelenjar tiroid.
(Decorli. E, 2017).
Thyroid-stimulating hormone receptor merupakan G-protein-
coupled receptor (GPCR) dan memiliki struktur yang sama pada
kelompok reseptor serpentin, yaitu segmen seven membrane
spanning, tiga lengkungan ekstraseluler, tiga lengkungan
intraseluler, dan sebuah ektodomain terminal amino dan sebuah
terminal karboksi intraseluler. Lengkungan intraseluler dari reseptor
ini berikatan dengan 3 subunit (trimetrik) protein G, yaitu subunit α,
β dan γ. (Decorli. E, 2017).
Sintesis dan sekresi dari TSH diatur oleh faktor dari hipotalamus
yang didominasi oleh thyrotropin-releasing hormone (TRH) dan
faktor perifer yang didominasi oleh kadar hormon tiroid. Tahap
sintesis TSH terdiri dari transkripsi, glikosilasi, dan kombinasi dua
subunit penyusun TSH yang dibentuk secara independen. Setelah
disintesis, TSH disekresikan dan akan berikatan dengan reseptornya,
yang disebut dengan thyroid-stimulating hormone receptor (TSHR).
Kadar normal TSH dalam d arah pada dewasa adalah 2 – 10 mU/L
dan pada neonatus adalah 3 – 18 mU/L. (Decorli. E, 2017).
Ikatan hormon dengan TSHR akan menghasilkan second
messanger yang akan memberikan dampak terhadap sel tempat
ikatan tersebut terjadi. Selain TSH, yang dapat mengaktivasi TSHR
adalah thyroid stimulating antibodies (TSAb) dan hormon
139
glikoprotein yang baru teridentifikasi, yang dinamakan tirostimulin.
Tirostimulin diproduksi pada beberapa jaringan dan bisa
mengaktivasi TSHR, dan ini mengemukakan mekanisme regulasi
parakrin pada jaringan tersebut. (Decorli. E, 2017).
Ikatan TSH-TSHR akan memberikan dampak klinis terhadap
jaringan dan organ tempat terjadinya ikatan tersebut. Ikatan tesebut
bisa terjadi pada kelenjar tiroid dan jaringan ekstratiroid. Pada
kelenjar tiroid, TSHR menyebabkan tirosit mengenali dan
merespon TSH yang disekresikan oleh sel tirotropik pada hipofisis.
Hal ini mengatur proliferasi tirosit, produksi dan sekresi hormon
tiroid. Gangguan transduksi sinyal dari TSH menyebabkan
kelainan tiroid, seperti gondok, hipotiroid, dan hipertiroid, yang
memiliki manifestasi klinis yang kompleks. (Decorli. E, 2017).
Thyroid-stimulating hormone (TSH) memberikan dampak klinis
jika berikatan dengan thyroid-stimulating hormone receptor
(TSHR). Dampak klinis TSH pada kelenjar tiroid adalah
mengatur pertumbuhan kelenjar tiroid, mempertahankan arsitektur
kelenjar tiroid, dan mengatur sintesis hormon tiroid. (Decorli. E,
2017).
Dampak klinis TSH pada jaringan adiposa adalah
meningkatkan adipogenesis dan merangsang lipolisis. Dampak
klinis TSH pada sistem imun adalah meningkatkan produksi sitokin,
seperti interleukin-6. Dampak klinis TSH pada tulang adalah
mempertahankan bone mineral density. (Decorli. E, 2017).
140
Dampak klinis TSH pada kelenjar hipofisis anterior adalah
memediasi inhibisi umpan balik TSH secara parakrin. Dampak klinis
TSH pada hati adalah mengatur metabolisme glukosa dan lemak
melalui hepatocyte nuclear factor-4α. Dampak klinis TSH pada hati
adalah mengatur metabolisme glukosa dan lemak melalui hepatocyte
nuclear factor-4α. (Decorli. E, 2017).
Prinsip pembacaan TSH menggunakan metode ELFA (Enzim
Linked Fluoresent Imuno Assay). Dengan waktu pemeriksaan 40
menit sampel diambil dan di transfer kedalam SPR yang
mengandung antigen TSH berlabel fosfatase alkalin (conjugate).
Antigen menangkap antibody yang dilapisi SPR. Kemudian dibaca
pada panjang gelombang 450nm.
Adapun alat yang digunakan dalam pemeriksaan TSH ialah
mikropipet 100µl, vidas dan tip kuning. Bahan yang digunakan ialah
serum dan KIT TSH (Strip dan SPR).
Cara kerja dari pemeriksaan TSH ialah sebagai berikut :
1. Siapkan standar, control dan smapel.
2. Pipet sampel serum 100µl masukkan kedalam lubang pertama.
3. Masukkan sesuai dengan urutannya serta masukkan juga SPR
dibagian atas.
4. Kemudian input dan klik start, kemudian inkubasi 60 menit
Berdasarkan pemeriksaan telah didapatkan hasil dengan nomor
ID 19001456 ialah 3,5 uUl/ml dimana berdasarkan nilai rujukan
yaitu 0,4 – 5,5 uUl/ml yang dapat dikatakan normal.
141
11. Pemeriksaan Narkoba
Narkoba atau sering dibilang Narkotika, Psikotropika dan Bahan
Adiktif berbahaya lainnya, yaitu bahan atau zat yang jika
dimasukkan dalam tubuh manusia, baik secara diminum, dihirup
maupun disuntikkan dapat mengubah pikiran, perasaan dan juga
perilaku seseorang dan lebih jauh lagi narkoba akan dapat
menimbulkan ketergantungan fisik dan psikologis. Penyalahgunaan
Narkotika merupakan salah satu masalah pemerintah yang perlu
mendapatkan perhatian serius dari semua pihak. Hal ini dibuktikan
dengan semakin meningkatkan kasus narkotika yang dilaporkan oleh
