CENTRIFUGE

(SENTRIFUS)
 CENTRIFUGE (SENTRIFUS)
= alat untuk memisahkan campuran materi yang
berbeda massa jenisnya, berdasarkan gaya
sentrifugal

Komponen campuran materi = suspensi

Cairan Partikel-partikel padat

 Dengan menggunakan sentrifus

Faktor gravitasi diperbesar

Proses pengendapan dipercepat

Partikel-partikel dapat dipisah-pisahkan

Partikel yang mempunyai massa jenis paling

besar akan menempati bagian tabung paling
dasar.
Principle of centrifugation

Induced Supernatant
gravitational
field

Precipitate/ pellet

Suspension In Separation
process complete
 Centrifuge rotors
axis of rotation
Swinging-bucket

At rest Spinning g
g

Fixed-angle
Rotor sudut dapat menyebabkan pengendapan
yang lebih cepat dari pada rotor ayun, karena
partikel akan bergerak ke dasar tabung
melawan viskositas cairan dalam jarak yang
lebih pendek
 GAYA SENTRIFUGAL

Suatu benda yang mengalami gerak putar akan

mendapatkan gaya ke arah pusat (gaya sentri-
petal) yang sama kuatnya dengan gaya ke arah
luar (gaya sentrifugal).
Besarnya gaya sentrifugal tergantung pada:
Kecepatan putar
Radius lingkarannya
Gaya sentrifugal (Fc)

Fc = m.4. 2.N2.R

Keterangan:
m = massa partikel
N = kecepatan putar per detik
R = radius lingkaran
Gaya sentrifugal relatif (Relative Centrifugal
Force = RCF)
= gaya sentrifugal : gravitasi
= berapa kali gravitasi

RCF = m.4. 2.N2.R

mg

RCF = m.4. 2.(rpm/60)2.R

mg

rpm (revolutions per minute)= putaran per menit

 Velocity of sedimentation of a particle

d ( p l )
2

v g
18
v = velocity of sedimentation d = diameter of particle
p = density of particle l = density of liquid
g = centrifugal force = viscosity of
liquid
Kecepatan sedimentasi suatu suspensi
ditentukan oleh:
RCF
ukuran partikel
bentuk partikel
viskositas cairan
perbedaan massa jenis partikel dan
cairan
Sentrifus juga digunakan untuk memisahkan
makromolekul- makromolekul:
- sel
- komponen sub-seluler
- protein
- asam-asam nukleat
 Size of major cell organelles
Nucleus 4-12 m
Plasma membrane sheets 3-20 m
Golgi tubules 1-2 m
Mitochondria 0.4-2.5 m
Lysosomes/peroxisomes 0.4-0.8 m
Microsomal vesicles 0.05-0.3m
Differential centrifugation of
a tissue homogenate (I)
Decant
1000g/10 min supernatant

etc. 3000g/10 min

Differential centrifugation of a
tissue homogenate (II)
1. Homogenate 1000g for 10 min
2. Supernatant from 1 3000g for 10 min
3. Supernatant from 2 15,000g for 15 min
4. Supernatant from 3 100,000g for 45
min
Pellet 1 nuclear
Pellet 2 heavy mitochondrial
Pellet 3 light mitochondrial
Pellet 4 microsomal
Differential centrifugation (III)
Expected content of pellets

1000g pellet: nuclei, plasma membrane

sheets
3000g pellet: large mitochondria, Golgi
tubules
15,000g pellet: small mitochondria,
lysosomes, peroxisomes
100,000g pellet: microsomes
 Macam-macam sentrifus:
Macam rpm
Sentrifus sederhana 7.000
Sentrifus kecepatan tinggi 7.000
Ultracentrifuge 60.000

Sentrifus kecepatan tinggi umumnya dilengkapi

dengan pendingin 4oC
Ada pula penggolongan sentrifus berdasarkan
RCFnya: dengan kecepatan 600 g, 6.000 g, 40.000 g,
100.000 g, dan ultra sentrifus dengan kecepatan
mencapai 160,000 g. (g = gravitasi)
SENTRIFUS TANGAN
Sentrifus hematokrit: untuk analisis darah
 Tabung sentrifus

Tabung mikro sentrifus