PEMBUATAN MEDIA

PEMBUATAN MEDIA
• NUTRIEN AGAR  PRONADISA
300 ML
1. MENGHITUNG JML MEDIA YG DITIMBANG
300/1000 X 23 = 6,9 gr
2. TIMBANG MEDIA SESUAI DENGAN YANG DIPERHITUNGKAN, MASUKKAN KEDALAM GELAS KIMIA
3. SIAPKAN AKUADES SEBANYAK 300ML, KEMUDIAN DITUANGKAN KEDALAM GELAS KIMIA YANG SUDAH BERISI
MEDIA
4. ADUK SAMPAI HOMOGEN
5. PANASKAN DI ATAS PEMANAS (KOMPOR, HEATER, HOT PLATE), SAMBIL TERUS DIADUK SAMPAI MENDIDIH DAN
MEDIA MENJADI JERNIH
6. UKUR pH MEDIA SAMPAI 6,6 – 7,0 (PRONADISA), PADA SUHU 250C. JIKA pH TERLALU ASAM MAKA
TAMBAHKAN NaOH 0,1 N BBRP TETES SAMPAI pH YANG DIINGINKAN. JIKA TERLALU BASA MAKA
TAMBAHKAN HCl 0,1N N BBRP TETES SAMPAI pH YANG DIINGINKAN
7. PINDAHKAN MEDIA KEDALAM ERLENMEYER/BOTOL, TUTUP RAPAT (KAPAS DIBUNGKUS DENGAN KASSA DAN
DITUTUP KERTAS PERKAMEN/ALUMUNIUM FOIL)
8. STERILISASI DALAM AUTOCLAVE SUHU 1210C SELAMA 15 MENIT
9. KELUARKAN MEDIA DARI AUTOCLAVE, TUNGGU DINGIN SAMPAI SUHU MEDIA SEKITAR 400C, KEMUDIAN
TUANG MEDIA KEDALAM CAWAN PETRI STERIL @ 15-20 ML.
10. TUNGGU BEKU PADA SUHU RUANG
11. MEDIA SAP DIGUNAKAN
12. JIKA INGIN DISIMPAN MEDIA MASUKKAN KEDALAM KANTUNG PLASTIK BENING MAKSIMAL 10 PETRI DAN
DISIMPAN PADA SUHU 100C, SAMPAI TIDAK ADA PERUBAHAN FISIK MEDIA.
• ENDO BASE AGAR == PRONADISA (36 Gr) / MERCK (39 Gr)
200 ML @ 20 ML
1. MENGHITUNG JML MEDIA YG DITIMBANG
200/1000 X 36 = 7,2 gr
2. TIMBANG MEDIA SESUAI DENGAN YANG DIPERHITUNGKAN MASUKKAN KEDALAM GELAS KIMIA
3. SIAPKAN AKUADES SEBANYAK 200ML, KEMUDIAN DITUANGKAN KEDALAM GELAS KIMIA YANG SUDAH BERISI MEDIA
4. ADUK SAMPAI HOMOGEN
5. PANASKAN DI ATAS PEMANAS (KOMPOR, HEATER, HOT PLATE), SAMBIL TERUS DIADUK SAMPAI MENDIDIH DAN MEDIA MENJADI JERNIH