berbagai media. (Oktaviani, dkk, 2015).
Dalam hal pemeriksaan jenis narkotika ini maka perlu dicari
metode–metode yang cukup teruji yang dapat menganalisa Narkotika
tersebut dengan hasil yang optimal (Taufik, dkk, 2017).
Dalam Pemeriksaan Narkoba ada beberapa cara salah satunya
dengan menggunakan Rapid Test. Rapid Test ini menggunakan
Strip, dalam Strip Test tersebut ada yang menggunakan 3 Parameter
yaitu Amphetamine (AMP), Marijuana (THC), Morphin (MOP) dan
ada yang menggunakan 6 Parameter yaitu Ampethamine (AMP),
Methampethamine (METH), Cocaine (COC), Morphine (MOP),
Marijuana (THC), Benzodiazephine (BZO). Strip test telah
Dirancang sedemikian rupa sehingga dapat dibuat dalam bentuk
imunokromatografi kompetitif kualitatif yang praktis, tidak
142
memerlukan tenaga trampil dan cepat (hasil dapat diperoleh dalam 3-
10 menit) (Oktaviani, dkk, 2015).
Prinsip dari pemeriksaan ini adalah narkoba yang terdapat pada
urine akan berkompetisi dengan konjugat, narkoba akan berikatan
dengan antibodi spesifik. Jika urine mengandung narkoba, antibodi
spesifi akan berikatan dengan narkoba, sehingga tidak timbul warna,
sedangkan jika urine tidak mengandung narkoba, antibodi spesifik
akan berikatan dengan konjugatnarkoba sehingga timbul warna
(Oktaviani, dkk, 2015).
Adapun alat dan bahan yang digunakan dalam praktikum kali ini
ialah strip test narkoba, urine, timer.
Cara kerja dari pemeriksaan narkoba ialah sebagai berikut :
1. Biarkan strip test dalam suhu kamar.
2. Buka penutup strip test, kemudian celupkan strip test tersebut
secara vertical ke dalam sample urine selama 10-15 detik.
3. Ketika strip test dicelupkan tidak boleh melewati batas garis
yang paling bawah Zona Sample (S).
4. Tempatkan test strip itu pada bidang datar. Lalu baca hasil
setelah 5-10 menit.
Berdasarkan cara kerja didapatkan hasil negatif karna terbentuk
2 garis pada strip dimana sesuai dengan interpretasi hasil yaitu
positif jika hanya terbentuk pita pink pada Control (C) dan negatif
jika terbentuk dua pita pink pada Control (C) dan pada Test (T) dan
Invalid tidak terbentuk pita pink pada Control (C) dan pada Test (T).
143
atau terbentuk pita pink pada Test (T) sedangkan pada Control (C)
tidak terbentuk pita pink.
144
BAB III
PENUTUP
3.13 Kesimpulan
Adapun kesimpulan yang dapat diperoleh dari Praktik Kerja Lapangan
adalah sebagai berikut :
1. Praktek kerja lapangan merupakan salah satu bentuk emplementasi secara
sistematis dan singkron antara program pendidikan dengan program
penguasaan keahlian yang diperoleh melalui kegiatan secara langsung
didunia kerja untuk mencapai tingkat keahlian tertentu dapat memberikan
keuntungan pada pelaksanaan itu sendiri, karena keahlian yang tidak
diajarkan dilingkungan pendidikan bisa didapat didunia kerja, sehingga
dengan adanya Praktek Kerja Lapangan (PKL) dapat meningkatkan mutu
dan relevensi pendidikan yang dapat diarahkan selama duduk dibangku
kuliah untuk mengembangkan suatu sistim yang mantap antara dunia
pendidikan dan dunia kerja.
2. Standar yang digunakan di instalasi Pengambilan Spesimen menggunakan
Standar Good Laboratory Practice (GLP) sebagai pedoman standar
operasional prosedur (SOP)
145
DAFTAR PUSTAKA
Achmad, Rukaesih. 2004. Kimia Lingkungan. Yogyakarta : ANDI.
Aditiawan, Wahyu. 2016. Pembuatan Media dan Sterilisasi. Fakultas Teknologi
Dan Industri Pertanian Universitas Halu Oleo. Kendari
Alaert, G. dan Sri, S. 1987. Metode Penelitian Air: Surabaya : Usaha Nasional.
Alashty, 2011 Change Of Ph, Organic Carbon (OC), Electrical Conductivity (EC),
Nickel (Ni) And Chrome (Cr) In Soil And Concentration Of Ni And Cr In
Radish And Lettuce Plants As Influenced By Three Year Application Of
Municipal Compost. Journal of Agricultural Research Vol. 6(16)
Andarewari, 2015. Penetapan Kadar CRP Secara Kualitatif. Kementerian Riset
Teknologi dan Pendidikan Tinggi Universitas Jenderal Soedirman
Purwokerto. Jawa Tengah
Andriani Yuni, 2015. Golongan Darah Pada Manusia. Universitas Jember. Jawa Timur.
Anisful Laili Munawaroh, Dwi Yuni Nur Hidayati, Yulian Wiji Utami, 2015.
Studi Komparasi Media Kultur Coco Blood Malachite Green (CBM)
Dengan Lowenstein Jensen (LJ) Untuk Diagnosis Cepat, Spesifik, Dan
Sensitive Pada Sputum Pasien Suspek Tuberkulosis. Volume 2. No. 2 Jurnal
Kesehatan .
Arifin, Z., Murdiati, T.B. Dan Firmansyah, R. 2005. Deteksi Formalin Dalam
Ayam Broiler Dipasaran. Balai Penelitian Veteriner. Bogor
Asdak, C. 1995. Hidrologi dan Pengelolaan Daerah Aliran Sungai.Yogyakarta :
Gajah Mada University Press
Ayu W.E, Purwiyanto A.I.S, Fauziyah, Agutriani F Dan Suteja Y. 2019. Kondisi
Nitrat, Nitrit, Amonia, Fosfat, Dan BOD Di Muara Sungai Banyuasin,
