,

T
N
A
A
R D
A
P M
E
PR RA
G
N
A N
T
A
A
T
U
B ECA
M
S
R
PE NG
P
E
P TA E A S
B DR
A

PEMBUATAN PREPARAT
Prosedur kerja
1. Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2. Siapkan objek glass bersih bebas lemak
3. Sterilkan ose yang akan digunakan
4. Ambil air atau Pz atau aquades dengan ose letakkan pada objek glass
5. Sterilkan ose yang telah digunakan
6. Ambil biakan atau sampel kuman
7. Letakkan pada objek glass kemudian ratakan
8. Sterilkan ose yang telah digunakan
9. Keringkan kemudian Fiksasi preparat tersebut
10.Preparat siap dilakukan pengecatan
Catatan : jika dari bahan sampel cair langkah 4 dan 5 tidak dilakukan

Tujuan fiksasi
Melekatkan kuman pada objek glass
Mempertahankan stuktur kuman saat dilakukan pengecatan
Mempermudah pengecatan

DD SEL BAKTERI GRAM (+) DAN GRAM (-)

REAGEN GRAM
1. Pemberian cat warna utama (cairan
kristal violet) berwarna ungu.
2. Pengintesifan cat utama dengan
penambahan larutan Lugol (perekat).
3. Pencucian (dekolarisasi) dengan
larutan alkohol asam.
4. Pemberian cat lawan (pembanding)
yaitu cat warna safranin

PENGECATAN GRAM
Prosedur kerja
1. Menyiapkan preparat olesan bakteri kemudian keringkan lalu fiksasi
pada pembakar spirtus.
2. Meneteskan larutan gram A , membiarkan selama 1 menit.
3. Mencuci dengan air mengalir
4. Meneteskan larutan gram B, membiarkan selama 1 menit.
5. Mencuci dengan air.
6. Meneteskan larutan gram C, membiarkan selama 25 detik.
7. Mencuci dengan air.
8. Menetesi dengan larutan gram D, membiarkan selama 1 menit,
mencuci dengan air dan mengeringkan dengan tissue.
9. Mengamati dibawah mikroskop dengan pembesaran 100x dan
menggunakan minyak imersi

HASIL PENGECATAN GRAM S. AUREUS DAN E. COLI

REAGEN

Pewarna Zeil
Zeil Nelsen 1
0,3%
Zeil Nelsen 2
Zeil Nelsen 3
0,3%

Nelsen :
: carbol fucsin
: HCl Alkohol 3%
: Methylen Blue

PENGECATAN BTA
Cara kerja
1. Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2. Ambil kuman dengan ose steril pada objek
glass keringkan
3. Setelah sediaan kering lakukan fiksasi
4. Lakukan pewarnaan denngan cara genangi
preparat dengan cat ZN 1 selama 1 menit dan
panaskan jangan sampai mendidih biarkan
lebih dari 5 menit bilas dengan air
5. Genangi preparat dengan cat ZN 2 selama 30
60 detik bilas dengan air
6. Genangi preparat dengan cat ZN 3 selama 1
menit bilas dengan air
7. Keringkan preparat tersebut
8. Lihat dibawah mikroskop dengan pembesaran
100x