JOURNAL READING

Microbiology of Chronic Suppurative Otitis

Media, Study of the Role of Bacterial Biofilm
and Fungal Infection
DOKTER PEMBIMBING :
dr. Bambang Suryadi, Sp.THT-KL
 
DISUSUN OLEH :
Hana Fadly
30101407197

KEPANITERAAN KLINIK BAGIAN ILMU KESEHATAN TELINGA HIDUNG

TENGGOROK – KEPALA LEHER (THT-KL) RST Dr. Soedjono Magelang
Fakultas Kedokteran Universitas Islam Sultan Agung Semarang
2018
Abstrak
 Otitis media supuratif kronis (OMSK) didefinisikan sebagai peradangan kronis pada celah
telinga tengah.
 Penyakit ini sering terjadi pada semua kelompok umur tetapi lebih umum pada kelompok
sosial ekonomi rendah. Hal ini paling sering terlihat di negara berkembang dan belum
berkembang yang mempengaruhi 0,5-30% dari setiap komunitas.
 Aplikasi antibiotik lokal tetap penting dan langkah pertama untuk mendapatkan telinga
kering. Perubahan flora bakteri dalam dekade terakhir dan penyalahgunaan antibiotik
menyebabkan munculnya organisme yang resistan terhadap berbagai obat.
 Baru-baru ini, biofilm bakteri dianggap memiliki peran besar dalam banyak infeksi
otolaryngologic. Pembentukan biofilm memfasilitasi infeksi bakteri kronis dan mengurangi
efektivitas terapi anti-mikroba.
 Diperkirakan bahwa biofilm menyumbang sekitar 60% infeksi mikroba di dalam tubuh.
 Selain biofilm bakteri, peran infeksi jamur di OMSK membutuhkan lebih banyak perhatian.
Infeksi jamur pada telinga tengah sering terjadi karena jamur berkembang dengan baik di
dalam nanah lembab. Pengetahuan tentang mycological aspect dari telinga ini sangat sedikit
yang diketahui, yang pentingnya telah meningkat dalam beberapa tahun terakhir karena
penggunaan yang berlebihan dari antibiotic, corticosteroids dan kemoterapi sitotoksik.
 Tujuan: Pemeriksaan mikrobiologi otitis media supuratif kronis dengan
mendeteksi isolat bakteri dan jamur yang terlibat dalam infeksi. Selain itu,
untuk deteksi kapasitas pembentukan biofilm bakteri.
 Pasien dan metode: Empat puluh Pasien menderita kronis otitis media
supuratif menghadiri klinik rawat jalan di rumah sakit Universitas
Menoufia dan rumah sakit Asuransi Karmoz dimasukkan dalam penelitian
ini.
Cairan nanah diambil menggunakan swab kapas steril. Sampel ini
dikulturkan untuk mendeteksi infeksi bakteri dan jamur dan deteksi
kemampuan bakteri membentuk biofilm dilakukan dengan menggunakan
metode kristal violet dan oleh Kultur Semalam di Tryptic Soya Broth (TSB).
 Hasil: Sebagian besar bakteri yang terisolasi umum adalah pseudomonas
aeurgiosa (37,5%), diikuti oleh Klebseilla.spp (10%) dan Staph.aeureus
(7,5%) dan kultur jamur menghasilkan Candida (10%) dan Aspergillus
(7,5%). Campuran infeksi bakteri dan jamur terjadi pada (11,7%) dari
pasien kami. 14 dari 15 kasus infeksi pseudomonas memberikan hasil
untuk pembentukan biofilm (93,3%) dan infeksi Staph.aeureus, 3 kasus
dari 3 kasus (100%) adalah membentuk biofilm.
 Kesimpulan: Kultur dan sensitivitas rutin merupakan langkah
paling penting dalam manajemen OMSK karena multi-etiologi
yang membuat terapi empiris menjadi tidak mungkin. Infeksi
jamur dapat terjadi tanpa bukti klinis, oleh karena itu, terapi
anti jamur lokal empiris sangat dianjurkan dalam kasus seperti
itu. Pembentukan biofilm mungkin bertanggung jawab untuk
tidak responsif terhadap kemoterapi antibiotik. Pengangkatan
atau penghambatan fisik biofilm dapat meningkatkan respons
terhadap terapi antimikroba dan pemberantasan infeksi.
Introduction
 Otitis media supuratif kronis (OMSK) didefinisikan sebagai
peradangan supuratif kronis dari lapisan periosteal mukosa
pada celah telinga tengah dengan perforasi membran timpani
[1,2].
 Penyakit ini sering terjadi pada semua kelompok umur tetapi
lebih umum pada kelompok sosial ekonomi rendah.Hal ini
paling sering terlihat di negara berkembang dan belum
berkembang yang mempengaruhi 0,5-30% dari setiap
komunitas [3]. OMSK memiliki dampak besar pada masyarakat
dalam hal pendengaran pasien [4]. Ini menyebabkan gangguan
pendengaran konduktif dan sensorineural dan efek buruk pada
perkembangan anak [5].
 OMSK terdiri dari dua tipe, mukosa atau tub timpani dan
kolesteatoma atau tipe atticoantral.