Sumatera Selatan. Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis. Vol 11. No
1.
Basset, J, et al 1994.Buku Ajar Vogel:Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik.
Terjemahan A. Hadyana Pudjaatmaka dan L. Setiono.Jakarta : Penerbit
Buku Kedokteran EGC.
Belanti, J.A. 1993 Imunologi III. Yogyakarta : UGM Press.
Boedina, S. K. 2001. Imunologi Diagnosis dan Prosedur Laboratorium. Jakarta :
FKUI Press.
146
Boyd, C.E. 1982. Water Quality in Warm Water Fish Pond. Alabama, USA :
Auburn University Agricultural Experimenta Satation.
Budiharjo, T., Purjanto, KA, 2016.“Buku Panduan Pemeriksaan Sputum BTA”.
EGC: Jakarta.
Cahyono JBSB. 2009. Hepatitis A. Yogyakarta : Kanisius Yogyakarta
Candra,Bidiman.2007.Pengantar kesehatan lingkungan.Buku kedokteran
EGC.:Jakarta
Chairlan dan Lestari, Estu (Alih bahasa), 2011. “Pedoman Teknik Dasar Untuk
Laboratorium Kesehatan. Edisi 2. EGC: Jakarta.
Chohiriyah Ika, 2009. Pengambilan sampel darah
vena.https://www.academia.edu/31290834/cara_pengambilan_sampel_dara
h_vena_punctie_dengan_vacutainer. di akses pada tanggal 4 februari 2020.
Concise International Chemical Assesment Document (CICAD). 2002,
Formaldehyde, The Inter-Organization Programmer For The Sound
Management Of Chemicals. WHO. Geneva
Coruoan, J. Elizabeth. 2000. Patofisiologi. EGC: Jakarta.
Corwin, Elizabeth. 2009. Patofisiologi: buku saku/ alih bahasa: Nike Budhi
Subekti; editor edisi bahasa Indonesia, Egi Komara Yudha (et al). Jakarta :
EGC.
Dahlan, Andi. 2016. Pembuatan Media Dan Sterilisasi. Fakultas Teknologi Dan
Industri Universitas Halu Oleo. Kendari.
Day, R. A. and A. L. Underwood. 2002. Analisis Kimia Kuantitatif. Edisi
Keenam. Jakarta : Penerbit Erlangga.
Decorli, E., 2017 Dampak klinik Thyroid-Stimulating Hormone. Jurnal
Kesehatan Andalas.Universitas Andalas Padang. Sumatera Barat
Departemen Kesehatan RI, 2013. Buku pedoman pelayanan Gizi Rumah Sakit,
Dirijen Pelayanan Medik. Direktorat Rumah Sakit khusus dan swasta.
Jakarta
Depkes RI. 2010. Permenkes RI No. 492/MENKES/PER/IV/2010. Tentang
Persyaratan Kualitas Air Minum. Depkes RI, Jakarta.
Desmawati, 2013.“Sistem Hematologi dan Imunologi”.EGC: Jakarta.
Diana, Haryani. 2013. Penanganan Limbah Infeksius. Poltekkes : Semarang.
147
Doraja, 2012. Biodegradasi Limbah Domestik Dengan Menggunakan Inokulum
Alami Dari Tangki Septik. Jurnal Sains dan Seni Vol :1 (1)
Dr. Gunawan yamin, Pengambilan dan pengiriman specimen untuk pemeriksaan
pada wanita kelompok RISTI.
Dung. G. R., 2011. Kolerasi Body Mass Index dan Abdominal Skinfold Thickness
Terhadap Kadar High Sensitivity C-Reactive Protein pada Satf Wanita
Universitas Sanata Dharma. Yogyakarta. Jawa Tengah
Eckenfelder, W.W. 1989. Industrial Water Pollution Control, 2nd ed. New York :
Mc Graw Hill Inc.
Effendi, H. 2003.Telaah Kualitas Air. Yogyakarta: Kanisius.
Fajar, Elizabeth. 2013. Hubungan Antara Stadium Klinis, Viral Load Dan Jumlah
CD4 Pada Pasien Human Immunodeficiency Virus (HIV)/Acquired Immuno
Deficiency Syndrome (AIDS) Di RSUP Dr. Kariadi Semarang. Universitas
Diponegoro. Semarang
Faoziyah. C dkk, 2013.Pemeriksaan Laboratorium TPHATreponemahttp://
nothingweyy.blogspot.com/2013/02/pemeriksaan-laboratorium-tpha-
treponema.html Diakses Tanggal 04 Febuari 2020
Fitria, Bayu. 2009. Pewarnaan Gram (Gram positif dan Gram Negatif).
Hajna, A.A., Perry, C.A. 1943. Comparative Study Of Presumptive And
Confirmative Media For Bacteria Of The Coliform Group And For Fecal
Streptococci. Am J Publ Hlth 33, hal. 550-556.
Handojo. I, 2009. Diktat Kuliah FK UNAIR Serologi Klinik. Surabaya: Bagian
Patologi Klinik Fakultas Kedokteran UNAIR.
Haris Zainal. 2005. SNI 06-6989 [1]. 24-2005 Warna Visual.
https://www.academia.edu. Di akses pada tanggal 4 Februari 2020.
Harti, Agnes S., Amalia A., Siti M., Estuningsih, dan Heni N. K. 2014.
Pemeriksaan HIV 1 Dan 2 Metode Imunokromatografi Rapid Test Sebagai
Screening Test Deteksi AIDS. STIKES Kusuma Husada dan Politeknik
Kesehatan Kemenkes Surakarta.
Irianto, Koes. 2006. Mikrobiologi Jilid I. Yrama Widya. Bandung.
Karmana. 2008 . Biologi. PT. Grafindo Media Pratama.Jakarta. (halaman : 56)
148
Kemenes 2016. Laporan Tahunan. Kementerian Kesehatan Ri Direktorat Jenderal
Pelayanan Kesehatan Laporan Tahunan.
Kemenkes.2012.Pedoman Penggunaan Insektisida (Dalam Pengendalian Vektor).
DirjenPengendalianPenyakitdanLingkungan. Kemenkes RI.
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia No : 370/Menkes/SK/III/2007.
Standar Profesi Ahli Teknologi Laboratorium Kesehatan. Kementerian
Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia, 2013. Pedoman Tata Laksana Sifilis

