IN-VITRO , EX - VIVO KARAKTERISASI

FUROSEMIDE BOUNDED PHARMACOSOMES

UNTUK PENINGKATAN DAYA LARUT DAN
PERMEABILITAS

KELOMPOK:
Didik Prasetyo
Ega Windri
Rissa Chandra Alfaninda
Herliyani

Penelitian ini adalah untuk mempersiapkan furosemide dibatasi pharmacosomes untuk

meningkatkan kelarutan dan permeabilitas obat oleh direproduksi sederhana teknik
penguapan

pelarut

dan

diteliti

lebih

lanjut

Furosemide

dibatasi

formulasi

pharmacosomes (PMC1 & PMC2) diambil dan dibandingkan dengan obat murni dengan
cara ditingkatkan kelarutan 5,4 kali lipat dalam air, 3.33, 4.76 lipat pH 7,4 dan pH 5,8
masing-masing, meningkatkan permeabilitas furosemide dibatasi pharmacosomes
28,28%

bila dibandingkan dengan obat murni, kandungan obat menunjukkan 94,83,N-

oktanol koefisien / partisi air 2,33-5,15 dan in-vitro profil pelepasan menunjukkan obat
berkelanjutan baik Melepaskan properti

furosemide siap dibatasi Pharmacosomes

dikonfirmasi dari pemindaian diferensial kalorimetri (DSC), difraksi sinar-X (XRD) dan
FT-IR. Itu Pharmacosomes melaporkan alam amphiphilic mungkin bertanggung jawab
untuk perbaikan kelarutan dan permeabilitas mengarah ke peningkatan bioavailabilitas
oral. Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa, formulasi ini Strategi menjadi penting
untuk obat BCS kelas-II & IV.

bahan farmasi baru-baru ini lebih dari 40 % aktif dikembangkan selama

bertahun tahun di industri farmasi mengalami penurunan bioavailabilitas , dan
pengembangan formulasi zat serta kurang permeabel sukar larut.
Pada kasus obat kelas IV BCS , pembubaran obat juga permeasi adalah
tingkat membatasi langkah dalam proses absorption obat . Furosemide adalah
5- ( aminosulphonyl ) -4 - chloro - 2 - [ ( 2 - fuanyl - metil ) amino ] asam
benzoat . diuretik kuat , terutama digunakan dalam pengobatan hipertensi, Ini
adalah obat kelas BCS IV yang kelarutan rendah ( 6 mg / L dalam urin ) dan
permeabialitas yang rendah ( log P o / w 1.4 ) 2 , 3. Furosemide menghambat
reabsorpsi aktif ion klorida dalam ascending limb tebal lengkung Henle dengan
mengikat salah satu situs mengikat Cl- Na + / 2Cl- / K sistem Co - transportasi + .

Gambar 1. Struktur furosemide.

Tujuan dari penelitian

kompleks

furosemide-fosfolipid

dibuat

dengan

metode

sederhana;
karakter fisikokimia furosemide dibatasi pharmacosomes
dievaluasi, seperti DSC, XRD dan FT-IR. Koefisien partisi noktanol / air (P) studi furosemide yang - SPC dilakukan untuk
mengukur sifat kelarutan peningkatan furosemide-SPC
dibandingkan dengan furosemide.
furosemide
permeabilitas
furosemide
dibatasi
pharmacosomes adalah kompleks studied. disusun
furosemide-fosfolipid.

Bahan :
Furosemide sebagai sampel.

Persiapan:
Furosemide disiapkan dengan mencampurkan furosemide
dengan konsentrasi molar yang berbeda dari SPC.
Konsentrasi molar yang berbeda dari SPC dan furosemide
ditempatkan dalam 100 mL labu alas bulat dan dilarutkan
dalam metil alkohol. Pelarut diuapkan di bawah vakum
pada 60 C dalam evaporator vakum rotary .
pharmacosomes dikumpulkan sebagai residu dikeringkan
dan ditempatkan dalam desikator satu malam dan
kemudian mengalami karakteristik.