 Jenis tympanic tuba mempengaruhi terutama mesotympanum, hypo

tympanum, tabung eustachian dan sel-sel udara mastoid di mana
sebagai atticoantral adalah berbahaya karena komplikasi yang
terkait dan dapat mengancam kehidupan pada saat infeksi dapat
menyebar dari telinga tengah ke struktur vital seperti mastoid, saraf
wajah, labirin , sinus lateral, meningen dan otak yang mengarah ke
abses mastoid, kelumpuhan saraf wajah, tuli, trombosis sinus
lateral, meningitis dan abses otak.

 Resistensi Antibiotik (ABR) bersifat kompleks dan multidimensi. Ini

melibatkan berbagai mekanisme resistensi menghasilkan berbagai
bakteri yang meluas, yang sebagian besar dapat menyebabkan
spektrum penyakit yang luas pada manusia dan hewan.
 Biofilm bakteri dianggap memiliki peran utama dalam banyak infeksi
otolaryngologic, selama 20 tahun terakhir apresiasi baru telah
berkembang mengenai bagaimana bakteri berperilaku berbeda
setelah terikat ke permukaan.

 Biofilm adalah komunitas bakteri yang kompleks dan terorganisir

yang mampu tumbuh dalam hubungan dengan biologis yang
berbeda atau permukaan inert. Bakteri terikat permukaan tumbuh
menjadi biofilm, yang merupakan koloni bakteri lambat tumbuh
yang dikelilingi oleh lapisan glikol polisakarida yang disebut glikol
calyx [11].

 Konsekuensi klinis dari mode pertumbuhan biofilm berhubungan

dengan kesulitan pemberantasan terapeutik sel sessile seperti
struktur supraseluler. Pembentukan biofilm memfasilitasi infeksi
bakteri kronis dan mengurangi efektivitas terapi anti-mikroba
[12,13].

 Diperkirakan bahwa biofilm menyumbang sekitar 60% infeksi

mikroba di dalam tubuh. Selain biofilm bakteri, peran infeksi jamur
pada OMSK membutuhkan lebih banyak perhatian.
 Infeksi jamur pada telinga tengah sering terjadi karena jamur
berkembang dengan baik di dalam nanah basah [14].
Pengetahuan tentang aspek mikologi dari telinga ini sangat
sedikit yang diketahui, yang pentingnya telah meningkat
dalam beberapa tahun terakhir karena penggunaan
berlebihan antibiotik spektrum luas, kortikosteroid,
kemoterapi sitotoksik dan peningkatan jumlah kondisi
defisiensi imun.
Pasien dan metode

Pasien dengan OMSK di Rumah Sakit Universitas

Menoufia dan rumah sakit Asuransi Karmoz.

40 Pasien
Metode
Pengumpulan Pemeriksaan
dan pengiriman visual langsung
specimen
●
Tiga swab dikumpulkan
dengan kapas steril
dari masing-masing
pasien.
Dibawa ke laboratorium
●
mikrobiologi di Medical
Research Institute,
Universitas Alexandria.
●
Jika transportasi segera
tidak memungkinkan,
salah satu swab
dicelupkan ke dalam
media transportasi
Amies dan disimpan
hingga hari berikutnya
pada suhu kamar.
Kultur
●
Semua specimen diinokulasikan
pada darah, dan plate agar Mac-
●
Satu swab Conkey.
Untuk kultur jamur,
●
digunakan untuk diinokulasikan pada lempeng
agar Sabouraud dextrose plate
menyiapkan diinkubasi semalam pada 37 ° C.
Lempeng agar sabouraud
smear langsung
●
dekstrosa yang tidak
dari spesimen. menunjukkan pertumbuhan
disimpan selama 5 hari pada
●
Swab gram ●
suhu kamar sebelum dibuang.
Pertumbuhan bakteri
diwarnai dan diidentifikasi menggunakan
morfologi kolonial, hasil
diperiksa untuk pewarnaan Gram dan reaksi
biokimi.
keberadaan sel- ●
Semua isolat bakteri menjadi
sel pus, bakteri sasaran pengujian kerentanan
antimikroba menggunakan
dan / atau metode Kirby-Bauer
menggunakan panel antibiotik
elemen jamur. yang dipilih menurut Clinical
and Laboratory Standard
Institute (CLSI) [16].
Metode : Kultur
Metode
 Penentuan kuantitatif pembentukan biofilm

 Metode ini dilakukan untuk semua bakteri patogen terisolasi dan candida spp.

