PROPOSAL KARYA TULIS ILMIAH

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL KULIT

BATANG SIMPUR (Dillenia suffruticosa) TERHADAP BAKTERI
Escherichia coli

Diajukan sebagai salah satu syarat memperoleh gelar

Ahli Madya Kesehatan di Bidang Farmasi

Disusun oleh:

SUCI NOVIKA PUTRI

214840136

PROGRAM STUDI FARMASI

POLTEKKES KEMENKES PANGKALPINANG
TAHUN 2024
 PROPOSAL KARYA TULIS ILMIAH

UJI EFEKTIVITAS DAYA HAMBAT EKSTRAK ETANOL

KULIT BATANG SIMPUR (Dillenia Suffruticosa) TERHADAP
PERTUMBUHAN BAKTERI Escherichia coli

Diajukan sebagai salah satu syarat memperoleh gelar

Ahli Madya Kesehatan di Bidang Farmasi

Disusun oleh:

SUCI NOVIKA PUTRI

214840136

Dosen Pembimbing:

Auronita Puspa Pratiwi, M. Sc

Ratih Puspita Kusumadewi Purba, S.Si., M.Sc

PROGRAM STUDI FARMASI

POLTEKKES KEMENKES PANGKALPINANG
TAHUN 2024

ii
 PERSETUJUAN PROPOSAL KARYA TULIS ILMIAH

Nama : Suci Novika Putri

NIM : 214840136
Program Studi : Farmasi
Judul KTI : Uji Efektivitas Daya Hambat Ekstrak Etanol Kulit Batang
Simpur (Dillenia suffruticosa) Terhadap Pertumbuhan
Bakteri Escherichia coli
Telah disetujui oleh pembimbing Karya Tulis Ilmiah untuk disajikan pada seminar
proposal Karya Tulis Ilmiah Program Studi Farmasi Poltekkes Kemenkes
Pangkalpinang.

Pangkalanbaru, 2024

Disetujui oleh
Pembimbing I Pembimbing II

Auronita Puspa Pratiwi, M. Sc Ratih Puspita K.P., S.Si., M.Sc

NIP 198803222012122002 NIP 198103102010122001

iii
 PENGESAHAN PROPOSAL KARYA TULIS ILMIAH

UJI EFEKTIVITAS DAYA HAMBAT EKSTRAK ETANOL KULIT

BATANG SIMPUR (Dillenia Suffruticosa) TERHADAP PERTUMBUHAN
BAKTERI Escherichia coli

Oleh:
SUCI NOVIKA PUTRI
214840136

Diajukan dihadapan Penguji Karya Tulis Ilmiah

Program Studi Farmasi Poltekkes Kemenkes Pangkalpinang
pada tanggal: 2024

Pangkalanbaru, 2024
Mengetahui,

Pembimbing I Ketua Program Studi Farmasi

Auronita Puspa Pratiwi, M. Sc. Eva Dewi Rosmawati Purba, M.Kes.

NIP 198803222012122002 NIP 197901152012122002

Pembimbing II

Ratih Puspita K.P., S.Si., M.Sc.

NIP 198103102010122001

Penguji:

Ketua Penguji
Eva Dewi Rosmawati Purba, M.Kes.
NIP 197901152012122002

Anggota Penguji I
Auronita Puspa Pratiwi, M. Sc.
NIP 198803222012122002

Anggota Penguji II
Ratih Puspita K.P., S.Si., M.Sc.
NIP 198103102010122001

iv
 KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Wr.Wb.
Segala puji dan syukur peneliti panjatkan kehadirat Allah SWT atas
rahmat dan karunia-Nya sehingga peneliti dapat menyelesaikan Proposal Karya
Tulis Ilmiah (KTI) yang berjudul “Uji Efektivitas Daya Hambat Ekstrak Etanol
Kulit Batang Simpur (Dillenia Suffruticosa) Terhadap Pertumbuhan Bakteri
Escherichia coli”. Penulisan proposal ini diajukan sebagai persyaratan akademis
dalam rangka menyelesaikan studi Diploma III pada Program Studi Farmasi
Poltekkes Kemenkes Pangkalpinang.
Peneliti menyadari bahwa dalam penulisan Proposal KTI ini tidak lepas
dari dukungan dan bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu, peneliti mengucapkan
terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu, terutama kepada:
1. Bapak Akhiat, SKM., M.Si selaku Direktur Poltekkes Kemenkes
Pangkalpinang
2. Ibu Eva Dewi Rosmawati Purba, M.Kes. selaku Ketua Program Studi Farmasi
Poltekkes Kemenkes Pangkalpinang dan selaku Ketua Penguji yang telah
memberikan masukan kepada peneliti.
3. Ibu Auronita Puspa Pratiwi, M. Sc selaku Dosen Pembimbing I atas bimbingan
dan dukungan yang telah diberikan kepada peneliti
4. Ibu Ratih Puspita Kusumadewi Purba, S.Si., M.Sc. selaku Dosen Pembimbing
II atas bimbingan dan dukungan yang telah diberikan kepada peneliti
5. Segenap dosen dan staf Poltekkes Kemenkes Pangkalpinang
6. Semua pihak yang telah membantu peneliti dalam menyelesaikan Proposal KTI
ini.
Peneliti menyadari dalam Proposal KTI ini masih terdapat kekurangan dan
kelemahan. Oleh karena itu, peneliti mengharapkan kritik dan saran yang
membangun dari para pembaca. Akhir kata peneliti mengharapkan semoga
Proposal KTI ini dapat bermanfaat bagi semua pihak.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb.

v
 Pangkalanbaru, 2024
Peneliti,

Suci Novika Putri

vi
 DAFTAR ISI

HALAMAN SAMPUL.....................................................................................i
HALAMAN JUDUL........................................................................................ii
HALAMAN PERSETUJUAN.........................................................................iii
HALAMAN PENGESAHAN..........................................................................iv
KATA PENGANTAR.......................................................................................v
DAFTAR ISI.....................................................................................................vi
DAFTAR TABEL.............................................................................................ix
DAFTAR GAMBAR........................................................................................x
DAFTAR LAMPIRAN.....................................................................................xi
BAB I PENDAHULUAN..............................................................................12

A. Latar Belakang..............................................................................12
B. Rumusan Masalah.........................................................................14
C. Tujuan...........................................................................................14
D. Manfaat.........................................................................................15
E. Ruang Lingkup.............................................................................15

BAB II TINJAUAN PUSTAKA......................................................................17

A. Tinjauan Teori...............................................................................17
1. Deskripsi Tanaman Dillenia suffruticosa................................17
2. Diare........................................................................................19
3. Escherichia coli......................................................................21
4. Antibakteri..............................................................................22
5. Ekstraksi..................................................................................24
6. Pelarut.....................................................................................26
7. Skrining fitokimia...................................................................27
B. Keaslian Penelitian.......................................................................30
C. Kerangka Teori.............................................................................31
D. Kerangka Konsep.........................................................................31
E. Definisi Operasional.....................................................................32

vii
 F. Hipotesis.......................................................................................32

BAB III METODE PENELITIAN..................................................................33

A. Rancangan Penelitian...................................................................33
B. Waktu dan Tempat........................................................................33
C. Alat dan Bahan.............................................................................34
D. Prosedur Kerja..............................................................................34
1. Pengambilan Sampel................................................................34
2. Pembuatan Serbuk...................................................................35
3. Pembuatan Ekstrak..................................................................35
4. Skring Uji Fitokimia................................................................37
5. Sterilisasi alat dan bahan..........................................................38
6. Pembuatan Larutan Levofloxacin 5%......................................38
7. Penyiapan Kertas Cakram dan Media......................................39
8. Peremajaan Bakteri..................................................................39
9. Pembuatan Suspensi Bakteri....................................................40
10. Uji Aktivitas Antibakteri..........................................................40
E. Cara Pengolahan Data..................................................................41