Penentuan Kandungan Furosemide

Fosfolipid Complex Isi furosemide di kompleks ditentukan secara
spektrofotometri. Sebuah bubuk 10 mg kompleks setara dengan obat
dilarutkan dalam 10 ml aseton dan diaduk selama 2 jam pada
pengaduk magnetik. Penyerapan furosemide di kompleks ditentukan
dengan membuat dilusi cocok dan, mengukur absorbansi hasil yang
diperoleh pada 228 nm.

Kelarutan Kompleks Pharmacosomes Furosemide

pharmacosomes kompleks kelarutan oleh mempersiapkan solusi
jenuh dalam 5,8 dapar fosfat, 7,4 dapar fosfat, 1,2 pH penyangga air
suling pada suhu 37 C 0,5 C dan terus dikocok ke dalam orbital
shaker mekanik sampai dengan 24 jam. Sampel ditarik disaring
melalui filter 0,45 pM membran (Millipore, India) diikuti oleh
pengenceran dan dianalisis spektrofotometri pada 228 nm.

Partisi Koefisien
Partisi Koefisien determinasi Furosemide bahan furosemide, pharmacosomes
dilakukan dengan menambahkan 40mg pharmacosomes setara dengan yang
diinginkan.
Ex-Vivo Permeation Studi Ex vivo
furosemide murni melalui membran perut tikus
dilakukan dengan
menggunakan sel difusi Franz- pada 37 C 0,2 C dan 50rpm. membran
disimpan di buffer pada 4 C pada koleksi. Setelah membran perut itu
diseimbangkan selama 30 menit dengan larutan buffer, membran ditempatkan
di antara kedua ruang, ruang penerima dipenuhi dengan pH segar 7,4 larutan
buffer. The Pharmacosomes dan furosemide ditempatkan di ruang donor dan
ditangguhkan dengan 1ml larutan buffer (pH 5.8) Aliquots (3 ml) dikumpulkan
pada interval waktu yang telah ditentukan dan disaring melalui kertas saring,
dan jumlah obat meresap kemudian ditentukan dengan mengukur absorbansi
pada 228 nm menggunakan spektrofotometer UV. Media yang pra hangat
pada suhu 37 C kemudian dimasukkan kembali ke dalam chamber receiver.

 Kinetics obat Release

Kinetika
pelepasan
furosemide
dari
Pharmacosomes ditentukan oleh pas kurva dengan
model yang berbeda ( diringkas dalam Tabel no . 1 )
. Kriteria untuk memilih model yang paling sesuai
didasarkan pada kebaikan -of - fit test.

Karakterisasi Furosemide-SPC
Complex
Ukuran partikel PenentuanDiameter

partikel dan distribusi ukuran Pharmacosomes dianalisis dengan

menggunakan Malvern Zetasizer.Sampel dipotong dengan air suling
untuk membuat intensitas hamburan yang direkomendasikan 100 000
jumlah / s. Setiap sampel diukur dalam rangkap tiga dalam analisis. Nilainilai (D50) dinyatakan untuk Pharmacosomes ukuran rata-rata range16.
Fourier Transforms Infrared (FT-IR) Spektroskopi

Studi FTIR fosfolipid, furosemide murni, campuran fisik dan fosfolipid

kompleks dilakukan untuk mengidentifikasi kelompok pergeseran
fungsional. Untuk spektroskopi FTIR, sampel dan dikeringkan KBR
dicampur. Kemudian spektrum IR diambil pada spektrofotometer FTIR
dengan teknik DRS (Diffuse zat enggan).

 Differential Scanning kalorimetri (DSC)

Sampel disegel dalam aluminium crimp sel dipanaskan dengan

kecepatan 5 / menit 0-300 di udara nitrogen (Mettler Toledo). Puncak
suhu transisi onset ditentukan dengan cara analisis. Puncak transisi suhu
onset fosfolipid, furosemide murni, campuran fisik dan fosfolipid kompleks
yang compared.
stabilitas Studi
Tujuan dari pengujian stabilitas adalah untuk memberikan bukti tentang
bagaimana kualitas zat obat atau produk obat bervariasi dengan waktu di
bawah pengaruh berbagai faktor lingkungan seperti suhu, kelembaban dan
cahaya dan untuk membangun masa re-test untuk obat substansi atau
umur simpan produk obat dan kondisi penyimpanan yang
disarankan.Dalam penelitian ini, studi stabilitas dilakukan untuk formulasi
dioptimalkan Pharmacosomes (PMC5) pada 400 suhu dan 75% RH
untuk jangka waktu 3 bulan. 3.