Untuk Pengendalian Sifilis di Layanan Kesehatan Dasar. Direktorat
Jenderal Pengendalian Penyakit dan Penyehatan Lingkungan : Jakarta
Kementerian Kesehatan RI, 2012. “Pedoman Nasional Program Pengendalian
Penyakit Kusta”.
Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. 2015. Standar Pelayanan
Laboratorium Tuberkulosis. ISBN 978-602-235-743-8.
Kementrian kesehatan RI,2012 Petunjuk teknis Pemeriksaan Biakan, Identifikasi
dan Uji Kepekaan Mycobacterium tuberculosis, Jakarta .
Kementrian kesehatan RI,2012 Standar Prosedur Operasional Pemeriksaan
Mikroskopis TB.
Kementrian Kesehatan, (2012). Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia
Nomor 37 Tahun 2012. Tentang Penyelenggaraan Labolatorium Pusat
Kesehatan Masyarakat. Jakarta: MK RI. Hal 5
Kepmenkes, 2007.Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Tentang
Standar Profesi Ahli Teknologi Laboratorium Kesehatan. Menkes RI
Khairunnisa, Dian, Irnanda Lestari, Muhammad Muliandi Bandaso, dan Sri
Wahyuni. 2018. Uji Angka MPN Bakteri Coliform. Universitas Sumatera
Utara. Medan.
Kusuma, Sri Agung Fitri. 2009. Uji Biokimia Bakteri. Fakultas Farmasi
Universitas Padjadjaran. Bandung.
Label. 2008. Mikrobiologi: Pembuatan Media. Laboratorium Biologi FMIPA
Universitas Haluoleo. Kendari.
Mehdi, C. 2008. Mengenal Bahaya Formalin, Borak Dan Pewarna Berbahaya.
Laboratorium Biokimia, Jurusan Kimia FMIPA-UB. Malang
149
Modul Pelatihan teknis tenaga laboratorium Puskesmas Tingkat dasar Dep Kes,
RI., Puslabkes., 1995
Mudana, 2017. Buku Pedoman Pelaksanaan Program Praktik Kerja Lapangan
(Pkl). Lembaga Pengembangan Pembelajaran Dan Penjaminan Mutu
Universitas Pendidikan Ganesha, Singaraja.
Mukhtar Ikhsan, 2016. Deteksi Mycobacterium Tuberculosis Dan Resistensinya
Dengan Teknik Pcr (Polymerase Chain Reaction) Dan Genexpert Mtb/Rif.
Proposal, Pusat Penelitian Dan Penerbitan (Puslitpen) Lp2m Uin Syarif
Hidayatullah Jakarta.
Ngibad K. dan Herawati D. Analisis Kadar Klorida Dalam Air Sumur Dan Pdam
Di Desa Ngelom Sidoarjo. Jurnal Kimia Dan Pendidikan Kimia. Vol 4, No
1, Tahun 2019. Jawa timur
Novizan. 2002. Petunjuk Pemakaian Pestisida. Agro Media Pustaka.Jakarta.
Nugraha, Gilang. 2018. Pedoman Teknik Pemeriksaan Laboratorium Klinik
Untuk Mahasiswa Teknologi Laboratorium Medic. Jakarta. TIM.
Octaviani, C. P., E. M. Tania., I. Widiastuti., I. F. Arifin., R. Dwijayanti., R. C.
Alfarisi., S. Komaria. 2015. Pemeriksaan Narkoba Metode ICT. Makalah.
Jurusan Analis Kesehatan. Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan
Bandung. Bandung
Oktari. A dan Silvia. N. D. 2016. Pemeriksaan Golongan Darah Sistem ABO
Metode Slide Dengan Reagen Serum Golongan Darah A, B, O. Vol, 5 no. 2.
Sekolah Tinggi Analis Bakti Asing Bandung.
Pearce, Evelyn. C. (2006); “Anatomi dan Fisiologi Untuk
Paramedis”,PT.Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Pelczar, Michael J dan Chan, E. C. S. 2007. Dasar-Dasar Mikrobiologi Jilid I.
Jakarta: UI Press.
Peraturan Gubernur Sulawesi Selatan No. 69 tahun 2010. Baku Mutu Dan Kriteria
Kerusakan Lingkungan Hidup. Makassar
Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia No. 558/MenKes/Per/VII/2006

