Tujuan percobaan : - Memahami proses preparasi sampel untuk analisis kromatografi kertas - Mengetahui komponen pigmen warna pada sampel tumbuhan Dasar Teori : - Cari mengenai pemisahan pigmen warna tumbuhan dengan kromatografi kertas Alat : 1. Gelas kimia 50 Ml 1 buah 6. Pensil 2. Pipet Tetes 1 buah 7. Gunting 3. Kaca Arloji 1 buah 8. Mortar Alu 4. Botol semprot 9. Hotplate 5. Penggaris 10. Cawan porselen Bahan : 11. Lidi/tusuk gigi 14. Kertas Whattman 12. Etanol 98% 15. Sampel tumbuhan 13. Etil Asetat Prosedur Analisis 1. Preparasi Sampel a. Sampel dicuci bersih terlebih dahulu lalu keringkan b. Timbang sebanyak 1 gram c. Haluskan sampel dengan mortar alu, dengan ditambahkan pelarut aseton sedikit demi sedikit untuk mempermudah penggerusan d. Tambahkan aseton sebnayak 30 mL dan tunggu satu jam untuk proses ekstraksi. e. Setelah satu jam pisahkan larutan dan padatannya dengan cara disaring. f. Pekatkan larutan hasil ektrak pada cawan porselen dengan memanaskan di atas hotplate (sampai mudah ditotolkan pada kertas) g. Angkat dan dinginkan 2. Optimasi Fasa Gerak yang Sesuai a. Gunting 4 kertas whatmann dengan ukuran disesuaikan dengan gelas kimia. Beri batas dengan pensil kira-kira 1-2 cm dari ujung bawah b. Siapkan gelas kimia diisi dengan ± 10 mL fasa gerak. Fasa gerak yang digunakan yaitu - 10 mL etanol - 10 mL etil asetat - Etanol : aquades 5 mL : 5 mL - Etanol : etil asetat 5 mL : 5 mL c. Gelas kimia yang berisi cairan ditutup dengan plastic wrap untuk menstabilkan ruangannya selama 15 menit d. Kertas whatmann masing-masing diberi 1 totolan hasil ekstrak daun e. Kertas ditempatkan dalam gelas kimia yang sudah stabil dan dijaga supaya garis bawah kertas tidak mengenai pelarut. Tutup rapat gelas kimia dengan plastic wrap. f. Kertas didiamkan sampai cairan pelarut mencapai atas atau sudah tidak dapat naik lagi, kemudian angkat g. Kertas dikeringkan untuk selanjutnya diberi batas dengan pensil pada tiap-tiap warna yang terpisah h. Hitung nilai Rf-nya yaitu jarak perpindahan tiap komponen terhadap jarak pelarut Jarak yang ditempuh komponen Rf = jarak yang ditempuh pelarut i. Lihat hasil pelarut mana yang dapat memisahkan secara maksimal Pertanyaan : 1. Apa yang akan dipisahkan dengan Teknik ini? Di dalam organ tumbuhan apa? 2. Sebutkan senyawa yang ada pada pigmen warna tumbuhan, beserta warnanya! 3. Dari hasil praktikum, Senyawa apa yang terkandung dalam pigmen sampel kalian? Carilah sifat kepolarannya 4. Senyawa apa yang digunakan sebagai fase diam dan fase gerak? Mengapa digunakan bahan tersebut (apa alasannya) ? PROSEDUR PRAKTIKUM ANALISIS PIGMEN WARNA PADA SAMPEL TUMBUHAN Tujuan percobaan : - Memahami proses preparasi sampel untuk analisis kromatografi kertas - Mengetahui komponen pigmen warna pada sampel tumbuhan Dasar Teori : - Cari mengenai pemisahan pigmen warna tumbuhan dengan kromatografi kertas Alat : 1. Gelas kimia 50 Ml 1 buah 6. Pensil 2. Pipet Tetes 1 buah 7. Gunting 3. Kaca Arloji 1 buah 8. Mortar Alu 4. Botol semprot 9. Hotplate 5. Penggaris 10. Cawan porselen Bahan : 11. Lidi/tusuk gigi 14. Kertas Whattman 12. Etanol 98% 15. Sampel tumbuhan 13. Etil Asetat Prosedur Analisis 1. Preparasi Sampel a. Sampel dicuci bersih terlebih dahulu lalu keringkan b. Timbang sebanyak 1 gram c. Haluskan sampel dengan mortar alu, dengan ditambahkan pelarut aseton sedikit demi sedikit untuk mempermudah penggerusan d. Tambahkan aseton sebnayak 30 mL dan tunggu satu jam untuk proses ekstraksi. e. Setelah satu jam pisahkan larutan dan padatannya dengan cara disaring. f. Pekatkan larutan hasil ektrak pada cawan porselen dengan memanaskan di atas hotplate (sampai mudah ditotolkan pada kertas) g. Angkat dan dinginkan 2. Optimasi Fasa Gerak yang Sesuai a. Gunting 4 kertas whatmann dengan ukuran disesuaikan dengan gelas kimia. Beri batas dengan pensil kira-kira 1-2 cm dari ujung bawah b. Siapkan gelas kimia diisi dengan ± 10 mL fasa gerak. Fasa gerak yang digunakan yaitu - 10 mL etanol - 10 mL etil asetat - Etanol : aquades 5 mL : 5 mL - Etanol : etil asetat 5 mL : 5 mL c. Gelas kimia yang berisi cairan ditutup dengan plastic wrap untuk menstabilkan ruangannya selama 15 menit d. Kertas whatmann masing-masing diberi 1 totolan hasil ekstrak daun e. Kertas ditempatkan dalam gelas kimia yang sudah stabil dan dijaga supaya garis bawah kertas tidak mengenai pelarut. Tutup rapat gelas kimia dengan plastic wrap. f. Kertas didiamkan sampai cairan pelarut mencapai atas atau sudah tidak dapat naik lagi, kemudian angkat g. Kertas dikeringkan untuk selanjutnya diberi batas dengan pensil pada tiap-tiap warna yang terpisah h. Hitung nilai Rf-nya yaitu jarak perpindahan tiap komponen terhadap jarak pelarut Jarak yang ditempuh komponen Rf = jarak yang ditempuh pelarut i. Lihat hasil pelarut mana yang dapat memisahkan secara maksimal Pertanyaan : 1. Apa yang akan dipisahkan dengan Teknik ini? Di dalam organ tumbuhan apa? 2. Sebutkan senyawa yang ada pada pigmen warna tumbuhan, beserta warnanya! 3. Dari hasil praktikum, Senyawa apa yang terkandung dalam pigmen sampel kalian? Carilah sifat kepolarannya 4. Senyawa apa yang digunakan sebagai fase diam dan fase gerak? Mengapa digunakan bahan tersebut (apa alasannya) ?