 Studi kelarutan

Kelarutan furosemide dan furosemide kompleks ditemukan untuk

menjadi jauh lebih tinggi (dalam air dan berbagai buffer). Tabel no.2.
Memberikan data kelarutan. Peningkatan kelarutan furosemide di
kompleks dapat dijelaskan oleh solubilisasi dihasilkan dari pembentukan
misel dalam medium. Sebagai surfaktan amphiphilic, fosfolipid dapat
meningkatkan kelarutan obat oleh aksi pembasahan dan dispersi.
Kompleks menunjukkan sifat amphiphilic, yang pada gilirannya dapat
membuktikan menjadi bertanggung jawab untuk meningkatkan
kelarutan, yang dapat menyebabkan peningkatan bioavailabilitas obat.
Informasi menunjukkan bahwa pharmacosomes furosemide meningkat
kelarutan air dari furosemide sebesar 5,4 kali lipat dan dalam hal
penyangga , meningkatkan kelarutan 3,33 , 4,76 kali lipat dalam pH 7,4
dan pH 5,8 masing-masing.

Tabel 2. Studi Kelarutan furosemide dan Pharmacosomes

 Partisi Koefisien Kelarutan kompleks furosemide ditemukan menjadi

jauh lebih tinggi ( di air dan n -oktanol ) dari furosemide tersebut. Tabel
tidak ada 2. Menyediakan data kelarutan . Tabel no.3 . Menunjukkan
koefisien n - oktanol / partisi air ( P ) dari furosemide , dan
Pharmacosomes furosemide pada n - oktanol / air Data menunjukkan
bahwa Pharmacosomes secara signifikan meningkatkan lipofilisitas
furosemide , dan Partisi dari Pharmacosomes furosemide di n oktanol dan air secara signifikan , ini adalah karena dispersi kuat
atau / dan alam amphiphilic dari Pharmacosomes dan kelompok polar
dari furosemide ditutupi oleh fosfolipid

Tabel data koefisien partisi 3. n - oktanol / air furosemide dan Pharmacosomes .

 In-vitro pembubaran Studi Furosemide & Pharmacosomes

furosemide telah digolongkan sebagai obat kelas IV sesuai sistem klasifikasi

biofarmasi (BCS) sebagai hasil kelarutan rendah dan bioavailabilitas oral; salah
satu penyebab utama bioavailabilitas oral yang rendah adalah kelarutannya. Ini
juga jelas ditunjukkan pada gambar no.2. Juga bahwa pada akhir 120 menit
hanya 62,95% furosemide telah dibebaskan dan tetap konstan hingga 165
menit sehingga menunjukkan pelepasan obat kurang. Kompleks furosemidefosfolipid menunjukkan profil disolusi lebih baik dari furosemide (Gambar. No 3).
Tidak seperti furosemide bebas (yang menunjukkan total pelepasan obat hanya
62,95% pada akhir 120 menit di ara no.2.) Kompleks furosemide menunjukkan
88,48% pelepasan obat di PMC1 dan 94,71% pelepasan obat di PMC2 pada
akhir 420 menit studi pembubaran pH 5,8 penyangga. Pembubaran padat
adalah operasi yang kompleks dipengaruhi oleh sejumlah besar faktor, tidak
hanya ukuran partikel. Perbedaan kebiasaan kristal, luas permukaan, energi
permukaan, ukuran partikel dan wettability semua mungkin memainkan peran
dalam mempengaruhi laju disolusi bubuk. Fosfolipid menjadi surfaktan
amphiphilic meningkatkan kelarutan obat oleh aksi pembasahan dan dispersi.
Dan itulah mengapa profil pembubaran kompleks ditemukan ditingkatkan.

