PEMERIKSA A N

GOLONGAN
DARAH

By
Hasnawati
 TUJUAN PEMERIKSAAN
GOLONGAN DARAH ABO

1. Menentukan adanya antigen A; B; pada sel darah

merah
2. Menentukan adanya anti-A dan anti-B pada serum
atau plasma
3. Memastikan tidak adanya antibodi-antibodi pada
darah pasien yang akan bereaksi dengan darah
donor
Penentuan Golongan Darah ABO :

Forward /Slide / Direct

Reverse / Tube / Indirect
. Forward
1 / Slid/Direct
menentukan antigen golongan darah penderita (sel
darah) menggunakan sera anti-A , anti-B dan
anti-A,B

2. Reverse/Tube/Indirect
menentukan antibodi golongan darah penderita (serum)
dengan menggunakan suspensi sel A dan suspensi sel B

3. Auto kontrol
Memeriksa antibodi dalam serum dengan cara
mereaksikannya dengan sel darah merahnya sendiri
Antigen dan Antibodi ABO pada individu

5
 Penentuan Golongan Darah ABO

 Penentuan golongan darah ABO dikerjakan dengan cara

Forward(Slide)- grouping

 Tujuan : menentukan antigen golongan darah pasien (sel darah)

dengan menggunakan sera anti-A , anti-B dan anti- A,B .

 Antisera Color Source

Anti-A Blue Group B donor

Anti-B Yellow Group A donor

Anti-A,B Clear Group O donor

Penentuan Golongan darah ABO

Foward / Slide / direct

Blood group Agglutination Agglutination

with Anti-A with Anti-B

A + -

B - +

AB + +

O - -
 Blood Grouping tests

 Slide test untuk menentukan jenis golongan

darah pada eritrosit

 Tube test untuk menentukan jenis golongan

darah pada eritrosit dan plasma
Tube test untuk menentukan
golongan darah
Forward and reverse typing
 Pemeriksaan golongan darah ABO harus
dilakukan sebelum dilakukan transfusi

 Tujuan pemeriksaan ini untuk mendpatkan

kecocokan darah donor (menghindari
inkompatibel )
Pemeriksaan dilakukan dua cara :
1 Forward typing
2 Reverse typing
Penentuan Gol.Darah ABO cara Direk-Tabung
Penentuan Gol.Darah ABO
cara Direk-Tabung

13
1- Forward typing
Anti A Anti B Anti A Anti B

A
B

Anti A Anti B Anti A Anti B

A O
B
 PEMERIKSAAN GOLONGAN
DARAH ABO
PEMISAHAN SERUM / PLASMA DARI SEL DARAH MERAH

Prinsip : Darah dengan pemutaran akan terjadi pemisahan

antara plasma dan sel-sel darah

Tujuan : memisahkan plasma dari sel-sel darah

Kegunaan : - persiapan pembuatan suspensi sel darah

merah
- persiapan penentuan antigen golongan darah
Cara kerja :

1. Darah dimasukkan ke dalam tabung sentrifus

2. Putar 3300 rpm selama 1,5-2 menit
3. Supernatan diambil dengan pipet tetes dan
pindahkan ke dalam tabung lain dan sel darah merah
terdapat di bagian bawah tabung
4. Sel darah merah dan plasma diberi label kemudian
disimpan

1 2 3
 PENCUCIANSELDAR
AHMERAH
Prinsip : Sel darah merah dengan penambahan larutan
saline dan pemutaran maka antibodi di sekitar sel
darah merah akan hilang

Tujuan : menghilangkan antibodi yg ada di sekitar sel darah

Kegunaan : - persiapan pembuatan suspensi sel darah

merah
- persiapan penentuan antigen golongan darah
 Cara kerja :
1. Sel darah yg telah dipisahkan ditambahkan larutan
salin sebanyak plasma yg dibuang
2. Putar 3300 rpm selama 1,5-2 menit
3. Supernatan dibuang
4. Lakukan pencucian sebanyak 3x
5. Endapan sel darh merah yg telah dicuci merupakan
suspensi sel 100%

