TerapiGenManusia

TERAPI GEN PADA MANUSIA
SUMBER :
Ahmad Aulia Jusuf

Bagian Histologi
Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia
 Pendahuluan
 Definisi Terapi Gen
 Jenis Terapi Gen
 Metoda Terapi Gen
 Prasyarat Terapi Gen
 Contoh Terapi Gen
2
Human Gene Therapy?
3
 5000 penyakit bawaan
◦ Kebanyakan bersifat genetik
 Defisiensi produk gen
 << Dapat digantikan dengan produk
dari luar
 Insulin
 Defek pada produk ensim tak bisa
digantikan
 Tak stabil dan mudah rusak
 Tak bisa dimasukkan dalam bentuk
aktif
 Sifat impermeabel membran sel
terhadap molekul besar
 Terapi gen
______________________________________________________________________________________________________________________
_________________________
1
Snustad D. Peter and Simmons M.J. : Human gene therapy in Principles of genetics,
4th Ed, 2006: 499-503
4
 Terapi untuk mengobati
penyakit tententu
◦ menginsersikan gen yang telah
diperbaiki atau gen tertentu kedalam
genom sel-sel atau jaringan
individu
 menggantikan gen yang
abnormal penyebab penyakit
tersebut
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
Snustad D. Peter and Simmons M.J. : Human gene therapy in Principles of genetics, 4th Ed, 2006: 499-503
2
Gene Therapy diunduh dari "http://en.wikipedia.org/wiki/Gene_therapy"
3
Scott T., Gene Therapy Breakthrough, diunduh dari www.unitedspinal.org. February 26th, 2008
4
What is gene therapy diunduh dari www.ornl.gov/sci/techresources/Human.../genetherapy.shtml
5
 Insersi gen yang normal pada lokasi
yang tidak spesifik di dalam genom
◦ untuk menggantikan gen yang tidak
berfungsi.
◦ Prinsip umum yang paling sering
digunakan
 Gen abnormal dihilangkan dari genom
individu dan digantikan oleh gen yang
normal
◦ Homologous recombination
 Gen abnormal diperbaiki melalui cara
selective reverse mutation
◦ Mengubah regulasi (pengaturan) gen
tertentu.
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
2
3
4
6
 Terapi gen sel somatik (somatic cell gene
therapy)
 Terapi gen sel germinal (Germ line cell
gene therapy)
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
4
Terapi Gen pada Manusia/AAJ/Histologi Monday, November 09, 2009 7

 Terapi gen sel somatik (somatic cell gene therapy)
◦ gene therapy non hereditable
◦ gen yang normal atau telah dimodifikasi ditransfer ke
dalam sel-sel somatik pasien
◦ mengobati/mengatasi gejala penyakit pasien
◦ tidak dapat diturunkan kepada generasi selanjutnya
 gen yang telah diperbaiki ini hanya ada pada sel-sel
somatik saja dan tidak ada pada sel-sel germinal.
◦ mirip dengan transplantasi sel, jaringan atau organ
 Lebih rumit dan lebih berbahaya
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
4
What is gene therapy diunduh dari www.ornl.gov/sci/techresources/Human.../genetherapy.shtml 8
 Terapi gen sel germinal (Germ line cell gene
therapy)1,2,4
◦ Gen yang mengalami defek pada sel-sel germinal
 diperbaiki dengan cara menginsersikan dan
mengintegrasikan gen yang normal atau gen yang telah
dimodifikasi kedalam genom sel-sel germinal
 Gen yang telah diinsersikan ini kemudian akan diturunkan
ke generasi berikutnya
◦ Sangat bermanfaat untuk mengatasi penyakit-penyakit
genetik dan penyakit-penyakit yang bersifat herediter
◦ masih sulit dilakukan karena alasan tehnis dan etik
 telah mengubah genetik seseorang
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
4

