TUGAS KELOMPOK

FARMAKOLOGI MOLEKULER

SALURAN ION MENEMUKAN JALUR

UNTUK KESUKSESAN TERAPEUTIK

Disusun :

Muhammad Arisandi 5420221056

Roswita 5420221066

MAGISTER ILMU KEFARMASIAN

UNIVERSITAS PANCASILA
 Pendahuluan
Alasan kegagalan saat melakukan
penelitian obat baru

Penemuan dan pengembangan suatu

Masalah Keamanan Obat pada saat pengembangan
obat baru merupakan suatu proses obat baru
kompleks yang membutuhkan
komitmen jangka panjang hingga
akhirnya membuahkan hasil.
Keefektifan Obat saat dilakukan uji klinis

Biaya Pengambangan Obat baru yang sangat tinggi sebagai

konsekuensi dari peraturan obat baru yang sangat ketat.
.
Tahap awal identifikasi adanya suatu molekul kecil kimia sangat
penting yang selanjutnya dapat diproses menjadi senyawa kimia
obat, yang paling memenuhi kriteria potensi dan selektivitas dari
target daerah terapeutiknya.

Baru sekitar 15% dari obat – obat yang saat ini

menggunakan kanal ion sebagai target terapinya, con:
Gol. CCB; sulfonilurea, antiaritmia, antiepilepsi, dan
anestesi lokal

Kanal Ion yang memiliki peran penting dalam berbagi

proses biologi adalah Kanal Kalium.Sebagian besar jenis
Kanal Kalium belum di selidiki fungsinya sebagi Target
Terapi Obat.
5 METODE SCREENING AKTIVITAS KANAL KALIUM

ELEKTROFISIOLOGI Yeast Growth

Ion Flux Assay
Essay

Ligan Binding MPBA (Membran Potensial

ASsay Based Assay)
 • Meskipun tes berbasis potensial membran dapat mendukung studi hubungan struktur-aktivitas
oleh kimia obat dalam bahan kimia individu kelas, penggunaannya yang luas untuk
mengidentifikasi lead untuk saluran ion secara umum dibatasi karena konsentrasi senyawa uji
5 harus dibatasi untuk mencegah banyaknya kesalahan.

• Uji fluks ion yang digunakan baik talium atau radioisotop rubidium sebagai pengganti K + memberikan
pengukuran aktivitas saluran yang lebih langsung, tetapi penggunaan radioaktivitas adalah masalah dalam
fasilitas penyaringan throughput tinggi, dan uji talium juga memiliki keterbatasan, tergantung pada sel inang
dimana saluran ion yang diinginkan diekspresikan. Sebagai contoh, Sel ovarium hamster Cina, biasanya
6 digunakan untuk ekspresi heterolog saluran ion, menampilkan talium endogen yang substansial jalur fluks
yang secara signifikan melemahkan respons yang dimediasi oleh saluran K + yang diekspresikan

• Tes pertumbuhan ragi mungkin lebih tepat untuk mengeksplorasi saluran K + yang tidak
memiliki gerbang tegangan karena ragi mempertahankan potensi membran yang besar, di
dalam negatif, yang akan melemahkan transisi dari status tertutup ke status terbuka saluran
sensitif tegangan Selain itu, dinding sel ragi dapat mewakili penghalang yang menghalangi
akses senyawa ke ion target saluran di membran plasma. Akhirnya, uji pengikatan ligan
7 memberikan kapasitas tinggi dengan karakteristik yang dapat direproduksi, namun
demikiantidak berfungsi dan memerlukan tindak lanjut tambahan untuk menentukan aktivitas
fungsional dari setiap hit yang teridentifikasi
 • Elektrofisiologi merupakan metode screening yang bagus untuk pengamatan aktivitas kanal
ion. Tetapi penggunaanya tebatas dan biaya operasionalnya sangat tinggi
1

• Metode Pengukuran Flux Ion , menggunakan Tahalium atau Isotop Rubidium sebagai pengganti ion K dapat
mengukur secara langsung dari aktivitas kanal ion
2

