PENGERTIAN Retikulosit : eritrosit muda yg tidak berinti dan didalam sitoplasmanya masih terdapat sisa ribosom dan RNA terlihat sebagai retikulum dg pewarnaan khusus. Retikulosit ditemukan dalam sumsum tulang, setelah mengalami maturasi selama 2 hari dilepaskan ke darah tepi, beredar selama 1 hari untuk kemudian menjadi eritrosit matur RETIKULOSIT TUJUAN/MANFAAT Pemeriksaan Retikulosit menggambarkan produksi eritrosit di sumsum tulang Hitung retikulosit yang tepat dapat mencerminkan aktivitas eritropoiesis METODE • Cara Manual pewarnaan supravital dengan Brilliant Cresyl Blue atau New Methylene Blue. • Cara Otomatis alat hitung otomatis, menggunakan zat fluoresense. HITUNG RETIKULOSIT PRINSIP Sisa ribosom dan RNA dapat dilihat dengan pewarnaan Brilliant Cresyl Blue, New Methylene Blue, purified azure B sisa RNA tampak sebagai filamen atau granula berwarna ungu atau biru tergantung zat warna yang dipakai. Hal ini hanya terlihat pada sediaan yang tidak difiksasi dan diwarnai dalam keadaan vital. BAHAN PEMERIKSAAN Sebagai bahan pemeriksaan dipakai darah segar berupa darah kapiler atau darah EDTA. Darah EDTA dapat ditunda sampai 6- 8 jam, setelah waktu tersebut jumlah retikulosit akan menurun ALAT DAN BAHAN BCB 1% atau New Methylene Blue Mikroskop cahaya tabung reaksi kecil kaca objek dan kaca penggeser pipet pasteur PROSEDUR 1. Kedalam tabung reaksi kecil masukkan 3 tetes Larutan BCB kemudian tambahkan darah dengan volume yang sama (1:1). 2. Inkubasi 30 menit pd suhu kamar. 3. Teteskan satu tetes pada kaca objek dan buat sediaan apus serta biarkan mengering. 4. Sediaan apus diperiksa dengan pembesaran 1000 kali (10 x 100) Cara menghitung • Menghitung jumlah retikulosit dicari daerah yang baik yaitu tidak terlalu tipis dan eritrosit tidak tumpang tindih • Retikulosit tampak sebagi sel yang lebih besar dari eritrosit normal dan mengandung filamen atau granula • Jumlah retikulosit dihitung minimal per 1000 eritrosit Jumlah Jumlah eritrosit Jumlah lapangan retikulosit 1 110 2 2 90 1 3 110 2 4 90 3 5 100 1 6 100 1 7 85 1 8 115 2 9 100 2 10 100 3
Jumlah 1000 18 NILAI RUJUKAN • Nilai Normal : Dewasa/anak : 0,5% -2,0% atau 5-20‰ Bayi : 2%-6% atau 20-60 ‰
• Hitung retikulosit absolut :
retikulosit (%) x jumlah eritrosit (juta/uL) nilai normal: 25.000-75.000/uL INTERPRETASI HASIL Retikulosit meningkat retikulositosis: anemia hemolitik, perdarahan, terapi Fe Retikulosit menurun retikulopenia: kemoterapi, anemia aplasi, anemia pernisiosa, keganasan SUMBER KESALAHAN • Pada anemia berat, volume darah harus lebih banyak dari zat warna yang terpakai, demikian pula sebaliknya • Zat warna yang tidak disaring mungkin mengendap pada eritrosit sehingga mengganggu pembacaan sediaan • Waktu inkubasi campuran antara darah dan zat warna kurang lama. • Sebelum membuat sediaan, campuran darah dan zat warna tidak homogen. SUMBER KESALAHAN • Menghitung didaerah yang jumlah eritrositnya terlalu padat • Jumlah eritrosit yang dihitung tidak mencapai 1000 eritrosit • Kesalahan membedakan retikulosit TERIMA KASIH