DAFTAR PUSTAKA........................................................................................43
LAMPIRAN.....................................................................................................46

viii
 DAFTAR TABEL

Tabel 1 Kategori Respon Hambat Bakteri.............................................................24

Tabel 2 Keaslian Penelitian...................................................................................30
Tabel 3 Definisi Operasional.................................................................................32

ix
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1 Tanaman Dillenia suffruticosa..............................................................17

Gambar 2 Kerangka Teori.....................................................................................31
Gambar 3 Kerangka Konsep.................................................................................31

x
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Perhitungan Pengulangan Perlakuan..................................................47

Lampiran 2 Tabel Hasil Pengolahan Data Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol
Kulit Batang Dillenia suffruticosa Terhadap Bakteri Escherichia coli
..........................................................................................................48

xi
 BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Penyakit diare merupakan salah satu penyakit infeksi saluran

pencernaan di Indonesia masih menjadi salah satu masalah pada kesehatan

masyarakat. Di negara berkembang sampai saat ini diare masih menjadi

masalah kesehatan dunia, masalah tersebut dilihat dari tingginya angka

kesakitan dan kematian akibat diare. Menurut Kemenkes (2021) jumlah

kasus diare tahun 2021 di Indonesia 7.350.708 mengalami kenaikan yang

dimana tahun 2020 terdapat 7.318.417 kasus, Di negara berkembang

sampai saat ini diare masih menjadi masalah kesehatan dunia, masalah

tersebut dilihat dari tingginya angka kesakitan dan kematian akibat diare.

Menurut Dinkes Provinsi Kepulauan Bangka Belitung (2023), angka

kejadian diare sebanyak 7.283 kasus pada tahun 2022. Pada 2023, kasus

diare mencapai 2.537 dari awal Januari hingga Juli.

Infeksi pada saluran pencernaan banyak terjadi disebabkan oleh bakteri

yang ditunjukkan pada penelitian bidang kesehatan (Azzahra et al., 2019).

Infeksi pada saluran pencernaan paling sering menimbulkan gejala diare.

Adapun bakteri yang menjadi penyebab utama infeksi pada saluran

pencernaan adalah Escherichia coli. Escherichia coli merupakan bakteri

yang paling banyak menimbulkan infeksi saluran cerna. Bakteri ini

biasanya menyebabkan infeksi melalui makanan, minuman maupun

12
higiene lingkungan sekitarnya (penggunaan air bersih, jamban keluarga

dan

13
 14

pengelolaan sampah keluarga) yang dapat menyebabkan gejala disentri,

diare dan berbagai penyakit saluran pencernaan lainnya (Nurhaedah,

2019).

Keberagaman Indonesia akan sumber daya alam khususnya sumber

daya hayati dari 40.000 jenis tumbuhan yang ada di Indonesia, beberapa

jenis diantaranya sering digunakan sebagai bahan untuk pengobatan.

Tanaman Simpur (Dillenia suffruticosa) adalah tanaman yang memiliki

banyak manfaatnya. Saat ini jumlah tanaman simpur semakin berkurang

sehingga perlu dilakukan pembudidayaan dan pelestarian kembali, karena

pada beberapa penelitian menunjukan bahwa simpur memiliki bioaktifitas

yang dapat dikembangkan menjadi bahan obat (Utami dan Anjani, 2020).

Pada penelitian ini akan menggunakan Dillenia suffruticosa karena

merupakan tanaman obat suku lum yang digunakan sebagai tanaman obat

tradisional biasanya digunakan pada bagian daun untuk mengobati memar.

Tanaman ini juga banyak tumbuh dan tersebar di wilayah Bangka Belitung

(Anjani 2023). Utami dan Anjani (2020) menyebutkan hasil uji fitokimia

ekstrak daun dan kulit batang Dillenia suffruticosa memiliki kandungan

senyawa golongan alkaloid, flavonoid, saponin, tannin, terpenoid, dan

steroid, sedangkan pada ekstrak akar Dillenia suffruticosa memiliki

kandungan senyawa golongan alkaloid, flavonoid, dan tannin. Fania

(2023) menyatakan bahwa daun Dillenia suffruticosa memiliki aktivitas

antibakteri terhadap Escherichia coli dengan rata-rata diameter pada

konsentrasi 2,5%, 5%, 7,5%, dan 10% adalah 7,62 mm (milimeter), 8,00
 15

mm, 8,30 mm, dan 8,95 mm sedangkan terhadap bakteri Staphylococcus

aureus dengan rata-rata diameter pada konsentrasi 2,5%, 5%, 7,5%, dan

10% adalah 6,97 mm, 7,33 mm, 7,88 mm, dan 8,19 mm.

Berdasarkan latar belakang, maka peneliti tertarik untuk melakukan

pengujian aktivitas antibakteri kulit batang Dillenia suffruticosa terhadap

bakteri Escherichia coli karena ingin mengetahui lebih lanjut apakah

tanaman ini memiliki senyawa flavonoid, tanin dan saponin yang memang

bisa digunakan sebagai antibakteri terhadap Escherichia coli. Hasil

penelitian ini dapat memberikan informasi mengenai kemampuan ekstrak

kulit batang Dillenia suffruticosa dalam menghambat Escherichia coli dan

memberikan pengetahuan mengenai peranan Dillenia suffruticosa yang

dapat dimanfaatkan lebih lanjut sebagai obat alternatif.

B. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang, maka didapatkan rumusan masalah yaitu

“Bagaimana aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit batang Dillenia

suffruticosa terhadap bakteri Escherichia coli”.

C. Tujuan

1. Penelitian ini bertujuan untuk mengukur daya hambat ekstrak etanol

kulit batang Dillenia suffruticosa terhadap pertumbuhan bakteri

Escherichia coli.

2. Untuk mengukur perbedaan rata-rata zona hambat pertumbuhan

Escherichia coli pada berbagai konsentrasi ekstrak etanol kulit batang

Dillenia suffruticosa.
 16

3. Untuk menetapkan konsentrasi ekstrak etanol kulit batang Dillenia

suffruticosa yang menghasilkan zona hambat terbesar dalam

menghambat pertumbuhan Escherichia coli.

D. Manfaat

1. Memberikan informasi mengenai aktivitas antibakteri ekstrak etanol

kulit batang Dillenia suffruticosa.

2. Menjadi untuk penelitian lebih lanjut mengenai ekstrak kulit batang

Dillenia suffruticosa.

3. Memberikan informasi mengenai peranan kulit batang Dillenia

suffruticosa kedepannya sebagai pengobatan tradisional dengan

konsentrasi yang sesuai.

E. Ruang Lingkup

Penelitian ini adalah penelitian eksperimental yang mengukur

efektivitas daya hambat ekstrak etanol kulit batang Dillenia suffruticosa

terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli dengan pelarut etanol 96%.

Penelitian ini dilakukan karena kulit batang Dillenia suffruticosa

mengandung metabolit sekunder berupa senyawa alkaloid, flavonoid,

tannin, saponin, terpenoid dan steroid yang berfungsi sebagai antibakteri,

maka dari itu peneliti melakukan pengujian lebih lanjut mengenai aktivitas

antibakteri kulit batang Dillenia suffruticosa terhadap bakteri Escherichia

coli. Penelitian ini akan dilakukan pada bulan Januari sampai dengan Juni

2024. Untuk pengambilan data dilakukan pada bulan Februari sampai

dengan April 2024. Identifikasi tumbuhan dan uji fitokimia akan dilakukan
 17

di Laboratorium Dasar dan Biologi Fakultas Pertanian, Perikanan, dan

Biologi Universitas Bangka Belitung. Uji aktivitas antibakteri dilakukan di

UPTD Balai Laboratorium Kesehatan Daerah Provinsi Bangka Belitung.

