Cover - Bab1 - 6216009sc-p
Cover - Bab1 - 6216009sc-p
oleh:
Aileen Primalia Partio (6216009)
Pembimbing:
Prof. Dr. Ir. Judy Retti B. Witono, M.App.Sc.
Dr. Angela Justina Kumalaputri, S.T., M.T.
oleh:
Aileen Primalia Partio (6216009)
Pembimbing:
Prof. Dr. Ir. Judy Retti B. Witono, M.App.Sc.
Dr. Angela Justina Kumalaputri, S.T., M.T.
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan
anugerah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dengan baik. penelitian ini
disusun untuk memenuhi tugas akhir sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar
Pendidikan sarjana Strata-1 pada Program Studi Teknik Kimia, Fakultas Teknologi Industri,
Universitas Katolik Parahyangan, Bandung.
1. Dr. Ir. Judy Retti B. Witono, M.App.Sc. dan Dr. Angela Justina Kumalaputri, S.T.,
M.T. selaku dosen pembimbing yang telah memberikan bimbingan, pengarahan,
masukan serta motivasi yang bermanfaat selama penyusunan penelitian ini.
2. Orangtua dan seluruh keluarga yang selalu memberikan doa, dukungan, motivasi,
serta menyemangati selama proses penyusunan penelitian ini.
3. Sahabat-sahabat yang selalu mendukung, menyemangati serta memotivasi.
4. Rekan-rekan mahasiswa Teknik Kimia UNPAR angkatan 2016 yang selalu
mendukung.
5. Semua pihak baik secara langsung maupun tidak langsung telah membantu dalam
penyusunan penelitian ini.
Penulis
vi
DAFTAR ISI
BAB II .................................................................................................................................. 6
TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................................................... 6
2.1 Antioksidan ......................................................................................................... 6
2.1.1 Klasifikasi Antioksidan ....................................................................... 6
2.1.1.1 Antioksidan Alami ................................................................ 7
2.1.1.2 Antioksidan Sintetik ............................................................. 9
2.1.2 Aplikasi Antioksidan ........................................................................... 9
2.2 Mikroalga ......................................................................................................... 11
2.2.1 Spirulina ............................................................................................ 14
2.2.1.1 Sifat Fisik dan Kimia Spirulina .......................................... 17
vii
2.2.1.2 Fikosianin ........................................................................... 18
2.2.1.3 Klorofil ................................................................................ 18
2.2.1.4 Karotenoid ........................................................................... 19
2.2.1.5 Aplikasi Spirulina ................................................................ 20
2.2.2 Chlorella vulgaris .............................................................................. 22
2.2.2.1 Sifat Fisik C. vulgaris ......................................................... 25
2.2.2.2 Aplikasi C. vulgaris ............................................................ 25
2.3 Ekstraksi ........................................................................................................... 27
2.4 Fluida Superkritik ............................................................................................. 28
2.5 Supercritical Fluid Extractioin (SFE) .............................................................. 31
2.6 Co-solvent ......................................................................................................... 32
2.7 Ekstraksi Fikosianin pada Spirulina platensis .................................................. 33
BAB III ............................................................................................................................... 35
METODE PENELITIAN ................................................................................................... 35
3.1 Alat dan Bahan Penelitian .............................................................................. 35
3.2 Metode Penelitian ........................................................................................... 36
3.2.1 Proses Ekstraksi Superkritik CO2 ...................................................... 37
3.2.2. Analisis Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH ..................... 38
3.3 Perhitungan Perolehan Ekstrak ...................................................................... 39
3.4 Lokasi dan Jadwal Kerja Penelitian ............................................................... 39
BAB IV ............................................................................................................................... 40
PEMBAHASAN ................................................................................................................. 40
