Oleh:

Agnes Yohaningsih Taek, S.KH

Jefrisandy Dapasesi, S.KH
 Limfadenopati  Pembesaran kelenjar getah bening
 Sering ditemukan masalah pada pasien hewan
 Sitologi berfungsi sebagai diagnosis dua kondisi umum yaitu, kulit / massa subkutan dan
limfadenopati pada pasien hewan (VILLIERS dan DUNN, 1998).
 Pada manusia di mana sitologi aspirasi telah menjadi prosedur diagnostik utama untuk penilaian
limfadenopati pada pasien virus immunodeficiency (VANSIRI et al., 2008).
 Selain itu teknik sitologi telah menjadi bagian integral diagnosis dalam kasus klinis malignant
(ROSZEL, 1981).
 Mejadi prosedur yang sederhana dan cepat, teknik ini menggunakan beberapa sumber daya
untuk mendapatkan sampel sel dari kebanyakan lesi. Meskipun tidak mungkin untuk
mendapatkan informasi tentang struktur jaringan, komponen sel, sel neoplastik dan non-
neoplastik dapat ditafsirkan secara jelas dengan bantuan sitologi (MORRIS dan DOBSON, 1992 )
 Cara yang paling dipilih untuk mendapatkan sampel diagnostik sitologi dari perifer dan / atau
internal kelenjar getah bening adalah dengan biopsi aspirasi jarum halus (FNAB) atau biopsi
jarum halus non-aspirasi (COWELL et al., 2003).
 Selanjutnya, interpretasi teknik FNAB adalah 97% akurat bila dibandingkan dengan temuan
histologis pada kasus manusia limfadenopati (STEWART et al., 1998).
 FNAB kelenjar getah bening memiliki penilaian cepat dari proses yang mendasari
karena membantu untuk membedakan hiperplasia reaktif, peradangan dan neoplasia,
apakah itu berasal dari sel-sel yang berada dilimfatik atau beredar melalui node atau
dari penyebaran metastatik limfatik dari tumor ganas.
 TESKE dan HEERDE (1996) menyatakan bahwa pemeriksaan sitologi spesimen FNAB
telah diterima secara umum sebagai teknik yang dapat diandalkan untuk mendiagnosis
limfoma ganas pada anjing.
 BULEY (1998) yang melaporkan bahwa sensitivitas dan spesifisitas FNAB dari kelenjar
getah bening untuk keganasan metastatik adalah 98%.
 Smear udara kering FNAB menghasilkan sel dengan rincian sitoplasma dan nukleus
yang optimal (MORRIS dan DOBSON, 1992).
 Detail nukleus dan nukleolar cukup untuk membedakan neoplasia dan inflmasi dan
untuk bukti sitologi potensi malignant dengan pewarnaan Romanowsky (MEINKOTH
dan COWELL, 2002).
 Ketika sel udara kering diwarnai dengan Hematoksilin dan Eosin (H & E) ada ditandai
hilangnya rincian nuklir bila dibandingkan dengan sel-sel yang rehidrasi atau segera
difiksasi dengan etanol 95% (LUMSDEN dan BAKER, 2000).Hal ini didukung oleh fakta
bahwa rehidrasi dan pewarnaan yang cepat dari Papanicolaou atau H & E dari aspirasi
udara kering atau smear menghasilkan rincian nukleus dan nukleolar yang lebih baik
dan memiliki nilai potensial dalam karakterisasi nukleus limfositik (TAYLOR dan
BAKER, 2000).
 Koleksi Sampel
Sampel FNAB kelenjar getah bening dikumpulkan dari anjing dengan limfadenopati
klinis, mengunjungi klinik di Madras Veterinary College Teaching Hospital, Chennai,
India.
 Teknik sitologi dan pewarnaan.
Sampel FNAB dikumpulkan sesuai dengan metode MILLS (1984) dan COWELL et al.
(2003).
Smear baik basah menggunakan etanol 95% (SACHDEVA dan KLINE, 1981) selama 20
menit atau udara kering dengan cepat, untuk kemudian diwarnai dengan pewarnaan
Romanowsky.
Metode yang dijelaskan oleh MAGNOL et al. (1994) digunakan untuk pewarnaan
dengan May-Grünwald (MG), May-GrünwaldGiemsa (MGG), Wright dan Wright's-
Giemsa (WRG). Pewarnaan Leishman-Giemsa (LG) dilakukan dengan merendam
apusan dengan pewarna LG selama satu menit dan mengencerkannya dengan dua kali.
Apusan dibiarkan selama 20 menit dan kemudian diperiksa. Smear tetap basah
diwarnai dengan pewarnaan Harris H & E sesuai teknik BANCROFT dan STEVENS
(1996).
Metodologi untuk pewarnaan Papanicolaou diadaptasi dari SACHDEVA dan KLINE
(1981).