• Tes pertumbuhan ragi mungkin lebih tepat untuk mengeksplorasi saluran K + yang tidak
memiliki gerbang tegangan karena ragi mempertahankan potensi membran yang besar, di
dalam negatif, yang akan melemahkan transisi dari status tertutup ke status terbuka saluran

3 sensitif tegangan Selain itu, dinding sel ragi dapat mewakili penghalang yang menghalangi
akses senyawa ke ion target saluran di membran plasma.
 • Meskipun tes berbasis potensial membran dapat mendukung studi hubungan struktur-aktivitas
oleh kimia obat dalam bahan kimia individu kelas, penggunaannya yang luas untuk
mengidentifikasi lead untuk saluran ion secara umum dibatasi karena konsentrasi senyawa uji
5 harus dibatasi untuk mencegah banyaknya kesalahan.

• Metode dengan Ligand Binding Assay , memiliki Kapasitas yang tinggi dengan daya reproduksibilitas yang
tinggi juga. Metode ini memebutuhkan pengamatan tambahan untuk menentukan fungsi dan aktivitas

6 kanal ion yang diamati.

• Adanya kebutuhan untuk menetapkan pengujian skrining ultrahighthroughput baru yang kuat, mudah
dioperasikan, dan yang dapat mengatasi beberapa keterbatasan yang terkait dengan teknologi yang

7 digunakan saat ini

Tabel 1. Perbandingan teknologi penyaringan saluran ion yang berbeda

Informasi Kemudahan
Protokol Kapasitas Biaya Cakupan
Konten Pengoperasian
LFA +++ + ++ +++ +++
Auto EP ++ +++ +++ + +++
Membran potensial +++ ++ + ++ ++
Lon flux +++ ++ ++ ++ +++
Pertumbuhan ragi +++ + + +++ +
Pengikat ligan +++ + + +++ +

+, Rendah; ++, sedang; +++, tinggi. Kapasitas berkaitan dengan kemampuan operasi dalam pelat 96-,
384-, atau 1.536-sumur. Kemudahan pengoperasian memperhitungkan kebutuhan menggunakan sel
mamalia. EP, elektrofisiologi.

Data yang menggambarkan kelayakan untuk
menetapkan uji fungsional throughput tinggi
untuk berbagai Saluran K + menggunakan
pendekatan novel dan imajinatif, yaitu
penulis menyebutnya sebagai "uji fluks
liposom" (LFA).
1. Liposom dilarutkan dalam suatu media berisi air atau NACL
2. . Secara alamiah akan terbentuk gradien Konsnetrasi K dalam
Liposom akan berindah ke media. melalui Kanal ion K
3. Ion H akan masuk ke dlam Liposom melalui CCCP nutk
mengimbangi muatan
4. Ion H akan menonaktifkan pewarna Fluorosens…..sehingga
menurunkan Konsentrasi Pewarna Fluorescen
5. Bila senyawa yang beraktifitas sebagai Inhibitor Kanal
6. Kalium mka tidak terjadi penurunana kadar Fluorescein
 KESIMPULAN

1. LFA menyediakan cara yang mudah dan hemat biaya untuk mengevaluasi K + saluran tidak hanya sebagai target terapi, tetapi
juga sebagai target untuk selektivitas dan keamanan.
2. Semua penghambat hERG menunjukkan korelasi yang sangat baik antara nilai IC50 penghambatan di LFA dan mereka
dilaporkan dalam literatur dari penentuan elektrofisiologi. Namun, ada pergeseran 10 kali lipat dalam nilai IC50 di antaranya dua
tes, dengan LFA melaporkan afinitas yang lebih rendah.
3. Meskipun LFA mungkin dianggap sebagai uji throughput tinggi semikuantitatif, khususnya untuk hERG, karakteristik
keseluruhannya mengungkapkan pendekatan itu dapat diterapkan secara lebih luas dengan saluran K + apa pun, dengan
menyediakan keuntungan substansial dibandingkan teknik lain yang ada yang membutuhkan ekspresi saluran fungsional dalam
sistem heterolog,
TERIMA KASIH…
DANJE…