ADD 10% OF BASIC FUCSIN ETHYL ALKOHOL 95% MIX WELL  LARUTAN INI SUDAH DIMILIKI OLEH LAB /SDH DIBUAT TERLEBIH DAHULU

6. TAMBAHKAN 200/1000 X 10 = 2 ML BASIC FUCSIN 10%

7. UKUR pH MEDIA SAMPAI 7,3 – 7,7 PADA SUHU 250C. JIKA pH TERLALU ASAM MAKA TAMBAHKAN NaOH 0,1 N BBRP TETES SAMPAI pH YANG DIINGINKAN. JIKA
TERLALU BASA MAKA TAMBAHKAN HCl 0,1N BBRP TETES SAMPAI pH YANG DIINGINKAN
7. PINDAHKAN MEDIA KEDALAM ERLENMEYER/BOTOL, TUTUP RAPAT (KAPAS DIBUNGKUS DENGAN KASSA DAN DITUTUP KERTAS PERKAMEN/ALUMUNIUM FOIL)
8. STERILISASI DALAM AUTOCLAVE SUHU 1210C SELAMA 15 MENIT
9. KELUARKAN MEDIA DARI AUTOCLAVE, DINGIN SAMPAI SUHU MEDIA SEKITAR 400C, KEMUDIAN TUANG MEDIA KEDALAM CAWAN PETRI STERIL @ 20 ML.
10. TUNGGU BEKU PADA SUHU RUANG
11. MEDIA SIAP DIGUNAKAN
12. JIKA INGIN DISIMPAN MEDIA MASUKKAN KEDALAM KANTUNG PALSTIK BENING MAKSIMAL 10 PETRI DAN DISIMPAN PADA SUHU 100C, SAMPAI TIDAK ADA
PERUBAHAN FISIK MEDIA.
• SABOUROUD DEXTROSA AGAR /SDA== SCHARLAU (WITH OUT CHLORAMPHENICOL)
600 ML @ 15 ML
1. MENGHITUNG JML MEDIA YG DITIMBANG
600/1000 X 65 = 39 gr
2. MASUKKAN KEDALAM GELAS KIMIA
3. SIAPKAN AKUADES SEBANYAK 600ML, KEMUDIAN DITUANGKAN KEDALAM GELAS KIMIA YANG SUDAH BERISI MEDIA
4. ADUK SAMPAI HOMOGEN
5. PANASKAN DI ATAS PEMANAS (KOMPOR, HEATER, HOT PLATE), SAMBIL TERUS DIADUK SAMPAI MENDIDIH DAN MEDIA MENJADI
JERNIH
7. UKUR pH MEDIA SAMPAI 5,4 – 5,8 PADA SUHU 25 0C. JIKA pH TERLALU ASAM MAKA TAMBAHKAN NaOH 0,1 N BBRP TETES SAMPAI
pH YANG DIINGINKAN. JIKA TERLALU BASA MAKA TAMBAHKAN HCl 0,1N BBRP TETES SAMPAI pH YANG DIINGINKAN
8. TAMBAHKAN CHLORAMPHENICOL BASE SEBANYAK 500 mg, DIHOMOGENKAN
7. PINDAHKAN MEDIA KEDALAM ERLENMEYER/BOTOL, TUTUP RAPAT (KAPAS DIBUNGKUS DENGAN KASSA DAN DITUTUP KERTAS
PERKAMEN/ALUMUNIUM FOIL)
8. STERILISASI DALAM AUTOCLAVE SUHU 121 0C SELAMA 15 MENIT
9. KELUARKAN MEDIA DARI AUTOCLAVE, DINGINKAN SAMPAI SUHU MEDIA SEKITAR 40 0C, KEMUDIAN TUANG MEDIA KEDALAM
CAWAN PETRI STERIL @ 15 ML.
10. TUNGGU BEKU PADA SUHU RUANG
11. MEDIA SIAP DIGUNAKAN
12. JIKA INGIN DISIMPAN MEDIA MASUKKAN KEDALAM KANTUNG PALSTIK BENING MAKSIMAL 10 PETRI DAN DISIMPAN PADA SUHU
100C, SAMPAI TIDAK ADA PERUBAHAN FISIK MEDIA.
• BLOOD AGAR BASE == OXOID (40)/MERCK (40)/NEOGEN (39,5)
400 ML @ 15 ML
1. MENGHITUNG JML MEDIA YG DITIMBANG
400/1000 X 40 = 16 gr
2. MASUKKAN KEDALAM GELAS KIMIA
3. SIAPKAN AKUADES SEBANYAK 400ML, KEMUDIAN DITUANGKAN KEDALAM GELAS KIMIA YANG SUDAH BERISI MEDIA
4. ADUK SAMPAI HOMOGEN
5. PANASKAN DI ATAS PEMANAS (KOMPOR, HEATER, HOT PLATE), SAMBIL TERUS DIADUK SAMPAI MENDIDIH DAN MEDIA MENJADI JERNIH
7. UKUR pH MEDIA SAMPAI 7,1 – 7,5 PADA SUHU 250C. JIKA pH TERLALU ASAM MAKA TAMBAHKAN NaOH 0,1 N BBRP TETES SAMPAI pH YANG DIINGINKAN. JIKA
TERLALU BASA MAKA TAMBAHKAN HCl 0,1N BBRP TETES SAMPAI pH YANG DIINGINKAN
8. PINDAHKAN MEDIA KEDALAM ERLENMEYER/BOTOL, TUTUP RAPAT (KAPAS DIBUNGKUS DENGAN KASSA DAN DITUTUP KERTAS PERKAMEN/ALUMUNIUM FOIL)
8. STERILISASI DALAM AUTOCLAVE SUHU 1210C SELAMA 15 MENIT
9. KELUARKAN MEDIA DARI AUTOCLAVE, DINGINKAN SAMPAI SUHU MEDIA SEKITAR 40-500C, TAMBAHKAN 7/100 X 400 = 28 ML DEFIBRINATE BLOOD SECARA
ASEPTIS