tanggal 31 Juli 2006
Pracoyo, N.E. 2006. Penelitian Bakteriologik Air Minum Isi Ulang di Daerah
Jabotabek. Cermin Dunia Kedokteran 152, hal. 37-40.
150
Prescott,L.M. 2002. Prescott-Harley-Klein: Microbiology 5th Edition. USA: The
McGrawth-Hill Companies
Putri. 2010. Cara Membuat Medium. Universitas Gadjah Mada. Yogyakarta.
Raisuli Ramadhan, Eka Fitria, Rosdiana, 2017. Deteksi Mycobacterium
Tuberculosis dengan Pemeriksaan Mikroskopis dan Teknik PCR Pada
Penderita Tuberkulosis Paru di Puskesmas Darul Imarah. Aceh. Volume 4
No. 2 Jurnal Penelitian Kesehatan
Rodiani, T., & Suprijadi. 2013. Analisis Titrimetri dan Gravimetri. Departemen
Pendidikan Nasional : Jakarta.
Rosida. A, 2016. Pemeriksaan Laboratorium Penyakit Hati. Jurnal Berkala

Kedoteran. Vol. 12 No. 1. Universitas Lambung Mangkurat/RSUD Ulin
Banjarmasin. Kalimantan Selatan
Sacher, Ronald A, Mc. Pherson, Richard A. 2004. Tinjauan Klinis Hasil
Pemeriksaan Laboratorium Edisi II. Jakarta:EGC.
SNI ISO/IEC 19028. 2008. Laminar Air Flow. Online: (http : // www .
biosafetycabinet. co.id/lam inar-air-flow/). Diakses pada tanggal 5 Februari
2020.
Staf Pengajar Departemen Mikrobiologi FKUI, 2009 :Penuntun Praktikum
Mikrobiologi Kedokteran, Pt Medical Multimedia Indonesia.
Suryaatmadja M. 2010, Tiroid : Pemeriksaan Laboratorium, ABC Laboratorium
Amerind Bio-Clinic, Jakarta [online] Available at : http://Tiroid:
Pemeriksaan Laboratorium_AmerindBio-Clinic.htm Tanggal 04 Febuari
2020.
Suryadi. I. B. B, 2015. Toksisitas Protein Produk Ekstraseluler Streptococcus
Agalactiae Isolat NK1 pada Ikan Nila Oreochromis Niloticus. Institut
Pertanian Bogor. Jawa Barat
Sutedjo AY, 2008. Mengenal penyakit melalui hasil pemeriksaan laboratorium.
Yogyakarta: Amera Books
Tarigan dan Edward.2003. Faktor Fisika Dan Kimia Air Sungai Selagan Bengkulu
Utara. Jurnal Natur Indonesia :2 (2)
151
Taufik, M., H. Marpaung., J. Gulton., dan S. L. Raja. 2017. Pemeriksaan
Narkotika Menggunakan Sampel Urine. Jurnal STIKNA (Sains, Teknologi,
Farmasi dan Kesehatan 1(1): 1-10
Vanilla, 2011. Treponema pallidum.:http://primavanilla.blogspot.com/2011/06/
treponema-pallidum-penyebab-penyakit.html Tanggal 04 Febuari 2020.
Velina. V.R., Akmal. Hanif. A. M., Erfrida, 2016. Gambaran Hasil Uji Widal
Berdasarkan Lama Demam pada Pasien Suspek Demam Tifoid. Jurnal
Kesehatan Andalas Vol. 5. Universitas Andalas Padang. Sumatera Barat.
Waluyo, L. 2009. Mikrobiologi Lingkungan. Malang: UMM Press.
Waluyo. 2008. Mikrobiologi Umum. UMM Press. Malang.
Wardhana, Wisnu. 2001. Dampak pencemaran lingkungan. Penerbit Andi.
Yogyakarta
Warono D dan Syamsudin. 2013. Unjuk kerja Spektrofotometer Untuk Analisa

