Ditimbang secara seksama sejumlah tertentu sampel sehingga dibuat konsentrasi standart induk sebesar 300ppm dan 400ppm mengandung hidrokortison asetat 2,5mg (replikasi 3x)
dibuat standart hidrokortison asetat dalam alkohol 96% dengan
Dimasukkan labu ukur 10ml konsentrasi 150ppm, 200ppm, 240ppm, 300ppm, dan 400ppm
Dilarutkan dengan alkohol 96% dengan ultrasonik cleaner
2. Preparasi Eluen Kertas saring dipotong sesuai ukuran chamber Ditambahkan alkohol sampai tanda batas
Kertas saring dimasukkan kedalam chamber Dikocok sampai homogen
Dibuat eluen
Etil asetat dipipet 7,5ml dengan pipet ukur 10ml -> dimasukkan erlenmeyer
CH3Cl dipipet 10ml menggunakan pipet volume dan dimasukkan
erlenmeyer berisi etil asetat
uen dimasukkan kedalam chamber -> chamber ditutup
4. Eluasi Larutan Standart Dan Larutan Sampel Lempeng KLT disiapkan
Ditotolkan 4µl larutan standart hidrokortison asetat pada lempeng KLT
menggunakan mikropipet
Ditotolkan 4µl larutan sampel pada lempeng KLT dengan menggunakan
mikropipet
Dipastikan chamber jenuh -> lempeng KLT dimasukkan dalam chamber
dengan pinset
Ditunggu eluasi lempeng sampai garis batas
Lempeng diambil, dikeringkan dengan dryer di lemari asam
Lempeng discan dengan densitometer CAMAG pada 255nm