 Ex - Vivo Permeation Studi

Berdasarkan studi pelepasan obat in vitro , Pharmacosomes

( PMC2 ) dan untuk perbandingan furosemide murni dipilih untuk ex
vivo studi permeasi . Obat kumulatif persen meresap dari formulasi
yaitu dari Pharmacosomes ( PMC2 ) dan dari furosemide74 murni . 78
% , 46,5 % masing-masing . Perembesan obat lambat dan mantap
dalam kasus furosemide . Burst perembesan diamati dengan
pharmacosomes formulasi karena fosfolipid dan sifat surfaktan tinggi .
Obat persen kumulatif meresap diberi di no.4.Phospholipids angka
menjadi surfaktan amphiphilic meningkatkan permeabilitas obat , dan
itu sebabnya profil difusi kompleks ditemukan ditingkatkan .

Gambar 2. profil Pembubaran furosemide .

Gambar 3.profil disolusi dari pharmacosomes

Ex - Vivo Permeation Studi

Berdasarkan studi pelepasan obat in vitro , Pharmacosomes ( PMC2 ) dan
untuk perbandingan furosemide dipilih untuk ex vivo studi permeasi . Obat
kumulatif persen meresap dari formulasi yaitu dari Pharmacosomes ( PMC2 )
dan dari furosemide74 murni . 78 % , 46,5 % masing-masing . Perembesan
obat lambat dan mantap dalam kasus furosemide . perembesan diamati
dengan pharmacosomes formulasi karena fosfolipid dan sifat surfaktan tinggi
. Obat persen kumulatif meresap diberi di no.4. Phospholipids angka menjadi
surfaktan amphiphilic meningkatkan permeabilitas obat , dan itu sebabnya
profil difusi kompleks ditemukan ditingkatkan .

Gambar 2. profil Pembubaran furosemide

Gambar 3. Pembubaran pharmacosomes

Gambar 4 Ex - Vivo studi permeasi

Gambar 6. Zeta potensial pharmacosomes

Gambar 5 distribusi ukuran Partikel dari pharmacosomes.

Distribusi Ukuran partikel dan Zeta Potensial

Gambar no. 5 dan 6 menyajikan ukuran dan zeta potensial dari
pharmacosomes setelah sedikit getaran dalam air suling , Ukuran , dan
potensi zeta , dari pharmacosomes siap solusi ditandai dengan Malvern
Zetasizer . Ukuran partikel rata-rata dan potensi berpusat di puncak
intensitas maksimum adalah sekitar 361,8 nm dan -26,9 masing-masing
untuk sampel pharmacosomes . Semua partikel berada di bawah 1.000
nm .

Fourier Transforms Infrared ( FT - IR ) Spektroskopi

Pembentukan
kompleks
dapat
dibuktikan
dengan
spektroskopi
IR
membandingkan spektrum pharmacosomes ( kompleks ) dengan spektrum masingmasing komponen campuran mereka . Spektrum inframerah dari furosemide , fosfolipid
, campuran fisik dan pharmacosomes ( kompleks ) ditunjukkan pada Gambar no. 7.
Spektrum FTIR menunjukkan perubahan puncak di kompleks dan tempat-tempat itu
furosemide dan SPC . FT - IR spektrum pharmacosomes ( kompleks ) menunjukkan
perbedaan yang signifikan di puncak itu komponen dan campuran fisik. Jadi spektrum
FTIR menunjukkan interaksi SPC dengan furosemide - kelompok COOH .

Figure 7

Differential Scanning kalorimetri ( DSC )

DSC adalah metode cepat dan handal untuk menyaring narkoba

eksipien dan memberikan informasi yang berbeda tentang potensi

interaksi . Dalam DSC , interaksi disimpulkan oleh penghapusan
puncak endotermik , penampilan puncak baru , perubahan bentuk
puncak, puncak suhu titik - lebur dan relatif luas puncak atau konten
panas . Gambar no.8 . The termogram dari furosemide menunjukkan
puncak eksotermik luas tunggal pada 221 .
Termogram fosfolipid menunjukkan puncak endotermik yang luas di
78 . campuran fisik furosemide dan fosfolipid menunjukkan dua
tajam puncak satu di 221 dan satu lagi di 78 . The termogram
dari pharmacosomes ( kompleks ) menunjukkan puncak tunggal ,
yang berbeda dari puncak furosemide . Jelaslah bahwa puncak asli
furosemide menghilang dari termogram dari Pharmacosomes
( kompleks ) . Hal ini menunjukkan bahwa furosemide dapat
berinteraksi dengan fosfolipid dan interaksi yang hidrofobik di alam .