 Kultur semalam di Tryptic Soya Broth (TSB) yang encer 1: 100 dengan TSB segar. Tiga sumur
dari plate kultur jaringan plastik berinsulasi 96-baik datar dengan tutup (Cellstar, greiner bio-
one) diisi dengan 0,2 ml masing-masing suspensi bakteri. Kontrol negatif digunakan
mengandung kaldu steril tanpa bakteri.

 Lempeng tertutup dan diinkubasi secara aerobik selama 24 jam pada 37 ° C. Setelah inkubasi,
isi dari sumur itu diaspirasi dan masing-masing dicuci 3 kali dengan 0,25 ml garam fisiologis
steril. Plate tersebut terguncang kuat untuk menghilangkan semua bakteri yang tidak patuh.

 Bakteri yang menempel tersisa diperbaiki menggunakan 0,2 ml absolut metanol per sumur
selama 15 menit diikuti oleh penghilangan metanol dan pengeringan udara. Plate bernoda
selama 5 menit dengan 0,2 ml 0,2% larutan kristal Hucker violet. Noda berlebih dibilas
dengan air ledeng. Plate dibiarkan kering di udara (Tabel 1).
 Pewarna yang terikat pada sel yang patuh telah
disubstilisasi dengan 160 µl 30% (v / v) asam asetat
glasial. Indeks Refraksi (OD) dari setiap sumur diukur
pada 590 nm menggunakan pembaca plat otomatis. OD
cut-off (ODc¬) dihitung sebagai tiga standar deviasi di
atas rata-rata OD dari sumur kontrol negatif. Isolat
bakteri menunjukkan OD rata-rata kurang dari ODc
dianggap tidak patuh. Di sisi lain isolat bakteri
menunjukkan OD rata-rata lebih dari ODc, lebih dari 2
kali ODc dan lebih dari 3 kali ODc dianggap patuh, cukup
patuh dan kuat patuh masing-masing.
Hasil
 Dalam penelitian ini, 26 kasus (65%) menunjukkan bakteri patogen tunggal, 3 kasus (7,5%) menunjukkan
dua bakteri patogen, 4 kasus (10%) menunjukkan infeksi bakteri dan jamur campuran dan 1 kasus (2,5%)
menunjukkan infeksi jamur campuran dengan Aspergillus spp dan Candida albicans. Di sisi lain, 6 kasus
(15%) tidak menunjukkan pertumbuhan bakteri atau jamur (Gambar 1).
 Identifikasi bakteri dan jamur mengungkapkan bahwa Pseudomonas aeruginosa adalah patogen yang
paling umum terisolasi (15 kasus) di antara 40 kasus CSOM kami diikuti oleh Klebsiella spp (4 kasus),
Staphylococcus aureus (3 kasus), Acinetobacter baumannii (3 kasus), Diphtheroid (3 kasus) ) dan E. coli
(1 kasus) dan Enterobacter spp (1 kasus). Candida albicans adalah patogen jamur yang paling sering
terisolasi (6 kasus) diikuti oleh Aspergillus flavus (4 kasus) (Gambar 2).
 Dengan menggunakan pemeriksaan langsung dari pewarna Gram dari specimen memungkinkan
deteksi hifa jamur dalam 4 kasus di mana Aspergillus flavus diisolasi dari kultur jamur. Uji kepekaan
antimikroba Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus ditunjukkan pada Gambar 3 & 4.
Kesimpulan

 Kultur dan sensitivitas rutin merupakan langkah paling

penting dalam mengobati OMSK karena multi-etiologi yang
membuat terapi empiris menjadi tidak mungkin. Infeksi jamur
dapat terjadi tanpa bukti klinis, oleh karena itu, terapi
antijamur lokal empiris sangat dianjurkan dalam kasus seperti
itu. Pembentukan biofilm mungkin bertanggung jawab untuk
tidak responsif terhadap kemoterapi antibiotik. Pengangkatan
atau penghambatan fisik biofilm dapat meningkatkan respons
terhadap terapi antimikroba dan pemberantasan infeksi.
TERIMAKASIH