Zat Aktif Ketoprofen. Jurnal Konversi 2(2) : 57-65
Widodo. D, 2015. Demam Tifoid. In: Siti, ed. Buku Ajar Ilmu Penyakit
DalamEdisi 6. Jakarta: Interna Publishing, pp. 549-558.
World Health Organization. Global tuberculosis report 2013. Geneva,2013
(WHO/HTM/TB/2013.11):6-67.
Wulandari D. D. Analisa Kesadahan Total Dan Kadar Klorida Air Di Kecamatan
Tanggulangin Sidoarjo. MTPH Journal. Volume 01 Nomor 01 Tahun
2017.surabaya
Yulia. R. I., Kabul L. P., Kinaish. R., Herrupawan. P. P. W, 2017. Tes Widal.
Poltekkes Kemenkes Semarang. Jawa Timur.
Yuni,2008. Uji Kepekaan Obat Anti Tuberculosis Lini Keduan Menggunakan
BACTEC Mycobacterium Growth Indicator Tube (MGIT). Pusat Biomedis
dan Teknologi Dasar Kesehatan. Jurnal Kefarmasian Indonesia.
Zahra, 2016.Pengambilan Specimen. EGC, Jakarta.
152
Zulfiana amalia, 2017. Profil Hasil Pemeriksaan Mycobacterium Tuberculosis
Menggunakan GENEXPERT Pada Pasien Di Rumah Sakit Umum Kota
Tangerang selatan Periode Juni 2016-Juni 2017. Proposal, Universitas Islam
Negri Syarif Hidayatullah Jakarta.
l
153
LAMPIRAN
A. Instalasi Pengambilan Spesimen
Pengambilan Sampel Darah Pengantaran Sampel ke berbagai