ADD 7% STERILE DEFIBRINATE BLOOD (7 ML DARAH DI DALAM 100 ML MEDIA) OXOID

7/100 X 400 = 28 ML
ADD 5-8% STERILE DEFIBRINATE BLOOD (5-8 ML DARAH DI DALAM 100 ML MEDIA) MERCK
PUTUSKAN ANDA MENGAMBIL BERAPA 6/100 X 400 = 24 ML
ADD 5-10% STERILE DEFIBRINATE BLOOD (5-10ML DARAH DI DALAM 100 ML MEDIA) NEOGEN
JIKA DIPUTUSKAN 10 %  10/100 X 400 = 40 ML

10. KEMUDIAN TUANG MEDIA KEDALAM CAWAN PETRI STERIL @ 15 ML.

11. TUNGGU BEKU PADA SUHU RUANG
12. MEDIA SIAP DIGUNAKAN
13. JIKA INGIN DISIMPAN MEDIA MASUKKAN KEDALAM KANTUNG PALSTIK BENING MAKSIMAL 10 PETRI DAN DISIMPAN PADA SUHU 100C, SAMPAI TIDAK ADA
PERUBAHAN FISIK MEDIA.
• Thio Citrate Bile Salt Sucrose Agar/TCBSA 
Neogen
• F;isolasi selektif Vibrio  300 ML
1. MENGHITUNG JML MEDIA YG DITIMBANG
300/1000 X 88 = 26,4 gr
2. TIMBANG MEDIA SESUAI DENGAN YANG DIPERHITUNGKAN
3. MASUKKAN KEDALAM GELAS KIMIA
4. SIAPKAN AKUADES SEBANYAK 300ML, KEMUDIAN DITUANGKAN
KEDALAM GELAS KIMIA YANG SUDAH BERISI MEDIA
5. ADUK SAMPAI HOMOGEN
5. PANASKAN DI ATAS PEMANAS (KOMPOR, HEATER, HOT PLATE), SAMBIL
TERUS DIADUK SAMPAI MENDIDIH DAN MEDIA MENJADI JERNIH
6. UKUR pH MEDIA SAMPAI 8,4 – 8,8 (NEOGEN), PADA SUHU 25 0C. JIKA pH
TERLALU ASAM MAKA TAMBAHKAN NaOH 0,1 N BBRP TETES SAMPAI
pH YANG DIINGINKAN. JIKA TERLALU BASA MAKA TAMBAHKAN HCl
0,1N N BBRP TETES SAMPAI pH YANG DIINGINKAN
7. KEMUDIAN TUANG MEDIA KEDALAM CAWAN PETRI STERIL @ 15-20
ML.
8. TUNGGU BEKU PADA SUHU RUANG
9. MEDIA SAP DIGUNAKAN
10. JIKA INGIN DISIMPAN MEDIA MASUKKAN KEDALAM KANTUNG PLASTIK
BENING MAKSIMAL 10 PETRI DAN DISIMPAN PADA SUHU 10 0C,
SAMPAI TIDAK ADA PERUBAHAN FISIK MEDIA.