BIOTEKNOLOGI

NAMA : frenje siahainenia

NIM : 14 3145 201 010
KELAS :A
 PCR (polymerase chain reaction)
PCR (polymerase chain reaction) merupakan suatu teknik atau metode
perbanyakan (replikasi) DNA secara enzimatik tanpa menggunakan organisme.
Dengan teknik ini, DNA dapat dihasilkan dalam jumlah besar dengan waktu
relatif singkat sehingga memudahkan berbagai teknik lain yang menggunakan
DNA.
 PCR memungkinkan adanya perbanyakan DNA antara dua
primer, hanya di dalam tabung reaksi, tanpa perlu memasukkannya ke
dalam sel (in vivo). Pada proses PCR dibutuhkan DNA untai ganda yang
berfungsi sebagai cetakan (templat) yang mengandung DNA-target (yang
akan diamplifikasi) untuk pembentukan molekul DNA baru, enzim DNA
polimerase, deoksinukleosida trifosfat (dNTP), dan sepasang primer
oligonukleotida.
PCR melibatkan banyak siklus yang masing-masing terdiri dari
tiga tahap berurutan, yaitu pemisahan (denaturasi) rantai DNA templat,
penempelan (annealing) pasangan primer pada DNA target dan
pemanjangan (extension) primer atau reaksi polimerisasi yang dikaalisis
oleh DNA polimerase.
 Kloning dalam Vektor Plasmid (cloning in a
plasmid vektor)

Plasmid adalah DNA ekstrakromosomal yang dapat

bereplikasi secara autonom dan bisa ditemukan pada sel
hidup. Di dalam satu sel, dapat ditemukan lebih dari satu
plasmid dengan ukuran yang sangat bervariasi namun
semua plasmid tidak mengkodekan fungsi yang penting
untuk pertumbuhan sel tersebut.
Umumnya, plasmid mengkodekan gen-gen yang
diperlukan agar dapat bertahan pada keadaan yang kurang
menguntungkan sehingga bila lingkungan kembali normal,
DNA plasmid dapat dibuang.
 Penamaan plasmid biasanya diawali dengan p
diikuti oleh serangkaian kode yang menunjukkan identitas
plasmid tersebut. Contoh plasmid yang umum digunakan
sebagai vektor adalah pUC118, pUC119, pBR322. Plasmid-
plasmid ini masing-masing membawa gen penanda
resistensi terhadap antibiotik yang dapat digunakan sebagai
dasar dalam seleksi koloni yang membawa plasmid dan
yang tidak. Beberapa plasmid memiliki MCS (Multiple
Cloning Site) pada gen lacZ yang menyandikan enzim -
galactosidase, sehingga memungkinkan melakukan seleksi
biru putih. Jika vektor tersebut telah membawa gen
tertentu, di belakang nama plasmid juga disertakan
keterangan mengenai gen yang dibawanya (contoh: pAP01
(amyH), berarti plasmid hasil konstruksi ini mengandung
gen amyH).
 Sintesis protein
Sintesis protein merupakan prses penyusunan asam-asam amino pada
rantai polinukleotida. Kunci utama dalam proses sintesis protein
adalah DNA yang merupakan material genetika dari sel. Sintesis
protein terjadi melalui2 tahap yaitu tanskripsi dan translasi.
Transkripsi
Proses transkripsi, sesuai namanya merupakan proses pencetakan atau
penulisan ulang DNA ke dalam mRNA. Proses ini terjadi di dalam
nukleus. Pada tahap ini, setiap basa nitrogen DNA dikodekan ke dalam
basa nitrogen RNA. Misalnya, jika urutan basa nitrogen DNA adalah
ACG TAG CTA, maka urutan mRNA hasil transkripsi adalah UGC
AUC GAU.
Proses pembentukan mRNA atau transkripsi
Contoh transkripsi urutan basa nitrogen DNA ke dalam mRNA

Tahap translasi adalah tahap penerjemahan kode mRNA oleh

tRNA ke dalam urutan asam amino. Tahap ini terjadi di dalam sitoplasma
dengan bantuan ribosom. Ribosom merupakan salah satu organel dalam
sitoplasma yang berperan dalam sintesis protein. Ribosom terdiri atas dua
bagian, yaitu subunit besar dan subunit kecil. Ribosom mengandung protein
dan rRNA.
Subunit besar dan subunit kecil pada ribosom
 Tahap translasi mirip tahap transkripsi. Keduanya
menggunakan enzim untuk membuat rantai polimer polinukleotida
pada transkripsi dan polipeptida pada translasi. Pada proses translasi
juga terjadi tahap inisiasi, elongasi, dan terminasi.
Pada tahap translasi kode genetik atau kodon dari mRNA
diterjemahkan menjadi rangkaian asam amino. Apakah kodon itu?
Kodon merupakan urutan tiga basa nitrogen pada mRNA. Setiap
urutan tiga basa tersebut memiliki arti khusus yang dapat
diterjemahkan dalam proses translasi.
Urutan tiga basa tersebut dikenal sebagai triplet. Misalnya,
AUG, AAA, UCA, dan UUA.
Thankz