Vena. instalasi.
Pengambilan sampel air limbah Pelabelan sampel Raitz serum
154
B. Instalasi Media dan Reagensia
Pembuatan media Lowenstein Penyediaan tabung untuk

Jensen pembuatan media LTB
Pembuatan media ECB Penuangan larutan menggunakan

Dispenset
155
C. Instalasi Kimia Kesehatan
Titrasi larutan untuk Ekstraksi sampel untuk

COD pemeriksaan pestisida
Melarutkan sampel Ekstraksi sampel untuk

menggunakan aquadest pemeriksaan siklamat
156
D. Instalasi Mikrobiologi
Pemeriksaan TCM menggunakan Pemeriksaan E.coli pada media

sampel sputum, metode PCR B.Ecoli
Pengimputan data untuk Pewarnaan Ziehl Neelsen pada

pemeriksaan TCM sampel sputum
157
E. Instalasi Imunologi
Pemeriksaan Rheumatoid Factor Pemeriksaan HBSAg metode

ELFA
Hasil pemeriksaan HIV strategi Hasil pemeriksaan Golongan

III darah
158

Laporan Praktek Kerja Lapangan

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Laporan Praktek Kerja Lapangan

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN PRAKTEK KERJA LAPANGAN

DI BALAI BESAR LABORATORIUM KESEHATAN

PROGRAM STUDI DIII ANALIS KESEHATAN

karunia serta izin-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan

Laporan Praktek Kerja Lapangan di Balai Besar Laboratorium Kesehatan

pada penilaian Praktek Kerja Lapangan di Balai Besar Laboratorium Makassar

program studi D-III Analis Kesehatan T.A. 2019/2020.

laporan ini. Maka penulis mengucapkan terima kasih kepada :

Kesehatan (BBLK) Makassar yang telah memberikan izin kepada kami

untuk melakukan kegiatan Praktek Kerja Lapangan yang dilakukan di

beberapa Instalasi Laboratorium BBLK Makassar.

mahasiswa Universitas Bina Mandiri Gorontalo dan mengantar ke ruangan

yang ada di Balai Besar Kesehatan Makassar.