4.1 Penelitian Utama .............................................................................................. 40
4.2 Analisis Aktivitas Antioksidan ......................................................................... 41
4.3 Analisis Perolehan ............................................................................................ 46
BAB V ................................................................................................................................ 49
KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................................................... 49
5.1 Kesimpulan ....................................................................................................... 49
5.2 Saran ................................................................................................................. 49
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................................... 50
LAMPIRAN A ................................................................................................................... 60
viii
PROSEDUR ANALISIS SAMPEL ................................................................................... 60
A.1 Analisis Aktivitas Antioksidan dengan DPPH .............................................. 60
LAMPIRAN B .................................................................................................................... 61
LEMBAR DATA KESELAMATAN BAHAN ................................................................. 61
B.1 Gas CO2 ......................................................................................................... 61
B.2 Gas N2 ............................................................................................................ 61
B. 3 Etanol ............................................................................................................ 62
B.4 DPPH ............................................................................................................. 63
LAMPIRAN C .................................................................................................................... 65
DATA PENGAMATAN .................................................................................................... 65
C.1 Analisis Aktivitas Antioksidan ........................................................................ 65
C.1.1 Variasi Variabel Konsentrasi Co-solvent .......................................... 65
C.2 Analisis Perolehan ........................................................................................... 68
LAMPIRAN D ................................................................................................................... 69
GRAFIK ............................................................................................................................. 69
D.1 Analisis Aktivitas Antioksidan ........................................................................ 69
D.2 Analisis Perolehan ........................................................................................... 77
LAMPIRAN E .................................................................................................................... 80
CONTOH PERHITUNGAN .............................................................................................. 80
E.1 Penentuan % Inhibisi ....................................................................................... 80
E.2 Penentuan Nilai IC50 ........................................................................................ 80
ix
DAFTAR GAMBAR
x
Gambar D.6 Konsentrasi Sampel terhadap % Inhibisi 18 mL Etanol, 4 Jam .................... 71
Gambar D.7 Konsentrasi Sampel terhadap % Inhibisi 6 mL Minyak Kedelai, 2 Jam ....... 72
Gambar D.8 Konsentrasi Sampel terhadap % Inhibisi 18 mL Minyak Kedelai, 2 Jam ..... 72
Gambar D.9 Konsentrasi Sampel terhadap % Inhibisi 6 mL Minyak Kedelai, 3 Jam ....... 73
Gambar D.10 Konsentrasi Sampel terhadap % Inhibisi 18 mL Minyak Kedelai, 3 Jam ... 73
Gambar D.11 Konsentrasi Sampel terhadap % Inhibisi 6 mL Minyak Kedelai, 4 Jam ..... 74
Gambar D.12 Konsentrasi Sampel terhadap % Inhibisi 18 mL Minyak Kedelai, 4 Jam ... 74
Gambar D.13 Pengaruh Volume Co-solvent terhadap IC50 dengan Waktu Ekstraksi 2 Jam
............................................................................................................................................. 75
Gambar D.14 Pengaruh Volume Co-solvent terhadap IC50 dengan Waktu Ekstraksi 3 Jam
............................................................................................................................................. 75
Gambar D.15 Pengaruh Volume Co-solvent terhadap IC50 dengan Waktu Ekstraksi 4 Jam
............................................................................................................................................. 76