 Transfer gen yang telah dimodifikasi
atau gen normal kedalam sel-sel
sasaran pada pasien
◦ Menggunakan vektor biologi yaitu virus
◦ Menggunakan cara non virus
 naked DNA
 oligonucleotides
 lipoplexes dan polyplexes
 hibrid methods
 dendrimers
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
3
4

 Vektor biologi yang digunakan adalah virus
◦ susunan genetiknya telah diubah sehingga dapat membawa gen manusia yang
normal
◦ gen yang telah diperbaiki dimasukkan kedalam sel-sel sasaran pada tubuh
manusia dengan cara tertentu dan kemudian berintegrasi pada genom
tertentu
◦ gen-gen pada virus yang dapat menyebabkan penyakit harus dihilangkan dan
diganti dengan gen-gen yang telah diperbaiki
◦ contoh virus A diketahui dapat berreplikasi atau memperbanyak diri dengan
cara menginsersikan gen-gen nya kedalam genom sel-sel host.
 virus ini mempunyai 2 jenis gene yaitu gen A dan gene B
 Gen A mengkode protein untuk menginsersikan gen-gen nya kedalam
genom sel host (inang)
 Gen B menyebabkan timbulnya penyakit pada host
 gen C adalah gen yang telah diperbaiki
 menggantikan gen B
 gen A tetap dipertahankan untuk menjalankan fungsinya.
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
3
11
4
 Vektor biologi yang digunakan
adalah virus
◦ Adenovirus merupakan virus
generasi pertama yang digunakan
dalam terapi gen dan sangat efektif
sebagai vektor pembawa transgen2,4
◦ Virus lain
 retrovirus
 adeno-associated viruses
 virus herpes simplex
 virus penyebab HIV
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
3
4

 Retrovirus1,2,3,4
◦ Materi genetik pada virus ini adalah dalam bentuk RNA
◦ Ketika retrovirus menginfeksi sel sasaran (host)
 RNA retrovirus, ensim reverse transcriptase dan
integrase masuk kedalam sel sasaran
 RNA retrovirus akan diubah menjadi DNA melalui
proses reverse transcription menggunakan ensim
reverse transcriptase
 DNA kemudian akan ditransfer kedalam inti sel sasaran
 berintegrasi pada tempat tertentu di genom sel
sasaran dengan bantuan ensim integrase
 DNA yang telah diperbaiki ini juga akan terintegrasi
pada tempat tertentu di genom sel sasaran
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
3
4
13
Transfer Gen menggunakan vektor retrovirus
(diunduh dari encarta.msn.com/media_461561269/gene_therapy.html)

 Retrovirus1,2,3,4
◦ Salah satu masalah yang dapat terjadi pada terapi gen
 ensim integrase dapat menginsersikan materi genetik virus pada tempat yang
kurang sesuai
 pada bagian tengah gen-gen endogen pada host
 gen endogen ini tidak dapat berfungsi dikenal sebagai insertional
mutagenesis
 pada gen pengatur fungsi gen lainnya
 proses pembelahan sel dapat tidak terkendali dan berubah menjadi sel
kanker
 Hal ini sekarang dapat diatasi dengan menggunakan ensim Zinc finger nucleases 5
◦ Keuntungan menggunakan retrovirus
 transgen yang dimasukkan bisa di transmisikan kesemua sel yang terinfeksi dan
turunannya
◦ Kerugian
 dapat menyebabkan terjadinya mutasi genetik yang berbahaya selama tahap
pengintegrasian
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
3
4
 Adenovirus1,2,3,4
◦ Ketika virus adenovirus menginfeksi sebuah sel inang
 molekul DNA virus tersebut akan dimasukkan kedalam sel inang tersebut
 materi genetik adenovirus tidak bersatu dengan materi genetik sel inang
 molekul DNA virus terletak bebas dalam inti sel dan proses transkripsinya
berlangsung secara sendiri
 molekul DNA virus tidak ikut berreplikasi ketika sel mengalami pembelahan
sehingga sel-sel inang hasil pembelahan tidak mengandung DNA virus
 membutuhkan pemasukkan kembali gen-gen yang sudah dimodifikasi ke
dalam populasi sel yang baru
 Sebaliknya keadaan ini akan mencegah terjadinya kanker
◦ Gendicine
 adenovirus yang telah mengandung gen p53 yang digunakan pada terapi gen
untuk mengobati penyakit kanker pada kepala dan leher
 sudah diizinkan oleh FDA China untuk digunakan pada manusia pada tahun 2003
 FDA Amerika Serikat telah menyetujui advexin, suatu vektor yang serupa dengan
Gendicine untuk digunakan di Amerika serikat pada tahun 2008
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
3
4
Transfer Gen menggunakan vektor adenovirus
(diunduh dari www.acceleratingfuture.com/michael/blog/?p=455)