Buang Lakukan
supernatan pencucian 3x

Diputar 3000 rpm Packed

selama 1,5-2 menit cells
 Pembuatan Suspensi Sel
Darah Merah A,B,O
1. Suspensi sel 100% dicek ulang golongan darah
dengan antiA dan anti B
2. Buat suspensi 10%, 5%
3. Berikan label

Suspensi Suspensi Suspensi

sel 100% sel 10% sel 5%
 Pembuatan Suspensi Sel darah
Merah
Suspensi Endapan sel Medium Kegunaan (lart.
Saline)
5% 1 bagian 19 bagian -Pemeriksaan gol.darah
-Pemeriksaan silang reaksi

10% 1 bagian 9 bagian - Pemeriksaan gol.darah

(slide test)

40% 2 bagian 3 bagian - Pemeriksaan gol.darah

rhesus
 Pemeriksaan Gol. Darah Serum Grouping /
typing

1. Serum / plasma diteteskan pada bloodgrouping plate

masing-masing satu tetes pada 4 tempat
2. Pada tetes serum pertama di tambah suspensi sel A 10%,
pada tetes serum kedua di tambah suspensi sel B 10%, pada
tetes serum ketiga di tambah suspensi sel O 10%
3. Goyangkan bloodgrouping plate hingga tercampur
dengan baik
4. Baca adanya aglutinasi
 SERUM
GROUPING/TYPING
Gol darah Sel A Sel B Sel O Auto
kontrol
A - + - -

B + - - -

O + + - -

AB - - - -
 Pemeriksaan Golongan Darah Metode Tabung

1. Pisahkan
2. Cuci sel darah 3x dan buat susp. Sel 5% dalam saline
3. Cell grouping / typing :
 Masukkan 1 tetes anti A, 1 tetes anti B ke dalam 2 tabung pertama,
 Tambahkan masing-masing 1 tetes susp. sel 5% darah yg diperiksa pada
setiap tabung yg berisi anti serum
4. Serum grouping / typing
 kedalam 4 tabung berikutnya teteskan masing-masing 2 tetes serum /
plasma darah yg diperiksa
 pada masing-masing tabung tambahkan 1 tetes tes sel A, 1 tes sel B, 1
tetes sel O dan 1 tetes susp.sel 5% darah yg diperiksa
5. Kocok sampai tercampur
6. Putar 3400 rpm 15 detik / 1000 rpm 1 menit
7. Baca adanya aglutinasi
 pisahkan sel Buat
Cuci sel
dari serum suspensi 5%

serum @ 1 tetes Suspensi sel

Anti Anti B
sel A sel B sel O sel 5% A

kocok

Sentrifus 3400
rpm/15”
A (1000 rpm/10”) A

B B
Pembacaan
reaksi
O O
(+) aglitinasi
(-) tidak aglutinasi AB
AB
Penentuan Golongan Darah ABO
Cara Reverse/Tube/Indirect :
Serum test direaksikan dengan : Gol.
Darah
Susp.Sel-A Susp.Sel-B

+ - B
- + A
- - AB
+ + O
Grading System for
Reactions
 Other methods for blood grouping
• Gel Cards
– The cards containing specific typing reagents (monoclonal
antibodies to the various red cell antigens).

• Interpretation of Results
– Reaksi positif terlihat sel darah merah diatas gel column setelah
disentrifus
– Reaksi negatif terlihat terpisah dengan gel column pada dasar
sedimen
BLOOD GROUPING MICROPLATE TEST METHOD

 Saat ini, penentuan golongan darah rutin dikerjakan

pada lempeng mikro-96-lubang (96-well microplate) :

-3 lajur (1-3) pd lempeng utk uji sel penderita dgn
antisera
-Lajur 4-6 utk uji sera penderita dgn sel yg
diketahui golongannya
-Lajur 7-8 utk uji gol-Rhesus terhadap sel darah
penderita .
Reaksi (+) menunjukkan aglutinasi tajam dan reaksi (-) sel
merata (disperse)