Gambar D.16 Pengaruh Waktu Ekstraksi terhadap IC50 dengan Volume Co-solvent 6 mL
............................................................................................................................................. 76
Gambar D.17 Pengaruh Waktu Ekstraksi terhadap IC50 dengan Volume Co-solvent 18 mL
............................................................................................................................................. 77
Gambar D.18 Pengaruh Volume Co-solvent terhadap % Perolehan dengan Waktu Ekstraksi
2 Jam ................................................................................................................................... 77
Gambar D.19 Pengaruh Volume Co-solvent terhadap % Perolehan dengan Waktu Ekstraksi
3 Jam ................................................................................................................................... 78
Gambar D.20 Pengaruh Volume Co-solvent terhadap % Perolehan dengan Waktu Ekstraksi
4 Jam ................................................................................................................................... 78
Gambar D.21 Pengaruh Waktu Ekstraksi terhadap % Perolehan dengan Volume Co-solvent
6 mL .................................................................................................................................... 79
Gambar D.22 Pengaruh Waktu Ekstraksi terhadap % Perolehan dengan Volume Co-solvent
18 mL .................................................................................................................................. 79
xi
DAFTAR TABEL
xii
Tabel C.2 Hasil Pengamatan 2 Jam Co-solvent Etanol Volume 18 mL ............................. 65
Tabel C.3 Hasil Pengamatan 3 Jam Co-solvent Etanol Volume 6 mL ................................ 65
Tabel C.4 Hasil Pengamatan 3 Jam Co-solvent Etanol Volume 18 mL ............................. 66
Tabel C.5 Hasil Pengamatan 4 Jam Co-solvent Etanol Volume 6 mL ............................... 66
Tabel C.6 Hasil Pengamatan 4 Jam Co-solvent Etanol Volume 18 mL ............................. 66
Tabel C.7 Hasil Pengamatan 2 Jam Co-solvent Minyak Kedelai Volume 6 mL ............... 66
Tabel C.8 Hasil Pengamatan 2 Jam Co-solvent Minyak Kedelai Volume 18 mL ............. 67
Tabel C.9 Hasil Pengamatan 3 Jam Co-solvent Minyak Kedelai Volume 6 mL ............... 67
Tabel C.10 Hasil Pengamatan 3 Jam Co-solvent Minyak Kedelai Volume 18 mL ........... 67
Tabel C.11 Hasil Pengamatan 4 Jam Co-solvent Minyak Kedelai Volume 6 mL ............. 67
Tabe C.12 Hasil Pengamatan 4 Jam Co-solvent Minyak Kedelai Volume 18 mL ............ 68
Tabel C.13 Hasil Pengamatan % Perolehan Co-solvent Etanol ......................................... 68
Tabel C.14 Hasil Pengamatan % Perolehan Co-solvent Minyak Kedelai .......................... 68
xiii
DAFTAR PERSAMAAN
xiv
INTISARI
Dewasa ini mikroalga banyak dimanfaatkan dalam berbagai bidang, salah satunya
sebagai antioksidan untuk menangkal radikal bebas yang dapat menyebabkan berbagai
penyakit. Spirulina platensis merupakan mikroalga yang memiliki tiga jenis pigmen alami,
yaitu fikosianin, klorofil, dan β-karoten. Ketiga pigmen ini mengandung antioksidan yang
sangat bermanfaat bagi manusia. Fikosianin merupakan zat warna biru alami yang paling
banyak ditemukan dalam Spirulina platensis dan merupakan zat yang mengandung
antioksidan paling tinggi. Tujuan dari penelitian ini adalah mempelajari ekstraksi fikosianin
dari Spirulina platensis dengan fluida superkritik CO2.
Variabel yang dipelajari dalam penelitian ini adalah jenis co-solvent (etanol dan
minyak kedelai), volume co-solvent (6 dan 18 mL), dan waktu ekstraksi (2, 3, dan 4 jam).
Penelitian Spirulina platensis dilakukan dengan ekstraksi fluida superkritik CO2. Ekstrak
yang didapat dari ekstraksi SC-CO2 akan dianalisis. Analisis yang akan dilakukan adalah
aktivitas antioksidan pada Spirulina platensis dengan metode DPPH menggunakan
spektrofotometer UV/Vis.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa semakin banyak pelarut yang digunakan, maka
aktivitas antioksidan akan semakin kuat pada waktu ekstraksi berturut-turut 2, 3, dan 4 jam.
Pada variasi waktu ekstraksi, didapati bahwa semakin lama waktu ekstraksi, aktivitas
antioksidan akan semakin kuat. Pada variasi jenis co-solvent, didapati bahwa jenis co-solvent
etanol 96 % menghasilkan aktivitas antioksidan lebih kuat dibandingkan dengan co-solvent
minyak kedelai, akan tetapi perolehan yang didapat pada co-solvent minyak kedelai lebih
besar dibandingkan dengan perolehan pada co-solvent etanol 96 %. Aktivitas antioksidan
terkuat yang didapat pada penelitian ini ialah sebesar 81,71 ppm pada variasi jenis co-solvent
etanol 96 % sebanyak 18 mL dengan waktu ekstraksi selama 4 jam. Sementara untuk
perolehan terbanyak yang didapat pada penelitian ini ialah sebesar 16,97 % pada variasi jenis
co-solvent minyak kedelai sebanyak 18 mL dengan waktu ekstraksi selama 4 jam.