Levofloxacin digunakan sebagai kontrol positif dan aquadest sebagai

kontrol negatif. Uji aktivitas antibakteri terhadap bakteri Escherichia coli

dilakukan dengan menggunakan metode difusi agar dengan konsentrasi

10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, dan 100%. Hasil

diperoleh dengan melakukan pengukuran zona hambat ekstrak kulit batang

Dillenia suffruticosa. Analisis data menggunakan uji parametrik One

Way Anova jika tidak memenuhi syarat uji ANOVA maka digunakan uji

Kruskal-Wallis.
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Tinjauan Teori

1. Deskripsi Tanaman Dillenia suffruticosa

a. Klasifikasi Tanaman

Menurut Desywijaya (2020), mengklasifikasikan tanaman

Dillenia suffruticosa sebagai berikut:

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Kelas : Dicotyleoneae

Ordo : Dilleniales

Famili : Dilleniaceae

Genus : Dillenia

Spesies : Dillenia suffruticosa

Gambar 1 Tanaman Dillenia suffruticosa

Sumber: Dokumentasi Pribadi (2023)

b. Morfologi Tanaman

Tanaman simpur (Dillenia suffruticosa) merupakan salah satu

tumbuhan yang bisa digunakan untuk pengobatan herbal.

18
 19

Di Indonesia tanaman simpur biasanya tumbuh di dataran rendah

seperti di rawa-rawa, namun juga ada yang tumbuh di daratan.

Tanaman simpur asli Indonesia ini memiliki tinggi 1,5 meter.

Pohon simpur yang bercabang digunakan masyarakat sebagai

kayu bakar. Kulit pohon tanaman simpur bersifat tebal. Warna

kulit pohonnya campuran antara merah, cokelat, dan abu-abu.

Bunga simpur berwarna putih dengan kelopak bunga berwarna

hijau kekuningan dan terdapat pada ujung ranting. Tanaman

simpur juga memiliki buah yang rasanya agak asam dan sedikit

rasa pahit (kelat) (Marwadani, 2020).

c. Manfaat Tanaman Dillenia suffruticosa

Berbagai manfaat daun Dillenia suffruticosa untuk

pengobatan, mempercepat penyembuhan luka, mengobati panas

dalam, mengatasi radang usus, mengontrol gula darah, mengobati

sariawan, meredakan diare, meredakan demam, meredakan flu,

pilek, dan gangguan pernapasan. Ekstrak bubuk kayu Dillenia

suffruticosa bisa digunakan untuk menghilangkan kutu rambut

dan ketombe (Mardawani, 2021). Kulit batang Dillenia

suffruticosa memiliki senyawa metabolit sekunder yang

digunakan sebagai antifungi dan karena mengandung berbagai

senyawa metabolit seperti: alkaloid, flavonoid, saponin, tannin,

terpenoid, dan steroid (Utami dam Anjani, 2020).

 20

2. Diare

a. Definisi

Diare adalah buang air besar dengan konsistensi tinja lebih

lunak ataupun lebih cair dengan frekuensi lebih dari 3 kali dalam

satu hari (Ibrahim, 2021). Pada balita biasanya diare terjadi lebih

dari 3 kali sehari dengan perubahan konsistensi tinja cair atau tanpa

lendir dan darah yang terjadi kurang dari satu minggu. Diare

diklasifikasikan menjadi 3 yaitu: diare akut yang terjadi secara

mendadak dan berlangsung paling lama 7-14 hari dengan

konsistensi tinja cair tanpa darah, diare persisten atau diare kronis

terjadi selama 14 hari biasanya tinja cair dan dapat disertai darah

atau tidak, jika terjadi dalam kurun waktu yang lama akan

mengakibatkan dehidrasi, diare disentri dapat mengakibatkan

anorkesia, kehilangan berat badan dan kerusakan mukosa usus

karena bakteri, diare ini biasanya tinja yang keluar sedikit-sedikit

tetapi sering.

b. Penyebab

Diare biasanya terjadi karena kurangnya higienitasi lingkungan

sekitarnya, seperti pengelolaan air di rumah, tempat pembuangan

sampah yang kurang baik, sanitasi yang buruk, perilaku cuci

tangan yang tidak baik, kebersihan diri, kuku yang panjang dan

kotor dapat menjadi tempat pertumbuhan bakteri, serta

pengetahuan yang kurang mengenai diare (Ibrahim, 2021).

 21

Kontaminasi dari makanan dan minuman dapat menyebabkan

terjadinya diare, kurangnya kebersihan dalam pengelolaan

makanan dapat membuat makanan menjadi tidak higienis.

c. Risiko

Terdapat berbagai risiko akibat terjadinya penyakit diare,

seperti terjadinya kematian sebanyak 1,6 juta orang setiap

tahunnya yang biasanya terjadi pada anak-anak. Pada anak-anak

akibat penyakit diare ini juga akan mempengaruhi fisik, seperti

mual, muntah, dan sakit perut serta penurunan prestasi akademik.

Diare juga dapat mengakibatkan penurunan nafsu makan,

penurunan berat badan, rasa lelah, hingga dapat mengakibatkan

kehilangan cairan elektrolit sehingga mengalami dehidrasi

(Ibrahim, 2021).

d. Pencegahan

Adapun cara pencegahan yang dapat dilakukan seperti selalu

mencuci tangan karena merupakan tindakan yang dapat dilakukan

dengan mudah, dapat dilakukan ketika sebelum ataupun sesudah

makan, setelah BAB/BAK, setelah berjabat tangan, memegang

gagang pintu, setelah bersin, serta aktivitas lainnya. Cara

pencegahan lainnya seperti rajin membersihkan kuku, mengurangi

jajan diluar rumah, sumber air minum dan tempat penyimpanan air

harus baik, dan kebersihan jamban. Menurut Kemenkes (2015) ada

beberapa pencegahan yang dapat dilakukan untuk kasus diare pada

 22

anak dan dewasa seperti pemberian ASI eksklusif dan makanan

pendamping ASI, menggunakan air bersih yang cukup, selalu

mencuci tangan, membuang tinja bayi dengan benar dan imunisasi

sesuai usia balita.

3. Escherichia coli

a. Klasifikasi Escherichia coli

Menurut Songer dan Post (2005), cit. Santoso (2016),

mengklasifikasikan Escherichia coli sebagai berikut:

Kingdom : Bacteria

Filum : Probacteria

Kelas : Gamma Proteobacteria

Ordo : Enterobacteiales

Famili : Enterobacteriaceae

Genus : Escherichia

Spesie : Escherichia coli

b. Morfologi Escherichia coli

Escherichia coli merupakan bakteri gram negatif, berdiameter ± 1,1

– 1,5 μm x 0,2 – 0,6 μm, dan tidak berspora. Bakteri Escherichia coli

mempunyai alat gerak berupa flagel dan tersusun dari sub unit protein

yang disebut flagelin, mempunyai berat molekul rendah dengan

ukuran diameter 12-18 nm dengan panjang 12 nm, tersusun dari

protein, berdiameter lebih kecil dan kaku, dan mempunyai pili yang

berfungsi sebagai jalan pemindahan DNA saat konjugasi. Tak hanya

 23

itu Escherichia coli mempunyai kapsul atau lapisan lendir yang

merupakan polisakarida tebal dan air yang melapisi permukaan luar

sel (Ikmalia, 2008, cit. Wahyuningsih, 2019).

4. Antibakteri

a. Definisi

Antibakteri merupakan zat yang digunakan untuk mengganggu

pertumbuhan atau mematikan bakteri dengan cara mengganggu

metabolismenya. Uji aktivitas antibakteri adalah untuk menentukan

tingkat kerentanan bakteri terhadap zat antibakteri dan untuk

mengetahui senyawa murni yang memiliki aktivitas antibakteri.

b. Uji Antibakteri

Ada beberapa metode yang dapat digunakan untuk uji aktivitas

antibakteri, yaitu metode difusi dan dilusi sebagai berikut:

1.) Metode difusi

a.) Cara Cakram (disc).