 Keuntungan
◦ dapat diproduksi dalam jumlah besar
◦ immunogenisitas pada sel inang yang rendah
 Beberapa metoda non virus yang dapat digunakan
adalah
◦ Naked DNA
 metoda transfeksi non virus yang sangat sederhana
 penelitian klinik dengan cara menyuntikan naked
DNA secara intramuskular menunjukkan sebagian
hasil yang sukses dan sebagian lagi mengalami
kegagalan
 ekspresi gen pada metoda transfeksi ini sangat
rendah dibandingkan dengan cara transfeksi
lainnya
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
3
4
18
 Beberapa metoda non virus
yang dapat digunakan adalah
◦ Oligonukleotida
 Metoda menginaktifkan gen-gen yang terlibat
dalam proses penyakit.
 Menggunakan antisense yang spesifik untuk
gen sasasaran
 mengganggu proses transkripsi gen
sasaran yang rusak.
 Menggunakan oligonukleotida rantai ganda
(double strand oligonucleotide)
 mengikat faktor-faktor transkripsi yang
diperlukan untuk regulasi promoter gen
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
sasaran
2
3
4
19
 Beberapa metoda non virus yang dapat
digunakan adalah
◦ Lipoplexes and polyplexes
 Meningkatkan efisiensi transfer dengan cara melindungi
DNA dari kerusakan dan memfasilitasi pemasukkannya
kedalam sel
 Menggunakan molekul lipid
 lipoplexes dan polyplexes
 dirancang untuk melindungi DNA dari proses degradasi
selama proses transfeksi
 membungkus plasmid yang mengandung DNA dalam
bentuk seperti micelle atau liposome
 lipoplexes atau polyplexes yang telah mengandung DNA
dikenal sebagai lipoplex.
 lipoplex akan berinteraksi dengan membran sel dan
masuk kedalam secara endositosis
 endosome yang mengandung lipoplex ini kemudian akan
lisis dan transgen yang ada di dalamnya akan dikeluarkan
ke dalam sitoplasma sel untu kemudian akan masuk ke
dalam inti sel
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
3
4
What is gene therapy diunduh dari www.ornl.gov/sci/techresources/Human.../genetherapy.shtml 20
 Beberapa metoda non virus yang dapat
digunakan adalah
◦ Metoda Hibrid (Hybrid method)
 Untuk meningkatkan efisiensi trnasfer transgen
dikembangkan metoda hibrid (campuran) yaitu
kombinasi liposome dengan virus influenza atau HIV
yang diinaktifkan
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
2
3
4

 Beberapa faktor yang menghambat efektivitas penggunaan terapi gen
◦ Masa hidup alami terapi gen yang pendek (Short-lived nature of gene
therapy)
 gen yang dimasukkan kedalam sel-sel target harus dapat berfungsi
 sel-sel yang mengandung gen terapi ini harus dapat hidup lama dan
stabil.
◦ Respons Imunologik
 adanya stimulus tertentu yang merangsang timbulnya respons
imunologik dapat menurunkan efektivitas terapi gen
 adanya respon imunologik ini juga akan menyulitkan pengulangan terapi
gen pada pasien
◦ Masalah dengan virus yang berfungsi sebagai vektor
 toksisitas, reaksi imunologik dan inflamasi, kontrol gen dan jaringan
sasaran.
 kemungkinan pulihnya kembali kemampuan virus untuk menyebabkan
penyakit pada manusia
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