Kata kunci: Spirulina platensis, fikosianin, ekstraksi fluida superkritik CO2, perolehan
fikosianin, aktivitas antioksidan
xv
ABSTRACT
Nowadays microalgaes are widely used in various applications, one of the example
is as an antioxidant that counteract the free radicals reaction which causing various
diseases. Spirulina platensis is a microalgae that has three types of natural pigments, namely
phycocyanin, chlorophyll, and β-carotene. These three pigments contain antioxidants which
are very beneficial for humans. Phycocyanin is the most natural blue color which can be
found in Spirulina platensis and the highest antioxidant substance in Spirulina platensis.
Extraction need to be proceeded to obtain the phycocyanin from Spirulina platensis. The
aim of this experiment is to study phycocyanin extraction from Spirulina plantensis using
CO2 supercritical fluid.
The variables study in this experiment are co-solvent types (ethanol and soybean
oil), volume of co-solvent (6 and 18 mL), and extraction time (2, 3, and 4 hours). Spirulina
platensis research was conducted by supercritical CO2 fluid extraction. Extracts obtained
from SC-CO2 extraction will be analyzed. The analyzed to be carried out is antioxidant
activity on Spirulina platensis using the DPPH method with UV/Vis spectrophotometer.
The results showed that the more co-solvents were used, the antioxidant activity
would be stronger at 2, 3, and 4 hours of extraction time. At the variation of extraction time,
it was found that the longer the extraction time, the stronger the antioxidant activity. In the
variation of co-solvent types, it was found that the 96 % ethanol co-solvent type, produced
stronger antioxidant activity compared to co-solvent soybean oil, but the yield obtained in
the co-solvent of soybean oil were greater that in co-solvent of ethanol. The strongest
antioxidant activity obtained in this study was 81.71 ppm on the variation of co-solvent
ethanol 96 % in 18 mL with 4 hours of extraction time. While for the biggest yield obtain in
this study amounted to 16.97 % on the variation of co-solvent soybean oil in 18 mL with 4
hours of extraction time.
xvi
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Indonesia merupakan negara tropis yang membuat tanaman fotosintesis dapat
tumbuh subur, termasuk mikroalga. Menurut Batten et al. (2011), Indonesia merupakan
negara ketiga di APEC (Asia-Pacific Economic Cooperation) yang memiliki potensi
produksi mikroalga yang cukup besar, seperti yang ditunjukkan pada Tabel 1.1 di bawah ini.
Hal tersebut juga diperkuat oleh Van Harmelen dan Oonk (2006) yang menyatakan bahwa
wilayah negara dengan temperatur tanah di atas 15 oC merupakan negara yang cocok untuk
produksi mikroalga, dimana Indonesia termasuk ke dalamnya seperti yang ditunjukkan pada
Gambar 1.1.
1
2
Gambar 1.1 Wilayah dengan Temperatur untuk Produksi Mikroalga (Van Harmelen dan Oonk, 2006)
Mikroalga merupakan sumber daya alam hayati kelautan non perikanan yang belum
banyak dieksplorasi padahal kaya akan manfaat. Mikroalga dapat dimanfaatkan dalam
berbagai bidang seperti energi, bahan kimia, makanan, farmasi, serta kosmetik. Berdasarkan
piramida pemanfaatan mikroalga (Eickhout, 2012) yang dikutip dari Bio Based Economy-
Bioraffinage, pemanfaatan mikroalga sebagai sumber alternatif bahan bakar menghasilkan
nilai ekonomis yang paling rendah. Sementara, untuk nilai ekonomis tertinggi
pemanfaatannya adalah dalam bidang farmasi, salah satunya sebagai suplemen kesehatan
(Gambar 1.2). Hal inilah yang mendorong munculnya penelitian-penelitian mengenai
pemanfaatan mikroalga sebagai sumber antioksidan.
