Total Flavonoids Content

(TFC)
Spectrophotometric Determination of Flavonoids Content in Leaves of
Fagopyrum cymosum Complex
Principle

Alumunium (Al) akan berikatan

dengan orthodihidroxy group Ring A
atau B-ring flavonoids

Acid labile complexes

Quercetin
 Metode A AlCl3-KAC Spectrophotometric
KAC = Kalium Asetat
Diukur absorbansinya pada
rentang panjang
gelombang 200-1000 nm

1 mL ekstrak dimasukkan
ke dalam labu ukur 10 mL

Dibuat blanko dengan tidak

menambahkan pereaksi
Ditambahkan 2 mL AlCl3 warna (AlCl3)
0.1 M, 3 mL KAC 1 M, 4 mL
metanol

Disentrifugasi selama 10
menit 4000 ppm
 Metode B NaNo2-Al(NO3)3-NaOH
Spectrophotometric
Dibuat blanko dengan tidak Kocok dan diamkan selama
1 mL ekstrak dimasukkan
menambahkan pereaksi 15 menit sebelum
ke dalam labu ukur 10 mL
warna (AlCl3) pengukuran

2,5 mL NaOH 5%
Ditambahkan 2 mL ultra-
Diukur absorbansinya pada ditambahkan ke dalam
pure water dan 0.5 mL
rentang panjang labu ukur diikuti dengan
NaNO2 5%, lalu kocok dan
gelombang 200-1000 nm penambahan air hingga
diamkan selama 6 menit
tanda batas

0.5 mL Al(NO3)3 10%

ditambahkan ke dalam
labu ukur, dikocok dan
diamkan selama 6 menit
 Metode C NaNo2-AlCl3-NaOH
Spectrophotometric
Diukur absorbansinya pada
1 mL ekstrak dimasukkan Ditambahkan 3 mL ultra-
rentang panjang
ke dalam labu ukur 10 mL pure water dan 0.3 mL
gelombang 200-1000 nm
NaNO2 5%, lalu kocok dan
diamkan selama 5 menit

Dibuat blanko dengan tidak

menambahkan pereaksi
warna (AlCl3)
0.5 mL AlCl3 10%
ditambahkan ke dalam
labu ukur, dikocok dan
diamkan selama 6 menit Kocok dan diamkan selama
15 menit sebelum
2,5 mL NaOH 1 M pengukuran
ditambahkan ke dalam
labu ukur diikuti dengan
penambahan ultra-pure
water hingga tanda batas
 Metode D HAC-AlCl3 Spectrophotometric

1 mL ekstrak dimasukkan Ditambahkan 4 mL ultra- Diikuti dengan

ke dalam labu ukur 25 mL pure water dan 5 mL bufer penambahan metanol
asetat (pH 3.8), 3 mL AlCl3 hingga tanda batas
0.1

Dibuat blanko dengan tidak

Kocok dan diamkan selama
menambahkan pereaksi
30 menit
warna (AlCl3)

Diukur absorbansinya pada

rentang panjang
gelombang 200-1000 nm
 Evaluasi Kestabilan keempat metode

Absorbansi yang di dapat dengan cara mengurangi absorbansi blanko (A)

dengan data absorbansi sampel yang tertera pada alat (A), kemudian
diproses secara analisis dengan menggunakan software SPSS untuk
mengetahui kestabilan metode dalam 600 s
 Evaluasi Kestabilan keempat metode
Hasil Evaluasi Kestabilan
Metode

Hasil Absorbansi Keempat

Dilihat dari hasil absorbansi, Metode D lebih stabil, diikuti
Metode
dengan metode C, B dan A

Dilihat dari standar eror, standar deviasi, variansi, kurtosis,

skewness (ketidak simetrisan), metode D lebih baik dalam
metode analisis dibandingkan dengan yang lain

Peran bufer chromogenic reaction, stably longer and

smoothlty result,
 Validasi Metode
Linearitas Akurasi dan Presisi
Terbentuk kurva kalibrasi
Quercetin
Dibuat 5 konsentrasi
Dengan menggunakan
(mg/mL)
kurva kalibrasi yang
disiapkan di hari yang
saama
The calculation of linear
regression was employed
by method of least squares 0 20 40

Dibuat 5 konsentrasi 60 80
(mg/mL)
Akurasi ditentukan dari
nilai recovery Diukur kadar flavonoid
setiap harinya selama 2
0.1 0.2 0.3 hari (masing-masing
Presisi ditentukan dengan
nilai RSD konsentrasi dibuat 5
0.4 0.5 sampel)
 Validasi Metode
Linearitas Akurasi dan Presisi

Y = 0.065992x 0.000721

R = 0.9993

%Recovery 98.04% 101.02%

RSD < 2%
 Daftar Pustaka
Li, G., Yu, S., Zhou, Y. H., and Chen, Q. F. 2013. Spectrophotometric Determination of Flavonoids Content in Leaves of Fagopyrum
cymosum Complex. Asian Journal of Chemistry. Vol 25(13). 7575 7578.