 Rincian seluler yang dijelaskan di sini didasarkan pada tipe pewarnaan smear Romanowsky,
kecuali jika disebutkan.
 Inti sel berwarna keunguan dan sitoplasma basofilik pucat. Granul sel mast berwarna
keunguan.
 Udara kering FNAB smear menghasilkan detail sitoplasma dan nuklir yang baik dengan
pewarnaan tipe Romanowsky. Apusan tebal diperoleh dari lesi metastasis dengan gugus
padat dan beberapa lapisan sel neoplastik dan limfoma, difiksasi basah dalam etanol 95%,
menunjukkan rincian nukleus dan nukleolar yang baik ketika diwarnai dengan metode 'Pap'
dan H & E.
 Mean ± S.E persentase sel yang diamati pada apusan nodus limfa ditunjukkan pada Tabel 1.
 Dari 109 kasus, 52 didiagnosis sebagai hiperplasia reaktif. Dalam beberapa kasus, limfoblas dengan
mitosis dikaitkan dengan imunoblas, menunjukkan sitoplasma hiperbasofilik.
 Ada peningkatan yang jelas dalam sel-sel plasma dalam berbagai tahap diferensiasi (penampilan zona
Golgi yang jelas, vakuola sitoplasma) dengan kehadiran sel mott sedang sampai sesekali dengan
Russell Bodies (Gambar 1).
 Jumlah makrofag tubuh tegang ringan hingga sedang (TBM) dan badan limfoglanduler hadir. Dua puluh
lima kasus didiagnosis sebagai limfadenitis neutrofilik. Ada peningkatan absolut dalam neutrofil hanya
dalam delapan kasus (Gambar 2).
 Kasus-kasus yang tersisa menunjukkan respons neutrofilik disertai dengan perubahan hiperplastik
yaitu peningkatan jumlah limfoblas dan sel plasma. Limfadenitis eosinofilik didiagnosis pada 15 kasus
(Gambar 3)
 Dari 109 kasus, sembilan dikelompokkan sebagai limfadenopati metastatik dengan
bukti metastasis, yang melibatkan tujuh karsinoma, satu sarkoma dan satu sel mast
tumor.
 Tiga kasus didiagnosis sebagai tumor terkait limfadenopati, tanpa adanya lesi
metastasis (Tabel 3).
 Sel-sel karsinoma metastasis muncul berbetuk bulat besar ke kelompok polihedral
dengan nukleus vesikuler bulat ke oval. Nukleus bersifat hiperkromatik dan beberapa
sel memiliki beberapa nuklei basofilik. Sitoplasma sangat basofilik dan beberapa
menunjukkan vakuolisasi (Gambar 4).
 Sel sarkoma tampak berbentuk spindel dengan eosinophilic dengan ekor dan basofilik
inti bulat ke oval dengan nukleolus tidak jelas (Gambar 5).
 Sel-sel tumor sel mast bulat mengandung butiran kecil kemerahan-ungu di sitoplasma
dan memiliki inti bulat dengan nuklei tak jelas (Gambar 6).
 Satu dari 109 kasus diidentifikasi sebagai plasmacytoma. Dalam apusan pewarnaan
'Pap', sel-sel itu bulat ke polyhedral dengan margin diskrit (berlainan). Anisocytosis
dan anisokaryosis menonjol. Sel-sel Mott dengan Russell bodies juga terlihat (Gambar
7).
 Apusan udara kering yang diwarnai dengan pewarnaan Romanowsky memungkinkan
interpretasi yang memuaskan dari biopsi sitologi.
 Ketika pewarnaan Wright, May-Grünwald, dan Leishman dikombinasikan dengan
Giemsa menghasilkan detail nukleus dan sitoplasma yang lebih baik. Namun,
pewarnaan 'Pap' lebih baik daripada pewarnaan Romanowsky dalam mengevaluasi
penyimpangan dalam kromatin dan nukleolus.
 Hasil ini sebanding dengan pengamatan MAGNOL et al. (1994). Detail nukleus lebih
baik dilihat di H & E dan pewarnaan 'Pap' jika dibandingkan dengan pewarnaan
Romanowsky.
 Observasi ini sesuai dengan LUMSDEN dan BAKER (2000). Namun, pewarnaan 'Pap'
tidak memadai untuk evaluasi limfoid seperti yang dilaporkan oleh MAGNOL et al.
(1994).
 Hiperplasia reaktif menunjukkan peningkatan 27 dan 7 kali lipat dalam persentase
rata-rata sel plasma dan limfoblas, berturut-turut. Sejalan dengan itu ada sedikit
penurunan jumlah limfosit. Temuan ini sependapat dengan DUNCAN (1993).