Metode ini dilakukan dengan meletakkan piringan yang

berisi antibakteri agar berdifusi ke dalam media agar.

Kemudian diinkubasi dengan suhu 37℃ selama 18-24 jam.

Hasil adanya hambatan pertumbuhan mikroorganisme oleh

bakteri ditunjukkan dengan daerah bening disekitar cakram

(Maradona, 2013).

b.) Cara Parit (ditsh)

 24

Metode ini dilakukan dengan media perbenihan agar yang

telah dicampur dengan bakteri uji dibuat parit kemudian

diisikan dengan zat antibakteri dan diinkubasi pada suhu

37℃ selama 18-24 jam. Hasil ada tidaknya pertumbuhan

bakteri diamati adanya zona jernih disekitar parit (Maradona,

2013).

c.) Cara Sumur (cup)

Media perbenihan agar yang telah dicampur dengan

bakteri uji dibuat sumur kemudian diisikan antibakteri dan

diinkubasi pada suhu 37℃ selama 18-24 jam. Hasil ada

tidaknya pertumbuhan bakteri diamati adanya zona jernih

disekitar sumur (Maradona, 2013).

2.) Metode Dilusi

a.) Cara Penipisan Lempeng Agar

Metode ini dilakukan dengan pembuatan pengenceran

kelipatan dua zat antibakteri dalam media agar yang masih

cair, kemudian dituangkan ke dalam cawan petri. Bakteri uji

diinokulasikan setelah campuran media agar dan zat uji

membeku, kemudian diinkubasi pada suhu 37℃ selama 18-

24 jam. Hasil ditunjukkan dengan KHM (Konsentrasi

Hambat Minimum), yaitu konsentrasi terkecil dari zat

antibakteri uji yang menghambat pertumbuhan bakteri

(Maradona, 2013).
 25

b.) Cara Pengenceran Tabung

Metode ini dilakukan dengan pembuatan pengenceran zat

antibakteri pada medium cair ditambahkan dengan bakteri

uji. Kemudian diinkubasi pada suhu 37℃ selama 18-24 jam.

Hasil ditunjukkan dengan KHM (Konsentrasi Hambat

Minimum), yaitu konsentrasi terkecil dari zat antibakteri uji

yang menghambat pertumbuhan bakteri, dengan cara melihat

media cair yang tetap terlihat jernih dibandingkan dengan

kontrol setelah diinkubasi (Maradona, 2013).

Adapun kategori aktivitas zona hambat antibakteri

dikelompokkan menjadi empat dilihat melalui respon hambat bakteri

dapat dilihat pada Tabel 1.

Tabel 1 Kategori Respon Hambat Bakteri

Diameter Zona Hambat Respon Hambat Bakteri
(mm)
(1) (2)
≤ 5 mm Lemah
6-10mm Sedang
11-20 mm Kuat
≥ 21 mm Sangat Kuat
Sumber: Surjowardojo et al., 2015, cit. Winastri et, al., 2020

5. Ekstraksi

a. Definisi

Ekstraksi merupakan proses penyarian zat aktif dari bagian

suatu tanaman obat untuk menarik komponen kimia yang terdapat

di dalamnya seperti senyawa antimikroba dan antioksidan

(Marjoni, 2016, cit. Adelia, 2021). Ekstraksi adalah proses

 26

pemisahan suatu zat pada suatu cairan yang berbeda dan tidak

saling larut untuk diambil ekstraknya.

b. Metode ekstraksi

1) Ekstraksi cara dingin

a) Maserasi adalah proses pencarian ekstraksi dengan

menggunakan pelarut diam atau dengan dilakukan

pengadukan beberapa kali. Proses ini biasanya dilakukan

merendamkan bahan selama 24 jam dan sekali-sekali

dilakukan pengadukan.

b) Perkolasi adalah proses pencarian ekstraksi dengan cara

merendamkan pelarut dan tumbuhannya, pelarut yang

digunakan harus menggunakan pelarut baru secara berulang-

ulang, dan proses ini memerlukan waktu yang lama.

2) Ekstraksi cara panas

a) Refluks merupakan proses pencarian ekstraksi yang

membutuhnkan pelarut baru dan digunakan dalam jumlah

yang banyak, dilakukan tiga sampai lima kali pengulangan.

Dilakukan pada titik didih pelarut dengan adanya pendingin

balik (kondensor).

b) Soxhlet merupakan ekstraksi dengan pelarut yang baru, Pelart

yang digunakan akan dipanaskan kemudian dilakukan

 27

menggunakan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi konstan

dengan adanya kondensor.

6. Pelarut

Adapun pelarut minyak atau lemak yang bisa digunakan untuk

proses ekstraksi sebagai berikut:

a. Etanol

Etanol memiliki kelarutan yang relatif tinggi dan bersifat inert,

sehingga tidak bereaksi dengan komponen lainnya. Pelarut ini

biasanya sering digunakan dalam laboratorium. Etanol memiliki

titik didih yang rendah sehingga memudahkan pemisahan minyak

dari pelarutnya saat proses destilasi (Guenther, 1987, cit.

Kumalasari, 2018).

b. n-Heksana

n-Heksana memiliki titik didih antar 65-70 ℃ sehingga

memudahkan pengangkatan minyak yang terkandung dalam biji-

bijian dan mudah menguap (Guenther, 1987, cit. Kumalasari,

2018).

c. Isopropanolol

Isopropanolol memiliki titik didih 81-82℃, pelarut ini

memiliki kelarutan yang relatif tinggi seperti etanol (Guenther,

1987, cit. Kumalasari, 2018).

 28

d. Etil Asetat

Etil asetat memiliki titik didih yang relative rendah yaitu 77 ℃,

bersifat semipolar sehingga memudahkan pemisahan minyak dari

pelarutnya (Guenther, 1987, cit. Kumalasari, 2018).

e. Aseton

Pelarut ini larut dalam berbagai perbandingan air, etanol, dietil

eter dan lain-lain (Guenther, 1987, cit. Kumalasari, 2018).

f. Metanol

Pelarut yang paling penting dan banyak digunakan dalam

proses isolasi senyawa organik bahan alam (Guenther, 1987, cit.

Kumalasari, 2018).

7. Skrining fitokimia
Skrining fitokimia merupakan proses yang dilakukan untuk

mengidentifikasi senyawa metabolit yang dihasilkan oleh suatu

tumbuhan. Metode ini dilakukan dengan cara melihat reaksi pengujian

warna dengan menggunakan suatu pereaksi warna. Pemilihan pelarut

dan metode ekstraksi sangat penting dalam skrining fitokimia. Serbuk

simplisia dan sampel dibasahi terlebih dahulu selanjutnya dilakukan

pemeriksaan kandungan senyawa alkaloida, flavonoida,

terpenoida/steroida, tanin, dan saponin.

a. Alkaloid
 29

Senyawa yang bersifat basa, mengandung satu atau lebih atom

nitrogen. Senyawa alkaloid bekerja sebagai antibakteri dengan cara

mengganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri

sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk secara utuh dan dapat

menyebabkan kematian sel tersebut juga menghambat enzim

topoisomerase sel bakteri (Habibi, 2017).

b. Flavonoid

Suatu kelompok senyawa fenol. Senyawa flavonoid yang

ditemukan dalam tanaman biasanya merupakan zat warna merah,

ungu, biru dan sebagian berwarna kuning. Biasanya terdapat pada

tanaman sebagai glikosida. Mekanisme kerja flavonoid sebagai

antibakteri yaitu membentuk senyawa kompleks dengan protein

ekstraseluler sehingga dapat merusak membran sel (Wahyuni dan

Karim, 2020).