4. Bapak Agusrianto Yusuf, S.Pd., M.Si selaku dosen pembimbing I dalam

praktek kerja lapangan yang telah membantu dalam membimbing pembuatan

kerja lapangan yang telah membantu dalam membimbing pembuatan laporan

6. Kakak-kakak tenaga Analis Kesehatan yang telah membantu dan

mendamping kami dalam melakukan berbagai kegiatan praktek kerja

lapangan di beberapa instalasi di Balai Besar Laboratoium Kesehatan

Semoga laporan ini bisa bermanfaat untuk dijadikan tambahan pengetahuan,

Makassar, Februari 2020

1.1 Latar Belakang..........................................................................................1

1.4 Tempat dan Waktu Pelaksaan...................................................................5

BAB II HASIL PELAKSANAAN DAN PEMBAHASAN................................6

2.1 Gambaran Umum Balai Besar Laboratorium Kesehatan Makassar..........6

2.2 Instalasi – instalasi Yang Ada di Laboratorium BBLK Makassar..........11

2.2.1 Instalasi Pengambilan Spesimen..................................................11

2.2.2 Instalasi Patologi Klinik...............................................................12

2.2.3 Instalasi Media dan Reagensia.....................................................42

2.2.4 Instalasi Kimia Kesehatan............................................................57

2.2.5 Instalasi Mikrobiologi..................................................................82

2.2.6 Instalasi Imunologi.....................................................................105

BAB III PENUTUP...........................................................................................145

Keberhasilan pembangunan akan meningkatkan taraf kehidupan sosial

makin baik. Ketetapan MPR Nomor IV/MPR/1999 tentang Garis-garis besar

Haluan Negara 1999-2004 menetapkan bahwa kebijakan pembangunan kesehatan

saling mendukung dengan pendekatan paradigma sehat dan meningkatkan serta

memelihara mutu lembaga pelayanan non kesehatan melalui pemberdayaan

sumberdaya manusia secara berkelanjutan.

Pelayanan laboratorium kesehatan merupakan bagian yang tidak terpisahkan

dari pelayanan kesehatan kepada masyarakat. Laboratorium kesehatan sebagai

salah satu unit pelayanan kesehatan, diharapkan dapat memberikan informasi

Masyarakat menghendaki mutu hasil pengujian laboratorium untuk terus

ditingkatkan seiring dengan kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi serta

perkembangan penyakit. Untuk memenuhi kebutuhan masyarakat terhadap

pelayanan kesehatan yang semakin meningkat, baik jumlah maupun mutunya,

maka peranan laboratorium kesehatan baik dalam bentuk rujukan kesehatan

maupun bentuk lainnya perlu dikembangkan dan ditingkatkan.

pendidikan bertipe vokasional yang dikembangkan Departemen Kesehatan.

Program Diploma III Analis Kesehatan berorientasi kepada pemenuhan

dapat mengikuti perkembangan kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi

khususnya dalam bidang laboratorium kesehatan, sesuai dengan kebutuhan serta

prioritas pembangunan dengan memanfaatkan teknologi tepat guna termasuk

teknologi yang menunjang usaha peningkatan pelayanan kesehatan. Lulusan

Pendidikan Diploma III Analis Kesehatan yang terampil, dikembangkan

berdasarkan teori yang diajarkan oleh kampus, praktik dan kegiatan

pengembangan keterampilan lainnya seperti magang dan praktik kerjaa lapangan.

magang diharapkan dapat meningkatkan kompetisi lulusan dan menjadi tambahan

pengetahuan serta wawasan dunia kerja. Termasuk dalam pengalaman praktis

pemagangan adalah melakukan identifikasi permasalahan, analisis dan

penyelesaian masalah, serta penerapan ilmu dan teknologi, khususnya bidang

Lahan praktik sebagai sarana belajar mengajar utama untuk mewujudkan

keprofesionalitas mahasiswa dan juga sebagai wahana untuk meningkatkan