Ekstraksi dan Pengujian Aktivitas Enzim Protease

pada Daun Kelor (Moringa oleifera Lamk)

KELOMPOK 4

1. N U R H A RI S M U N A N D A R
2. NUR WAHYUNI NAHRU
3. AINUNNISA
4. D I A N P U T R I A Y U N IT A
5. A N D I A D R IN A A M A N D A
6. V I T R A A GU N G
7. MUH. ILHAM
LATAR BELAKANG

Tanaman kelor (Moringa oleifera Lamk) merupakan tanaman yang

mudah tumbuh di berbagai jenis tanah, tidak memerlukan
perawatan yang intensif, tahan terhadap musim kemarau dan
mudah dikembangbiakkan
Alternatif penggunaan enzim protease dari daun kelor ini dapat
meningkatkan nilai ekonomis dan pemanfaatan dari daun kelor
tersebut yang selama ini hanya dianggap sebagai tanaman liar serta
penggunaannya masih sebagai bahan untuk sayuran dan pakan
ternak saja
Sehingga keberadaan tanaman kelor ini dapat dijadikan sebagai
salah satu sumber enzim protease yang cukup potensial.
Klasifikasi Kelor (Moringa oleifera Lamk)

Klasifikasi tanaman kelor adalah sebagai berikut (Nasir, dkk., 2010):

Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Divisio : Magnoliophyta
Class : Magnoliopsida
Subclass : Rosidae
Ordo : Brassicales
Family : Moringaceae
Genus : Moringa
Species : Moringa oleifera
MAKSUD DAN TUJUAN

MAKSUD PERCOBAAN

Adapun maksud dari percobaaan ini adalah mengisolasi

enzim protease dari daun kelor dan pengujian aktivitas enzim
protease dari daun kelor dengan metode Walter.

TUJUAN PERCOBAAN
Adapun tujuan dari percobaan ini adalah:
1. Untuk mengisolasi enzim protease dari daun kelor.
2. Untuk menguji aktivitas enzim protease dengan metode
Walter.
PRINSIP PERCOBAAN

Prinsip dari percobaan ini adalah ekstraksi enzim protease

dengan buffer fosfat 0,1 M (pH 7,0) yang akan menjaga
kestabilan enzim sehingga diperoleh ekstrak enzim protease.
Penentuan aktivitas enzim dihitung berdasarkan jumlah
asam amino (peptida sederhana) yang terbentuk dengan
menggunakan kurva standar tirosin.
 ALAT DAN BAHAN PERCOBAAN
BAHAN PERCOBAAN
1. Daun kelor (Moringa oliefera Lamk)
2. KH2PO4 dan K2HPO4
3. HCl
4. NaOH
5. akuades
6. reagen folin-ciaceulteus
7. Na-K-Tartarat
8. TCA
9. kasein dan
10.CuSO4
ALAT DAN BAHAN PERCOBAAN

Alat percobaan
1. Timbangan digital
2. Blender
3. Vortex
4. Tabung reaksi
5. Rak tabung
6. Gelas piala 200 ml, 500 ml
7. Gelas ukur 10 ml
8. Inkubator
9. Stopwatch
10.Spektrofotmeter uv-vis
11.Pipet tetes
12.Pipet volume 5 ml, 10 ml, 25 ml
A. Ekstraksi
BAGAN KERJA
Daun Kelor

- dipisahkan dengan tangkainya dan dicuci.

- Ditimbang 100 g
- dihomogenisasi menggunakan blender
- ditambahkan 200 mL buffer kalium fosfat 100 mM pH 7.0
- disaring melalui sepotong kain tipis

Residu Filtrat

- Dimasukkan ke dalam freezer selama 30 menit

- didekantasi

Residu Enzim
B. Pengujian Aktivitas Enzim
Perhitungan Aktivitas Spesifik (Unit/mg)