c. Tanin

Suatu senyawa polifenol yang tersebar luas dalam tumbuhan

terdapat dalam jaringan kayu seperti kulit, batang, dan jaringan

lainnya, seperti daun dan buah. Tanin biasanya dapat digunakan

sebagai antidiare, menghentikan pendarahan dan mencegah

peradangan terutama pada mukosa mulut karena tannin bersifat

astrigen. Mekanisme kerja tanin sebagai antibakteri menyerang

polipeptida dinding sel bakteri sehingga dapat mengganggu

 30

permeabilitas sel sebagai antibakteri yang menyebabkan kerusakan

pada dinding sel bakteri (Wahyuni dan Karim, 2020).

d. Saponin

Saponin dapat membentuk larutan koloidal dalam air sehingga

dapat menimbulkan buih atau busa. Saponin dapat menurunkan

kadar kolesterol dalam darah, fungisidal dan antibiotik. Mekanisme

kerja saponin sebagai antibakteri karena saponin memiliki molekul

yang dapat melarutkan lemak atau lipofilik sehingga dapat

menurunkan permukaan sel dan menyebabkan kerusakan

komponen-komponen penyusun sel bakteri (Wahyuni dan Karim,

2020).

e. Triterpenoid atau Steroid

Senyawa yang tidak berwarna, berbentuk kristal, dan sulit

dicirikan karena tidak ada kereaktifan kimianya. Mekanisme kerja

triterpenoid adalah bereaksi dengan porin (protein transmembran)

pada membran luar dinding sel bakteri dan membentuk ikatan

polimer yang kuat sehingga mengakibatkan rusaknya dinding sel

(Wulansari et al., 2020).

 31

B. Keaslian Penelitian

Tabel 2 Keaslian Penelitian

No Pembeda Utami (2020) Fania (2023) Peneliti
(1) (2) (4) (5)
(3)
1. Judul Analisis Fitokimia dan Hand Sanitizer Uji Efektivitas
Toksisitas Ekstrak Ekstrak Etanol Daya Hambat
Etanol Daun, Kulit Daun Simpur Ekstrak Etanol
Batang, Akar Tanaman (Dillenia Kulit Batang
Simpur (Dillenia indica suffruticosa) Simpur
L) Dengan Metode sebagai Antiseptik (Dillenia
Brine Shrimp Bakteri Escherechia Suffruticosa)
Lethality Test (BSLT) coli dan terhadap
Staphilococcus aure Pertumbuhan
us Bakteri
Escherichia coli
2. Sampel Ekstrak etanol daun, Ekstrak etanol
yang kulit batang, akar Ekstrak etanol daun kulit batang
digunakan tanaman simpur (Dillena simpur (Dillenia simpur (Dillenia
suffruticosa) suffruticosa) suffruticosa)
3. Konsentrasi 10%, 100%, 200%, 5%, 7,5%, dan 10% 10%, 20%,
yang 400%, 800%, dan 30%, 40%,
digunakan 1000% 50%, 60%,
70%, 80%,
90%, dan 100%.
4. Pengujian Brine Shrimp Bakteri Escherechia Bakteri
terhadap Lethality Test (BSLT) coli dan Escherechia coli
Staphilococcus aure
us
5. Skrinning Alkaloid, flavonoid, Alkaloid, terpenoid, Flavonoid,
Fitokimia saponin, tannin, flavonoid, fenolik, tannin, dan
terpenoid, dan steroid dan saponin saponin
 32

C. Kerangka Teori

Ekstrak Etanol Kulit Batang Simpur (Dillenia suffruticosa)

Senyawa Metabolit Sekunder

Tanin Flavonoid Saponin

Mampu mengganggu Mampu menghambat Mampu menghambat
permeabilitas sel bakteri sintesis dinding sel protein
bakteri

Aktivitas antibakteri ekstrak etanol

kulit batang Dillenia suffruticosa

Penghambatan pertumbuhan bakteri

Escherichia coli

Gambar 2 Kerangka Teori

D. Kerangka Konsep
 33

Ekstrak etanol kulit batang

simpur (Dillenia suffruticosa)

Daya hambat bakteri

Escherichia coli

Gambar 3 Kerangka Konsep

E. Definisi Operasional

Tabel 3 Definisi Operasional

Variabel Definisi Operasional Alat Ukur Hasil Ukur Skala
(1) (2) (3) (4) (5)
Ekstrak Ekstrak hasil Timbangan Konsentrasi Ordinal
etanol kulit maserasi dan labu ekstrak kulit
batang menggunakan pelarut ukur batang
Dillenia ekstrak etanol 96% Dillenia
suffruticosa dipekatkan dengan suffruticosa
rotary vacum dalam
evaporator dengan bobot/volum
konsentrasi 10%, e (%b/v)
20%, 30%, 40%,
50%, 60%, 70%,
80%, 90%, dan 100%
Zona hambat Aktivitas antibakteri Penggaris Diameter Rasio
ekstrak dengan terbentuknya zona hambat
etanol kulit zona hambat ekstrak dalam
batang etanol kulit batang milimeter
Dillenia Dillenia suffruticosa (mm) dan
suffruticosa terhadap kategori
terhadap pertumbuhan bakteri respon daya
Escherichia Escherichia coli di hambat
coli area sekitar kertas bakteri
cakram

F. Hipotesis
 34

Berdasarkan uraian tinjauan teori, maka hipotesis dalam penelitian ini

adalah terdapat perbedaan yang signifikan terhadap rata-rata zona hambat

pertumbuhan Escherichia coli pada berbagai konsentrasi ekstrak kulit

batang Dillenia suffruticosa.

 BAB III

METODE PENILITIAN

A. Rancangan Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental yang menggunakan

desain Post Test Only Control Group. Desain ini dipilih karena setelah

pemberian perlakuan hanya akan dilakukan pengukuran. Sampel dibagi

menjadi dua kelompok, yaitu kelompok kontrol dan kelompok perlakuan.

Kelompok kontrol disini terdiri kontrol positif menggunakan Levofloxacin

sebagai kontrol positif dan kontrol negatif menggunakan aquadest sebagai

kontrol negatif. Sedangkan kelompok perlakuan menggunakan ekstrak

etanol kulit batang simpur dengan konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40%,

50%, 60%, 70%, 80%, 90%, dan 100%. Hasil akan diperoleh dengan

melakukan pengukuran zona hambat ekstrak etanol kulit batang simpur

pada bakteri Escherichia coli. Pada masing-masing kelompok akan

dilakukan pengulangan sebanyak 3 kali dan dihitung menggunakan rumus:

(t-1) (r-1) ≥15

Keterangan:

t : Jumlah perlakuan konsentrasi

r : Jumlah pengulangan

B. Waktu dan Tempat

Penelitian ini akan dilakukan pada bulan Januari sampai dengan Juni

2024. Pengambilan data akan dilakukan pada bulan Februari sampai

35
 36

dengan April 2024. Uji skrining fitokimia akan dilakukan di Laboratorium

Dasar
 37

dan Biologi Fakultas Pertanian Perikanan dan Biologi Universitas Bangka

Belitung dan uji aktivitas antibakteri dilakukan di UPTD Balai

Laboratorium Kesehatan Daerah Provinsi Bangka Belitung.

C. Alat dan Bahan

Alat yang akan digunakan dalam penelitian ini yaitu, cawan petri,

jarum ose, gelas ukur, labu ukur, erlenmeyer, ayakan, blender, hot plate,

incubator, oven, autoclave, rotary vacuum evaporator, biosafety cabinet,

pipet tetes, tabung reaksi, rak tabung reaksi, waterbath, busen, lemari

pendingin, penggaris, jangka sorong, spidol, label, saringan, corong, toples

kaca, spatula, pinset, aluminium foil, Laminar Air Flow (LAF), dan kain

bersih.