Menurut Koyande et al. (2019), mikroalga memiliki kandungan protein yang mirip
dengan susu, kedelai, telur, dan daging. Selain itu, mikroalga dapat memproduksi
antioksidan dan pigmen seperti klorofil, karoten, dan phycobiliprotein. Antioksidan dan
pigmen tersebut digunakan sebagai bentuk sistem perlindungan terhadap lingkungan yang
banyak mengandung radikal bebas dan tekanan oksidatif tinggi. Tubuh manusia tidak dapat
memproduksi antioksidan dengan sendirinya. Antioksidan yang dihasilkan oleh mikroalga
salah satunya dapat dimanfaatkan sebagai suplemen bagi manusia.
Menurut Becker (2013), mikroalga kaya akan protein, karbohidrat, lipid, dan vitamin
seperti vitamin A, B1, B2, B6, B12, C (asam askorbat), dan E (tokoferol) serta mineral
seperti kalium, besi, magnesium, kalsium, dan iodin. Agar antioksidan dapat diekstraksi,
maka digunakan pelarut-pelarut organik yang umumya beracun dan berbahaya. Untuk itu,
pada penelitian ini akan digunakan alternatif ekstraksi bebas pelarut dengan menggunakan
fluida superkritik.
Supercritical Fluid Extraction (SFE) merupakan teknik ekstraksi dengan
menggunakan fluida pada kondisi dekat atau di atas titik kritiknya sebagai pelarut.
Antioksidan pada bahan-bahan alam umumnya hanya tahan pada temperatur setinggi ± 60
o
C dan akan terdenaturasi pada temperatur di atas 70 oC (Krishnaiah et al., 2013). Fluida
yang umum digunakan pada SFE adalah CO2 dengan temperatur kritik yang relatif rendah,
yaitu 31 oC, sehingga cocok digunakan untuk mengekstraksi bahan alam. Hal tersebutlah
yang mendorong penggunaan ekstraksi dengan fluida superkritik CO2 pada penelitian ini.
1.2 Tema Sentral Masalah Penelitian
Pemanfaatan mikroalga sebagai sumber daya alam hayati kelautan non perikanan
yang melimpah di Indonesia masih kurang. Padahal mikroalga menghasilkan antioksidan
yang kaya akan manfaat bagi tubuh. Oleh karena itu diperlukan pengembangan produksi
antioksidan berbasis mikroalga sebagai usaha pemanfaatan sumber daya alam hayati
kelautan non perikanan Indonesia yang belum banyak dieksplorasi.
1.3 Identifikasi Masalah Penelitian
1. Bagaimana pengaruh jenis co-solvent terhadap perolehan ekstrak fikosianin dan
aktivitas antioksidan dari Spirulina platensis?
2. Bagaimana pengaruh volume co-solvent terhadap perolehan ekstrak fikosianin dan
aktivitas antioksidaan dari Spirulina platensis?
3. Bagaimana pengaruh waktu ekstraksi terhadap perolehan ekstrak fikosianin dan
aktivitas antioksidan dari Spirulina platensis?
4
No Co-solvent Temperatur (◦C) Tekanan (bar) Waktu (min) Laju Alir CO₂ (mL/min) Preatreatment % β-karoten % Yield Referensi
1 80 0,14
2 10 %v/v Etanol 55 220 180 5 − − 2.46 Mendiola et al., 2005
3 360 3.94
4 − 65
35 120
5 10 % v/v Etanol 68
6 − 68
55 220
7 10 % v/v Etanol 95
75 − Air-dried − Mendiola et al., 2007
8 − 76
35 320
9 10 % v/v Etanol 93
10 − 83
55 360
11 10 % v/v Etanol 87
12 200 180 0,4
13 120 0,423
32 300
14 240 0,49
15 400 180 0,428
16 120 0,426
200
17 20 % v/v Etanol 40 240 1 − − 0,548 Wang et al., 2007
18 300 180 0,269
19 200 180 0,668
20 120 0,466
48 300
21 240 0,909
22 400 180 0,489
23 100 11
40
24 Etanol 400 180 − Freeze-drying 9 − Crampon et al., 2017
25 60 400 22
5