2

4
22
 Beberapa faktor yang menghambat efektivitas penggunaan terapi gen
◦ Kelainan gen multipel
 terapi gen sulit digunakan untuk mengobati penyakit-penyakit yang
disebabkan oleh adanya kombinasi gen-gen yang mengalami kerusakan
 penyakit jantung, tekanan darah tinggi, Alzheimer, artritis dan
diabetes.
◦ Potensi untuk timbulnya tumor
 Bila DNA diintegrasikan pada tempat yang salah di dalam genom,
misalnya pada daerah tumor suppressor gene, hal ini dapat menyebabkan
timbulnya tumor.
 pasien dengan X-linked severe combined immunodeficiency (X-SCID)
yang diterapi dengan sel punca darah (Hematopoietic stem cells yang
diinfeksi oleh retrovirus yang mengandung transgen
 Tiga dari 20 pasien yang diterapi menderita leukemia6
23
 National Institute of Health (NIH)
◦ Gen harus di klon dan diketahui
karakteristiknya
 harus tersedia dalam bentuk murni
◦ Metoda efektif
◦ Resiko terapi gen
 harus dievaluasi secara berhati-hati
 seminimal mungkin
◦ Penyakit tidak dapat diobati dengan cara
lainnya
◦ Harus ada data penelitian pendahuluan
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
24
 Terapi gen pada manusia pertama kali dilakukan tahun
1990
◦ penyakit ”Adenosine deaminase-deficient severe combined
immunodeficiency disease (ADA-SCID)
 SCID
◦ penyakit autosomal yang jarang terjadi
◦ penderita tidak mempunyai sistem imun
◦ beberapa penderita mengalami defisiensi ensim adenosine
deaminase (ADA)
 kadar deoxyadenosine yang terfosforilasi meningkat mencapai tingkat
toksik dan terakumulasi dalam limfosit T
 membunuh sel limfosit.
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1
25
 Contoh penggunaan adenovirus dalam terapi gen
◦ terapi gen yang dipakai untuk mengobati cystic fibrosis (CF)
 virus adenovirus yang membawa gen CF diinhalasi oleh
pasien
 sel-sel paru akan terinfeksi dan mensintesis produk gen
CF untuk mengatasi simptom dan gejala penyakit
 kuatnya reaksi imunologik tubuh menyebabkan terapi
gen menjadi tidak efektif
 Sel-sel yang terinfeksi virus dan mengandung transgen
akan mati dan tidak bisa memperbanyak diri
27
28

TerapiGenManusia

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi Asli:

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

TerapiGenManusia

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

TERAPI GEN PADA MANUSIA

Ahmad Aulia Jusuf

Terapi Gen pada Manusia/AAJ/Histologi Monday, November 09, 2009 7

Terapi Gen pada Manusia/AAJ/Histologi Monday, November 09, 2009 9

Terapi Gen pada Manusia/AAJ/Histologi Monday, November 09, 2009 10

Terapi Gen pada Manusia/AAJ/Histologi Monday, November 09, 2009 12

(diunduh dari encarta.msn.com/media_461561269/gene_therapy.html)

Terapi Gen pada Manusia/AAJ/Histologi Monday, November 09, 2009 14

(diunduh dari www.acceleratingfuture.com/michael/blog/?p=455)

Terapi Gen pada Manusia/AAJ/Histologi Monday, November 09, 2009 17

Terapi Gen pada Manusia/AAJ/Histologi Monday, November 09, 2009 21

Gene Therapy diunduh dari "http://en.wikipedia.org/wiki/Gene_therapy"

What is gene therapy diunduh dari www.ornl.gov/sci/techresources/Human.../genetherapy.shtml

Anda mungkin juga menyukai