KROMATOGRAFI

CAIR KINERJA
TINGGI (HPLC)

Kelompok 3 :

1. Fadhillah Oktarin Dinata (A1F019002)

2. Tia Annisa (A1F019010)
3. Lisa Dwi Putri (A1F019016)
4. Anugrah Rahma S. (A1F019022)
 Pengertian Kromatografi
Kromatografi merupakan suatu teknik pemisahan campuran senyawa dalam suatu sampel berdasarkan
perbedaan interaksi sampel dengan fase diam dan fase gerak. Fase diam dapat berupa padatan atau
cairan yang diletakkan pada permukaan fasa pendukung, sedangkan fasa gerak dapat berupa gas atau
cairan maka dapat berkembang beberapa teknik kromatografi

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC)

Kromatografi cair kinerja tinggi atau sering disebut dengan High Performance Liquid
Chromatography (HPLC) merupakan suatu metode pemisahan yang dapat diaplikasikan dalam
berbagai jenis pemisahan. Pemisahan HPLC terjadi dalam kolom yang berisi fase diam, yang dialiri
oleh fase gerak
 Prinsip Pemisahan Kromatografi Cair
Kinerja Tinggi (HPLC)

Prinsip pemisahan secara kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) yaitu

berdasarkan perbedaan distribusi/laju migrasi komponen-komponen dalam
campuran. Penyebabnya karena masing-masing komponen memiliki
keseimbangan fase diam dan fase gerak yang berbeda.
 Intrumen atau Alat Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
(HPLC)
Berikut bagan alat HPLC :
Berdasarkan jurnal penelitian yang kami bahas, alat/instrumen yang peneliti
gunakan adalah sebagai berikut nampan, pisau, gunting, cawan kaca, soxhlet,
erlenmayer, gelas kimia, thermometer, labu alas bulat, plat KLT, botol vial,
desikator, blender, gelas ukur, pipet ukur, pipet tetes, corong pisah, refluks, hot plate,
rotavapor (rotari evaporator), kertas saring,labu ukur, chamber, rubber bulb dan
HPLC. Kolom yang dipakai adalah jenis kolom SGE C-18 ODS, lampu detektor
2489 UV/Visible.
 Mekanisme Pemisahan Secara
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
(HPLC)

• Persiapan alat HPLC.

• Persiapan eluen.
• Pembuatan larutan 1000 ppm.
• Penentuan kondisi optimum
• Penentuan waktu retensi masing-masing standar dengan HPLC.
• Identifikasi sampel asam lemak dengan HPLC.
• Isolasi sampel asam lemak dengan HPLC.
Aplikasi Pemisahan Secara Kromatografi Cair Kinerja
Tinggi (HPLC)

Pada jurnal yang kami bahas, HPLC digunakan untuk

mengidentifikasi dan mengisolasi berbagai jenis asam lemak
essensial (omega-3 & omega 6) yang terdapat dalam asam
lemak hasil hidrolisis.
Data Hasil Jurnal Penelitian Pemisahan Secara
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC)

Berikut kromatogram campuran standar optimum yang

diperoleh dari penelitian :

Grafik kromatogram campuran standar optimum

Setelah dilakukan penentuan kondisi optimum, minyak badan dan kepala belut kemudian
diidentifikasi dan diisolasi jenis asam lemak essensial apa saja yang terkandung di
dalamnya. Berikut grafik kromatogram yang diperoleh :

Grafik kromatogram Minyak Grafik Kromatogram Minyak

Badan Belut pada Kondisi Kepala Belut pada Kondisi
Optimum Optimum
 Nilai yang diperoleh dari grafik kromatogram baik itu pada minyak badan belut dan
minyak kepala belut dibandingkan dengan kromatogram campuran standar pada kondisi
optimum.
THANK YOU