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah kulit batang simpur

(Dillenia suffruticosa), plastik, aquadest, etanol 96%, Levofloxacin, media

Mueller Hinton Agar (MHA), besi (III) klorida (FeCl 3), asam klorida

(HCl) 2N, serbuk magnesium (Mg), dan isolate Escherichia coli.

D. Prosedur Kerja

1. Pengambilan Sampel

Kulit batang simpur (Dillenia suffruticosa) diambil dari pohon yang

ada disekitar pantai Tanjung Langkah Koba, Kecamatan Koba,

Kabupaten Bangka Tengah, Provinsi Bangka Belitung. Sampel diambil

pada bagian kulit batang tanaman simpur. Sampel kulit batang dipilih

pada 3 bagian pohon, yaitu atas, tengah, dan bawah. Proses

pengambilan sampel menggunakan pisau, kemudian mengiris kulit

 38

batang dengan memanjang ukuran sekitar 10x5 cm. Sampel

dimasukkan ke dalam plastik.

2. Pembuatan Serbuk

Pembuatan serbuk kulit batang simpur (Dillenia suffruticosa)

dilakukan sortasi basah untuk memisahkan kulit batang dari kotoran-

kotoran yang menempel, setelah itu ditiriskan. Kemudian kulit batang

simpur yang telah ditiriskan dilakukan perajangan dengan cara kulit

batang dipotong kecil-kecil. Lalu dikeringkan di bawah sinar matahari.

Setelah kering kulit batang simpur dilakukan sortasi kering untuk

memisahkan kotoran-kotoran yang tersisa. Setelah itu kulit batang

simpur dihaluskan menggunakan blender hingga menjadi serbuk halus.

Sampel yang sudah menjadi serbuk diambil sebanyak 1000 gram.

Kemudian sampel dimasukkan ke dalam plastik. Serbuk kulit batang

Dillenia suffruticosa ditimbang dan dihitung persentase kadar air

menggunakan rumus:

Bobot serbuk kulit batang kering(g)

% Kadar Air = x 100 %
Bobot simplisia basah(g)

3. Pembuatan Ekstrak

Ekstraksi tumbuhan kulit batang simpur (Dillenia suffruticosa)

menggunakan metode maserasi atau perendaman. Kulit batang simpur

yang telah halus dimasukkan ke dalam toples maserasi dan

ditambahkan pelarut etanol 96% dengan perbandingan antara sampel

dengan pelarut, yaitu 1:5 dimana 1 bagian untuk massa serbuk simplisia

dan 5 bagian untuk volume pelarut etanol 96%. Proses maserasi

 39

dilakukan selama 6 hari pada suhu kamar (15-30℃) dilakukan

pengadukan setiap 24 jam 1 kali. Larutan yang telah selesai proses

maserasi, kemudian disaring menggunakan kain dan ditampung. Hasil

penyaringan diuapkan dengan rotary vacum evaporator pada 75℃,

untuk memisahkan antara pelarut dan ekstrak sehingga diperoleh

ekstrak murni. Ekstrak kental kulit batang Dillenia suffruticosa diambil

dengan konsentrasi 100% murni lalu dibuat pengenceran. Berikut

rumus rendemen ekstrak kental yang dihasilkan:

Berat hasil rendemen(g)

%Rendemen= x 100 %
Berat sampel ( g)

Ekstrak murni kulit batang (Dillenia suffruticosa) diencerkan

dengan aquadest ke dalam labu ukur untuk memperoleh konsentrasi

10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, dan 100%, dengan

cara sebagai berikut:

a. Konsentrasi 10% : 0,1 g ekstrak murni kulit batang Dillenia

suffruticosa ditambahkan aquadest 1,5 ml.

b. Konsentrasi 20% : 0,2 g ekstrak murni kulit batang Dillenia

suffruticosa ditambahkan aquadest 1,5 ml.

c. Konsentrasi 30% : 0,3 g ekstrak murni kulit batang Dillenia

suffruticosa ditambahkan aquadest 1,5 ml.

d. Konsentrasi 40% : 0,4 g ekstrak murni kulit batang Dillenia

suffruticosa ditambahkan aquadest 1,5 ml.

e. Konsentrasi 50% : 0,5 g ekstrak murni kulit batang Dillenia

suffruticosa ditambahkan aquadest 1,5 ml.

 40

f. Konsentrasi 60% : 0,6 g ekstrak murni kulit batang Dillenia

suffruticosa ditambahkan aquadest 1,5 ml.

g. Konsentrasi 70% : 0,7 g ekstrak murni kulit batang Dillenia

suffruticosa ditambahkan aquadest 1,5 ml.

h. Konsentrasi 80% : 0,8 g ekstrak murni kulit batang Dillenia

suffruticosa ditambahkan aquadest 1,5 ml.

i. Konsentrasi 90% : 0,9 g ekstrak murni kulit batang Dillenia

suffruticosa ditambahkan aquadest 1,5 ml.

j. Konsentrasi 100% : 1 g ekstrak murni kulit batang Dillenia

suffruticosa ditambahkan aquadest 1,5 ml.

4. Skrining Uji Fitokimia

a. Tanin

Sebanyak 1 mL ekstrak kulit batang Dillenia suffruticosa

dimasukkan ke dalam tabung reaksi ditambahkan dengan 5 tetes

larutan besi (III) klorida (FeCl3) 1% kemudian sampel dikocok dan

amati perubahan yang terjadi. Reaksi positif ditunjukkan dengan

terbentuknya larutan berwarna biru tua atau hijau kehitaman

dilakukam pengulangan 1 kali (Ningsih et al., 2020).

b. Flavonoid

Sebanyak 1 mL ekstrak kulit batang Dillenia suffruticosa

dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian ditambahkan 5ml

etanol, lalu dilakukan pemanasan ± 5 menit dan ditambahkan 0,2

gram magnesium lalu ditambahkan 10 tetes asam klorida (HCl) 2N

 41

kemudian sampel dikocok dan amati perubahan yang terjadi. Reaksi

positif ditunjukkan dengan terbentuknya larutan berwarna merah,

kuning atau jingga dan dilakukan 1 kali (Ningsih et al., 2020).

c. Saponin

Sebanyak 1 mL ekstrak kulit batang Dillenia suffruticosa

dimasukkan ke dalam tabung reaksi ditambahkan 10 ml aquadest

yang telah dipanaskan. Kemudian amati perubahan yang terjadi

apakah terbentuk busa. Reaksi dinyatakan postif mengandung

saponin jika busa stabil selama 30 menit dan tidak hilang pada

penambahan 1 tetes HCL 2N dan dilakukan 2 kali (Ningsih et al.,

2020).

5. Sterilisasi alat dan bahan

Alat dan bahan yang digunakan harus disterilisasi terlebih dahulu.

Sterilisasi dilakukan untuk mengeliminasi suatu mikroorganisme pada

suatu tempat dengan menggunakan metode tertentu. Alat-alat yang

terbuat dari gelas disterilkan dengan menggunakan oven pada suhu

180℃ selama 1 jam. 37 Alat jarum ose dan pinset disterilkan dengan

cara pemijaran di atas api bunsen. Alat yang memiliki ukuran atau

mempunyai skala disterilkan menggunakan autoklaf dengan suhu

121℃ selama 15 menit (Fardin et al., 2016).

6. Pembuatan Larutan Levofloxacin 5%

 42

Kontrol positif dibuat dari sediaan obat Levofloxacin 250 mg,

digerus kemudian diambil sebanyak 10 mg, kemudian dilarutkan dalam

100 ml aquadest ke dalam labu takar dan digoyang hingga homogen.

7. Penyiapan Kertas Cakram dan Media

a. Penyiapan kertas cakram

Kertas cakram yang telah disterilisasi dicelupkan ke dalam

kelompok kontrol dan kelompok perlakuan selama 30 menit.

