RADIOIMUNOASSAY

RADIOIMUNOASSAY
• Untuk mengukur kadar antigen dan antibodi
dalam kadar rendah (dlm Nanogram)
memungkinkan mendeteksi dini macam
kelainan.
 Macam metode
• Reaksi antigen antibodi dalam larutan
• Reaksi antigen antibodi pada benda padat
atau partikel
 Prinsip kerja
• Teknik RIA dalam larutan menggunakan prinsip
kompetitif antara antigen yang berlabel dan tidak
berlabel dengan antibodi spesifik (Ag-Ab-Ag)
• Apabila Ag sebelum reaksi diketahui maka sisa Ag
yang tidak bereaksi atau yang terikat pada
kompleks dan diukur radioaktivitasnya, dapat
dipakai secara tidak langsung sebagai parameter
kadar Ag yang terdapat dalam spesimen.
 Fase - fase
• Fase terpenting pemisahan kompleks Ag-Ab-
Ag* dari Ag * dari Ab yang bebas
• Cara pemisahan dengan pengendapan dengan
Amunium sulfat, asamtrichlorasetat atau
polietilen glikol maupun mereaksikanya
dengan antibodi kedua atau filtrasi dengan
gel.
• Pada RIA dengan benda padat, antibodi
diletakkan pada suatu partikel misal dinding
tabung bagian dalam , butir butir gelas
ataupun plastik maupun cakram kertas saring.
• Teknik ini dapat dengan mudah memisahkan
kompleks Ag-Ab-Ag* dapat dipisahkan dari
Ag* yang bebas.
 Teknik RIA
• Teknik Kompetitif
• Teknik nonkompetitif
 Teknik nonkompetitif
• Meletakkan Ag dan Ab pada suatu partikel
kemudian mereaksikannya dengan spesimen
yang diuji.
• Jika yang diuji Ag, maka partikel dilapisi
dengan Ab spesifik, kemudian direaksikan
dengan spesimen. Setelah ditambahkan
antibodi berlabel , kemudian kompleks Ab-Ag-
Ab dipisahkan dan diukur radioaktivitasnya
• Banyaknya Ab* yang terikat pada kompleks
merupakan parameter kadar Ag dalam spesimen.
• Teknik ini dikenal sebagai teknik sandwich
• Teknik ini mengalami modifikasi dengan cara
spesiment direaksikan dengan partikel berlapis
antibodi, ditambahkan antibodi spesifik yang
tidak berlabel baru kemudian ditambahkan
antiimmunoglubulin universil yang berlabel.
• akan terbentuk kompleks Ab-Ag-Ab-AntiIg* yang
radioaktivnya dapat diukur yang merupakan
parameter kadar Ag dalam spesimen.