 Beberapa sel mast, jumah mitotik, dan sel motts dengan Russell bodies disertai dengan
hiperplasia reaktif seperti yang dilaporkan oleh THRALL (2000) dan COWELL et al.
(2003).
 Peningkatan 10 kali lipat dalam neutrofil dan peningkatan 9 kali lipat dalam
eosinofil diamati pada kasus limfadenitis neutrofilik dan eosinofilik, berturut-turut.
 Hanya 32% dari kasus menunjukkan limfadenitis neutrofilik absolut, di mana
karena semua limfadenitis eosinofilik terjadi reaksi campuran dengan peningkatan
neutrofil, limfoblas dan sel plasma.
 Perbandingan persentase limfoblas dan sel plasma lebih tinggi pada limfadenitis
eosinofilik dan persentase rata-rata limfosit lebih rendah daripada limfadenopati
lainnya. COWELL dkk. (2003) menyatakan bahwa peningkatan jumlah sel plasma
biasanya hadir dengan limfadenitis dari setiap penyebab seperti yang diamati
dalam penelitian ini.
 Persentase metastasis ke kelenjar getah bening regional yang diamati dalam
penelitian ini adalah tinggi bila dibandingkan dengan laporan LAGENBACH et al.
(2001), yaitu 43,75% untuk karsinoma dan 12,50% untuk sarkoma.
 Semakin tinggi persentase deteksi mungkin karena rendahnya jumlah kasus yang
diamati dalam penelitian ini. Namun, FNAB sangat sensitif untuk mendeteksi lesi
metastasis di kelenjar getah bening.
 Tumor sel mast yang berdiferensiasi sedang memiliki potensi lebih tinggi untuk
metastasis ke kelenjar getah bening regional tanpa menghiraukan lesi. Ini tidak
boleh disalahartikan sebagai sel mast sisa atau reaktif yang kadang-kadang
diamati.
 Pada anjing, tumor sel mast kulit di daerah inguinal sering bermetastasis ke
kelenjar getah bening perut (ALLENMAN dan BAIN, 2000). Dalam penelitian ini,
kelenjar getah bening inguinal dengan metastasis tumor sel mast ditempati oleh
sel neoplastik dengan butiran ungu kemerahan sitoplasma pada apusan bernoda
Romanowsky.
 Kriteria sitologi dari anisocytosis dan anisokaryosis yang diamati pada karsinoma
dan sarkoma yang bermetastasis telah dekat dengan laporan sebelumnya (MILLS,
1984; DUNCAN, 1993; MAGNOL et al., 1994; COWELL et al., 2003). Dengan
demikian teknik FNAB ditemukan lebih unggul dibandingkan metode impresi dan
goresan dan histopatologi dalam mendeteksi neoplasma metastasis di kelenjar
getah bening.
 Limfoma menunjukkan persentase rata-rata 82,2% limfoblas. Hasil ini sebanding
dengan deskripsi sebelumnya limfoma limfoblastik oleh BURKHARD dan MEYER
(1996). BARRET (1978) dan CANIATTI dkk. (1996) melaporkan populasi sel sebagai 50-
80% di limfoma limfoblastik.
 Keempat kasus yang ditemui adalah tipe limfoblastik dan memiliki indeks mitosis
tinggi pada satu, menengah di bawah, dan rendah pada dua anjing lainnya. Kerapuhan
sel, inti telanjang, dan badan limfoglandular banyak terdapat di limfoma daripada di
hiperplasia. Sebagian besar sel (> 80%) mengisi node bersifat merusak. Observasi ini
disepakati dengan para peneliti sebelumnya (CANIATTI et al., 1996; THRALL, 2000;
NESBIT et al., 2002).
 Secara morfologis, limfoblas neoplastik muncul hampir seperti limfoblas non-
neoplastik. Oleh karena itu persentase limfoblas dan bukan kriteria malignant yang
memungkinkan untuk disebut limfoma (COWELL et al., 2003)
 Penelitian ini menunjukkan bahwa FNAB dari kelenjar getah bening menghasilkan
seluleritas tinggi dan kualitas dan kuantitas sampel yang memadai untuk interpretasi
sitologi yang memuaskan. Pewarnaan Romanowsky pada apusan udara kering cukup
memadai untuk diagnosis banding limfadenopati.
 Pewarnaan 'Pap' dan H & E dengan etanol 95% pada apusan sitologi mungkin lebih
disukai untuk mendiagnosis limfoma dan neoplasia metastatik. Ini membuka jalan bagi
pekerjaan rutin teknik sitologi dalam diagnosis cepat limfadenopati dalam praktik
anjing.
 Thangapandiyan, M., C. BALACHANDRAN: Cytological Evaluation of Canine
Lymphadenopathies - A Review of 109 Cases. Vet. Arhiv 80, 499-508, 2010.