Kelompok kontrol yaitu aquadest sebagai kontrol negatif dan

Levofloxacin sebagai kontrol positif. Kelompok perlakuan yaitu

ekstrak etanol kulit batang Dillenia suffruticosa dengan

konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%,

dan 100%.

b. Pembuatan Media Mueller Hinton Agar (MHA)

Pembuatan media yaitu menggunakan media MHA dengan

cara melarutkan 6,8 g MHA dengan 200 ml aquadest dalam

erlenmeyer lalu panaskan di atas hot plate sambil diaduk hingga

agar larut sempurna. Serbuk MHA yang sudah larut disterilisasi

dengan autoclave pada suhu 121℃ selama 15 menit pada tekanan

1 atm. Kemudian media agar didinginkan lalu tuang ke dalam

cawan petri yang telah steril dan biarkan media agar memadat

dengan sempurna pada suhu kamar (Makalew et al., 2016).

8. Peremajaan Bakteri
 43

Sebanyak satu jarum ose isolate bakteri Escherichia coli

digoreskan secara zig-zag pada media agar miring MHA, kemudian

diinkubasi pada suhu 37℃ - 38℃ selama 24 hingga 48 jam (Yusriana

et al., 2014).

9. Pembuatan Suspensi Bakteri

Sebanyak 1,5 g media Nutrient Agar dilarutkan dalam 100 ml

aquadest, kemudian dipanaskan hingga meniddih dan melarut

sempurna. Kemudian ambil 1 ose bakteri biakan di suspensikan ke

dalam 5 ml NaCl di dalam tabung reaksi, sampai diperoleh kekeruhan

yang sesuai dengan standar 0,5 Mc. Farland atau sebanding dengan

jumlah bakteri 108 (CFU)/ml (Susanti dan Mufadzilah, 2021).

10. Uji Aktivitas Antibakteri

Pengujian daya hambat ekstrak etanol kulit batang Dillenia

suffruticosa dilakukan dengan menggunakan metode difusi kertas

cakram. Media MHA dimasukkan ke dalam cawan petri sebanyak 10

ml. Kemudian suspensi kultur murni dicelupkan menggunakan cotton

swab lalu diinokulasikan secara merata pada cawan petri. Setiap cawan

petri dibagi menjadi 3 area menggunakan spidol. Kertas cakram steril

direndamkan dalam kelompok kontrol (kontrol positif: Levofloxacin

dan kontrol negatif: aquadest) selama 15 menit dan kelompok

perlakuan (dengan konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%,
 44

80%, 90% dan 100%) selama 24 jam. Kertas cakram yang telah

direndam ke dalam kelompok kontrol dan kelompok perlakuan

(konesntrasi 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, dan

100%) diletakkan pada setiap permukaan media MHA dan dilakukan

sebanyak 3 kali pengulangan. Proses ini dilakukan di dalam biosafety

cabinet. Kemudian media MHA yang berisi kertas cakram diinkubasi

selama 24 jam. Selanjutnya pengujian dilakukan dengan menggunakan

ekstrak etanol kulit batang Dillenia suffruticosa, kontrol positif dan

kontrol negatif. Untuk pengujian kontrol positif menggunakan larutan

Levofloxacin 5% sebanyak 3 kertas cakram direndam dalam

Levofloxacin yang telah dilarutkan dengan aquadest untuk

membandingkan zona hambat Levofloxacin dengan zona hambat

ekstrak, sedangkan pengujian kontrol negatif menggunakan aquadest

untuk melihat penghambatan pertumbuhan bakteri. Selanjutnya

dilakukan pengamatan dengan melihat zona bening yang terbentuk pada

kertas cakram, kemudian diukur diameter zona bening menggunakan

penggaris. Pengukuran diameter zona hambat dilakukan untuk

menentukan kategori respon hambat bakteri pada ekstrak etanol kulit

batang Dillenia suffruticosa.

E. Cara Pengolahan Data

Data hasil penelitian akan diperoleh dari zona hambat yang disajikan

dalam tabel dan dianalisis dengan uji statistik parametik One Way Anova

untuk mengetahui perbedaan rata-rata zona hambat yang signifikan dengan

 45

berbagai konsentrasi ekstrak etanol kulit batang Dillenia suffruticosa.

terhadap bakteri Escherichia coli, sebelum dilakukan uji ANOVA data

penelitian yang diperoleh dilakukan uji normalitas agar data terdistribusi

normal dan uji varians karena data harus homogen. Uji normalitas yang

dilakukan adalah uji normalitas Saphiro-Wilk. Data terdistribusi normal jika

memiliki nilai p > 0,05. Jika, data tidak terdistribusi normal, uji statistik

yang dilakukan yaitu uji Kruskal Wallis.

1. Ha : Jika nilai sig < 0,05 maka terdapat perbedaan yang signifikan rata-

rata diameter zona hambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli pada

berbagai konsentrasi ekstrak etanol kulit batang Dillenia suffruticosa.