Gambar 8. DSC termogram dari A ) furosemide B ) SPC C ) Fisik campuran D )

Pharmacosomes .

Gambar 9. XPRD spektrum dari ) furosemide b ) campuran fisik c ) Pharmacoso

Gambar 10. SEM furosemide dibatasi pharmacosomes .

X-ray Powder Diffraction (XRPD)

Untuk menentukan perubahan dalam furosemide dan untuk
memeriksa keadaan kuat fosfolipid furosemide kompleks, analisis XRPD
diambil. The XRPD furosemide menunjukkan puncak signifikan utama
Intensitas di 5.95, 18.9, 20,36, 21,28. Kristal puncak obat murni
mengurangi Pharmacosomes yang menunjukkan bahwa furosemide itu
diubah menjadi amorf di bentuk utama kompleks fosfolipid. Hilangnya
furosemide puncak difraksi kristal menunjukan pembentukan kompleks
fosfolipid.

Scanning Electron Microscopy (SEM)

Pharmacosomes yang ditemukan DSC berbentuk dengan
morfologi permukaan kasar. Sebagai fosfolipid memiliki nilai
kemurnian yang berbeda dan memiliki efek berbeda dalam bentuk
dan morfologi permukaan. Permukaan adalah ditemukan lengket di
kompleks siap dengan kemurnian rendah nilai (40-60%) dari
fosfolipid
Kita bisa melihat bahwa fosfolipid tidak terdapat dalam
penampilan obat, tetapi obat merata dalam fosfolipid dan
membentuk sistem berbentuk. Di sisi lain permukaan kompleks
siap dengan nilai-nilai kemurnian tertinggi fosfolipid (70%)
menunjukkan bentuk kasar, tidak lengket dan bebas alam berjalan.

Kinetics obat-Release
model matematik seperti zero -order , pertama -order , dan model

Higuchi dan Ritger - Peppas biasanya digunakan untuk

menggambarkan kinetika pelepasan obat dari formulasi uji .
1. kinetika orde-nol menggambarkan sistem di mana laju pelepasan
obat adalah independen dari waktu dan konsentrasi obat dari
bahan terlarut .
2. Pertama - kinetika orde menggambarkan sistem di mana laju
pelepasan obat tergantung pada konsentrasi .
3. Model Higuchi menunjukkan bahwa pelepasan obat dikontrol oleh
mekanisme difusi .
4. Model Ritger - Peppas memberikan pemahaman yang lebih baik
dari mekanisme pelepasan terkontrol .

Studi stabilitas
Setelah Pharmacosomes penyimpanan bubuk dianalisis
untuk berbagai parameter seperti kandungan obat,%
pelepasan obat dalam kasus profil disolusi, spektroskopi
Infra-merah untuk memeriksa Status obligasi dan penampilan
fisik. Tidak ada perbedaan besar ditemukan antara
parameter dievaluasi sebelum dan penuaan / penyimpanan
dan semua berada dalam batas yang dapat diterima. Karena
itu formulasi tetap stabil untuk waktu yang cukup. Hasilnya
ditunjukkan dalam tabel no. 6

Kesimpulan
Pada penelitian ini, sebuah kompleks Furosemide-fosfolipid

(Pharmacosomes) oleh sample dan metode direproduksi

dan dievaluasi untuk berbagai parameter fisika. IR, DSC
dan XRD studi menunjukkan bahwa ada lebih atau kurang
interaksi antara furosemide dan fosfolipid dan membentuk
semacam ikatan yang mungkin ikatan kovalen, hidrogen
atau van der Waals.

THANKYOU