2. H0 : Jika nilai sig > 0,05 maka tidak terdapat perbedaan signifikan rata-

rata diameter zona hambat pada pertumbuhan bakteri Escherichia coli

pada berbagai konsentrasi ekstrak etanol kulit batang Dillenia

suffruticosa.
 DAFTAR PUSTAKA

Amalia, A., I. Sari, dan R. Nursanty. 2017. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etil
Asetat Daun Sembung (Blumea balsamifera (L.) DC.) Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Metichillin Resistant Staphylococcus aureus
(MRSA).
Anjani T.P., Khadijah, D. Febrianti, A. Kurniawan, E. Lestari, O. Khanati., et al.,
2023. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Bini Simpur (Dilenia Sp.),
Kedebik (Melastoma Sp.) dan Mengkirai (Trema Orientalis) Terhadap
Bakteri Aeromonas Hydrophila. Jurnal Ganec Swara. 17(3): 1085 – 1088.
Azzahra F., E. a. Almalik., A. A. Sari. 2019. Uji Aktivitas Antibakteri Dari Ekstrak
Etanol Daun Alpukat (Persa Americana Mill.) Terhadap Bakteri
Salmonella thypi Dan Staphylococcus aureus. Jurnal
homepage://jofar.afi.ac.id. 4(2): 1 – 10.
Desywijaya S. 2020. Analisis Komponen Zat Ekstraktif Polar dan Nonpolar Pada
kayu Simpur (Dillenia spp). Skripsi. Program Studi Kehutanan.
Universitas Hasanuddin. Makassar.
Dinas Kesehatan Provinsi Kepulauan Bangka Belitung. 2023. Introduksi
Pelaksanaan dan Human Papilloma Virus, Dinkes Babel Gelar Soialisasi
dan Advokasi. 18 Juli 2023. Bangka Belitung.
Duppa, M.T., A.A. Pratama, S. Wahyuni, dan I.M.S. Fitriana. 2020. Pengaruh
Pemberian Ekstrak Kulit Batang Turi Putih (Sesbania grandiflora L.)
Terhadap Konsistensi Feses dan Frekuensi Defekasi Mencit (Mus
musculus). Journal Pharmacy and Sciences. 11(2): 1 – 8.
Fania, R.P., Masriani, D.S. Ningsih, dan H. Erliani. 2023. Hand Sanitizer Ekstrak
Etanol Daun Simpur (Dillenia suffruticosa) sebagai Antiseptik Bakteri
Escherichia coli dan Staphilococcus aureus. Jurnal Sains dan Kesehatan.
5(3): 366 – 372.
Fardin dan C. Wulan. 2016. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol Jamur
Rayap (Termitomyces albuminosus (Berk.) Heim) Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus dan Bacillus subtilis. The National Journal of
Pharmacy. 13(2): 46 – 54.
Guenther, E. 1987. Minyak Atsiri, Jilid I, Diterjemahkan oleh Ketaren. Universitas
Indonesia. Jakarta. 113. cit. Kumalasari, Ayu. 2018. Uji Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Etil Asetat 96% Daun Maya (Coleus arthropurpureus
L. Benth) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus. Skripsi.
Program Studi S1 Farmasi. Stikes Karya Putra Bangsa. Tulungagung.
Habibi, A.I. 2017. Skrining Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak n-Heksan
Korteks Batang Salam (Syzygium polyanthum). Skripsi. Universitas Islam
Negeri Walisongo. Semarang.
Hutasoit, D.P. 2020. Pengaruh Sanitasi Makanan dan Kontaminasi Bakteri
Escherichia coli Terhadap Penyakit Diare. Jurnal Ilmiah Kesehatan
Indonesia. 9(2): 779 – 786.
Ibrahim, I., R.A.D. Sartika, Triyanti, dan T.A.E. Permatasari. 2021. Faktor-Faktor
yang Berhubungan dengan Kejadian Diare pada Siswa di Kabupaten
Lebak, Provinsi Banten, Indonesia. Indonesian Journal of Public Health
Nutrition. 2(1): 34 – 43.
Ikmalia. 2008. Analisis Profil Protein Isolat Escherichia coli S1 Hasil Iradiasi
Sinar Gamma. cit. Wahyuningsih, R. 2019. Identifikasi Adanya Bakteri
Escherichia coli Pada Minuman Es Teh yang Dijual Disekitar Stikes BCM
Pangkalan Bun Wilayah Kota Waringin Barat. Jurnal Borneo Cendekia.
3(1): 93 – 107.
Kemenkes. 2015. Profil Kesehatan Indonesia. Jakarta.
______. 2021. Profil Kesehatan Indonesia. Jakarta.
Makalew, M.A.J., E. Nangoy, dan P.M. Wowor. 2016. Uji Efek Antibakteri Air
Perasan Daging Buah Nanas (Ananas comosus (L).Merr) Terhadap Bakteri
Klebsiella pneumoniae. Jurnal e-Biomedik (eBm). 4(1): 1 – 6.
Maradona, Doni. 2013. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Durian
(Durio ziberthinus L), Daun Lengkeng (Dimocarpus longan Lour), dan
Daun Rambutan (Nephelium lappaceum L) Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus ATCC 25925 dan Escherichia coli ATCC 25922.
Skripsi. Program Studi Farmasi. UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. Jakarta.
Mardawani., D.T. Relita, dan A. Hartini. 2021. Simpur Air (Dillenia Suffruticosa)
Sebagai Tanaman Hias dan Fitromediasi Taman Gersang di Kabupaten
Sintang. Prosiding Seminar Nasional. Universitas Muhammadiyah
Semarang. 4: 2451 – 2458.
Marjoni, R. 2016. Dasar-Dasar Fitokimia untuk Diploma III Farmasi. Jakarta: CV.
Trans Info Media. cit. Adelia, M. 2021. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Etanol Kulit Batang Pinang (Areca catechu L.) Terhadap Bakteri Shigella
dysenteriae. Karya Tulis Ilmiah. Jurusan Farmasi. Poltekkes Kemenkes
Pangkalpinang. Pangkalpinang.
Ningsih, D.S., Henri, O. Roanisca, dan R.G. Mahardika. 2020. Skrining Fitokimia
dan Penetapan Kandungan Total Fenolik Ekstrak Daun Tumbuhan Sapu-
sapu (Baeckea frutescens L.). Journal of Tropical Biology. 8(3): 178 –
185.
Nurhaedah, N. 2019. Hubungan Antara Sanitasi Lingkungan Dengan Kejadian
Diare Pada Lanjut Usia. Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada. 9(1): 29
– 31.
Pratiwi, S.T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Erlangga: Jakarta. cit. Pratiwi, M.N.
2019. Aktivitas Antibakteri Fraksi Buah Jambu Wer (Prunus persica (L.)
Batsch) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphyloccocus aureus. Skripsi.
Jurusan Farmasi. Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.
Malang.
Songer, J.G., dan K. W. Post. 2005. Veterinary Microbiology Bacterical and
Fungal Agentof Animal Disease. USA: Elsevier Saunders. 86 – 110. cit.
Santoso, N.M.A. 2016. Identifikasi Jumlah Bakteri Escherichia coli Pada
Minuman Es Teh yang Dijual Di Dusun Candimulyo Jombang. Karya
Tulis Ilmiah. Stikes Insan Cendekia Medika. Jombang.
Surjowardojo, T.E. Susilawati, dan R.S. Gabriel. 2015. Daya Hambat Dekok Kulit
Apel Manalangi (Malus sylvestrs Mill.) Terhadap Pertumbuhan
Staphylococcus aureus dan Pseudomonas sp. Penyebab Masitis Pada Sapi
Perah. Fakultas Peternakan. Universitass Brawijaya Malang. cit. Winastri,
N.L.A.P., H. Muliasari., dan E. Hidayati. 2020. Aktivitas Antibakteri Air
Perasan dan Rebusan Daun Calicing (Oxalis corniculata L.) Terhadap
Streptoccocus mutans. Berita Biologi. 19(1): 223 – 230.
Susanti, S.F, dan Mufadzilah. 2021. Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Buah
Asam (Tamarindus Indica L) Dengan Variasi Konsentrasi Dalam
Menghambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus. Journals of
Ners Community. 12(1): 120 – 130.
Utami, M.R, dan R.D. Anjani. 2020. Analisis Fitokimia dan Toksisitas Ekstrak
Etanol Daun, Kulit Batang, Akar Tanaman Simpur (Dillenia indica L)
Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Jurnal Media
Farmasi. 16(2): 230 – 237.
Wahyuni dan S.F. Karim. 2020. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Kacapiring (Gardenia jasminoides Ellis) Terhadap Bakteri Streptococcus
mutans. Jurnal Sains dan Kesehatan. 2(4): 399 – 404.
Wulansari, E.D., D. Lestari, dan M.A. Khoirunissa. 2020. Kandungan Terpenoid
Dalam Daun Ara (Ficus arica L.) Sebagai Agen Antibakteri Terhadap
Bakteri Methicillin-Resistant Staphyloccus aureus. Pharmacon. 9(2): 219
– 225.
Yusriana, C.S., C.S. Budi, dan T. Dewi. 2014. Uji Daya Hambat Infusa Daun
Nangka (Artocarpus heterophyllus) Terhadap Pertumbuhan Bakteri
Staphylococcus aureus. Jurnal Permata Indonesia. 5(2): 1 – 7. cit Babelina
P.J., 2021. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Gribong
(Archidendron clypearia) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus. Karya
Tulis Ilmiah. 1 – 74.
LAMPIRAN
Lampiran 1 Perhitungan Pengulangan Perlakuan

Perhitungan pengulangan sebagai berikut:

(t-1) (r-1) ≥ 15

(10-1) (r-1) ≥ 15

9 (r-1) ≥ 15

9r – 9 ≥ 15

9r ≥ 15 + 9

9r ≥ 24

24
r≥
9

r ≥ 2,67

r=3

Keterangan:

t: Jumlah perlakuan

r: Jumlah pengulangan
Lampiran 2 Tabel Hasil Pengolahan Data Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak

Etanol Kulit Batang Dillenia suffruticosa Terhadap Bakteri Escherichia coli

Rata-Rata
Diameter
Diameter
Zona
Bahan Uji Konsentrasi Zona Signifikansi
Hambat
Hambat
(mm)
(mm)
P1 P2 P3
(1) (2) (3) (4) (5) (6) (7)
10%
20%
30%
40%
Ekstrak
etanol kulit 50%
batang
60%
Dillenia
suffruticosa 70%
80%
90%
100%
Kontrol
Tetrasiklin
Positif
Kontrol
Aquadest
Negatif

Keterangan:

P1 : Pengulangan Pertama

P2 : Pengulangan Kedua

P3 : Pengulangan Ketiga